1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL
AUTOR : Martha Guerrero –Olazarán,Eddy.L.Cab-
Barrera,Luis Galan-Wong y Jose Viader
INTEGRANTES:
HENRY GONZALO CCAMA LLANQUE
DEYSY MAGALI INCACUTIPA LAYME
LUIS SANTIAGO MALDONADO RONDO
HECTOR RINALDO DAMIAN FLORES
VALERIA FERNANDA AMPUERO HERRERA
CURSO : BIOTECNOLOGIA
DOCENTE : Dr. HEBERT H.SOTO GONZALES
ILO – PERÚ
13/09/2021
2.
3. BIOTECNOLOGÍA DE
PROTEINAS RECOMBINANTES
Se considera una proteína recombinante o proteína heteróloga
aquella proteína cuya síntesis se realiza en un organismo distinto al
organismo nativo. Actualmente se ofrecen en el mercado
internacional una gran variedad de proteínas recombinantes para
un amplio abanico de aplicaciones, lo que ha impulsado la
investigación en este campo.
El desarrollo de la tecnología DNA
recombinante y la optimización de
bioprocesos con organismos recombinantes.
Posibilidades para la
producción de proteínas
nativas o modificadas.
ofrece
Un sistema de expresión lo
conforma un organismo
hospedero y fragmento de DNA
que poseen los elementos
genéticos necesarios para
realizar los procesos de
transcripción y traducción en
dicho organismo hospedero.
Para la selección de un sistema adecuado para la síntesis de
una proteína recombinante
El origen biológico, propiedades
químicas y biológicas de la proteína.
El bioproceso que se empleara para su
producción.
Se debe
considerar
El origen biológico es importante ya que generalmente un
sistema de expresión eucariota es mas eficiente para
sintetizar una proteína de origen eucariota que un sistema
de expresión procariota. Es importante analizar las
secuencia nucleotídica codificante para evaluar el uso de
codones y la presencia de secuencias de finalización
prematura de la transcripción.
4. FACTORES DETERMINANTES EN LA
SELECCIÓN DE UN SISTEMA DE EXPRESIÓN
Origen de la proteína Aplicación Bioproceso
• PROCARIOTA. Organismos unicelulares
que carecen de estructuras unidas a las
membranas. Las bacterias y las arqueas
son los dos tipos de procariotas.
• EUCARIOTA. Organismos cuyas células
tienen un núcleo y otros orgánulos
encerrados por una membrana plasmática.
• Secuencia nucleotídica
• Propiedades químicas
• Estabilidad
• Toxicidad
• Destino celular
• Grado de pureza
Estos son
Química de la
transformación.
Reactivo químico
Medio ambiente
- Tipo
- Condiciones de cultivo
- Escala
- costo
Propiedades de la proteína
-Uso de codones
preferenciales
-Tamaño
-Modificaciones
postraduccionales
-proteólisis
-PH
-temperatura
- Agente terapéutico
- Vacunas
- Diagnostico
Biomedicina
Alimentos
- Procesos industriales
- Nutracéuticos
- Aditivos
- Industria del papel
- Industria textil y del
cuero
- Industria
farmacéutica
- Industria química
- Reactivo analítico
- Energía y combustibles
- Tratamiento de residuos
Actualmente se emplea gran variedad
de hospederos que van desde
organismos unicelulares tales como
bacerias,hongos,levaduras y líneas
celulares de mamiferos,insectos o
plantas ,hasta organismos completos
como animales y plantas transgénicas.
5. PROTEÍNAS RECOMBINANTES EN
LA ACUACULTURA
Esta tecnología esta enfocado
para incrementar la eficiencia
y productividad de la
practica acuícola
Uno de estos fue
desarrollados de hormonas y
estimulantes de crecimiento de
especies marinas
Crecimiento de
bovina
Empleado para el
crecimiento de varios
especies
Estudia los genes y sus
elementos reguladores para
la producción de proteinas
Genes que codifican proteínas
y actúa como alergenos
humanos
6. Tripsina
Que es ?
Función biológica
Es una enzima peptidasa que rompe los enlaces peptídicos de las proteínas mediante hidrólisis para formar péptidos de menor
tamaño y aminoácidos. Se produce en el páncreas y se secreta en el duodeno (parte del intestino), donde es esencial para la
digestión. Es una enzima específica, ya que liga al péptido en las posiciones del carboxilo de residuos arginina (Arg) o lisina (Lys)
en la cadena, ambos aminoácidos con grupos R cargados positivamente, fragmentando al péptido inicial.
La tripsina fue descubierta en 1876 por el fisiólogo alemán Wilhelm Kühne
mientras estudiaba el mecanismo de la digestión.
La tripsina es producida por el páncreas en forma de tripsinógeno (enzima
inactiva), y luego se activa en el duodeno gracias a la enteropeptidasa, que la
convierte en tripsina (enzima activa) mediante un corte proteolítico.
¿Como se
produce?
Historia
Propiedades
presente en el tracto digestivo de una gran variedad de mamíferos y juega un papel
importante en la activación de endopeptidasas digestivas en animales.
Esta enzima lleva a cabo la catálisis de reacciones de hidrólisis de enlaces peptídicos que contienen
residuos de aminoácidos básicos, tales como lisina y arginina reduciendo el tamaño de proteínas
grandes y haciéndolas accesibles a posterior degradación por otras proteasas.
Las serín-proteasas se caracterizan por un mecanismo catalítico común que involucra la presencia de
una triada formada por tres residuos específicos de serina, histidina y ácido aspártico.
7. PRODUCCION TRIPSINÓGENO RECOMBINANTE DE CAMARÓN
BLANCO DEL PACÍFICO (Litopenaeus Vannamei)
Sistema de Expresión de Pichia pastori
con el
Este sistema de expresión cuenta con un
promotor finamente regulable que se puede
inducir después de tener una densidad celular
deseada, estrategia útil si la proteína
recombinante resulta ser toxica para el
hospedero
Reúne los criterios favorables para el
desarrollo de procesos escalables a nivel
industrial y ha mostrado resultados
satisfactorios con la producción de otras serín
proteasas como ha sido el caso de una forma
modificada de tripsinógeno bovino
Las cepas recombinantes fueron
cultivadas bajo condiciones de
inducción, en un medio mínimo
amortiguado conteniendo metanol al
0,75%
Con el fin de obtener mayor
eficiencia en los niveles de
producción del tripsinógeno
recombinante de camarón
Se inicio un estudio para determinar las
condiciones de fermentación en un biorreactor
de 5L
A ph 3 disminuyen los niveles
de producción del
tripsinógeno recombinante
Trabajando a 22°C y a pH 5
durante la etapa de inducción-
producción, se encontró una
producción mayor que en
ensayos de fermentación a
30°C
8. DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES
- Se selecciona el sistema de expresión de
pichia pasotoris para la producción de
tripsogeno
- Las cepas recombinantes de p. pastoris
producen y secretan el tripsogeno
- Para el caso del bovino algunos autores
tuvieron que hacer una mutacion.