práctica de laboratorio

1. UNIVERSIDAD DE SONORA
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA QUÍMICA Y METALURGIA
BIOTECNOLOGÍA DE PROCESOS
PRÁCTICA 1
DISEÑO DE MEDIOS DE CULTIVOS

2. INTRODUCCIÓN
Un medio de cultivoes un material alimenticio que se usa en el
laboratorio para el desarrollo de los microrganismos. Una vez que ha sido
preparado, un medio de cultivo puede ser inoculado(es decir, se le
añaden organismos) y a continuación incubadoen condiciones que
favorezcan el crecimiento microbiano. El crecimiento de los
microrganismos es el cultivo. Un cultivo axénico o purocontiene un único
tipo de microorganismos.
Los medios de cultivo deben contener los nutrientes y factores de
crecimiento necesarios y deben estar exentos de cualquier microrganismo
contaminante. Los medios de cultivo contienen como mínimo: carbono,
nitrógeno, azufre, fósforoy sales inorgánicas. En muchos casos serán
necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias inductoras del crecimiento.
También se añaden colorantes que actúan como indicadores para
detectar, por ejemplo, la formación de ácido o como inhibidores del
crecimiento de unas bacterias y no de otras.
La elaboración de medios de cultivo requiere proporcionar los
elementos antes citados en una forma asimilable. Así, por ejemplo, el C
debe estar en forma de carbono orgánico para los heterótrofos y como
CO2 para los autótrofos, el N en forma de NH4, de NO3- o de NO2- o en
forma de aminoácidos a los que se pueda tomar su grupo amino; el P
debe estar en forma de PO43-, el S procede de aminoácidos sulfurados o
de SO42-, etc.
Además, en ciertos casos, es necesario añadir a los medios de cultivo
algunos aminoácidos o vitaminas que determinados tipos de
microrganismos no pueden sintetizar
El microrganismo a cultivar en este caso es el hongo Aspergillus niger,
un microrganismo aerobio heterótrofo.
Se preparará un medio líquido diseñado para producir 10 gramos por litro
de biomasa de Aspergillus niger

3. Materiales
3 Matraces 250 ml
2 crisoles
NH4Cl
NaH2PO4
MgSO4.7H2O
NaCl
Procedimiento
1) Prepara 200 ml del medio en 1 matraz.
2) Distribuir el medio en 2 matraces y taparlos con gasa y algodón.
3) Preparar la solución fisiológica para diluir el hongo
4) Esterilizar los matraces y la solución fisiológica por 15 minutos a 121°C
5) Inocular el medio con 1 ml de solución de Aspergillus niger.
6) Incubar por 24 horas a 25°C
7) Pasar la biomasa obtenida a los crisoles y meterlos a la estufa por 24
horas para pesar en seco.
8) Medir la cantidad de biomasa en peso seco y sacar el rendimiento.
NOTA: Originalmente la obtención de la biomasa para pesado en seco se
iba a llevar a cabo por filtración al vacio, pero debido a la cantidad de
biomasa obtenida se decidió que se pesaría en crisoles.
La aireación durante la incubación se fijó en 100

4. Diseñar un medio de cultivo
30 g/l Biomasa
Composición celular: 0.5 C, 0.08 N, 0.05 P y 0.03 S.
Compuesto PM(g/gmol) Composición (g)
Glucosa 180 72 C
NH4Cl 53.49 14 N
NaH2PO4 137.99 30.9 P
MgSO4*7H2O 246.47 32 S
Glucosa
NH4Cl
NaH2PO4
MgSO4*7H2O
Al 100% de rendimiento
Compuesto Al 100% (g/l) Para 200 ml del medio
(g)
Glucosa 75 15
NH4Cl 18.3394 3.66788
NaH2PO4 13.397 2.6794
MgSO4*7H2O 13.8638 2.77276

5. Resultados
No de muestra Peso del crisol
(g)
Peso del crisol
mas muestra (g)
Muestra (g)
2 29.3206 30.1018 0.7812
3 25.4450 26.1038 0.6588
Para el volumen de operación de 100 ml
Rendimiento

6. Fotografías