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1. UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
TOXICOLOGIA
Nombre: Yasmani Carlos Pardo Leiva
Curso: Quinto Año Paralelo: “B”
Fecha: Martes, 18 de Noviembre del 2014
Docente: BQF. Carlos García González
TOXICOS ORGANICOS FIJOS
Los tóxicos orgánicos fijos son aquellos compuestos orgánicos que no
pueden ser aislados por dest ilación. Todos los fármacos ent ran en esta
categoría así como las drogas de abuso, los plaguicidas y una gran
cant idad de sustancias ut ilizadas en síntesis química y en indust ria
alimentaria. De las intoxicaciones con fármacos, las que involucran a los
psicofármacos son las más frecuentes, aunque también son frecuentes
las intoxicaciones con aspirina o con paracetamol. La mayoría de las
veces, la invest igación de la presencia de estos compuestos en casos de
sospecha de intoxicación, requiere de la aplicación de dos t ipos de
métodos:
1. Métodos de aislamiento que separan al compuesto del resto de los
componentes de la muest ra pasos de la ext racción en fase sólida Sistema
de ext racción en fase sólida
2. Métodos de identificación (y, en algunos casos, de cuant ificación)
Barrido espect ral de algunas benzodiacepinas Cromatografía en capa
delgada Analít ica del estudio de tóxicos fijos La espect rofotomet ría de
absorción atómica es el procedimiento más empleado en la
determinación de elementos t raza en medios biológicos. Existen cuat ro
modalidades: llama, cámara de grafito, vapor frío y sistema de hidruros
volát iles. La modalidad de llama es adecuada para la medida de
elementos en alta concent ración. La atomización elect rotérmica o
cámara de grafito (EAAS) es la idónea para el análisis de elementos en
muy bajas concent raciones. El sistema de hidruros volát iles (SHV) se aplica
con gran efect ividad para conseguir volat ilizar algunos metales en forma
de hidruros (As, Se, Sb, Ti, etc.), y con el sistema de vapor frío obtener
mercurio atómico. Esto a su vez, proporciona un medio para aislar al
elemento de la mat riz de la muest ra, con lo cual se consigue mayor
sensibilidad y disminución de las interferencias. Los procedimientos
analít icos por este sistema en medios biológicos son innumerables.

2. Analít ica de los tóxicos orgánicos no volát iles o Tóxicos Orgánicos Fijos
Bajo la denominación de Tóxicos Orgánicos Fijos (TOF) o no volát iles se
incluye una gran variedad de sustancias orgánicas, de interés
toxicológico, que no pueden aislarse por dest ilación de las mat rices que
los cont ienen, sino que debe recurrirse a la acción de disolventes
orgánicos (en medio ácido o alcalino) para su separación y posterior
ident ificación. La mayoría de estos tóxicos sufren profundos cambios
metabólicos en el organismo y, en consecuencia, pueden aparecer en
los fluidos o tejidos en su forma original o como productos de
biot ransformación (metabolitos), libres o conjugados con diferentes
compuestos (ácido glucurónico, sulfatos, aminoácidos, etc.). Las
propiedades fisicoquímicas del tóxico y sus metabolitos pueden ser muy
dist intas, a veces incluso ent re los metabolitos de un mismo compuesto.
Ello determina una excreción característ ica según los casos y la
conveniencia de realizar la invest igación en una u ot ra mat riz (orina,
sangre, bilis, etc.). Frecuentemente la especie que será analizada está
presente en un tejido o un fluido biológico, unido a proteínas u ot ros
const ituyentes celulares. En este caso, puede ser necesario separar el
tóxico (el compuesto madre o sus metabolitos) del resto de los
componentes de la mat riz, de modo de obtenerlo en cant idad y pureza
suficientes para permit ir su ident ificación y cuant ificación. Sólo
recientemente han surgido métodos disponibles que permiten la medida
directa de algunos analitos sin la separación previa de su mat riz. El
analista toxicólogo ha experimentado un crecimiento paulat ino en el
número de técnicas a su disposición. En la actualidad la clásica
metodología convencional ha sido reemplazada por la int roducción de
métodos inst rumentales más sofist icados, de gran sensibilidad y precisión
pero cuyo costo elevado limita su disponibilidad en la mayoría de los
laboratorios de nuest ro medio. Los TOF t ienen en común el uso de
metodologías similares para su aislamiento, caracterización y
cuant ificación. En este capítulo se describirá someramente el
fundamento delos equipos empleados en su invest igación de acuerdo
con el siguiente esquema: A) INMUNOENSAYOS: Existen en el comercio
numerosos t ipos de inmuno ensayos con aplicaciones en Toxicología. En
su mayoría están diseñados para el análisis de muest ras líquidas, como
orina, agua y suero debido a que estas mat rices presentan poca
cant idad de interferencias. Estas muest ras se emplean en forma directa,
evitando por lo tanto el paso previo de ext racción aislamiento de los
analitos y logrando una reducción important ísima en el t iempo de
obtención de los resultados (10 minutos – 1 hora). Los inmuno ensayos se
basan en la reacción específica que se produce cuando un ant ígeno se
enfrenta con un ant icuerpo. La técnica t radicional consiste en mezclar
un volumen de muest ra conteniendo la droga a ensayar, con una
cant idad fija de un ant icuerpo específico (monoclonal o policlonal), y

