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Departamento de Biología Molecular de Plantas	

Instituto de Biotecnología, UNAM	

Laboratorio 23	

Estudio del desarrollo del cloroplasto.	

LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN:	

Estudio de la biosíntesis de pigmentos cloroplásticos en plantas.	

PARTICIPANTES	
  EN	
  EL	
  PROGRAMA	
  DE	
  SERVICIO	
  SOCIAL:	
  
	
  
Dra.	
  Patricia	
  León	
  Mejía	
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  Grupo)	
  
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  Maricela	
  Ramos	
  Vega	
  (InvesBgador)	
  
Dra.	
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  Romero	
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  (InvesBgador)	
  
CLOROPLASTOS	
  
ESTRUCTURA	
  DE	
  CLOROPLASTO	
  
BIOGÉNESIS DEL CLOROPLASTO!
(Eventos Relevantes)!
PROPLASTIDIO
CLOROPLASTO MADURO!
Vothknecht y Westhoff, 2001.!
§Aumento en volumen y número.!
§Invaginación de la membrana
interna.!
§Incremento del número de copias
del genoma cloroplástico.!
§Estructuración de las membranas
tilacoideas.!
§Establecimiento y operación de la
maquinaria fotosintética!
(Meristemos y Embriones)!
Programa de desarrollo órgano y tejido específico regulados por múltiples
eventos de señalización y expresión genética. Factores tanto internos
(fitohormonas) como externos (luz, nutrientes) están involucrados en este
complejo proceso de diferenciación. !
(Tejidos Fotosintéticos)!
- Biosíntesis de clorofilas y carotenoides.!
- Biosíntesis lípidos y ácidos grasos.!
!
- Metabolismo de aminoácidos. !
!
- Biosíntesis de terpenos/Vía MEP.!
!
- Biosíntesis de purinas y pirimidinas.!
	
  FUNCIONES	
  DEL	
  CLOROPLASTO	
  	
  
Fotosíntesis!
Tipos	
  de	
  PlásBdos	
  
CLOROPLASTO!
(5-10 µM/40>100 pc!
ETIOPLASTO!
CROMOPLASTO!
PROPLASTIDIO!
(0.2-1 µM/~20 pc)!
AMILOPLASTO!
Los	
  cloroplastos	
  son	
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  metabólicas	
  
Además	
  de	
  realizar	
  la	
  fotosíntesis,	
  los	
  cloroplastos	
  llevan	
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  variedad	
  de	
  procesos	
  	
  
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  fundamentales	
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  estructura	
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  celular.	
  
	
  
Uno	
  de	
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  isoprenoides	
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  (León	
  y	
  Guevara-­‐García,	
  2007)	
  
-Hormonas" ácido abscísico, brasinoesteroides, citocininas, giberelinas"
-Fotosíntesis"
-Estreses bióticos y abióticos! fitoalexinas, quinonas, tocoferoles"
-Componentes de membrana!
clorofilas, carotenoides, ubiquinonas, plastoquinonas"
esteroles y hopanoides"
•Están	
  presentes	
  en	
  todos	
  los	
  organismos,	
  siendo	
  más	
  abundantes	
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  diversos	
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  plantas.	
  
•Se	
  han	
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  diferentes	
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  extremadamente	
  	
  
diversos	
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  estructura	
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  función.	
  
Funciones	
  biológicas!
Aplicaciones biotecnológicas!
-Alimentación " α-tocoferol (vitamina E), β-caroteno (provitamina A)"
-Medicina" taxol y licopeno (anticancerígenos), artemisina (antimalárico)"
-Industria" Limoneno y mentol (saborizantes), aceites esenciales (fragancias), "
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Los	
  Isoprenoides	
  
Vías	
  de	
  biosíntesis	
  de	
  isoprenoides	
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CITOPLASMA!
Acetil CoA !
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Mevalonato !
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Piruvato + GA3P !
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!
2-C-metil-D-eritritol-4-fosfato !
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4-difosfocitidil 2-C-metil-D-eritritol-2-fosfato !
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DXS (CLA1) !
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IPP ! DMAPP !
IPP ! DMAPP !
	
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Cloroplastos	
  
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Piruvato + GA3P !
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Isoprenoides!
	
