MEDIOS DE CULTIVOY ESTERILIZACIÓNSEGUNDA UNIDAD: INTRODUCCIÓNA LA MICROBIOLOGÍABiól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
• Para poder estudiar a un microorganismo en necesariocultivarlo.• Cultivar a un microorganismo es proporcionarle lascondi...
•Los nutrientes que requieren los microorganismos son:agua, carbohidratos, nitrógeno, fósforo, azufre, calcio, cobre,etc.•...
Es una solución líquida ogelatinosa que contiene losnutrientes necesarios para elcrecimiento de losmicroorganismos.¿QUÉ ES...
1. Por su consistencia:a. Líquidos: también se llaman caldos de cultivo, nocontienen agar y se preparan en matraces pequeñ...
2. Por su composición:a. Definido: se conoce su composición exacta, se utilizacuando ya se conocen los microorganismos que...
3. Por su función:a. Selectivos: promueve o inhibe el crecimiento de losmicroorganismosb. Diferenciales: permiten distingu...
La base para su elaboración es un medio deshidratado, unmedio que está en polvo al cual hay que disolver en agua yesterili...
1. Pesar los medios de cultivoBacterias: 23 g de agar nutritivo para un litro de aguadestiladaHongos: agar, dextrosa y pap...
2. Colocar el medio de cultivo en polvo en un matrazerlenmeyer y agregar agua destilada3. Calentar en la parrilla de agita...
4. Retirar de la parrilla y colocar un tapón hecho con algodónenvuelto en gasas. El tapón debe quedar fijo pero noapretado...
6. Pasados los 20 minutos sacar el medio de cultivo y dejarenfriar solo un poco. OJO: en el caso del medio de cultivopara ...
7. Vaciar el medio de cultivo en cajas petri dentro de uncampo estéril. En cada caja vaciar aproximadamente 30ml.¿COMO SE ...
Otra de las técnicas empleadas en microbiología es laesterilización.Esterilizar es eliminar todos los microorganismos pres...
Para la esterilización se pueden emplear los siguientes métodosy/o agentes:1. Métodos físicos:a. Calor húmedo: autoclaveBi...
Para la esterilización se pueden emplear los siguientes métodosy/o agentes:1. Métodos físicos:b. Calor seco: estufa y flam...
Para la esterilización se pueden emplear los siguientes métodosy/o agentes:1. Métodos físicos:c. Rayos ultravioletad. Filt...
2. Métodos químicos:a. Hipoclorito de sodio, cloro comercial al 10%b. Alcohol etílico al 70%c. Cloruro de benzalconio¿CÓMO...
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Clasificación de los simples y enriquecidos.

  1. 1. MEDIOS DE CULTIVOY ESTERILIZACIÓNSEGUNDA UNIDAD: INTRODUCCIÓNA LA MICROBIOLOGÍABiól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  2. 2. • Para poder estudiar a un microorganismo en necesariocultivarlo.• Cultivar a un microorganismo es proporcionarle lascondiciones adecuadas para su crecimiento y multiplicación.• El objetivo principal de cultivar a un microorganismo esobtener un cultivo axénico; es decir un cultivo puro que seforma a partir de una sola célula.Biól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  3. 3. •Los nutrientes que requieren los microorganismos son:agua, carbohidratos, nitrógeno, fósforo, azufre, calcio, cobre,etc.• También es necesario brindarle las condicionesambientales adecuadas de luz, temperatura, oxigenación,humedad, etc. Las bacterias crecen a 37º C y un pH de 6.5-7.5 y los hongos a 27 C y un pH de 4.5-6.• Para cultivar a los microorganismos es necesario el uso demedios de cultivo.Biól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  4. 4. Es una solución líquida ogelatinosa que contiene losnutrientes necesarios para elcrecimiento de losmicroorganismos.¿QUÉ ES UN MEDIO DE CULTIVO?Biól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  5. 5. 1. Por su consistencia:a. Líquidos: también se llaman caldos de cultivo, nocontienen agar y se preparan en matraces pequeños.b. Semisólidos: contienen 0.5% de agar y se preparan enmatraces pequeños.c. Sólidos: contienen de 1.5 a 2% de agar y se preparan encajas petri (placa) o en tubos de ensaye.