3. una cant idad fija de la misma droga marcada sintét icamente común
radioisótopo, una enzima act iva o una sustancia fluorescente, por
ejemplo. De este modo se establece una competencia ent re la droga
marcada (Droga*) y la presente en la muest ra (Droga) por los sit ios de
unión del ant icuerpo. En forma simple se esquemat iza esta competencia:
Droga* + Droga + Ant icuerpo Droga*-Ant icuerpo + Droga –Ant icuerpo La
probabilidad de que una molécula marcada o sin marcar se una al
ant icuerpo depende de su concent ración. Se requieren inst rumentos
capaces de evaluar el punto final de la reacción y comparar la respuesta
del test cont ra estándares conocidos. De acuerdo al t ipo de marca es el
método analít ico de medida empleado. En algunos casos no puede
diferenciarse la señal producida por la droga marcada unida al
ant icuerpo y la droga macada libre, siendo necesario separarlas antes
de efectuar la medida. Estos ensayos se conocen como heterogéneos, e
involucran principalmente a los radio inmuno ensayos. Cuando esta
separación no es necesaria, porque la señal producida por la droga
marcada se diferencia si está libre o unida, el ensayo se llama
homogéneo. Esta diferencia ocurre porque la señal es suprimida,
alterada o producida en la unión con el ant icuerpo. Los inmunoensayos
ópt icos (donde la señal medida es un cambio ópt ico, como absorbancia
UV, fluorescencia o luminiscencia) pertenecen a este t ipo. En términos
matemát icos se pueden escribir como:
TÉCNICAS CROMATOGRAFICAS La búsqueda de TOF mediante técnicas
cromatográficas, como TLC (Thin Layer Chromatography), HPTLC (High
Performance Thin Layer Chromatography), HPLC (HighPressure Liquid
Chromatography), GC (Gas Chromatography), etc. se caracteriza
porque antes de aplicarlas es necesario separar las drogas de la mat riz
en la que se encuent ran inmersas mediante alguna técnica de
ext racción. En la práct ica esto se logra siguiendo una serie de pasos,
como los que se describen a cont inuación.
1. Preparación de la muestra: es un paso crucial en los análisis. Involucra
la homogenización de la muest ra, ajustes de pH, pesaje, procedimientos
de hidrólisis (ácida, básica o enzimát ica), precipitación, cent rifugación,
etc. de modo tal que se facilite el aislamiento de la sustancia de interés.
2. Aislamiento del analito: se puede llevar a cabo mediante ext racción
líquido-líquido (en tubos, en ampollas de decantación o en columnas de
t ierra de diatomeas) o ext racción en fase sólida (columnas de SPE) de
acuerdo a las disponibilidades del laboratorio. En este paso se mueve el
analito de su mat riz original para obtenerlo en la mayor concent ración
posible, estabilizarlo (ya que en su mat riz original puede degradarse
química o enzimát icamente) y eliminar interferencias.

4. 3. Concentración del extracto: el objet ivo de este paso es colocar el
analito en el menor volumen posible para aumentar la sensibilidad del
análisis. Se deben usar condiciones cont roladas, idealmente una
temperatura menor de 40ºC y corriente de nit rógeno. Durante las
operaciones antes mencionadas se debe tener sumo cuidado para
evitar pérdidas por volat ilización, oxidación o absorción en los
precipitados, ya que frecuentemente los productos a ident ificar están
presentes en cant idades menores del g/ ml. Las pérdidas por
volat ilización de sustancias básicas como anfetaminas pueden
prevenirse cuidando la temperatura y salificando el ext racto con ácido
clorhídrico al 1 % en metanol.
WEBGRAFIA
 ht tp://es.slideshare.net/mauriciochibanez/toxicos-organicos-fijos-
30628178
 ht tp://es.slideshare.net/ViCheEspinoza/toxicos-organicos-fijos