José Emilio Rebollo Feria
Cáceres, 6 de septiembre, 2012
Presentación del Proyecto
Proyecto Estratégico PCJ1007
∗ PCJ1007: Biocontrol de bacterias en procesos de fermentación
láctea: protección de la actividad de cultivos iniciadores y
reducción de interferencias microbianas
∗ Financiación: FEDER y Junta de Extremadura
∗ Entidades participantes: INTAEX + UEx + 5 Empresas.
∗ Duración: 5/10/2011 - 5/10/2015
∗ Cuantía: 445.043 €
∗ Coordinador: José Emilio Rebollo Feria
∗ Número de investigadores participantes: 16
∗ 2 SUBPROYECTOS
INVESTIGACIÓN APLICADA
• Título: Selección, mejora y análisis de cepas virales aptas como sistemas
de biocontrol contra bacterias que interfieren la producción de quesos.
• Investigador principal: José Emilio Rebollo Feria
DESARROLLO TECNOLÓGICO
• Título: Biocontrol de Escherichia coli en quesos de leche cruda y en
ubres de rumiantes mediante el uso de bacteriófagos.
• Investigador principal: Rafael Tabla Sevillano
∗ 1 PLAN DE TRANSFERENCIA
• Responsable: Isidro Roa Ojalvo
GRUPOS DE LA UEx
∗ Área de Genética
(Subproyecto de Investigación Aplicada):
∗José Emilio Rebollo Feria (TU)
∗Felipe Molina Rodríguez (CD)
∗Elena López Acedo (TA)
∗Encarnación Ferrera Guillén (AL)
∗ Área de Microbiología
(Subproyecto de Desarrollo Tecnológico):
∗Manuel Ramírez Fernández (CU)
∗Isabel Oliveros Jiménez (TU)
∗Luis Miguel Hernández Martín (TU)
GRUPOS JUNTA DE
EXTREMADURA
∗ Grupo de Lácteos del INTAEX
(Subproyecto de Desarrollo Tecnológico):
∗Rafael Tabla Sevillano
∗Isidro Roa Ojalvo
∗José González Crespo
∗Antonia Gómez
∗Nuria Balas
∗ Fincas “La Orden” y “Valdesequera”
∗Óscar Aceituno Romo
∗Fermín López Gallego
EMPRESAS
∗ Hermanos Pajuelo, SAT
∗ Quesos del Casar, SL
∗ Quesería Almonte, SL
∗ Tentuqueso, SL
∗ Lactocyex, SL
∗ Consejo Regulador DOP “Torta del Casar”
∗ Consejo Regulador DOP “Queso de Ibores”
EQUIPO GENÉTICA
UEx
ELENA LÓPEZ
FELIPE MOLINA
JOSÉ EMILIO REBOLLO
Área de Genética de la UEx: Encarnación Ferrera
INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS
∗ Caracterizar genéticamente cepas alterantes (especialmente E.
coli), previamente aisladas en las empresas colaboradoras.
∗ Electroforesis en campo pulsante
∗ PCR multiplex para bacterias coliformes
INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS
∗ Uso de fagos de laboratorio frente a las cepas aisladas.
Obtención de mutantes virales.
∗ Perfil de sensibilidad a fagos de las bacterias alterantes aisladas
de quesería y ganadería
∗ Aislamiento de mutantes claros y virulentos a partir de especies
virales atemperadas
INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS
∗ Aislar, en los materiales de producción, cepas virales activas
contra las bacterias alterantes.
∗ Aplicación de métodos de inducción lisogénica para posibles
profagos
∗ Detección de fagos a partir de leche, suero y queso
∗ Enriquecimiento cíclico en fagos
INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS
∗ Caracterización de los virus aislados y mejora de su
capacidad antibacteriana.
∗ Espectro de los virus en la lisis de bacterias autóctonas y de
laboratorio
∗ Desarrollo de métodos moleculares de detección
∗ Análisis por microscopía electrónica de los virus aislados
∗ Derivados claros a partir de fagos atemperados
INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS
∗ Aplicación de procesos de inactivación viral, para reducir la
presencia de fagos en el queso.
∗ Efectos de la alta presión hidrostática sobre el titulo de virus
bacterianos en diversas etapas de la fabricación de queso
(compartido con INTAEX)
∗ Otros tratamientos
INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS
∗ Diseño de cócteles virales como sistemas de biocontrol.
∗ Eventuales combinaciones de fagos naturales y artificiales en
procesos de lisis bacteriana
∗ Espectros de lisis
EQUIPO LÁCTEOS
∗ ISIDRO ROA
∗ NURIA BALAS
∗ RAFAEL TABLA
∗ TONI GÓMEZ
∗ JOSÉ GONZÁLEZ
Área de Productos Lácteos
FINCA VALDESEQUERA
FERMÍN LÓPEZ
ÓSCAR ACEITUNO
TECNOLOGÍAS ESPECIALES
APLICABLES AL PROYECTO
∗ Aplicación de HHP a diferentes productos o
microorganismos.
∗ Rango de presión 0-900 Mpa.
