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Biología Molecular
    Introducción
Tipos de organismos
• Procariontes:
  – consisten de una sola célula, su material
    genético no está compartamentalizado, es
    de tipo bacteria.
• Eucariontes
  – pueden ser uni- o multicelulares, su
    material genético está rodeado por una
    membrana, pueden ser plantas, animales,
    levaduras o humanos.
En resumen
• 1. Una serie de experimentos muy elegantes revelaron
  que el DNA es el material genético y descifraron su
  estructura.
• 2. La molécula de DNA es una doble helicoidal con
  rieles de azúcar-fosfato y pares purina pirimidina como
  peldaño. La secuencia de bases especifica la secuencia de
  aminoácidos de una proteína particular. El DNA debe estar
  altamente enrollado para ajustarse al espacio del núcleo.
• 3. Cuando el DNA se replica, las dos hebras parentales
  se separan y sobre cada una se construye una hebra
  complementaria nueva. Una helicasa empieza el proceso, la
  RNA polimerasa y la DNA polimerasa llenan con bases la
  nueva hebra, y la ligasa une el esqueleto azúcar-fosfato.
• 4. Existen tres mecanismo de reparación de errores en la
  secuencia de bases que se presentaran durante la
  replicación del DNA. La reparación anormal o ausente
  causa rompimiento de los cromosomas y generalmente
  incremente el riesgo de cáncer.
Friedrich Miescher
• Fue el primero en aislar el material del
  núcleo de la célula.
• Notó que este material presenta un
  carácter acídico y le llamo nucleína.
• En esa época se creía que el DNA era
  un material que daba estructura y
  soporte al núcleo.
Frederick Griffith
•   1928
•   Experimentos con Streptococcus pneumoniae
•   Causa neumonía en humanos
•   Es letal en ratones
•   Por aislamiento y repurificación encontró
    variantes morfológicas,
    – Producen colonia lisas P presentan cápsula de
      polisacárido
    – Producen colonias rugosas P no presentan cápsula de
      polisacárido
• Colonias lisas = virulentas

• Colonias rugosas = NO
  virulentas
Experimento de Griffith.


   Bacterias virulentas
   encapsuladas vivas                  El ratón muere




 Bacterias no virulentas
 no encapsuladas vivas
                                        El ratón vive


Bacterias virulentas
encapsuladas vivas



Bacterias virulentas                    El ratón vive
 muertas por calor
Exp. de Griffith. 2
                            Bacterias virulentas muertas por calor


  Bacterias no virulentas
  no encapsuladas vivas                        El ratón muere


  Bacterias virulentas
 muertas por el calor y
bact. no virulentas vivas
Exp. de Oswald Avery, C. M. MacLeod,
         and M. McCarty, 1944.
                               DNA aislado de bacterias virulentas
                               muertas por calor


  Bacterias no
virulentas vivas


                                                       El ratón muere



Transformación


                   Bacterias virulentas
                     encapsuladas
En resumen
                              L
                                  Muertas




Polisacáridos   Lípidos      RNA          Proteína   DNA



                      Células “R” Vivas




     R            R           R              R        R    L
Experimento de Hershey y Chase
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  • 1. Biología Molecular Introducción
  • 2. Tipos de organismos • Procariontes: – consisten de una sola célula, su material genético no está compartamentalizado, es de tipo bacteria. • Eucariontes – pueden ser uni- o multicelulares, su material genético está rodeado por una membrana, pueden ser plantas, animales, levaduras o humanos.
  • 3. En resumen • 1. Una serie de experimentos muy elegantes revelaron que el DNA es el material genético y descifraron su estructura. • 2. La molécula de DNA es una doble helicoidal con rieles de azúcar-fosfato y pares purina pirimidina como peldaño. La secuencia de bases especifica la secuencia de aminoácidos de una proteína particular. El DNA debe estar altamente enrollado para ajustarse al espacio del núcleo. • 3. Cuando el DNA se replica, las dos hebras parentales se separan y sobre cada una se construye una hebra complementaria nueva. Una helicasa empieza el proceso, la RNA polimerasa y la DNA polimerasa llenan con bases la nueva hebra, y la ligasa une el esqueleto azúcar-fosfato. • 4. Existen tres mecanismo de reparación de errores en la secuencia de bases que se presentaran durante la replicación del DNA. La reparación anormal o ausente causa rompimiento de los cromosomas y generalmente incremente el riesgo de cáncer.
  • 4. Friedrich Miescher • Fue el primero en aislar el material del núcleo de la célula. • Notó que este material presenta un carácter acídico y le llamo nucleína. • En esa época se creía que el DNA era un material que daba estructura y soporte al núcleo.
  • 5. Frederick Griffith • 1928 • Experimentos con Streptococcus pneumoniae • Causa neumonía en humanos • Es letal en ratones • Por aislamiento y repurificación encontró variantes morfológicas, – Producen colonia lisas P presentan cápsula de polisacárido – Producen colonias rugosas P no presentan cápsula de polisacárido
  • 6. • Colonias lisas = virulentas • Colonias rugosas = NO virulentas
  • 7. Experimento de Griffith. Bacterias virulentas encapsuladas vivas El ratón muere Bacterias no virulentas no encapsuladas vivas El ratón vive Bacterias virulentas encapsuladas vivas Bacterias virulentas El ratón vive muertas por calor
  • 8. Exp. de Griffith. 2 Bacterias virulentas muertas por calor Bacterias no virulentas no encapsuladas vivas El ratón muere Bacterias virulentas muertas por el calor y bact. no virulentas vivas
  • 9. Exp. de Oswald Avery, C. M. MacLeod, and M. McCarty, 1944. DNA aislado de bacterias virulentas muertas por calor Bacterias no virulentas vivas El ratón muere Transformación Bacterias virulentas encapsuladas
  • 10. En resumen L Muertas Polisacáridos Lípidos RNA Proteína DNA Células “R” Vivas R R R R R L

Notas del editor

  1. En el experimento de Avery y cols. cuando se inyecta a ratones una cepa encapsulada de neumococos es letal mientras que la cepa no encapsulada es inocua, al igual que la cepa encapsulada inactivada por calor. Investigaciones anteriores hechas por F. Griffith, habían demostrado que la adición de bacterias virulentas muertas por calor a una cepa viva no virulenta transformaba permanentemente a esta última y la convertía en una cepa encapsulada, virulenta y letal.
  2. Griffith llegó a la conclusión de que un factor transformante presente en las bacterias muertas habá penetrado en las bacterias vivas no virulentas, convirtiéndolas en virulentas y encapsuladas. Avery y cols. identificaron el factor transformante de Griffith como DNA. Extrajeron el DNA de neumococcos virulentos muertos por calor, eliminando la proteína hasta donde fue posible y añadieron este DNA a bacterias no virulentas. Los neumococos no virulentos quedaron transformados permanentemente en una cepa virulenta.
  3. Griffith llegó a la conclusión de que un factor transformante presente en las bacterias muertas había penetrado en las bacterias vivas no virulentas, convirtiéndolas en virulentas y encapsula-das. Avery y cols. identificaron el factor transformante de Griffith como DNA. Extrajeron el DNA de neumococos virulentos muertos por calor, eliminando la proteína hasta donde fue posible y añadieron este DNA a bacterias no virulentas. Los neumococos no virulentos quedaron transformados permanentemente en una cepa virulenta.
  4. Resumen del experimento de Avery y cols. En que se esquematiza que los diferentes componentes aislados de bacterias que producen colonias lisas “L”, muertas por calor, sólo producen transformación cuando el componente es DNA.