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Capacidad de seis especies vegetales para acumular plomo en suelos
contaminados
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Juan carlos rodríguez ortiz
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Revista Fitotecnia Mexicana
Sociedad Mexicana de Fitogenética, A.C.
somefi@taurus1.chapingo.mx, vagh@colpos.mx
ISSN (Versión impresa): 0187-7380
MÉXICO
2006
Juan Carlos Rodríguez Ortiz / Humberto Rodríguez Fuentes / Gerardo de Lira Reyes /
Jesús Martínez de la Cerda / José Luis Lara Mireles
CAPACIDAD DE SEIS ESPECIES VEGETALES PARA ACUMULAR PLOMO EN
SUELOS CONTAMINADOS
Revista Fitotecnia Mexicana, julio-septiembre, año/vol. 29, número 003
Sociedad Mexicana de Fitogenética, A.C.
Chapingo, México
pp. 239-245
Red de Revistas Científicas de América Latina y el Caribe, España y Portugal
Universidad Autónoma del Estado de México
Artículo Científico Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3): 239 – 245, 2006
Recibido: 16 de Diciembre del 2004.
Aceptado: 28 de Junio del 2006.
CAPACIDAD DE SEIS ESPECIES VEGETALES PARA ACUMULAR PLOMO
EN SUELOS CONTAMINADOS
CAPACITY OF SIX PLANT SPECIES TO ACCUMULATE LEAD
IN CONTAMINATED SOILS
Juan Carlos Rodríguez Ortiz1
*, Humberto Rodríguez Fuentes2
, Gerardo de Lira Reyes2
,
Jesús Martínez de la Cerda2
y José Luis Lara Mireles1
1
Facultad de Agronomía, Universidad Autónoma de San Luis Potosí. Km. 14.5 carretera San Luis Potosí-Matehuala. Ejido Palma de la Cruz, Municipio de
Soledad de Graciano Sánchez, San Luis Potosí, México. Tel. y Fax: 01 (444) 852-4056. 2
Facultad de Agronomía, Universidad Autónoma de Nuevo León.
Km. 17.5 carretera Zuazua-Marín. Marín, Nuevo León, México.
*Autor para correspondencia (jcrodort@hotmail.com)
RESUMEN
El uso de especies vegetales como agentes descontaminantes de
suelos contaminados por metales pesados representa una alternativa
tecnológica económica y limpia que merece ser estudiada. En el pre-
sente trabajo se evaluaron las especies: Cenchrus ciliaris, Helianthus
annus, Ricinus communis, Nicotiana tabacum, Sorghum sudanense y
Brassica campestris, que fueron cultivadas en macetas con un suelo de
textura franco arenosa que se contaminó artificialmente con 0, 500 y
1000 mg de Pb kg-1
de suelo con el objetivo de evaluar su capacidad
de acumular plomo. Las especies difirieron en sus capacidad de acu-
mular plomo. En el tratamiento 500 mg de Pb kg-1
de suelo el orden
de estas capacidades (P ≤ 0.05) fueron: N. tabacum (3.27 y 3.08 mg de
Pb kg-1
en la materia seca total y en la parte aérea respectivamente) >
R. communis > C. ciliaris > S. sudanense > B. campestris > H. annus.
Mientras que en el tratamiento 1000 mg de Pb kg-1
de suelo el orden
(P ≤ 0.05) fue: R. communis (6.79 y 3.94 mg de Pb kg-1
en la materia
seca total y parte aérea respectivamente) > S. sudanense > C. ciliaris
> H. annus > N. tabacum = B. campestris. Con base en la literatura
especializada, no se identificó a ninguna de las seis especies evaluadas
como “hiperacumuladora de plomo”.
Palabras clave: Fitorremediación, metales pesados, descontamina-
ción, fitoextracción, biotecnología.
SUMMARY
The use of plant species to clean up soils contaminated with heavy
metals represent an alternative and inexpensive technology without
disturbing the ecosystems, deserving to be studied. The following spe-
cies: Cenchrus ciliaris, Helianthus annus, Ricinus communis, Nico-
tiana tabacum, Sorghum sudanens, and Brassica campestris were cul-
tivated in pots in a sandy loam soil artificially contaminated with 0,
500 and 1000 mg Pb kg-1
soil. The aim of this study was to evaluate
the Pb accumulation. These species varied in their capacity to accu-
mulate Pb. In the treatment 500 mg Pb kg-1
of soil, the Pb extraction
capacity (P ≤ 0.05) was: N. tabacum (3.27 y 3.08 mg de Pb kg-1
total
dry matter and shoots, respectively) > R communis > C. ciliaris > S.
sudanense > B. campestris > H. annus. In treatment 1000 mg Pb kg-1
of soil, the order (P ≤ 0.05) was: R. communis (6.79 y 3.94 mg de Pb
kg-1
total dry matter and shoots, respectively) > S. sudanense> C.
ciliaris > H. annus > N. tabacum = B. campestris. According to the
specialized literature, none of these species can be classified as “Lead
hiperaccumulator”.
Index words: Phytoremediation, heavy metals, contamination, phy-
toextraction, biotechnology.
