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COLIFORMES
                                                                                   GENERADORES DE GAS
                                                                                                                                                                                                                          1


                                                                                                                                                                                                                          1


                                                                                                                                                                                                                          1
                                                                                                                                                                                                                              Instituto Tecnológico Agroalimentario,
                                                                                                                                                                                                                              Departamento de Productos Lácteos.
                                                                                                                                                                                                                                       Junta de Extremadura.

                                                                                                                                                                                                                              Avda. Adolfo Suarez s/n Aptdo: 20107


                                                                                                                                                                                                                               Antonia Gómez
                                                                                                                                                                                                                               José González
                                                                                                                                                                                                                               Isidro Roa
                                                                                                                                                                                                                                                                          2
                                                                                                                                                                                                                                                                                    Departamento de Bioquímica,
                                                                                                                                                                                                                                                                                    Biología Molecular y Genética.
                                                                                                                                                                                                                                                                                         Facultad de Ciencias.

                                                                                                                                                                                                                                                                              Universidad de Extremadura, 06071, Badajoz


                                                                                                                                                                                                                                                                              Jose E. Rebollo


                                                                                                                                                                                                                          1    Rafael Tabla
                                                                                    DURANTE LA MADURACIÓN DEL QUESO DE IBORES                                                                                            toni.gomez@juntaextremadura.es




                                                                                                                                                                                                       Material y Métodos
Introducción y Objetivos                                                                                                                                                               Para el estudio microbiológico se tomó leche, cuajada, y quesos a
                                                                                                                                                                                       los 7, 15, 30 y 60 días de maduración. La determinación de bacte-
                                                                                                                                                                                       rias aerobias mesófilas totales y enterobacterias se realizó median-
 El queso de Ibores, de pasta semidura y mantecosa, se elabora                                                                                                                         te recuentos en placa de PCA y VRBG respectivamente. La detec-
 con leche cruda de cabra y presenta una maduración mínima de                                                                                                                          ción y recuento diferencial de E. coli y coliformes se llevó a cabo
 sesenta días. El empleo de leche cruda hace frecuente la presen-                                                                                                                      en medio de cultivo cromogénico.
 cia de coliformes. Un predominio de este grupo microbiano puede                                                                                                                       El aislamiento de las cepas se hizo al azar de placas de VRBG que
 producir alteraciones en el queso como la hinchazón temprana.                                                                                                                         contenían entre 20 y 200 colonias. La identificación se realizó
                                                                                                                                                                                       acorde con los métodos y criterios de Brenner (1984), realizando las
                            El propósito de este trabajo es determinar los niveles                                                                                                     siguientes pruebas: motilidad, fermentación de D-glucosa, citrato,
                            de enterobacterias en general, y coliformes en par-                                                                                                        reacción del rojo de metilo, producción de acetoína (Voges-
                            ticular en queso de Ibores. Igualmente se pretende                                                                                                         Proskauer), producción de indol y de H2S, producción de gas a
                            estudiar la evolución de los mismos durante su madu-
                            razción, determinar los géneros y especies predomi-                                                                                                        partir de glucosa, presencia de β-galactosidasa, descarboxilación
                            nantes, así como la producción de gas a partir de lacto-                                                                                                   de ornitina y de lisina, fermentación y producción de gas a partir
                            sa de las bacterias coliformes presentes.                                                                                                                  de lactosa (caldo lauril sulfato) .




 1 EVOLUCIÓN DE ENTERO-                                                                                       2 PRODUCCIÓN DE GAS DE                                                                   3 ESPECIES IDENTIFICADAS
                 BACTERIAS Y COLIFORMES                                                                         LAS BACTERIAS COLIFOR-                                                                   EN QUESO DE IBORES.
                 DURANTE LA MADURACIÓN.                                                                         MES AISLADAS.                                                                            En la Figura 3 se muestran las especies identifica-
                                                                                                                                                                                                         das en este estudio. Como se puede apreciar, la
                 Los recuentos en VRBG fueron coincidentes con                                                  La caracterización de los coliformes aislados en
                                                                                                                                                                                                         especie predominante (44%) fue Klebsiella pneu-
                 los obtenidos en agar cromogénico. En este                                                     función de su capacidad de producción de gas a
                 medio los niveles de E.coli, fueron del orden de 3                                             partir de lactosa mostró que la mayoría de ellos                                         moniae subsp. pneumoniae, seguida a distancia
                 unidades logarítmicas inferiores al resto de colifor-                                          (54%), producían más de 1,5 cm de gas en campa-                                          por Enterobacter intermedius (15%).
                 mes.                                                                                           na Durham (Figura 2), y en tan solo un 16% no fue
                                                                                                                perceptible la generación de gas a partir de lacto-
                 Como se puede apreciar en la Figura 1 la pobla-                                                sa.
                 ción de coliformes en la elaboración B (6,1 log
                 UFC/gr en cuajada) pudo ser controlada durante
                 la fermentación. En cambio, en la elaboración A,                                                                                                                                                                            e
                 con 7,3 log UFC/gr, las bacterias coliformes se
                                                                                                                                                                                                                                          ia
                                                                                                                                                                                                                                       on