  Isoprenoides	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
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VÍA	
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Lopez-­‐Bucio,J.S.	
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  de	
  Luna-­‐Valdez,L.A.	
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  Leon,P.	
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2014.	
  Arabidopsis	
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  Hernandez-­‐Bernal,A.F.	
  Cordoba,E.	
  Leon,P.	
  2014.	
  CharacterizaBon	
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Leon,P.	
  Gregorio,J.	
  Cordoba,E.	
  2013.	
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  chloroplast	
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Porta,H.	
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  2011.	
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  the	
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  • 1. Departamento de Biología Molecular de Plantas Instituto de Biotecnología, UNAM Laboratorio 23 Estudio del desarrollo del cloroplasto. LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN: Estudio de la biosíntesis de pigmentos cloroplásticos en plantas. PARTICIPANTES  EN  EL  PROGRAMA  DE  SERVICIO  SOCIAL:     Dra.  Patricia  León  Mejía  (Jefe  de  Grupo)   Dra.  Guadalupe  Maricela  Ramos  Vega  (InvesBgador)   Dra.  Cynthia  Romero  Guido  (InvesBgador)  
  • 4. BIOGÉNESIS DEL CLOROPLASTO! (Eventos Relevantes)! PROPLASTIDIO CLOROPLASTO MADURO! Vothknecht y Westhoff, 2001.! §Aumento en volumen y número.! §Invaginación de la membrana interna.! §Incremento del número de copias del genoma cloroplástico.! §Estructuración de las membranas tilacoideas.! §Establecimiento y operación de la maquinaria fotosintética! (Meristemos y Embriones)! Programa de desarrollo órgano y tejido específico regulados por múltiples eventos de señalización y expresión genética. Factores tanto internos (fitohormonas) como externos (luz, nutrientes) están involucrados en este complejo proceso de diferenciación. ! (Tejidos Fotosintéticos)!
  • 5. - Biosíntesis de clorofilas y carotenoides.! - Biosíntesis lípidos y ácidos grasos.! ! - Metabolismo de aminoácidos. ! ! - Biosíntesis de terpenos/Vía MEP.! ! - Biosíntesis de purinas y pirimidinas.!  FUNCIONES  DEL  CLOROPLASTO     Fotosíntesis!
  • 6. Tipos  de  PlásBdos   CLOROPLASTO! (5-10 µM/40>100 pc! ETIOPLASTO! CROMOPLASTO! PROPLASTIDIO! (0.2-1 µM/~20 pc)! AMILOPLASTO!
  • 7. Los  cloroplastos  son  fábricas  metabólicas   Además  de  realizar  la  fotosíntesis,  los  cloroplastos  llevan  a  cabo  una  variedad  de  procesos     metabólicos  fundamentales  para  la  estructura  y  función  celular.     Uno  de  esos  procesos  metabólicos  es  la  biosíntesis  de  metabolitos  secundarios  tales  como     los  isoprenoides  (o  terpenos).     Aunque  no  todos  los  isoprenoides  se  sinteBzan  en  plásBdos,  el  número  aquí  es  muy  alto     (del  orden  de  miles);  pero  sobre  todo  destaca  la  importancia  de  sus  funciones  para  diversos   procesos  vegetales.   Los  isoprenodes  Benen  un  interés  adicional,  ya  que  además  de  su  papel  central  en  el     desarrollo  y  metabolismo  de  las  plantas,  muchos  de  estos  compuestos  Benen  un  valor     comercial  muy  importante.                                                                                                                                                                                                                          (León  y  Guevara-­‐García,  2007)  
