El microscopio de contraste de fases permite observar células y tejidos vivos sin necesidad de tinción ni fijación, aprovechando los diferentes índices de refracción de los objetos para separar las ondas de luz y generar contrastes. Se usa principalmente en estudios de fisiología, patología y farmacología para analizar procesos celulares en tiempo real, y también en otros campos como la geología y la industria.

1. MICROSCOPIO CON
CONTRASTE DE FASES

2. ÍNDICE
• Introducción.
• Fundamento.
• Principales piezas.
• Ventajas y desventajas.
• Tratado de la muestra: ETAPAS.
• Aplicaciones.
• Diferencias.

3. Introducción
• Para poder observar una célula o tejido, en
microscopio de campo claro convencional, hay
que fijarla y hacerle una tinción, lo que implica,
la muerte de la célula en cuestión.
Al pasar por todos estos procesos, algunas
estructuras puedan dañarse o cambiar su
forma, por ello se utiliza este microscopio que
permite realizar exámenes inmediatos y
observar células vivas con diferentes grados
de brillo y oscuridad.

4. FUNDAMENTO
Se basa fundamentalmente en el retraso que se
produce en las ondas de luz al atravesar objetos de
distintos índices de refracción, aprovechando y
amplificando dichos retrasos.
 Su manera de funcionar es por medio del condensador,
se logran separar los rayos luminosos que son difractados
por el objeto de los que lo hacen, al pasar por la muestra,
los rayos que atraviesan objetos más densos
experimentan un retraso de un cuarto de lambda, y al
pasar por el anillo de fase, debido a la forma del anillo de
fase, estas ondas se retrasan un cuarto de lambda más.
Por lo que estos desfases de las ondas luminosas se
perciben como diferencias en el contraste, en distintos
tonos de grises.

6. PRINCIPALES PIEZAS

8. VENTAJAS DESVENTAJAS
Produce una imagen brillante
contra un fondo oscuro, sin
halos de difracción de una
célula viva.
Alto costo del equipo por los
diferentes aditamentos
utilizados en el microscopio.
Determinación del índice de
refracción.
Costo alto y mantenimiento
cuidadoso de las muestras de
células vivas.
Determinación de sólidos,
masa seca y espesor de las
estructuras celulares.
La microcinematografía requerida
para mirar los procesos que
realiza la célula in vivo, requiere
equipos especiales y personal
entrenado.

9. Tratado de la muestra: ETAPAS
• Extensión: Si la muestra es líquida se hace
directamente y , si es sólida, hay resuspenderla
previamente en una gota de agua.
• Fijación: Adhesión de la muestra al portaobjetos
y desnaturalizar las proteínas para facilitar la
acción del colorante.
• Tinción: Se realiza añadiendo los colorantes
sobre los microorganismos sometidos a los
procesos anteriores.

10. Puede ser de varios tipos:
• Negativa: Los colorantes no tiñen el
microorganismo, sino el entorno, aumentando
de este modo su contraste.
• Simple: Se utiliza un solo colorante que puede
ser de cualquier tipo. Al igual que la tinción
negativa, sólo nos permite observar la forma, el
tamaño y el tipo de agrupación de las células.
• Diferencial: Intervienen dos o más colorantes y
cada uno diferencia una estructura. El colorante
que se usa en segundo lugar es de color
diferente al del primero, denominándose
colorante de contraste.

11. Aplicaciones
• Observación de células y tejidos vivos.
• Observación de muestras delgadas o células aisladas.
• En estudios de diversas disciplinas como fisiología ,
patología, farmacología (procesos celulares,
identificación y cuantificación de microorganismos y
parásitos en fluidos y tejidos, efecto de medicamentos y
otras sustancias en las células y sus procesos de
mortalidad, ciclosis, digestión, entre otros.)
• Estudios de alimentos y medicinas.
• Análisis de materiales industriales (materiales, cristales ,
fibras sintéticas, plásticos, pigmentos , emulsiones y
suspensiones minerales.)
• Estudios geológicos (minerales).

12. Diferencias de microscopios.
• Células vivas ---- Células muertas.
• Riqueza de detalles en las estructuras.
• Condensador (filtro en anillo) y objetivo (placa
de difracción).