                 mantuvieron en niveles altos hasta el final de la                                                                                                                               60%
                                                                                                                                                                                                                                    m
                                                                                                                                                                                                                                eu




                 maduración, provocando hinchazón temprana,
                                                                                                                                                                                                                           pn




                 perceptible visualmente en la masa del queso.
                                                                                                                                                                                                                     iae
                                                                                                                                                                                                                  on




                 8
                                                                                                                                                                                                                m




                                                                                                                                                                                             45%
                                                                                                                                                                                                             eu
                                                                                                                                                                                                          pn




                                                                                                                                                                                                                                                                                                                     50%
                                                                                                                                                                                                                                                     s
                                                                                                                                                                                                         k




                                                                                                                                                                                                                                                  iu
                                                                                                                                                                                                                                              ed




                 6
                                                                                                                                                                                                                                                                                                       s
                                                                                                                                                                                                                                           rm


                                                                                                                                                                                                                                                                                                     ne




                                                                                                                                                                                            30%
                                                                                                                                                                                                                                        te




                                                                                                                                                                                                                                                                                                                 40%
                                                                                                                                                                                                                                                                                                   ge
    log UFC/gr




                                                                                                                                                                                                                                      in




                                                                                                                                                                                                                                                                                                   e
                                                                                                                                                                                                                                                ro

                                                                                                                                                                                                                                                                                                ca




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                                                                                                                                                                                                                                  er




                                                                                                                                                                                                                                                                                               na
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                                                                                                                                                                                                                                                                                       oz
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                                                                                                                                                                                                                                                                                    bo
                                                                                                                                                                                                                    te




                                                                                                                                                                                                                                                                                    ox


                                                                                                                                                                                                                                                                                     e
                                                                                                                                                                                                                                               ac
                                                                                                                                                                                                                                    b




                                                                                                                                                                                                                                                                                  py
                                                                                                                                                                                                                                                                                  ia
                                                                                                                                                                                                                 En


                                                                                                                                                                                                                                 ro




                                                                                                                                                                                                                                                                                 ar
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                                                                                                                                                                                                                                                                                 a
                                                                                                                                                                                                                                             b




                                                                                                                                                                                                                                                                              on
                                                                                                                                                                                                                              te




                                                                                                                                                                                                                                                                             ec
                                                                                                                                                                                                                                                                              er




                                                                                                                                                                                                                                                                              ol
                                                                                                                                                                                                                                          ro




                 2
                                                                                                                                                                                                                                                     el




                                                                                                                                                                                                                                                                                                              20%
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                           VISITA NUESTRA WEB http://intaex.juntaextremadura.net
                                                                                                                no gas
                                                                                                                                                                                                                                                                            m
                                                                                                                                                                                                                         En




                                                                                                                                                                                                                                                                          ct




                                                                                                                                                                                                                                                                           ic
                                                                                                                                                                                                                                                 si
                                                                                                                                                                                                                                       te




                                                                                                                                                                                                                                                                        ad
                                                                                                                                                                                                                                                                       eu
                                                                                                                                                                                                                                               eb




                                                                                                                                                                                                                                                                        nt
                                                                                                                                                                                                                                                                      ba




                                                                                                                                                                                            0%
                                                                                                                                                                                                                                   En




                                                                                                                                 <0,5
                                                                                                                                                                                                                                                                    fo
                                                                                                                                                                                                                                                                      a
                                                                                                                                                                                                                                                                   pn
                                                                                                                                                                                                                                            Kl