INTRODUCCIÓN
El plomo (Pb) es un contaminante ambiental mayor y
altamente tóxico para el hombre. Su presencia en el am-
biente se debe principalmente a actividades antropogénicas
como la industria, minería, fundición y al uso que se dio
de gasolinas con plomo (Chaney y Ryan, 1994; Cooper et
al., 1999). El Pb generado de esas actividades puede per-
manecer como residuo por 1000 a 3000 años en suelos de
clima templado (Bowen, 1979). Por lo anterior, los altos
contenidos de Pb en el suelo pueden provocar problemas
de toxicidad en plantas, animales y humanos. En México
se han sido reportado algunos casos de contaminación; en
Monterrey, Nuevo León, se encontró que los contenidos
de Pb en suelos de un parque público y de un lote urbano
fueron de 492 y 764 mg de Pb kg-1
de suelo, respectiva-
mente. En una colonia de Torreón, Coahuila cercana a una
importante industria fundidora se reportaron niveles de 40
000 mg de Pb kg-1
de suelo (Juárez, 1999). En el munici-
pio de Marín, N. L. se encontró un suelo abandonado que
en el pasado tuvo un uso industrial, con 61 140 mg Pb kg-1
de suelo. Actualmente, en San Luis Potosí la empresa In-
dustrial Minera México anunció el establecimiento de un
CAPACIDAD DE ESPECIES VEGETALES PARA ACUMULAR PLOMO Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3), 2006
240
programa de limpieza ambiental de suelos contaminados
por plomo, lo cual ha sido relacionado a casos de intoxica-
ción en niños (Santillana, 2005).
En México, cuando un suelo se encuentra contaminado
por un residuo peligroso, como puede ser el Pb, la legisla-
ción ambiental establece que se deben llevar a cabo accio-
nes para recuperar sus condiciones originales, de tal mane-
ra que pueda ser utilizado en cualquier tipo de actividad
prevista por el programa de desarrollo urbano (Diario Ofi-
cial de la Federación, 1988); sin embargo, aún no se dis-
pone de los instrumentos regulatorios y normativos para
guiarla. En Estados Unidos, la Agencia de Protección al
Ambiente (EPA) establece que la remediación es obligada
cuando el contenido total de Pb en el suelo excede los 300
a 500 mg de Pb kg-1
para el caso de uso residencial, o
2000 mg de Pb kg-1
de suelo para uso industrial (USEPA,
1996).
Los tratamientos más comunes de descontaminación de
suelos por metales pesados incluyen la aplicación de enca-
lados, fosfatos y materia orgánica, la remoción del suelo o
añadir suelo no contaminado para diluir el efecto de la
contaminación (Alloway, 1990; Smith et al., 1995). Sin
embargo, estos procedimientos no logran extraer los con-
taminantes del suelo, sino que sólo disminuyen la biodis-
ponibilidad de los metales. La aplicación in situ o ex situ
de ácidos puede provocar su lixiviación, pero ocasionan
efectos desfavorables a las propiedades del suelo y los cos-
tos de dichas técnicas suelen ser elevados (Cooper et al.,
1999).
Por otro lado, se han encontrado algunas especies vege-
tales que tienen habilidad para tolerar y acumular altas
cantidades de metales pesados cuando se siembran en sue-
los contaminados y que podrían representar una alternativa
de remediación ecológica y económicamente rentable, al
remover los contaminantes junto con la cosecha de los cul-
tivos y disponer de ellas en confinamientos para desechos
industriales (Cunningham et al., 1995; McGrath, 1998).
Se ha identificado un pequeño número de plantas con la
capacidad de cultivarse en suelos que contienen altos nive-
les de metales, y también de acumular esos contaminantes
en cantidades considerables en sus partes aéreas. Algunas
de ellas pertenecen a la familia Brassicaceae, como Thlaspi
caerulescens y Brassica juncea (Chaney, 1983; Nanda
Kumar et al., 1995). Esas plantas han sido llamadas “hi-
peracumuladoras”.
Se consideran acumuladoras de Pb a las especies vege-
tales que concentran más de 1000 mg de Pb kg-1
de materia
seca (Baker y Brooks, 1989). De acuerdo con Ebbs et al.
(1997), las características de una planta remediadora ideal
incluyen el desarrollo de abundante biomasa y capacidad
evidente de tolerar y acumular los contaminantes de inte-
rés; estos autores también mencionan que los nuevos estu-
dios en fitorremediación deberían utilizar técnicas que
permitan una rápida identificación de especies acumulado-
ras. La presente investigación se realizó considerando la
problemática de contaminación arriba descrita, así como
las ventajas de la fitorremediación y tuvo como objetivo
evaluar la capacidad de seis especies vegetales de acumular
Pb cuando se establecen en suelos contaminados.
MATERIALES Y MÉTODOS
El presente trabajo se realizó en el municipio de Marín,
Nuevo León, México. Se utilizaron macetas de 7.57 L con
10 kg de suelo franco arenoso, con 50 % de arena, 23 %
de limo, 27 % de arcilla, conductividad eléctrica de 3.5
mS cm-1
, pH de 7.2, materia orgánica de 0.65 % y Pb total
de 65 mg kg-1
, valor que de acuerdo con Pais y Jones
(1997) no es fitotóxico.
Las especies vegetales seleccionadas se distribuyeron
en tres grupos: el primero lo integran las especies Cench-
rus ciliaris, Helianthus annus y Ricinus communis, las cua-
les son comunes en la ciudad de Monterrey, N. L., fueron
elegidas por ser plantas adaptadas en la zona y se descono-
ce su capacidad de acumular Pb. Un segundo grupo con-
sistió de dos especies cultivadas: Nicotiana tabacum y
Sorghum sudanense; la primera ha sido ampliamente eva-
luada en trabajos de investigación relacionados con la ab-
sorción y acumulación de metales pesados (Mench et al.,
1989), y de S. sudanense se desconoce su capacidad de
acumulación. Un tercer grupo lo conforma Brassica cam-
pestris, especie perteneciente a la familia Brassicaceae,
que según Nanda Kumar et al. (1995) se relaciona con es-
pecies acumuladoras de metales pesados.
El suelo se contaminó artificialmente con tres dosis de
Pb: 0 (testigo), 500 y 1000 mg de Pb kg-1
de suelo. La
aplicación se realizó 5 d después del transplante, mediante
la dilución de la dosis correspondiente a cada maceta en
500 mL de agua. La dosis de 500 mg Pb kg-1
se considera
como una concentración que rebasa las cantidades prome-
dio en el suelo que indican una inminente contaminación
(Temmerman et al. 1984). La dosis de 1000 mg kg-1
se es-
tableció con la intención de ejercer una presión extra en las
plantas, que permitiera una mejor selección de las especies
vegetales por su acumulación de este metal pesado. Como
fuente de plomo se utilizó Pb(NO3)2 grado reactivo (marca
Jalmek).