¿COMO SE CLASIFICAN LOS MEDIOS DE CULTIVO?Biól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  6. 6. 2. Por su composición:a. Definido: se conoce su composición exacta, se utilizacuando ya se conocen los microorganismos que se van acultivar.b. Complejo: no se conoce su composición, pueden tenersangre, leche, extracto de levadura o carne; se utilizacuando no se conocen a los microorganismos o no seconocen sus requerimientos nutricionales.c. Mínimo: es un medio definido que proporciona solo losnutrientes necesarios.¿COMO SE CLASIFICAN LOS MEDIOS DE CULTIVO?Biól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  7. 7. 3. Por su función:a. Selectivos: promueve o inhibe el crecimiento de losmicroorganismosb. Diferenciales: permiten distinguir entre diferentes tiposde microorganismos.c. De enriquecimiento: contiene factores de crecimiento,un nutriente esencial que el microorganismo no puedesintetizar.¿COMO SE CLASIFICAN LOS MEDIOS DE CULTIVO?Biól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  8. 8. La base para su elaboración es un medio deshidratado, unmedio que está en polvo al cual hay que disolver en agua yesterilizar.¿COMO SE PREPARAN LOS MEDIOS DE CULTIVO?Biól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  9. 9. 1. Pesar los medios de cultivoBacterias: 23 g de agar nutritivo para un litro de aguadestiladaHongos: agar, dextrosa y papa y extracto de levadura paraun litro de agua destilada¿COMO SE PREPARAN LOS MEDIOS DE CULTIVO?Biól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  10. 10. 2. Colocar el medio de cultivo en polvo en un matrazerlenmeyer y agregar agua destilada3. Calentar en la parrilla de agitación hasta que el medio estetotalmente cristalino¿COMO SE PREPARAN LOS MEDIOS DE CULTIVO?Biól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  11. 11. 4. Retirar de la parrilla y colocar un tapón hecho con algodónenvuelto en gasas. El tapón debe quedar fijo pero noapretado.5. Colocar el medio en la autoclave y esterilizar a 121 Cdurante 20 minutos.¿COMO SE PREPARAN LOS MEDIOS DE CULTIVO?Biól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  12. 12. 6. Pasados los 20 minutos sacar el medio de cultivo y dejarenfriar solo un poco. OJO: en el caso del medio de cultivopara hongos dejar enfriar hasta los 45 C y agregar elantibiótico, es decir la gentamicina (ampolleta). De lagentamicina necesitamos 1 ml para un litro de medio¿COMO SE PREPARAN LOS MEDIOS DE CULTIVO?Biól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  13. 13. 7. Vaciar el medio de cultivo en cajas petri dentro de uncampo estéril. En cada caja vaciar aproximadamente 30ml.¿COMO SE PREPARAN LOS MEDIOS DE CULTIVO?Biól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  14. 14. Otra de las técnicas empleadas en microbiología es laesterilización.Esterilizar es eliminar todos los microorganismos presentesen nuestro material. Todos los aparatos, superficies ymateriales utilizados para cultivar deben ser esterilizados.ESTERILIZACIÓNBiól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  15. 15. Para la esterilización se pueden emplear los siguientes métodosy/o agentes:1. Métodos físicos:a. Calor húmedo: autoclaveBiól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  16. 16. Para la esterilización se pueden emplear los siguientes métodosy/o agentes:1. Métodos físicos:b. Calor seco: estufa y flameado a la llamaBiól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  17. 17. Para la esterilización se pueden emplear los siguientes métodosy/o agentes:1. Métodos físicos:c. Rayos ultravioletad. FiltraciónBiól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010
  18. 18. 2. Métodos químicos:a. Hipoclorito de sodio, cloro comercial al 10%b. Alcohol etílico al 70%c. Cloruro de benzalconio¿CÓMO SE LLEVA A CABO LA ESTERILIZACIÓN?Biól. Rosalba Amaya LunaEnero 2010

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