El documento habla sobre la validación de métodos analíticos en laboratorios. Explica que la validación es el proceso para demostrar que los procedimientos analíticos son adecuados para su uso previsto evaluando parámetros como exactitud, precisión, límites de detección y cuantificación. También describe los objetivos de la validación y los requisitos para validar métodos microbiológicos y de instrumentación.

1. ANÁLISIS INSTRUMENTAL,
METROLOGÍA, CONTROL DE
CALIDAD.
LIC. ARIANA CORNEJO MEDINA

2. OBJETIVOS:
 Argumentar los criterios generales de validación.
 Describir las fases y parámetros de la validación,
conforme al uso de los instrumentos y normas
para el control de la calidad de procesos y
productos. Definir el concepto de validación de
métodos.
 Valorar la importancia de la validación y
verificación de métodos microbiológicos.

3. Unidad V: Validación de métodos
Contenidos:
5.1. Concepto de validación de métodos.
5.2. Criterios generales de validación.
5.3. Fases y parámetros de la validación,
conforme al uso de los instrumentos y normas para
el control de la calidad de procesos y productos.

4. Concepto de validación de métodos.
«La validación de métodos, es el proceso por el cual
se demuestra que los procedimientos analíticos son
aptos para el uso indicado».
«La validación de un método analítico es el proceso
por el cual se establece, mediante estudios de
laboratorio, que las características de desempeño del
método cumplen con los requisitos para las
aplicaciones analíticas previstas».

5. Los parámetros de calidad de los métodos
analíticos, son los criterios que nos ayudan a
discernir si un método analítico concreto es adecuado
para resolver un determinado problema.
Estos parámetros están expresados en términos
cuantitativos.

6. Existen parámetros analíticos obligatorios en
la validación, estos son:
• Exactitud: ¿qué nos dice el valor verdadero?
• Precisión: grado de concordancia entre un
grupo de resultados ¿hay dispersión en el dato?
• Límite de detección: sensibilidad del método.

10. • Límite de cuantificación: ¿dónde puedo
empezar a cuantificar con seguridad?
• Linealidad: ¿cómo es el coeficiente de
correlación de mi calibrado?

11. Por otro lado, también tenemos parámetros
analíticos optativos en la validación:
• Selectividad: relacionado con la exactitud, el
problema son…las interferencias.
• Recuperación: si adicionamos una molécula
comercial a la matriz a una concentración
determinada, ¿la recuperamos?

12. • Efecto matriz: ¿está aumentada o disminuida
la señal de nuestro analito?
Si estos factores se pueden dar, el método estaría
completo.
Es importante tener en cuenta que: El método
analítico debe estar bien estandarizado antes de
iniciar el proceso de validación

13. Los objetivos que debe cumplir la validación son:
 Definir y asegurar la calidad de la información
analítica generada a través de las propiedades
analíticas.
 Garantizar la coherencia entre la información
analítica generada y las necesidades planteadas
por la sociedad, industria, comercio, ciencia y
tecnología.

14. Una buena elección del método o un buen diseño
es clave. Una vez establecidos los protocolos y
validados, deben seguirse escrupulosamente.
Es fundamental no quedarse en lo obsoleto, si un
método no funciona, por muy establecido que esté,
hay que actualizarlo. La regulación vendrá
posteriormente.

15. La validación de procedimientos analíticos
requiere:
 Instrumentos calificados y calibrados
 Métodos documentados
 Patrones de referencia confiables
 Analistas calificados
 Integridad de la muestra

16. Protocolo de validación para método analítico
 Declaración de propósito y alcance
 Responsabilidades
 Método de ensayo documentado
 Lista de materiales y equipos
 Procedimiento para los experimentos para cada parámetro
 Análisis estadístico
 Criterio de aceptación para cada parámetro de desempeño

17. Calificación del instrumento
 Marca, modelo y manual del fabricante
 Modificaciones
 Calificación de la instalación y de la operación
 Programas de calibración
 Cronogramas de mantenimiento

18. Características de los procedimientos
analíticos
● Fortaleza
● Robustez
● Variabilidad causada por :
○ Variaciones de día a día
○ De analista a analista
○ De laboratorio a laboratorio
○ De instrumento a instrumento
○ De columna cromatográfica a columna cromatográfica
○ De estuche de reactivos a estuche de reactivos
○ Inestabilidad de los reactivos analíticos

19. Diferentes clases de ensayos analíticos
● Clase A: Para establecer identidad
● Clase B: Para detectar y cuantificar impurezas
● Clase C: Para determinar cuantitativamente la
concentración
● Clase D: Para evaluar las características

