1. Extracción de Ácidos Nucléicos
• a) Extracción de ADN
• b) Extracción de ARN
Manuel García Ulloa Gámiz

2. Extracción de ADN
• Lisis
a) Buffer de Tris (tri-hidroximetil-aminometano).
b) SDS o NaDS (dodecilsulfato sódico)

3. Variaciones principales:
Lisozima + EDTA (bacterias) Método físico (plantas)
ácido etilendiaminotetraacético

4. Degradación protéica
• Adición de una
enzima proteasa
(y/o RNAsa).
• Adición de una sal
(acetato de sodio
ó amonio) para
ayudar a la
precipitación de la
fracción protéica de
la solución.
La enzima proteasa conduce la proteólisis que
comienza el catabolismo protéico por la hidrólisis
de los enlaces peptídicos que unen a los
aminoácidos.

5. Separación de fases
Método fenol-cloroformo
• Añadir solución
de fenol-
cloroformo en
la solución
previamente
lisada.
• Centrifugar.
• Aislar fase
acuosa
completa.
Luego de la centrifugación, los
ácidos nucléicos se posicionan en la
interfase de la mezcla.

6. Purificación
• Precipitación del ADN
mediante etanol frío
ó isopropanol.
• Centrifugación.
• Repetir procedimiento
(purificación del
pellet).
Dado que el ADN es
insoluble en alcohol, se
agrega en un pellet
luego de la
centrifugación.
*Este paso también remueve
las sales solubles en alcohol.

8. Bibliografía
• http://bioscientias.blogspot.mx/2010/12/bacterias-
arsenico-y-criticas.html#.UE_-ubLN9NZ
• http://www.scielo.org.mx/scielo.php?pid=S0186-
29792009000300006&script=sci_arttext
• http://serc.carleton.edu/microbelife/research_methods/ge
nomics/dnaext.html
• http://html.rincondelvago.com/extracion-del-adn-
genomico-y-electroferesis-en-gel.html
• http://www.iayork.com/MysteryRays/2007/06/15/11/

9. Electroforesis

10. Electroforesis