                                                                                                                                                                                                                                                                   ro

                                                                                                                                                                                                                                                                   ci




                                                                                                                                                  0,5-1,5
                                                                                                                                                                                                                                                               tia
                                                                                                                                                                                                                                                                te




                                                                                                                                                                                                                                                                                                             10%
                                                                                                                                                                                                                                                                er
                                                                                                                                                                                                                                                     K

                                                                                                                                                                                                                                                            En




                                                                                                                                                                                                                                                             ia
                                                                                                                                                                                                                                                             cl

                                                                                                                                                                                                                                                           rra




                 0                                                                                                                      gas (c                           >1,5
                                                                                                                                                                                                                                                        Le




                                                                                                                                                                                                                                                          in




                                                                                                                                              m)
                                                                                                                                                                                                                                                       Se


                                                                                                                                                                                                                                                       rs




                     0                   15             30                          45                   60
                                                                                                                                                                                                                                                     Ye




                                                                                                                                                                                                                                                                                                            0%
                                                  maduración (días)


                     Figura 1: Recuentos en placa de agar cromogénico (E.coli/coliformes)                        Figura 2: Producción de gas a partir de lactosa de los coliformes aisla-                 Figura 3: Especies de coliformes en queso de Ibores (%).
                     del queso de Ibores durante la maduración (0, 7, 15, 30 y 60 días). Elaboración A           dos (cm de gas en campana Durham).
                     ( ◊ ) y elaboración B ( ).




                                                                                                              CONCLUSIONES
                         0 días = Niveles más altos                                                                Formación de ojos =                                                                     Coliforme predominante=
                         de Coliformes                                                                             1ª semana                                                                               Klebsiella pneumoniae
                         Los niveles más altos de enterobacterias y coliformes a lo largo de                       La formación de ojos en los quesos por coliformes se produce du-                        La especie de coliforme predominante en queso de Ibores fue
                         la maduración del queso de Ibores se alcanzaron a los 0 días, pro-                        rante la primera semana de maduración.                                                  Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae.
                         duciéndose a partir de ese momento una disminución de su pobla-
                         ción hasta el final del estudio.


REFERENCIAS:
Brenner, D. J. (1984) Family Enterobacteriaceae. In Bergey`s Manual of Systematic Bacteriology, Vol. 1. (Eds. N.R.                                                                                                      Unión Europea
                                                                                                                                                                                                                               FEDER
Krieg and J.G.Holt)pp. 408-516. Baltimore, Williams & Wilkins.
                                                                                                                                                                                                           Una manera de hacer Europa
Tornadijo, M. E.,Garcia, M.C., Fresno, J.M. and Carballo, J. (2001) Study of Enterobacteriaceae during the manu-
facture and ripening of San Simón cheesse. Food microbiology 18, 499-509.