En total se formaron 18 tratamientos producto de la
combinación de las seis especies vegetales y las tres dosis
de Pb en el suelo. El experimento se condujo de acuerdo
con un diseño de bloques completos al azar en un arreglo
RODRÍGUEZ, RODRÍGUEZ, DE LIRA, MARTÍNEZ Y LARA Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3), 2006
241
factorial de tratamientos y cuatro repeticiones; cada unidad
experimental fue representada por dos macetas por repeti-
ción.
Desarrollo experimental
Las semillas de cada especie se sembraron en charolas
de poliestireno con 200 cavidades que contenían un sustra-
to orgánico inerte comercial (COSMOPEAT de Cosmocel
®). Después de la siembra, a los 45 d, las plántulas fueron
retiradas de las charolas y sus raíces se lavaron con agua
destilada; luego se transplantó una plántula de cada especie
por maceta, excepto en S. sudanense (con cuatro plantas)
ya que esta especie se sembró directamente en las macetas.
Los riegos se aplicaron al alternar agua con nutrimen-
tos y sin éstos. La solución nutritiva se preparó con los si-
guientes elementos y cantidades: N, 224; P, 62; K, 235;
Ca, 160; Mg, 24; Fe, 5; Mn, 0.11; Mo, 0.05; Zn, 0.131;
Cu, 0.032 mg L-1
, respectivamente, con pH de 6. La can-
tidad de agua aplicada fue suficiente para evitar estrés
hídrico, según evaluación visual de cada planta; además,
se evitó que durante el riego se drenara el agua en las ma-
cetas con el fin de mantener constante el contenido del Pb
en la maceta.
Muestreo de plantas
Las plantas se muestrearon al inicio de la floración en
la mayoría de las especies, excepto R. communis que tiene
un ciclo biológico más prolongado que las demás; en C.
ciliaris, a los 90 d después del transplante; H. annus, 50;
R. communis 70; N. tabacum 70; S. sudanense, 70 y B.
campestris 50.
Variables de estudio
Acumulación de Pb en tejido vegetal. La acumulación
de Pb se define como la cantidad de la sustancia que per-
manece en un organismo después de un tiempo en exposi-
ción (Depledge et al., 1994). En esta investigación se con-
sideró como variable principal la acumulación de plomo en
tejido vegetal, ya que integra tanto el grado de absorción
del metal por las plantas, así como el efecto negativo que
las concentraciones excesivas de metal puede tener sobre la
producción de materia seca. Con esta variable se puede
evaluar el potencial efectivo de cada especie vegetal para
remediación. Dicho potencial se calculó en parte aérea,
raíz y total (parte aérea + raíz), mediante la multiplicación
de peso seco de cada parte por la concentración de Pb en
la misma.
Producción de materia seca. Se extrajeron plantas
completas (raíz + parte aérea) de las macetas, se lavaron
con agua destilada y se llevaron a una estufa (Thelco mo-
delo 28) para su secado a 75 °C, hasta peso constante. Se
pesó por separado la raíz de la parte aérea, en balanza
electrónica con precisión de 0.01 g. La suma de raíz y par-
te aérea se consideró como el peso seco total. Las mues-
tras se molieron en molino de acero inoxidable, al cual se
le colocó una malla del número 10, y se guardaron en bol-
sas de plástico a temperatura ambiente hasta su análisis.
Concentración de Pb. Un gramo de tejido vegetal de
cada muestra se colocó en crisoles de porcelana de 30 mL
de capacidad, se quemó en parrilla eléctrica y las cenizas
se introdujeron a una mufla a 450 °C por 4 h. Se adicionó
2 mL de HCl concentrado y se colocó en la parrilla hasta
tener una evaporación de aproximadamente 80 % del áci-
do. Después se adicionó 15 mL de una solución de HCl 1
N, se filtró con papel Whatman No. 41 y se aforó con
agua bidestilada a 25 mL (Rodríguez y Rodríguez, 2002).
La concentración de Pb se determinó por espectroscopía de
absorción atómica. Se emplearon estándares certificados
(Fisher) y cada muestra se analizó por triplicado.
Distribución de Pb en la planta. Se hizo mediante una
comparación de los porcentajes de plomo acumulado en la
parte aérea de las plantas y en las raíces, con respecto a la
acumulación total.
Análisis estadístico
Para comparar las especies en cuanto a la acumulación
de Pb por maceta y la distribución de Pb en la planta, se
hizo un análisis de varianza, mediante el paquete estadísti-
co de diseños experimentales FAUANL (Olivares, 1994).
Cuando hubo diferencias entre tratamientos, se hizo la
comparación de medias mediante la prueba de Tukey (P ≤
0.05). Para el caso de la distribución de Pb, antes de su
análisis los porcentajes se transformaron con la función arc
sen porcentaje (Reyes, 1992).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Acumulación total de plomo en tejido vegetal
Se detectaron diferencias significativas en Pb acumula-
do entre especies, dosis de Pb y en la interacción entre
ambos; es decir, los efectos principales no fueron indepen-
dientes (Cuadro 1). En la Figura 1 se muestra que en esta
variable que no hubo diferencias entre especies en el testi-
go sin plomo, lo cual no sucedió en las demás dosis de Pb
en el suelo, y revela la importancia de someter a un con-
junto de especies vegetales, a las cuales se desea conocer
su potencial de acumulación, a dosis crecientes del metal
pesado en el suelo ya que su respuesta no es igual, pues
con 500 mg de Pb kg-1
suelo la mayor acumulación de
CAPACIDAD DE ESPECIES VEGETALES PARA ACUMULAR PLOMO Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3), 2006
242
plomo la presentó N. tabacum, con 3.27 mg de Pb, en tan-
to que R. communis y C. ciliaris sólo acumularon 2.78 y
2.22 mg de Pb, respectivamente. En el tratamiento con
1000 mg Pb kg–1
de suelo, R. communis acumuló 6.8 mg
de Pb mientras que S. sudanense acumuló 2.8 veces me-
nos (2.44 mg Pb). R. communis habita en diferentes zonas
de la ciudad de Monterrey, lo que podría significar una
ventaja desde el punto de vista económico y ecológico si se
llegará a usar como agente remediador de suelos contami-
nados.
