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COMPETENCIA 9.- REALIZA ANALISIS MIROBIOLOGICOS DEACUERDO A
LOS PROTOCOLOS QUE MARCAN LAS NORMAS VIGENTES
CONSULTANDO FUENTES RELEVANTES Y REALIZANDO EXPERIMENTOS
PERTINENTES.
Johana González
Estefanía Diez
Katia Andrade
Marcela Contreras
NOM-113-SSA1-1994- BIENES Y SERVICIOS.
MÉTODO PARA LA CUENTA DE
MICROORGANISMOS COLIFORMES TOTALES EN
PLACA.
A. AGUA PEPTONADA
 INGREDIENTES CANTIDADES
 Peptona 1 g
 NaCl 8.5 g
 Agua 1L.
 Preparación:
 ---Disolver los componentes en 1L. De agua.
 --- pH a 7,0 con hidróxido de sodio 1. N.
 ---Distribuir en porciones de cualquier volumen
múltiplo de nueve según se requiera.
 ---Esterilizar durante 15 minutos a 121°C.
 --- Los volúmenes finales de la solución de trabajo
deben ser iguales a los iniciales.
-MEDIO DE CULTIVO-
Agar-rojo- violeta-bilis-lactosa (RVBA)
 Preparación:
 ---Mezclar los componentes en el agua y dejar
reposar durante algunos minutos.
 ---Mezclar y ajustar el pH a 7,4 con ácido
clorhídrico .1N(normal) a 25°C, de forma que se
mantenga en este valor.
 ---Calentar con agitación constante y hervir durante 2
minutos.
 ---Enfriar inmediatamente el medio en un baño de
agua hasta que llegue a 45°C.
 ---Evitar el sobrecalentamiento del medio.
 ---Usar el medio dentro de las tres primeras horas
después de su preparación.
NOM-114-SSA1-1994
Método para la determinación de
salmonella en alimentos.
Caldo tetrationato
ingredientes:
 -proteosa peptona o triptona---------- 5.0 gr
 -sales biliares -----------------------------1.0gr
-carbonato de calcio --------------------10.0gr
-tisofulfato de sodio pentahidratado 30.0gr
-agua destilada ----------------------------1.0 L
 Materiales:
-vasos de precipitados
-matraz Erlenmeyer
Preparación:
 Disolver todos los ingredientes en vasos de precipitados,
en un litro de agua destilada estéril.
 Distribuir en un matraz de Erlenmeyer , agitando
constantemente en porciones de 10 y 225ml. Guardar en
refrigeración.
determinación de salmonella
Materiales y reactivos:
-balanza analítica
-licuadora
-cajas Petri
-tubos de ensaye
-caldo lactosado
-agua peptonada
-caldo tetrationato
Procedimiento:
 Pesar 25g de la muestra en la balanza
granataria y agregar 225 ml de caldo
lactosado, agua peptonada etc ; licuar
durante 1 min. dejar reposar 60 min a
temperatura ambiente e incubar a 35°C
18-24hrs.
 Transferir el caldo a la caja Petri e
incubar a 35°C 24hs, tomar la muestra y
sembrar por estría en la caja Petri.
 Por ultimo volver a incubar a 35°C 24h y
seleccionar 2 colonias típicas.

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  • 1. COMPETENCIA 9.- REALIZA ANALISIS MIROBIOLOGICOS DEACUERDO A LOS PROTOCOLOS QUE MARCAN LAS NORMAS VIGENTES CONSULTANDO FUENTES RELEVANTES Y REALIZANDO EXPERIMENTOS PERTINENTES. Johana González Estefanía Diez Katia Andrade Marcela Contreras
  • 2. NOM-113-SSA1-1994- BIENES Y SERVICIOS. MÉTODO PARA LA CUENTA DE MICROORGANISMOS COLIFORMES TOTALES EN PLACA. A. AGUA PEPTONADA  INGREDIENTES CANTIDADES  Peptona 1 g  NaCl 8.5 g  Agua 1L.
  • 3.  Preparación:  ---Disolver los componentes en 1L. De agua.  --- pH a 7,0 con hidróxido de sodio 1. N.  ---Distribuir en porciones de cualquier volumen múltiplo de nueve según se requiera.  ---Esterilizar durante 15 minutos a 121°C.  --- Los volúmenes finales de la solución de trabajo deben ser iguales a los iniciales.
  • 4. -MEDIO DE CULTIVO- Agar-rojo- violeta-bilis-lactosa (RVBA)
  • 5.
  • 6.  Preparación:  ---Mezclar los componentes en el agua y dejar reposar durante algunos minutos.  ---Mezclar y ajustar el pH a 7,4 con ácido clorhídrico .1N(normal) a 25°C, de forma que se mantenga en este valor.  ---Calentar con agitación constante y hervir durante 2 minutos.
  • 7.  ---Enfriar inmediatamente el medio en un baño de agua hasta que llegue a 45°C.  ---Evitar el sobrecalentamiento del medio.  ---Usar el medio dentro de las tres primeras horas después de su preparación.
  • 8. NOM-114-SSA1-1994 Método para la determinación de salmonella en alimentos. Caldo tetrationato ingredientes:  -proteosa peptona o triptona---------- 5.0 gr  -sales biliares -----------------------------1.0gr -carbonato de calcio --------------------10.0gr -tisofulfato de sodio pentahidratado 30.0gr -agua destilada ----------------------------1.0 L  Materiales: -vasos de precipitados -matraz Erlenmeyer
  • 9. Preparación:  Disolver todos los ingredientes en vasos de precipitados, en un litro de agua destilada estéril.  Distribuir en un matraz de Erlenmeyer , agitando constantemente en porciones de 10 y 225ml. Guardar en refrigeración.
  • 10. determinación de salmonella Materiales y reactivos: -balanza analítica -licuadora -cajas Petri -tubos de ensaye -caldo lactosado -agua peptonada -caldo tetrationato
  • 11. Procedimiento:  Pesar 25g de la muestra en la balanza granataria y agregar 225 ml de caldo lactosado, agua peptonada etc ; licuar durante 1 min. dejar reposar 60 min a temperatura ambiente e incubar a 35°C 18-24hrs.  Transferir el caldo a la caja Petri e incubar a 35°C 24hs, tomar la muestra y sembrar por estría en la caja Petri.  Por ultimo volver a incubar a 35°C 24h y seleccionar 2 colonias típicas.