1 FUNDAMENTOS Y
CONCEPTOSBÁSICOS
2 TÉCNICAS Y HERRAMIENTAS
DE LABORATORIO
Historia y ramas de la microbiología
Clasificación general de microorganismos
(bacterias, hongos, virus, parásitos, arqueas)
Morfología y fisiología microbiana (formas,
estructuras, metabolismo)
Reproducción bacteriana y crecimiento
microbiano
Biofilms y su importancia clínica
Tinción de Ziehl–Neelsen (ácido-alcohol resistentes)
Otras tinciones especiales (tinción negativa,
fluorescente, endosporas, cápsulas)
Medios de cultivo (selectivos, diferenciales,
enriquecidos, transporte)
Pruebas bioquímicas comunes (catalasa, oxidasa,
coagulasa, IMViC, ureasa, TSI)
Métodos de esterilización y desinfección
Control de calidad microbiológica en laboratorio
Contenido
3.
3 MICROBIOLOGÍA MÉDICA
APLICADA
4TEMAS DE INTERÉS
Patógenos bacterianos importantes (ej. E.
coli, Staphylococcus aureus,
Mycobacterium tuberculosis)
Protozoarios patógenos (además de
amibas: Giardia lamblia, Trichomonas
vaginalis)
Introducción a hongos clínicos (levaduras,
mohos, micosis comunes)
Introducción a virología (estructura viral,
replicación, virus de importancia médica)
Antimicrobianos y resistencia bacteriana
(Mecanismos y pruebas como
antibiograma)
Microbiota normal y su papel en la salud
Inmunología básica aplicada a microbiología
Bioseguridad en el laboratorio (Niveles BSL)
Epidemiología básica de enfermedades infecciosas
Microbiología ambiental (agua, alimentos, suelos)
Contenido
Historia y ramasde la
microbiología
Definición: La microbiología es la ciencia que
estudia los microorganismos: seres vivos demasiado
pequeños para verse a simple vista (bacterias,
hongos, virus, protozoos, algunas algas).
6.
Pioneros:
Antonie van Leeuwenhoek(1674): Primeras
observaciones de microorganismos con microscopio
simple.
Louis Pasteur (siglo XIX): Refutó la teoría de la
generación espontánea, desarrolló pasteurización y
vacunas.
Robert Koch: Estableció los Postulados de Koch para
relacionar un microorganismo con una enfermedad.
Historia y ramas de la
microbiología
7.
Ramas principales:
Bacteriología →estudio de bacterias.
Micología → hongos.
Virología → virus.
Parasitología → parásitos.
Microbiología ambiental, industrial, médica, veterinaria.
Historia y ramas de la
microbiología
8.
Procariotas:
Sin núcleo definidoni orgánulos membranosos.
Incluyen bacterias y arqueas.
2. Clasificación general de microorganismos
9.
Eucariotas:
Con núcleo yorganelos membranosos.
Incluyen protozoos, hongos, algas microscópicas.
2. Clasificación general de microorganismos
10.
Acelulares:
No son células,requieren células huésped para
replicarse.
Ejemplo: virus, viroides, priones.
2. Clasificación general de microorganismos
Estructuras importantes:
Pared celular(Gram + o Gram -)
Membrana plasmática
Ribosomas
Flagelos, fimbrias, cápsulas
Endosporas (en algunas bacterias)
3. Morfología y fisiología microbiana
14.
1. Pared celular(Gram + o Gram -)
3. Morfología y fisiología microbiana
Función: Proporciona forma, rigidez y protección contra cambios
osmóticos.
Gram positivas (Gram +):
Tienen una capa muy gruesa de peptidoglicano (mureína) que retiene
el colorante cristal violeta en la tinción de Gram.
Contienen ácidos teicoicos y lipoteicoicos, que ayudan a la adherencia y
estabilidad.
15.
1. Pared celular(Gram + o Gram -)
3. Morfología y fisiología microbiana
Gram negativas (Gram -):
Tienen una capa delgada de peptidoglicano y una membrana externa
adicional rica en lipopolisacáridos (LPS), que actúa como barrera y
puede ser tóxica (endotoxina).
Presentan espacio periplásmico entre membrana interna y externa.
17.
2. Membrana plasmática
3.Morfología y fisiología microbiana
Función: Controla el paso de sustancias hacia dentro y fuera de la célula.