Cuadro 1. Análisis de varianza para la variable acumulación total de Pb
en tejido vegetal.
FV GL CM F calculada
Especies (E) 5 14990010 862 **
Dosis (D) 2 22239672 1278 **
E x D 10 8946237 514 **
Error 51 17397
Total 71
** = P ≤ 0.01; C V = 10.12 %
En general, las especies presentaron una tendencia a
acumular más Pb a medida que se incrementó la dosis de
este elemento en el suelo (Figura 1). Sin embargo, N. ta-
bacum y B. campestris no toleraron la dosis de 1000 mg
de Pb kg-1
de suelo y murieron. Los mecanismos de fito-
toxicidad de Pb están relacionados con cambios en la per-
meabilidad de las membranas celulares, reacciones de gru-
pos sulfihidrilo (-SH) con cationes y afinidad para reaccio-
nar con grupos fosfatos y grupos activos de ADP o ATP
(Alloway, 1990); este autor afirma que la toxicidad varía
entre genotipo, y entre condiciones experimentales. Mien-
tras tanto, los mecanismos de tolerancia al Pb se relacio-
nan con un aislamiento de éste en el metabolismo de la cé-
lula, que puede ser por retención en la pared celular
(Mengel y Kirkby, 1982), o por fitoquelatinas de fórmula
(ϒ-Glu-Cys)n- Gly, donde n = 21 (Rauser, 1995).
Distribución de Pb en la planta (acumulación
parte aérea vs. raíz)
Se detectaron diferencias significativas en la distribu-
ción de Pb en la planta entre especies, dosis de Pb, partes
de la planta e interacciones (Cuadro 2). En el Cuadro 3 se
observa que, en general, el porcentaje del total de Pb acu-
mulado en la parte aérea se fue haciendo menor a medida
que se incrementó la dosis de Pb aplicada al suelo. En el
tratamiento testigo, el caso más extremo lo muestra S. su-
danense con una acumulación de Pb de 97 % en parte aé-
rea y 3 % en raíz. En el tratamiento 500 mg de Pb kg-1
de
suelo la mayor acumulación de Pb en la parte aérea fue de
N. tabacum, con 94 % (esto es, 3.08 mg de Pb en sus teji-
dos aéreos). En el tratamiento de 1000 mg Pb kg-1
de suelo
la mayor acumulación de Pb en la parte aérea fue de R.
communis con 58 % (esto es, 3.94 mg de Pb en sus tejidos
aéreos), que fue ligeramente superior a C. ciliaris y H.
annus, especies que acumularon por igual 57 % del pomo
en la parte aérea. S. sudanense fue la única especie que
acumuló más Pb en raíz que en la parte aérea, 37 % y 63
%, respectivamente. Estos resultados muestran que la dis-
tribución de Pb en la planta depende de factores como la
dosis del metal en el suelo y de la especie vegetal.
bc
b
c
d
a
ab
a
b
c
+
d
ns
0
1
2
3
4
5
6
7
Testigo 500 1000
Tratamientos (mg Pb kg-1
de suelo)
C. ciliaris
H. annus
R. communis
N. tabacum
S. sudanense
B. campestris
Figura 1. Acumulación total de Pb en seis especies vegetales cultivadas
en suelo con tres dosis de 0, 500 y 1000 mg de Pb kg-1
de suelo (mg de
Pb en tejido vegetal producido por planta, excepto S. sudanense que es
de cuatro plantas). Medias con letras iguales, dentro de cada tratamiento
de plomo en el suelo, son estadísticamente iguales (Tukey, 0.05). ns, in-
dica que las seis especies vegetales obtuvieron resultados estadísticamen-
te iguales. †Las plantas murieron en esta dosis.
Cuadro 2. Análisis de varianza para la variable distribución de Pb en la
planta (parte aérea vs. raíz).
FV GL CM F calculada
Especies (E) 5 1309 54**
Dosis (D) 2 3970 163**
Parte de la planta (P) 1 27869 1148**
E x D 10 1550 64**
E x P 5 4311 862**
D x P 2 19477 9738**
E x D x P 10 6349 634**
Error 105 2549 24
Total 143 90640
** = P ≤ 0.01; C V = 12.13 %
Acumulación
de
Pb
(mg
Pb
en
tejido
vegetal)
RODRÍGUEZ, RODRÍGUEZ, DE LIRA, MARTÍNEZ Y LARA Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3), 2006
243
Cuadro 3. Comparación de medias de los porcentajes de Pb con respecto
al total acumulado, en parte aérea y raíz, de las seis especies cultivadas
con tres dosis de Pb aplicadas al suelo (0, 500, 1000 mg kg-1
suelo).
Especie Testigo 500 1000
Parte
aérea
Raíz Parte
aérea
Raíz Parte
aérea
Raíz
C. ciliaris 95 a 5 b 84 a 16 b 57 a 43 b
H. annus 94 a 6 b 68 a 32 b 57 a 43 b
R. communis 90 a 10 b 73 a 27 b 58 a 42 b
N. tabacum 88 a 12 b 94 a 6 b † †
S. sudanense 97 a 3 b 58 a 42 a 37 b 63 a
B. campestris 83 a 17 b 41 a 59 a † †
Medias con letra iguales por especie (fila), dentro de cada tratamiento de
plomo en el suelo, son estadísticamente iguales (Tukey, 0.05). †Las plan-
tas murieron en esta dosis.