  • 8. -Hormonas" ácido abscísico, brasinoesteroides, citocininas, giberelinas" -Fotosíntesis" -Estreses bióticos y abióticos! fitoalexinas, quinonas, tocoferoles" -Componentes de membrana! clorofilas, carotenoides, ubiquinonas, plastoquinonas" esteroles y hopanoides" •Están  presentes  en  todos  los  organismos,  siendo  más  abundantes  y  diversos  en  plantas.   •Se  han  idenBficado  más  de  40,000  isoprenoides  diferentes  que  son  extremadamente     diversos  en  estructura  y  función.   Funciones  biológicas! Aplicaciones biotecnológicas! -Alimentación " α-tocoferol (vitamina E), β-caroteno (provitamina A)" -Medicina" taxol y licopeno (anticancerígenos), artemisina (antimalárico)" -Industria" Limoneno y mentol (saborizantes), aceites esenciales (fragancias), " carotenoides (colorantes)" Los  Isoprenoides  
  • 9. Vías  de  biosíntesis  de  isoprenoides  en  plantas   CITOPLASMA! Acetil CoA ! 3-Hidroxi-3-Metilglutaril CoA ! ! Mevalonato ! Citocininas ! Brasinosteroides ! Fitoesteroles Fitoalexinas ! ! ! PLÁSTIDO! Piruvato + GA3P ! 1-desoxi-D-xilulosa-5-fosfato ! ! ! esencias, sabores ! ácido abscísico ! giberelinas ! clorofilas (pigmentos) ! tocoferoles ! carotenos (pigmentos)! ! 2-C-metil-D-eritritol-4-fosfato ! DXR 4-difosfocitidil-2-C-metil-D-eritritol ! MCT CMK 4-difosfocitidil 2-C-metil-D-eritritol-2-fosfato ! 2C-metil-D-eritritol 2,4-ciclodifosfato ! MECS DXS (CLA1) ! Vitamina B1 Vitamina B6 1-hidroxi-2-metil-2(E)-butenil-4-difosfato ! HDS HDR IPP ! DMAPP ! IPP ! DMAPP !  Vía  Mevalónica      Vía  MEP     5-fosfomevalonato ! 5-difosfomevalonato !
  • 10. Silvestre   Mutante   cla1-­‐1   Cloroplastos   Plántulas   En  nuestro  grupo  se  han  idenBficado  genes  importantes  para  la  biogénesis  de  los  cloroplastos   y  para  la  biosíntesis  de  los  isoprenoides.   Piruvato + GA3P ! 1-desoxi-D-xilulosa-5-fosfato ! DXS1 (CLA1) ! IPP ! DMAPP ! X   Isoprenoides!  Isoprenoides                                        cla1-­‐1                    Silvestre   carotenoides  totales                            3  %                                  100  %   clorofilas  totales                                          4  %                                  100  %   α-­‐tocoferol                                                            7  %                                  100  %   ABA                                                                                  38  %                                  100  %   Mutaciones  en  genes  de  la  vía  MEP  alteran  la   biogénesis  de  los  cloroplastos  y  afectan  la   biosíntesis  de  isoprenoides.   Cloroplastos    alterados   VÍA  MEP   (Plástido)  
  • 11. PUBLICACIONES  RECIENTES   Lopez-­‐Bucio,J.S.  Dubrovsky,J.G.  Raya-­‐Gonzalez,J.  Ugartechea-­‐Chirino,Y.  Lopez-­‐Bucio,J.  de  Luna-­‐Valdez,L.A.  Ramos-­‐Vega,M.  Leon,P.  Guevara-­‐Garcia,A.A.     2014.  Arabidopsis  thaliana  mitogen-­‐acBvated  protein  kinase  6  is  involved  in  seed  formaBon  and  modulaBon  of  primary  and  lateral  root  development    J  Exp  Bot.,  65,  169-­‐183.     Gregorio,J.  Hernandez-­‐Bernal,A.F.  Cordoba,E.  Leon,P.  2014.  CharacterizaBon  of  evoluBonary  conserved  moBfs  involved  in  acBvity  and  regulaBon  of  the     ABA-­‐INSENSITIVE  (ABI)  4  transcripBon  factor  Mol  Plant,  7,  422-­‐436.     Leon,P.  Gregorio,J.  Cordoba,E.  2013.  ABI4  and  its  role  in  chloroplast  retrograde  communicaBon  Fron?ers  in  Plant  Science,  3,  304.     Porta,H.  Jimenez,G.  Cordoba,E.  Leon,P.  Soberon,M.  Bravo,A.  2011.  Tobacco  plants  expressing  the  Cry1AbMod  toxin  suppress  tolerance  to  Cry1Ab  toxin     of  Manduca  sexta  cadherin-­‐silenced  larvae  Insect  Biochem  Mol  Biol,  41,  513-­‐519.     Cordoba,E.  Porta,H.  Arroyo,A.  San  Roman  C.  Medina,L.  Rodriguez-­‐Concepcion,M.  Leon,P.  2011.  FuncBonal  characterizaBon  of  the  three  genes  encoding     1-­‐deoxy-­‐D-­‐xylulose  5-­‐phosphate  synthase  in  maize  J  Exp  Bot.,  62,  2023-­‐2038.     Padilla-­‐Chacon,D.  Cordoba,E.  Olivera,T.  Sanchez,S.  Coello,P.  Leon,P.  Tiessen,A.  MarBnez-­‐Barajas,E.  2010.  Heterologous  expression  of  yeast  Hxt2  in     Arabidopsis  thaliana  alters  sugar  uptake,  carbon  metabolism  and  gene  expression  leading  to  glucose  tolerance  of  germinaBng  seedlings     Plant  Mol  Biol,  72,  631-­‐41.