1. Búsqueda de nuevos loci asociados a
Autosó
Hipercolesterolemia Autosómica
Dominante
Ana Cenarro Lagunas
Laboratorio de Investigación Molecular
Hospital Universitario Miguel Servet
Zaragoza, 8 de Noviembre de 2010

2. Introducción
- La aterosclerosis:
• patología crónica de las arterias
patologí cró
• importantes complicaciones clínicas
clí
• cardiovasculares y cerebrovasculares
morbi-
- Primera causa de morbi-mortalidad en el mundo occidental
- Factores de riesgo:
•Dislipemia
Dislipemia
•Tabaquismo
Tabaquismo
Hipertensió
•Hipertensión arterial
Hipertensi
•Resistencia a la insulina
Resistencia
•Obesidad
Obesidad

3. Introducción
HIPERCOLESTEROLEMIAS PRIMARIAS
Hipercolesterolemias Primarias Gen implicado (Cromosoma)
Hipercolesterolemia Familiar (HF) LDLR (19)
Apo B-100 Defectuosa Familiar (BDF) APOB (2)
FH3 PCSK9 (1)
Hipercolesterolemia Asociada a Sitosterolemia ABCG5/ABCG8 (2)
Déficit de colesterol 7 α hidroxilasa CYP7A1 (8)
Hipercolesterolemia Autosómica Recesiva (ARH) LDLRAP1 (1)
Hipercolesterolemia Asociada a Variantes de Apo E APOE (19)
Hipercolesterolemia Familiar Combinada Desconocidos (??)
Hipercolesterolemia Poligénica Desconocidos (??)

4. Introducción
•Las Hipercolesterolemias Autosómicas Dominantes (HAD)
Las Autosó
son defectos familiares asociados con cifras elevadas de
LDL-
LDL-c y riesgo elevado de enfermedad coronaria, con un
patró transmisió autosó
patrón de transmisión autosómico dominante.
•Mutaciones en los genes LDLR y APOB son las causas más
Mutaciones má
frecuentes de HAD.
•El diagnóstico molecular de pacientes con fenotipo de
El diagnó
mutació
hipercolesterolemia familiar no detecta una mutación
causal en el 30% de los casos, lo que sugiere que el
gené heterogé
sustrato genético de la HAD es heterogéneo y no limitado a
estos genes.

5. mutació
Familias HAD sin mutación en LDLR ni APOB

6. Segregación del fenotipo
HAD con una región del
cromosoma 1

7. Identificació
Identificación de PCSK9 como causa de HAD

8. Z-
FAMILIA Z-1
FAMILIA Z-2
+ +
+ +
+ + + + + +
I-1
I-1 I-2 I-3 I-4 I-5
+
II-
II-1 II-
II-2 II-
II-3 II-
II-4 II-
II-5 II-
II-6 II-7
II- II-
II-8 II-
II-9
II-
II-2
III-
III-1* III-
III-2 III-
III-3 III-
III-4* III-5
III-
Z-
FAMILIA Z-3
+
I-1
?
II-
II-1 II-
II-2 II-3
II-
III-
III-1 III-
III-2

10. Resultados
•Se realizó un análisis masivo de SNPs mediante la plataforma GeneChip
Se realizó aná
Affymetrix.
Human mapping 10K Array Xba 131 de Affymetrix.
• Se identificó un SNP rs965814 G/A en un intrón del gen ADCY8,
identificó intró
cromosoma 8, que se asociaba a la hipercolesterolemia en la familia Z-1.
familia Z-
•Se realizó un estudio de asociación caso-control del SNP rs965814 en
Se realizó asociació caso-
200 ADH y 198 controles.
•Se realizó un mapeo detallado de la citobanda 8q24.22 donde está el
Se realizó está
microsaté SNPs.
SNP con 24 marcadores: 8 microsatélites y 16 SNPs.

11. asociació
Estudio de asociación

12. Z-
Familia Z-1

14. FAMILIA F-1
FAMILIA F-2
Edad: 77 años
CT: 204 mg/dL
LDL-c: 149 mg/dL
67 60 69 55 58 50
65 294
Edad, años 50 56 46 51 41 38 237 182 355 301 195
250 215
CT, mg/dL 354 121 307 240 239 216 181 114 271 219 120
195
LDL-c:, mg/dL 283 65 239 159 154 153
40 34 26 30 27
Edad, años 244 189 223 289 216
30 14
CT, mg/dL 234 180 116 168 194 123
LDL-c:, mg/dL 176
FAMILIA F-3
Edad, años 75 77 70 63 N.A. 58
CT, mg/dL 209 186 201 255 448
130 63
LDL-c:, mg/dL 115 136 166 347
312
217
Edad, años 45 41 34 29 27
CT, mg/dL 325 229 290 238 231
LDL-c:, mg/dL 245 159 194 165 153

16. Resultados
•No se ha identificado ningún SNP asociado a hipercolesterolemia
No ningú
(afecto/no afecto) en estas 3 familias en su conjunto
•Se está analizando cada familia por separado
Se está
Tambié
•También se está realizando el análisis con variables cuantitativas
Tambi está aná
LDLc…
(CT, LDLc…)
•Se han seleccionado los 50 SNPs más informativos para diseñar un
Se diseñ
chip de genotipado y analizarlos en 200 sujetos ADH y 200 sujetos
control

17. Resultados
Aná
Análisis del exoma
Criterios de inclusión:
inclusió
•Sujetos no relacionados
Sujetos
•Origen español
Origen españ
•Con al menos 2 familiares adicionales disponibles
Con
•Aumento extremo de LDL-c > percentil 99, con TG < 300 mg/dL
Aumento LDL- mg/dL
•Transmisión dominante, codominante o recesiva
Transmisió
Transmisi
•LipoChip y secuenciación del LDLR negativos
LipoChip secuenciació
•Genotipo de APOE normal
Genotipo
Nº Sujeto Sexo Edad CT (mg/dL) TG (mg/dL) HDL (mg/dL) LDLc (mg/dL) apoA1 (mg/dL) apoB (mg/dL) APOE
4 V 53 396 116 52 320 179 210,0 E3/4
62 M 58 448 111 79 347 137 206,0 E3/4
320 M 55 513 60 82 419 132 175,0 E2/4
353 M 68 490 110 58 410 147 150,0 E3/4
405 M 43 419 111 63 334 178 152,0 E3/4
1671 V 46 386 57 69 305 149 216,0 E3/3