La mayor acumulación de Pb en parte aérea, mostrada
en la mayoría de los casos, se atribuye a una mayor pro-
ducción de materia seca de esta parte de la planta en com-
paración con la raíz (Cuadro 4). Las especies que acumu-
laron más Pb en la parte aérea en el tratamiento de 500 mg
de Pb kg-1
produjeron en promedio 4.3 veces más materia
seca aérea que en la raíz; mientras que C. ciliaris, en el
tratamiento de 1000 mg de Pb kg-1
, fue casi cuatro veces
más. Por su parte, las concentraciones de Pb en raíces fue-
ron en promedio superiores a la parte aérea en 2 y 3.5 ve-
ces, en los tratamiento de 500 y 1000 mg de Pb kg-1
, res-
pectivamente. Lo anterior dio como resultado cocientes
(acumulación) a favor de las partes aéreas de las plantas.
La cualidad de acumular más Pb en la parte aérea que
en la raíz es preferida en plantas que se usan con fines de
fitorremediación, ya que esta parte es la que se cosecha y
posteriormente se confina junto con los contaminantes que
contienen. Al respecto, Brown et al. (1994) mencionaron
que algunas especies podrían poseer un sistema interno
muy específico de “bombear” metales de los tejidos radi-
cales hacia los de la parte aérea. También se podría esti-
mular la traslocación de Pb vía externa mediante el uso de
quelatos como el EDTA (ácido etildiaminotriacético), co-
mo reportaron Huang et al. (1997a). Estos autores encon-
traron que la traslocación y la concentración de Pb en sa-
via de maíz (Zea mays L.) se incrementó a 6.88 mg L-1
por
la adición de 0.5 g de EDTA kg-1
de suelo y a 21.15 mg
L-1
por la adición de 1 g de EDTA kg-1
de suelo, en com-
paración con el testigo que obtuvo 0.15 mg Pb L-1
.
Capacidad hiperacumuladora
Ninguna de las seis especies logró concentrar más de
1000 mg de Pb kg-1
de materia seca, por lo que ninguna de
ellas puede considerarse hasta el momento como especie
hiperacumuladora de Pb, de acuerdo con el criterio esta-
blecido por Baker y Brooks (1989). R. communis fue la
especie que alcanzó la mayor concentración de Pb en el
tratamiento de 1000 mg de Pb kg-1
, con 735 mg de Pb kg-1
de materia seca en parte aérea (Figura 2). La capacidad de
hiperacumular Pb no es un proceso fácil. Hasta 1989 sólo
se tenían reportadas cinco especies hiperacumuladoras de
Pb: Armeria martima, Thlaspi rotundifolium, Thlaspi al-
pestre, Alyssum wulfenianum y Polycarpaea synandra (Ba-
ker y Brooks, 1989). Por su parte, Nanda Kumar et al.
(1995) reportaron que Brassica juncea cv. 426308 logró
concentrar hasta 34 500 mg de Pb kg-1
de materia seca.
Extracción de Pb del suelo
Si se considera que la cantidad de Pb acumulado en las
plantas equivale a la cantidad de Pb extraído del suelo, los
resultados aquí obtenidos permiten inferir, en primera ins-
tancia, que la remediación de los suelos utilizados en este
experimento requerirá de mucho tiempo. Además, el sis-
tema parece ser poco eficiente, ya que por un lado N. ta-
bacum logró extraer 3.27 mg de Pb, de los cuales 94 %
fue acumulado en la parte aérea de la planta (Figura 1 y
Cuadro 3); es decir, 3.08 mg de Pb en el tratamiento 500
mg de Pb kg-1
de suelo. Por su parte, R. communis extrajo
6.79 mg de Pb, los cuales 58 % (3.94 mg Pb) fue acumu-
lado en la parte aérea de la planta (Figura 1 y Cuadro 3)
en el tratamiento1000 mg de Pb kg-1
.
Cuadro 4. Comparación de medias de la producción de materia seca en parte aérea y raíz, en las seis especies vegetales crecidas en tres dosis de Pb apli-
cadas al suelo (0, 500, 1000 mg kg-1
suelo).
Materia seca *
Especie Testigo 500 1000
Parte aérea Raíz Parte aérea Raíz Parte aérea Raíz
C. ciliaris 13 a 3.2 b 11 a 2.3 b 4 a 1.2 b
H. annus 8 a 1.2 b 4.1 a 0.8 b 3.3 a 0.6 b
R. communis 10.4 a 3.2 b 7.1 a 2.5 b 4.7 a 1.8 b
N. tabacum 9.8 a 2.2 b 6.2 a 1.5 b † †
S. sudanense 6 a 2.1 b 5.5 a 1.8 b 3.7 a 1.5 b
B. campestris 2.7 a 0.2 b 1.2 a 0.1 b † †
* g de materia seca contenida por planta (para S. sudanense es de cuatro plantas). Medias con letra iguales por fila, dentro de cada tratamiento de plomo en
el suelo, son estadísticamente iguales (Tukey, 0.05). †Las plantas murieron en esta dosis.
CAPACIDAD DE ESPECIES VEGETALES PARA ACUMULAR PLOMO Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3), 2006
244
Figura 2. Concentración de plomo en la parte aérea de seis especies ve-
getales (mg de Pb kg-1
de materia seca).