Compuesta por bicapa lipídica con proteínas integrales y periféricas.
Carece de esteroles (como el colesterol en células animales) excepto en
micoplasmas.
Alberga enzimas para respiración celular, transporte activo y síntesis de
macromoléculas.
18.
3. Ribosomas
3. Morfologíay fisiología microbiana
Función: Síntesis de proteínas.
Son de tipo 70S (subunidades 50S y 30S), más pequeños que los
eucariotas (80S).
Flotan libres en el citoplasma, no están unidos a membranas.
Blanco de algunos antibióticos (ej. tetraciclinas, aminoglucósidos).
19.
4. Flagelos, fimbrias,cápsulas
3. Morfología y fisiología microbiana
Flagelos:
Orgánulos de locomoción en forma de filamentos helicoidales.
Permiten movilidad dirigida (quimiotaxis).
Formados por flagelina.
Fimbrias:
Filamentos cortos y numerosos que sirven para adhesión a superficies y células
huésped, no para movimiento.
Importantes en la colonización e inicio de infecciones.
20.
4. Flagelos, fimbrias,cápsulas
3. Morfología y fisiología microbiana
Cápsulas:
Capa viscosa de polisacáridos (o polipéptidos) que rodea la célula.
Protege contra fagocitosis y desecación.
Favorece la adherencia.
Se observan con tinción negativa.
21.
4. Flagelos, fimbrias,cápsulas
3. Morfología y fisiología microbiana
Cápsulas:
Capa viscosa de polisacáridos (o polipéptidos) que rodea la célula.
Protege contra fagocitosis y desecación.
Favorece la adherencia.
Se observan con tinción negativa.
22.
5. Endosporas (enalgunas bacterias)
3. Morfología y fisiología microbiana
Función: Supervivencia en condiciones extremas (calor, radiación, desecación,
químicos).
Formadas por géneros como Bacillus y Clostridium.
Contienen ADN, ribosomas y enzimas mínimas, rodeados por una pared muy
resistente con dipicolinato de calcio.
Estado metabólicamente inactivo; pueden germinar en condiciones favorables.
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5. Endosporas (enalgunas bacterias)
3. Morfología y fisiología microbiana
Función: Supervivencia en condiciones extremas (calor, radiación, desecación,
químicos).
Formadas por géneros como Bacillus y Clostridium.
Contienen ADN, ribosomas y enzimas mínimas, rodeados por una pared muy
resistente con dipicolinato de calcio.
Estado metabólicamente inactivo; pueden germinar en condiciones favorables.
24.
Funciones vitales
3. Morfologíay fisiología microbiana
1. Nutrición y metabolismo
Función: Obtención de energía y nutrientes para mantener las funciones
celulares.
Tipos según fuente de carbono y energía:
Autótrofos:
Usan CO₂ como fuente de carbono.
Fotoautótrofos: obtienen energía de la luz (ej. cianobacterias).
Quimioautótrofos: obtienen energía de reacciones químicas inorgánicas (ej.
bacterias nitrificantes).
25.
Funciones vitales
3. Morfologíay fisiología microbiana
1. Nutrición y metabolismo
Función: Obtención de energía y nutrientes para mantener las funciones
celulares.
Tipos según fuente de carbono y energía:
Autótrofos:
Usan CO₂ como fuente de carbono.
Fotoautótrofos: obtienen energía de la luz (ej. cianobacterias).
Quimioautótrofos: obtienen energía de reacciones químicas inorgánicas (ej.
bacterias nitrificantes).
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Funciones vitales
3. Morfologíay fisiología microbiana
Heterótrofos:
Usan compuestos orgánicos como fuente de carbono y energía.
Saprofitos: degradan materia orgánica muerta.
Parásitos: obtienen nutrientes de un huésped vivo.
27.
Funciones vitales
3. Morfologíay fisiología microbiana
2. Reproducción (fisión binaria)
Función: Multiplicación de bacterias para aumentar la población.
Proceso:
1. Replicación del ADN.
2. Crecimiento y alargamiento de la célula.
3. Formación de un tabique (septum).
4. Separación en dos células hijas genéticamente idénticas.
Es un método asexual, rápido y eficiente, permitiendo duplicaciones en minutos
u horas según la especie y condiciones.
28.