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  • 1. COLIFORMES GENERADORES DE GAS 1 1 1 Instituto Tecnológico Agroalimentario, Departamento de Productos Lácteos. Junta de Extremadura. Avda. Adolfo Suarez s/n Aptdo: 20107 Antonia Gómez José González Isidro Roa 2 Departamento de Bioquímica, Biología Molecular y Genética. Facultad de Ciencias. Universidad de Extremadura, 06071, Badajoz Jose E. Rebollo 1 Rafael Tabla DURANTE LA MADURACIÓN DEL QUESO DE IBORES toni.gomez@juntaextremadura.es Material y Métodos Introducción y Objetivos Para el estudio microbiológico se tomó leche, cuajada, y quesos a los 7, 15, 30 y 60 días de maduración. La determinación de bacte- rias aerobias mesófilas totales y enterobacterias se realizó median- El queso de Ibores, de pasta semidura y mantecosa, se elabora te recuentos en placa de PCA y VRBG respectivamente. La detec- con leche cruda de cabra y presenta una maduración mínima de ción y recuento diferencial de E. coli y coliformes se llevó a cabo sesenta días. El empleo de leche cruda hace frecuente la presen- en medio de cultivo cromogénico. cia de coliformes. Un predominio de este grupo microbiano puede El aislamiento de las cepas se hizo al azar de placas de VRBG que producir alteraciones en el queso como la hinchazón temprana. contenían entre 20 y 200 colonias. La identificación se realizó acorde con los métodos y criterios de Brenner (1984), realizando las El propósito de este trabajo es determinar los niveles siguientes pruebas: motilidad, fermentación de D-glucosa, citrato, de enterobacterias en general, y coliformes en par- reacción del rojo de metilo, producción de acetoína (Voges- ticular en queso de Ibores. Igualmente se pretende Proskauer), producción de indol y de H2S, producción de gas a estudiar la evolución de los mismos durante su madu- razción, determinar los géneros y especies predomi- partir de glucosa, presencia de β-galactosidasa, descarboxilación nantes, así como la producción de gas a partir de lacto- de ornitina y de lisina, fermentación y producción de gas a partir sa de las bacterias coliformes presentes. de lactosa (caldo lauril sulfato) . 1 EVOLUCIÓN DE ENTERO- 2 PRODUCCIÓN DE GAS DE 3 ESPECIES IDENTIFICADAS BACTERIAS Y COLIFORMES LAS BACTERIAS COLIFOR- EN QUESO DE IBORES. DURANTE LA MADURACIÓN. MES AISLADAS. En la Figura 3 se muestran las especies identifica- das en este estudio. Como se puede apreciar, la Los recuentos en VRBG fueron coincidentes con La caracterización de los coliformes aislados en especie predominante (44%) fue Klebsiella pneu- los obtenidos en agar cromogénico. En este función de su capacidad de producción de gas a medio los niveles de E.coli, fueron del orden de 3 partir de lactosa mostró que la mayoría de ellos moniae subsp. pneumoniae, seguida a distancia unidades logarítmicas inferiores al resto de colifor- (54%), producían más de 1,5 cm de gas en campa- por Enterobacter intermedius (15%). mes. na Durham (Figura 2), y en tan solo un 16% no fue perceptible la generación de gas a partir de lacto- Como se puede apreciar en la Figura 1 la pobla- sa. ción de coliformes en la elaboración B (6,1 log UFC/gr en cuajada) pudo ser controlada durante la fermentación. En cambio, en la elaboración A, e con 7,3 log UFC/gr, las bacterias coliformes se ia on mantuvieron en niveles altos hasta el final de la 60% m eu maduración, provocando hinchazón temprana, pn perceptible visualmente en la masa del queso. iae on 8 m 45% eu pn 50% s k iu ed 6 s rm ne 30% te 40% ge log UFC/gr in e ro ca e er na ae oa ct 4 a ta ae ba oc r cl la te us 30% 15% oz ro yt xi r ac rin te bo te ox e ac b py ia En ro ar la a b on te ec er ol ro 2 el 20% VISITA NUESTRA WEB http://intaex.juntaextremadura.net no gas m En ct ic si te ad eu eb nt ba 0% En <0,5 fo a pn Kl ro ci 0,5-1,5 tia te 10% er K En ia cl rra 0 gas (c >1,5 Le in m) Se rs 0 15 30 45 60 Ye 0% maduración (días) Figura 1: Recuentos en placa de agar cromogénico (E.coli/coliformes) Figura 2: Producción de gas a partir de lactosa de los coliformes aisla- Figura 3: Especies de coliformes en queso de Ibores (%). del queso de Ibores durante la maduración (0, 7, 15, 30 y 60 días). Elaboración A dos (cm de gas en campana Durham). ( ◊ ) y elaboración B ( ). CONCLUSIONES 0 días = Niveles más altos Formación de ojos = Coliforme predominante= de Coliformes 1ª semana Klebsiella pneumoniae Los niveles más altos de enterobacterias y coliformes a lo largo de La formación de ojos en los quesos por coliformes se produce du- La especie de coliforme predominante en queso de Ibores fue la maduración del queso de Ibores se alcanzaron a los 0 días, pro- rante la primera semana de maduración. Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae. duciéndose a partir de ese momento una disminución de su pobla- ción hasta el final del estudio. REFERENCIAS: Brenner, D. J. (1984) Family Enterobacteriaceae. In Bergey`s Manual of Systematic Bacteriology, Vol. 1. (Eds. N.R. Unión Europea FEDER Krieg and J.G.Holt)pp. 408-516. Baltimore, Williams & Wilkins. Una manera de hacer Europa Tornadijo, M. E.,Garcia, M.C., Fresno, J.M. and Carballo, J. (2001) Study of Enterobacteriaceae during the manu- facture and ripening of San Simón cheesse. Food microbiology 18, 499-509.