Sin embargo, hay dos aspectos a considerar. El prime-
ro es que no se necesita reducir el contaminante a un valor
de cero en un determinado suelo, sino reducirlo a niveles
que no representen un riesgo mayor a la salud humana y al
ambiente. Estos niveles dependerán de diversos factores,
entre ellos los niveles máximos permisibles de Pb en el
suelo establecidos por las legislaciones ambientales de cada
país. El segundo es que las plantas sólo extraen el Pb bio-
disponible del suelo, que en la mayoría de los casos es mí-
nima con respecto al contenido total de plomo (< 4 mg Pb
L-1
de solución del suelo, para un suelo que contiene 2500
mg Pb kg-1
; Huang et al., 1997b). Bajo esta perspectiva, el
extraer esas cantidades podría ser altamente significativo
ya que esta última fracción representa la de mayor riesgo
ambiental de manera directa, ya que el contaminante tiene
la capacidad de ingresar a la cadena alimenticia vía absor-
ción vegetal (Alloway, 1990).
Por otro lado, es evidente la necesidad de ampliar las
investigaciones para el desarrollo de esta tecnología. Con
base en estos resultados, se recomienda enfatizar los es-
fuerzos hacia la selección de un mayor número de especies
vegetales de alta producción de biomasa aunada a la alta
capacidad de absorción, traslocación y tolerancia de los
metales pesados, que en conjunto le conferirán una alta
habilidad para acumular metales pesados (como el Pb), y
mayor extracción de los contaminantes del suelo. Otros
puntos a considerar para la selección de especies vegetales
biorremediadoras, serán: 1) Reducir al máximo la posibili-
dad de un disturbio ecológico por la posible introducción
de especies o genes de éstas a nuevos ecosistemas; 2) La
posibilidad de ser cultivadas y de responder a prácticas
agronómicas; y 3) Adaptación a la zona. También será de-
cisivo el aumentar esas capacidades naturales, lo que se
podría lograr mediante la biotecnología vegetal (Pilon-
Smits y Pilon, 2002), así como de prácticas agronómicas
como la fertilización nitrogenada, uso de quelatos y densi-
dad poblacional óptima (Bennett et al., 1998; Kulli et al.,
1999; Chaney et al., 2000) u otras técnicas.
CONCLUSIONES
Las seis especies vegetales ensayadas variaron en su
capacidad de acumular plomo. El orden de tales capacida-
des en el tratamiento de 500 mg de Pb kg-1
de suelo, fue-
ron: N. tabacum (3.27 y 3.08 mg de Pb kg-1
en la materia
seca total y en la parte aérea, respectivamente) > R. com-
munis > C. ciliaris > S. sudanense > B. campestris > H.
annus. Mientras en el tratamiento de 1000 mg de Pb kg-1
de suelo, fueron: R. communis (6.79 y 3.94 mg de Pb kg-1
en la materia seca total y en la parte aérea respectivamen-
te) > S. sudanense > C. ciliaris > H. annus > N. tabacum
= B. campestris. Basados en la literatura especializada,
ninguna de las seis especies se puede clasificar como “hi-
peracumuladora” de plomo.
BIBLIOGRAFÍA
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0
100
200
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Especie
0
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C.ciliaris H. annus R. communis N. tabacum S. sudanense B. campestris
Testigo
500 mg Pb-1
de suelo
1000 mg Pb-1
de suelo
Concentración
(mg
Pb
kg
-1
de
material
seca)
RODRÍGUEZ, RODRÍGUEZ, DE LIRA, MARTÍNEZ Y LARA Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3), 2006
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  • 1. See discussions, stats, and author profiles for this publication at: https://www.researchgate.net/publication/26478195 Capacidad de seis especies vegetales para acumular plomo en suelos contaminados Article  in  Revista fitotecnia mexicana publ. por la Sociedad Mexicana de Fitogenética · January 2006 Source: DOAJ CITATIONS 0 READS 397 5 authors, including: Some of the authors of this publication are also working on these related projects: CULTIVATION View project Contaminación por metales pesados en sedimentos de un área ribereña en San Luis Paotosí, México View project Humberto Rodriguez-Fuentes Autonomous University of Nuevo León 32 PUBLICATIONS   105 CITATIONS    SEE PROFILE Juan carlos rodríguez ortiz Universidad Autónoma de San Luis Potosí 36 PUBLICATIONS   128 CITATIONS    SEE PROFILE All content following this page was uploaded by Humberto Rodriguez-Fuentes on 01 June 2014. The user has requested enhancement of the downloaded file.
