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1. Uri Zárate Durán
Espectrofotómetro
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2. ¿Qué es un espectrofotómetro?
Un espectrofotómetro es un instrumento usado en el análisis químico que sirve para medir,
en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud
fotométrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o reacciones químicas
que se miden en una muestra. También es utilizado en los laboratorios de química para la
cuantificación de sustancias y microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotómetros, que son de absorción atómica, de absorción
molecular (que comúnmente se conoce como espectrofotómetro UV-VIS), y no debe ser
confundido con un espectrómetro de masa.
Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través de
una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite
al operador realizar dos funciones:
 Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra,
 Indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que nos interesa está presente en
la muestra.
ESPECTROFOTOMETRIA
La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones
biológicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación
absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto,
y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
Todas las sustancias pueden absorber energía radiante, aun el vidrio que parece ser
completamente transparente absorbe longitud de ondas que pertenecen al espectro visible;
el agua absorbe fuertemente en la región del infrarrojo.
La absorción de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende de la estructura
de las moléculas, y es característica para cada sustancia química.
Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energía es absorbida; la energía radiante
no puede producir ningún efecto sin ser absorbida.
El color de las sustancias se debe a que éstas absorben ciertas longitudes de onda de la luz
blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda
no absorbida.
Existen varios tipos de espectrofótometro.
Estos instrumentos tienen la capacidad de proyectar un pequeño haz de luz monocromática
a través de diferentes muestras para poder medir la cantidad de luz que es absorbida por
dicha muestra, permitiendole realizar funciones como.
Obtención de información sobre la naturaleza de la sustancia introducida en la muestra.
Conocer indirectamente que cantidad o cuanta cantidad de la que nos interesa saber esta
Práctica 6Uri Zárate Durán

3. dentro de esa pequeña muestra.
Hoy en día existen varíos tipos de ello, solo por nombrar algunos con sus respectivos
alcances:
Espectrofotómetro ultravioleta, 200-450 nm, banda 6 nm, precisión+- 1% T, concentración
si, con salida ordenador RS232.
Absorbancia , transmitancia y concentración.
1 cubeta de 10mm, o un tubo de 12mm de diámetro.
Rango longitud de onda:200-450 nm.
Lámpara de deuterio.
Exactitud Fotométrica: +/- 1%T.
Ancho de banda: 6 nm.
Salida digital RS 232.
Espectrofotómetro visible, 325-1000 nm, banda 5 nm, precisión+- 0,5 % T.
Detector de fotodiodo de silicio de alta calidad y rejilla de 1200 líneas/mm aseguran una
gran exactitud y precisión.
Blanco y auto cero fáciles de llevar a cabo (la pulsación de un único botón permite la
selección del modo transmitancia, absorbancia y cálculo de concentraciones).
Salida RS232 para transmisión directa de los datos a un ordenador o impresora.
Software opcional basado en sistema operativo de Windows que permite aumentar las
aplicaciones del equipo al cálculo de curvas y cinética enzimática a través del puerto
RS232.
Gran compartimento para muestras que permite alojar cubetas de 5-100 mm paso de luz
con los adaptadores adecuados
Espectrofotómetro visible, 320-1000 nm. Con salida ordenador RS232.
Pricipales tipos de espectrofotómetros
Existen varios tipos de espectrofotómetros, entre los cuales se encuentran:
 Espectrofotómetros de absorción atómica
 Espectrofotómetro de masa

4. Historia
En 1940 estaban disponibles en el mercado varios espectrofotómetros, pero los primeros
modelos no podían trabajar en el ultravioleta. Arnold O. Beckman desarrolló una versión
mejorada en el National Technical Laboratorios Company, más tarde la empresa Beckman
Instrument y en última instancia Beckman Coulter. Se desarrollaron los modelos A, B, y C
(se produjeron tres unidades del modelo C), y luego el modelo D, que se convirtió en el
DU. Toda la electrónica estaba contenida dentro de la caja del instrumento y tenía una
nueva lámpara de hidrógeno con continuum ultravioleta, y un mejor monocromador. Este
instrumento fue producido desde 1941 hasta 1976 con esencialmente el mismo diseño; más
de 30 000 unidades fueron vendidas. El precio en 1941 fue de US$723. El laureado con el
Nobel de química Bruce Merrifield dijo que era «probablemente el instrumento más
importante que se ha desarrollado para favorecer la realización de la biociencia.