∗ Tratamiento combinado de presión-temperatura
∗ Análisis microbiológicos pre y post-tratamientos
∗ Estudios in vivo con ganado
∗ Rebaño destinado a investigación (controlado)
∗ Instalaciones
∗ Sistema de ordeño monitorizado
∗ Separación de grupos
∗ RELACIONES CON EMPRESAS REGIONALES
∗ RELACIONES CON PORTUGAL
∗ RITECA II
∗ CATAA – Associação Centro de Apoio Tecnológico Agro-
Alimentar
∗ Universidade de Évora (Dto. Zootecnia)
UTILIDADES Y CONTACTOS
DESARROLLO TECNOLÓGICO: OBJETIVOS
∗ 1. Aislamiento de cepas de E. coli a partir de queserías y
ganadería.
∗ Determinación de niveles de mesófilos totales,
enterobacterias, coliformes y E. coli.
∗ Evolución microbiana a lo largo de la maduración
∗ Aislamiento de coliformes
∗ Identificación
∗ Potencialidad de la terapia fágica en el control de E coli
(y otros coliformes)
∗ Leche (laboratorio):
∗ cabra y oveja
∗ pH neutro y ácido
∗ Queso (planta piloto):
∗ Torta
∗ Ibores
DESARROLLO TECNOLÓGICO: OBJETIVOS
DESARROLLO TECNOLÓGICO: OBJETIVOS
∗ Reducción de la hinchazón temprana en quesos de leche
cruda (industria).
∗ Eliminación de bacteriófagos en quesos mediante el uso
de altas presiones hidrostáticas.
DESARROLLO TECNOLÓGICO: OBJETIVOS
∗ Reducción de la contaminación superficial de las ubres de
rumiantes por E coli (y otros coliformes) mediante terapia
fágica.
∗ Reducción de la contaminación inicial de la leche durante la fase
de ordeño.
∗ Determinación de la potencialidad de la terápia fágica de ubres
en la reducción de la incidencia de mamitis en rumiantes.
Ctra. Cáceres s/n, Finca Santa
Engracia, 06071 BADAJOZ. Tfno. 924
012650. Fax 924 012674
http.//intaex.juntaextremadura.net
Instituto TecnolInstituto Tecnolóógico Agroalimentario de Extremaduragico Agroalimentario de Extremadura
Universidad de Extremadura, Av. de
Elvas, s/n. 06071 BADAJOZ
Tfno.: 924 289 300
http.//www.unex.es
Universidad de Extremadura

Proyecto "Biocontrol de fermentaciones lácteas". José Emilio Rebollo

  • 1.
    José Emilio RebolloFeria Cáceres, 6 de septiembre, 2012 Presentación del Proyecto
  • 2.
  • 3.
    ∗ PCJ1007: Biocontrolde bacterias en procesos de fermentación láctea: protección de la actividad de cultivos iniciadores y reducción de interferencias microbianas ∗ Financiación: FEDER y Junta de Extremadura ∗ Entidades participantes: INTAEX + UEx + 5 Empresas. ∗ Duración: 5/10/2011 - 5/10/2015 ∗ Cuantía: 445.043 € ∗ Coordinador: José Emilio Rebollo Feria ∗ Número de investigadores participantes: 16
  • 4.
    ∗ 2 SUBPROYECTOS INVESTIGACIÓNAPLICADA • Título: Selección, mejora y análisis de cepas virales aptas como sistemas de biocontrol contra bacterias que interfieren la producción de quesos. • Investigador principal: José Emilio Rebollo Feria DESARROLLO TECNOLÓGICO • Título: Biocontrol de Escherichia coli en quesos de leche cruda y en ubres de rumiantes mediante el uso de bacteriófagos. • Investigador principal: Rafael Tabla Sevillano ∗ 1 PLAN DE TRANSFERENCIA • Responsable: Isidro Roa Ojalvo
  • 5.
    GRUPOS DE LAUEx ∗ Área de Genética (Subproyecto de Investigación Aplicada): ∗José Emilio Rebollo Feria (TU) ∗Felipe Molina Rodríguez (CD) ∗Elena López Acedo (TA) ∗Encarnación Ferrera Guillén (AL) ∗ Área de Microbiología (Subproyecto de Desarrollo Tecnológico): ∗Manuel Ramírez Fernández (CU) ∗Isabel Oliveros Jiménez (TU) ∗Luis Miguel Hernández Martín (TU)
  • 6.
    GRUPOS JUNTA DE EXTREMADURA ∗Grupo de Lácteos del INTAEX (Subproyecto de Desarrollo Tecnológico): ∗Rafael Tabla Sevillano ∗Isidro Roa Ojalvo ∗José González Crespo ∗Antonia Gómez ∗Nuria Balas ∗ Fincas “La Orden” y “Valdesequera” ∗Óscar Aceituno Romo ∗Fermín López Gallego
  • 7.
    EMPRESAS ∗ Hermanos Pajuelo,SAT ∗ Quesos del Casar, SL ∗ Quesería Almonte, SL ∗ Tentuqueso, SL ∗ Lactocyex, SL ∗ Consejo Regulador DOP “Torta del Casar” ∗ Consejo Regulador DOP “Queso de Ibores”
  • 8.