  • 2. Revista Fitotecnia Mexicana Sociedad Mexicana de Fitogenética, A.C. somefi@taurus1.chapingo.mx, vagh@colpos.mx ISSN (Versión impresa): 0187-7380 MÉXICO 2006 Juan Carlos Rodríguez Ortiz / Humberto Rodríguez Fuentes / Gerardo de Lira Reyes / Jesús Martínez de la Cerda / José Luis Lara Mireles CAPACIDAD DE SEIS ESPECIES VEGETALES PARA ACUMULAR PLOMO EN SUELOS CONTAMINADOS Revista Fitotecnia Mexicana, julio-septiembre, año/vol. 29, número 003 Sociedad Mexicana de Fitogenética, A.C. Chapingo, México pp. 239-245 Red de Revistas Científicas de América Latina y el Caribe, España y Portugal Universidad Autónoma del Estado de México
  • 3. Artículo Científico Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3): 239 – 245, 2006 Recibido: 16 de Diciembre del 2004. Aceptado: 28 de Junio del 2006. CAPACIDAD DE SEIS ESPECIES VEGETALES PARA ACUMULAR PLOMO EN SUELOS CONTAMINADOS CAPACITY OF SIX PLANT SPECIES TO ACCUMULATE LEAD IN CONTAMINATED SOILS Juan Carlos Rodríguez Ortiz1 *, Humberto Rodríguez Fuentes2 , Gerardo de Lira Reyes2 , Jesús Martínez de la Cerda2 y José Luis Lara Mireles1 1 Facultad de Agronomía, Universidad Autónoma de San Luis Potosí. Km. 14.5 carretera San Luis Potosí-Matehuala. Ejido Palma de la Cruz, Municipio de Soledad de Graciano Sánchez, San Luis Potosí, México. Tel. y Fax: 01 (444) 852-4056. 2 Facultad de Agronomía, Universidad Autónoma de Nuevo León. Km. 17.5 carretera Zuazua-Marín. Marín, Nuevo León, México. *Autor para correspondencia (jcrodort@hotmail.com) RESUMEN El uso de especies vegetales como agentes descontaminantes de suelos contaminados por metales pesados representa una alternativa tecnológica económica y limpia que merece ser estudiada. En el pre- sente trabajo se evaluaron las especies: Cenchrus ciliaris, Helianthus annus, Ricinus communis, Nicotiana tabacum, Sorghum sudanense y Brassica campestris, que fueron cultivadas en macetas con un suelo de textura franco arenosa que se contaminó artificialmente con 0, 500 y 1000 mg de Pb kg-1 de suelo con el objetivo de evaluar su capacidad de acumular plomo. Las especies difirieron en sus capacidad de acu- mular plomo. En el tratamiento 500 mg de Pb kg-1 de suelo el orden de estas capacidades (P ≤ 0.05) fueron: N. tabacum (3.27 y 3.08 mg de Pb kg-1 en la materia seca total y en la parte aérea respectivamente) > R. communis > C. ciliaris > S. sudanense > B. campestris > H. annus. Mientras que en el tratamiento 1000 mg de Pb kg-1 de suelo el orden (P ≤ 0.05) fue: R. communis (6.79 y 3.94 mg de Pb kg-1 en la materia seca total y parte aérea respectivamente) > S. sudanense > C. ciliaris > H. annus > N. tabacum = B. campestris. Con base en la literatura especializada, no se identificó a ninguna de las seis especies evaluadas como “hiperacumuladora de plomo”. Palabras clave: Fitorremediación, metales pesados, descontamina- ción, fitoextracción, biotecnología. SUMMARY The use of plant species to clean up soils contaminated with heavy metals represent an alternative and inexpensive technology without disturbing the ecosystems, deserving to be studied. The following spe- cies: Cenchrus ciliaris, Helianthus annus, Ricinus communis, Nico- tiana tabacum, Sorghum sudanens, and Brassica campestris were cul- tivated in pots in a sandy loam soil artificially contaminated with 0, 500 and 1000 mg Pb kg-1 soil. The aim of this study was to evaluate the Pb accumulation. These species varied in their capacity to accu- mulate Pb. In the treatment 500 mg Pb kg-1 of soil, the Pb extraction capacity (P ≤ 0.05) was: N. tabacum (3.27 y 3.08 mg de Pb kg-1 total dry matter and shoots, respectively) > R communis > C. ciliaris > S. sudanense > B. campestris > H. annus. In treatment 1000 mg Pb kg-1 of soil, the order (P ≤ 0.05) was: R. communis (6.79 y 3.94 mg de Pb kg-1 total dry matter and shoots, respectively) > S. sudanense> C. ciliaris > H. annus > N. tabacum = B. campestris. According to the specialized literature, none of these species can be classified as “Lead hiperaccumulator”. Index words: Phytoremediation, heavy metals, contamination, phy- toextraction, biotechnology. INTRODUCCIÓN El plomo (Pb) es un contaminante ambiental mayor y altamente tóxico para el hombre. Su presencia en el am- biente se debe principalmente a actividades antropogénicas como la industria, minería, fundición y al uso que se dio de gasolinas con plomo (Chaney y Ryan, 1994; Cooper et al., 1999). El Pb generado de esas actividades puede per- manecer como residuo por 1000 a 3000 años en suelos de clima templado (Bowen, 1979). Por lo anterior, los altos contenidos de Pb en el suelo pueden provocar problemas de toxicidad en plantas, animales y humanos. En México se han sido reportado algunos casos de contaminación; en Monterrey, Nuevo León, se encontró que los contenidos de Pb en suelos de un parque público y de un lote urbano fueron de 492 y 764 mg de Pb kg-1 de suelo, respectiva- mente. En una colonia de Torreón, Coahuila cercana a una importante industria fundidora se reportaron niveles de 40 000 mg de Pb kg-1 de suelo (Juárez, 1999). En el munici- pio de Marín, N. L. se encontró un suelo abandonado que en el pasado tuvo un uso industrial, con 61 140 mg Pb kg-1 de suelo. Actualmente, en San Luis Potosí la empresa In- dustrial Minera México anunció el establecimiento de un