20. Extensión de la validación
 Métodos nuevos requieren validación completa
 Métodos de Farmacopea requieren validación
parcial (o verificación)
 Cambios significativos implican revalidación
parcial
 cambios de equipo
 cambios de fórmula
 cambios de proveedores de reactivos críticos

21. Transferencia de métodos analíticos
● Protocolo y procedimiento del método de
transferencia
○ precisión
○ exactitud
○ robustez
● Método científico escrito y aprobado
● Verificación de la competencia
● Aceptación formal por el nuevo laboratorio

22. Requerimientos de validación del laboratorio
de química
● Balanzas
● Cromatografía
○ HPLC, HPTLC, GC, TLC
● Aparato de disolución o desintegración
● Determinación de humedad Karl Fischer
● Aparatos de punto de fusión, de
ablandamiento o de congelación
● Hornos, refrigeradoras, incubadoras

23. Requerimientos de validación del laboratorio de
química
● pH metro
● Polarímetro - rotación óptica
● Refractómetro
● Espectrofotómetro UV/Vis, IR, FTIR, Raman, AA
● Temporizadores
● Viscosímetro
● Equipo volumétrico

24. Ensayos biológicos
● Pueden ser difíciles de "validar"
● "Validez" en base a caso por caso
● Cumplir estrictamente las monografías
de los Ensayos biológicos en las
farmacopeas

25. Ensayos microbiológicos que
requieren validación
● Ensayos de límites microbianos
● Recuento microbiano
● Ensayo de esterilidad
● Ensayo de eficacia de preservativo
● Programa de control de ambiente
● Ensayos biológicos

26. ● Temperatura y tiempo de incubación.
● Todos los microorganismos no pueden crecer en
los medios.
● Variaciones en los medios puede afectar la
recuperación.
● Desinfectantes o preservativos inhibidores
● Muestra: Procedimientos, manejo,
almacenamiento, transporte

27. Cuando nos referimos a normas de calidad,
hablamos de las reglas que tiene que cumplir un
producto o un servicio mediante sus características.
Estos requisitos son fundamentales para determinar
el grado de satisfacción que deben recibir los
consumidores de esos productos o servicios durante
su uso.

28. Los objetivos de las normas de calidad consisten
en:
 Definir las características mínimas de un
producto: por ejemplo, para que unos auriculares
sean inalámbricos, deben cumplir con
determinadas características.
 Mejorar la seguridad: los productos deben contar
con algunos requisitos que garanticen la
seguridad del consumidor.

29.  Proteger los intereses del cliente: esto quiere
decir que los productos responderán a sus
necesidades.
 Reducir costos: al determinar y organizar las
reglas de producción, se disminuyen los costos.

30. La normativa ISO en laboratorios contiene
tanto requisitos de gestión como requisitos técnicos
que inciden sobre la mejora de la calidad del trabajo
realizado en los laboratorios.
La normativa ISO aplicable a un laboratorios clínico
automatizado es la International Organization for
Standardization (ISO), que establece la ISO
15189:2012 “Medical laboratories. Requirements for
quality and competence”.

31. Los documentos ISO 9000 ofrecen pautas para
la calidad en las industrias de fabricación y servicios,
y pueden aplicarse de manera generalizada a otros
tipos de organizaciones.
La norma ISO 9001:2000 aborda los requisitos
generales del sistema de gestión de calidad y se
aplica a los laboratorios clínicos. Actualmente,
existen dos normas ISO específicas para
laboratorios.

32. ISO 15189:2007. Medical laboratories-particularreq
uirements for quality and competence. Ginebra:
Organización Internacional de Normalización, 2007.
ISO/IEC 17025:2005. General requirements for the
competence of testing and calibration laboratories.
Ginebra: Organización Internacional de
Normalización, 2005.

33. Otra importante organización internacional
de normas para laboratorios es el Instituto de Normas
Clínicas y de Laboratorio (CLSI), anteriormente
conocida como Comité Nacional de Normas de
Laboratorios Clínicos (NCCLS).
El CLSI utiliza un proceso de consenso que implica a
muchos partícipes para la elaboración de las normas.

34. La complejidad del sistema del laboratorio
requiere abarcar diversos factores para garantizar
la calidad dentro de este. Algunos de estos son:
 El entorno del laboratorio
 Los procedimientos de control de calidad
 Las comunicaciones
 El mantenimiento de los archivos
 Personal competente y experto
 Reactivos y equipos de buena calidad