    EQUIPO GENÉTICA UEx ELENA LÓPEZ FELIPEMOLINA JOSÉ EMILIO REBOLLO
  • 9.
    Área de Genéticade la UEx: Encarnación Ferrera
  • 10.
    INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS ∗Caracterizar genéticamente cepas alterantes (especialmente E. coli), previamente aisladas en las empresas colaboradoras. ∗ Electroforesis en campo pulsante ∗ PCR multiplex para bacterias coliformes
  • 11.
    INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS ∗Uso de fagos de laboratorio frente a las cepas aisladas. Obtención de mutantes virales. ∗ Perfil de sensibilidad a fagos de las bacterias alterantes aisladas de quesería y ganadería ∗ Aislamiento de mutantes claros y virulentos a partir de especies virales atemperadas
  • 12.
    INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS ∗Aislar, en los materiales de producción, cepas virales activas contra las bacterias alterantes. ∗ Aplicación de métodos de inducción lisogénica para posibles profagos ∗ Detección de fagos a partir de leche, suero y queso ∗ Enriquecimiento cíclico en fagos
  • 13.
    INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS ∗Caracterización de los virus aislados y mejora de su capacidad antibacteriana. ∗ Espectro de los virus en la lisis de bacterias autóctonas y de laboratorio ∗ Desarrollo de métodos moleculares de detección ∗ Análisis por microscopía electrónica de los virus aislados ∗ Derivados claros a partir de fagos atemperados
  • 14.
    INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS ∗Aplicación de procesos de inactivación viral, para reducir la presencia de fagos en el queso. ∗ Efectos de la alta presión hidrostática sobre el titulo de virus bacterianos en diversas etapas de la fabricación de queso (compartido con INTAEX) ∗ Otros tratamientos
  • 15.
    INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS ∗Diseño de cócteles virales como sistemas de biocontrol. ∗ Eventuales combinaciones de fagos naturales y artificiales en procesos de lisis bacteriana ∗ Espectros de lisis
  • 16.
    EQUIPO LÁCTEOS ∗ ISIDROROA ∗ NURIA BALAS ∗ RAFAEL TABLA ∗ TONI GÓMEZ ∗ JOSÉ GONZÁLEZ
  • 17.
  • 18.
  • 19.
    TECNOLOGÍAS ESPECIALES APLICABLES ALPROYECTO ∗ Aplicación de HHP a diferentes productos o microorganismos. ∗ Rango de presión 0-900 Mpa. ∗ Tratamiento combinado de presión-temperatura ∗ Análisis microbiológicos pre y post-tratamientos ∗ Estudios in vivo con ganado ∗ Rebaño destinado a investigación (controlado) ∗ Instalaciones ∗ Sistema de ordeño monitorizado ∗ Separación de grupos
  • 20.
    ∗ RELACIONES CONEMPRESAS REGIONALES ∗ RELACIONES CON PORTUGAL ∗ RITECA II ∗ CATAA – Associação Centro de Apoio Tecnológico Agro- Alimentar ∗ Universidade de Évora (Dto. Zootecnia) UTILIDADES Y CONTACTOS
  • 21.
    DESARROLLO TECNOLÓGICO: OBJETIVOS ∗1. Aislamiento de cepas de E. coli a partir de queserías y ganadería. ∗ Determinación de niveles de mesófilos totales, enterobacterias, coliformes y E. coli. ∗ Evolución microbiana a lo largo de la maduración ∗ Aislamiento de coliformes ∗ Identificación
  • 22.
    ∗ Potencialidad dela terapia fágica en el control de E coli (y otros coliformes) ∗ Leche (laboratorio): ∗ cabra y oveja ∗ pH neutro y ácido ∗ Queso (planta piloto): ∗ Torta ∗ Ibores DESARROLLO TECNOLÓGICO: OBJETIVOS
  • 23.
    DESARROLLO TECNOLÓGICO: OBJETIVOS ∗Reducción de la hinchazón temprana en quesos de leche cruda (industria). ∗ Eliminación de bacteriófagos en quesos mediante el uso de altas presiones hidrostáticas.
  • 24.
    DESARROLLO TECNOLÓGICO: OBJETIVOS ∗Reducción de la contaminación superficial de las ubres de rumiantes por E coli (y otros coliformes) mediante terapia fágica. ∗ Reducción de la contaminación inicial de la leche durante la fase de ordeño. ∗ Determinación de la potencialidad de la terápia fágica de ubres en la reducción de la incidencia de mamitis en rumiantes.
  • 25.
    Ctra. Cáceres s/n,Finca Santa Engracia, 06071 BADAJOZ. Tfno. 924 012650. Fax 924 012674 http.//intaex.juntaextremadura.net Instituto TecnolInstituto Tecnolóógico Agroalimentario de Extremaduragico Agroalimentario de Extremadura
  • 26.
    Universidad de Extremadura,Av. de Elvas, s/n. 06071 BADAJOZ Tfno.: 924 289 300 http.//www.unex.es Universidad de Extremadura