Funciones vitales
3. Morfologíay fisiología microbiana
3. Comunicación y formación de biofilms
Comunicación bacteriana (quorum sensing):
Las bacterias liberan moléculas señal (autoinductores) para detectar la densidad
poblacional.
Permite coordinar comportamientos grupales como la producción de toxinas o la
bioluminiscencia.
Formación de biofilms:
Comunidad microbiana unida por una matriz extracelular polimérica.
Protege a las bacterias frente a antibióticos, defensas del huésped y cambios ambientales.
Ejemplos: placa dental, biopelículas en catéteres, colonias en superficies húmedas.
29.
Funciones vitales
3. Morfologíay fisiología microbiana
3. Comunicación y formación de biofilms
Comunicación bacteriana (quorum sensing):
Las bacterias liberan moléculas señal (autoinductores) para detectar la densidad
poblacional.
Permite coordinar comportamientos grupales como la producción de toxinas o la
bioluminiscencia.
Formación de biofilms:
Comunidad microbiana unida por una matriz extracelular polimérica.
Protege a las bacterias frente a antibióticos, defensas del huésped y cambios ambientales.
Ejemplos: placa dental, biopelículas en catéteres, colonias en superficies húmedas.
1. Tinción deZiehl–Neelsen
Objetivo: Detectar bacterias ácido–alcohol resistentes como Mycobacterium tuberculosis.
Principio:
La pared rica en ácidos micólicos retiene la fucsina fenicada incluso tras lavado con alcohol–
ácido.
Se usa calor para favorecer la penetración del colorante.
Interpretación:
Rojo/fucsia: bacterias ácido–alcohol resistentes.
Azul: otras bacterias y fondo (tinción de contraste).
33.
2. Otras tincionesespeciales
Tinción negativa: Colorea el fondo, dejando visibles cápsulas como halo transparente
(ej. tinta china, nigrosina).
Tinción fluorescente: Utiliza colorantes o anticuerpos marcados con fluorescencia para
detección rápida.
Tinción de endosporas: Verde de malaquita para esporas y safranina para células
vegetativas.
Tinción de cápsulas: Muestra la cápsula como halo claro sobre un fondo oscuro.
34.
3. Medios decultivo
Selectivos: Inhiben el crecimiento de algunos microorganismos y permiten otros.
Ejemplo: MacConkey (inhibe Gram +, selecciona Gram -).
Diferenciales: Distinguen microorganismos por su metabolismo.
Ejemplo: Agar EMB (lactosa fermentadores producen color metálico).
35.
3. Medios decultivo
Enriquecidos: Aportan nutrientes extra para bacterias exigentes.
Ejemplo: Agar sangre.
De transporte: Mantienen viables las bacterias sin multiplicación.
Ejemplo: Medio Stuart.
36.
4. Pruebas bioquímicascomunes
Catalasa: Detecta producción de oxígeno a partir de peróxido de hidrógeno.
Oxidasa: Detecta citocromo c oxidasa.
Coagulasa: Detecta enzima que coagula el plasma (ej. S. aureus).
IMViC: Serie de pruebas para enterobacterias (Indol, Rojo de metilo, Voges–Proskauer,
Citrato).
Ureasa: Detecta hidrólisis de urea.
TSI (Triple Sugar Iron): Diferencia fermentación de azúcares y producción de H₂S.
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4. Pruebas bioquímicascomunes
Catalasa: Detecta producción de oxígeno a partir de peróxido de hidrógeno.
Oxidasa: Detecta citocromo c oxidasa.
Coagulasa: Detecta enzima que coagula el plasma (ej. S. aureus).
IMViC: Serie de pruebas para enterobacterias (Indol, Rojo de metilo, Voges–Proskauer,
Citrato).
Ureasa: Detecta hidrólisis de urea.
TSI (Triple Sugar Iron): Diferencia fermentación de azúcares y producción de H₂S.
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5. Métodos deesterilización y desinfección
Esterilización: Elimina toda forma de vida microbiana.
Métodos: Autoclave (vapor a presión), filtración, radiación UV o ionizante.
Desinfección: Reduce o elimina patógenos en superficies.
Métodos: Cloro, alcohol, compuestos de amonio cuaternario.
39.
6. Control decalidad microbiológica
Verifica que los medios y equipos estén libres de contaminantes.
Se usan cepas control conocidas para asegurar que las pruebas y cultivos funcionen
correctamente.