  • 4. CAPACIDAD DE ESPECIES VEGETALES PARA ACUMULAR PLOMO Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3), 2006 240 programa de limpieza ambiental de suelos contaminados por plomo, lo cual ha sido relacionado a casos de intoxica- ción en niños (Santillana, 2005). En México, cuando un suelo se encuentra contaminado por un residuo peligroso, como puede ser el Pb, la legisla- ción ambiental establece que se deben llevar a cabo accio- nes para recuperar sus condiciones originales, de tal mane- ra que pueda ser utilizado en cualquier tipo de actividad prevista por el programa de desarrollo urbano (Diario Ofi- cial de la Federación, 1988); sin embargo, aún no se dis- pone de los instrumentos regulatorios y normativos para guiarla. En Estados Unidos, la Agencia de Protección al Ambiente (EPA) establece que la remediación es obligada cuando el contenido total de Pb en el suelo excede los 300 a 500 mg de Pb kg-1 para el caso de uso residencial, o 2000 mg de Pb kg-1 de suelo para uso industrial (USEPA, 1996). Los tratamientos más comunes de descontaminación de suelos por metales pesados incluyen la aplicación de enca- lados, fosfatos y materia orgánica, la remoción del suelo o añadir suelo no contaminado para diluir el efecto de la contaminación (Alloway, 1990; Smith et al., 1995). Sin embargo, estos procedimientos no logran extraer los con- taminantes del suelo, sino que sólo disminuyen la biodis- ponibilidad de los metales. La aplicación in situ o ex situ de ácidos puede provocar su lixiviación, pero ocasionan efectos desfavorables a las propiedades del suelo y los cos- tos de dichas técnicas suelen ser elevados (Cooper et al., 1999). Por otro lado, se han encontrado algunas especies vege- tales que tienen habilidad para tolerar y acumular altas cantidades de metales pesados cuando se siembran en sue- los contaminados y que podrían representar una alternativa de remediación ecológica y económicamente rentable, al remover los contaminantes junto con la cosecha de los cul- tivos y disponer de ellas en confinamientos para desechos industriales (Cunningham et al., 1995; McGrath, 1998). Se ha identificado un pequeño número de plantas con la capacidad de cultivarse en suelos que contienen altos nive- les de metales, y también de acumular esos contaminantes en cantidades considerables en sus partes aéreas. Algunas de ellas pertenecen a la familia Brassicaceae, como Thlaspi caerulescens y Brassica juncea (Chaney, 1983; Nanda Kumar et al., 1995). Esas plantas han sido llamadas “hi- peracumuladoras”. Se consideran acumuladoras de Pb a las especies vege- tales que concentran más de 1000 mg de Pb kg-1 de materia seca (Baker y Brooks, 1989). De acuerdo con Ebbs et al. (1997), las características de una planta remediadora ideal incluyen el desarrollo de abundante biomasa y capacidad evidente de tolerar y acumular los contaminantes de inte- rés; estos autores también mencionan que los nuevos estu- dios en fitorremediación deberían utilizar técnicas que permitan una rápida identificación de especies acumulado- ras. La presente investigación se realizó considerando la problemática de contaminación arriba descrita, así como las ventajas de la fitorremediación y tuvo como objetivo evaluar la capacidad de seis especies vegetales de acumular Pb cuando se establecen en suelos contaminados. MATERIALES Y MÉTODOS El presente trabajo se realizó en el municipio de Marín, Nuevo León, México. Se utilizaron macetas de 7.57 L con 10 kg de suelo franco arenoso, con 50 % de arena, 23 % de limo, 27 % de arcilla, conductividad eléctrica de 3.5 mS cm-1 , pH de 7.2, materia orgánica de 0.65 % y Pb total de 65 mg kg-1 , valor que de acuerdo con Pais y Jones (1997) no es fitotóxico. Las especies vegetales seleccionadas se distribuyeron en tres grupos: el primero lo integran las especies Cench- rus ciliaris, Helianthus annus y Ricinus communis, las cua- les son comunes en la ciudad de Monterrey, N. L., fueron elegidas por ser plantas adaptadas en la zona y se descono- ce su capacidad de acumular Pb. Un segundo grupo con- sistió de dos especies cultivadas: Nicotiana tabacum y Sorghum sudanense; la primera ha sido ampliamente eva- luada en trabajos de investigación relacionados con la ab- sorción y acumulación de metales pesados (Mench et al., 1989), y de S. sudanense se desconoce su capacidad de acumulación. Un tercer grupo lo conforma Brassica cam- pestris, especie perteneciente a la familia Brassicaceae, que según Nanda Kumar et al. (1995) se relaciona con es- pecies acumuladoras de metales pesados. El suelo se contaminó artificialmente con tres dosis de Pb: 0 (testigo), 500 y 1000 mg de Pb kg-1 de suelo. La aplicación se realizó 5 d después del transplante, mediante la dilución de la dosis correspondiente a cada maceta en 500 mL de agua. La dosis de 500 mg Pb kg-1 se considera como una concentración que rebasa las cantidades prome- dio en el suelo que indican una inminente contaminación (Temmerman et al. 1984). La dosis de 1000 mg kg-1 se es- tableció con la intención de ejercer una presión extra en las plantas, que permitiera una mejor selección de las especies vegetales por su acumulación de este metal pesado. Como fuente de plomo se utilizó Pb(NO3)2 grado reactivo (marca Jalmek). En total se formaron 18 tratamientos producto de la combinación de las seis especies vegetales y las tres dosis de Pb en el suelo. El experimento se condujo de acuerdo con un diseño de bloques completos al azar en un arreglo
  • 5. RODRÍGUEZ, RODRÍGUEZ, DE LIRA, MARTÍNEZ Y LARA Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3), 2006 241 factorial de tratamientos y cuatro repeticiones; cada unidad experimental fue representada por dos macetas por repeti- ción. Desarrollo experimental Las semillas de cada especie se sembraron en charolas de poliestireno con 200 cavidades que contenían un sustra- to orgánico inerte comercial (COSMOPEAT de Cosmocel ®). Después de la siembra, a los 45 d, las plántulas fueron retiradas de las charolas y sus raíces se lavaron con agua destilada; luego se transplantó una plántula de cada especie por maceta, excepto en S. sudanense (con cuatro plantas) ya que esta especie se sembró directamente en las macetas. Los riegos se aplicaron al alternar agua con nutrimen- tos y sin éstos. La solución nutritiva se preparó con los si- guientes elementos y cantidades: N, 224; P, 62; K, 235; Ca, 160; Mg, 24; Fe, 5; Mn, 0.11; Mo, 0.05; Zn, 0.131; Cu, 0.032 mg L-1 , respectivamente, con pH de 6. La can- tidad de agua aplicada fue suficiente para evitar estrés hídrico, según evaluación visual de cada planta; además, se evitó que durante el riego se drenara el agua en las ma- cetas con el fin de mantener constante el contenido del Pb en la maceta. Muestreo de plantas Las plantas se muestrearon al inicio de la floración en la mayoría de las especies, excepto R. communis que tiene un ciclo biológico más prolongado que las demás; en C. ciliaris, a los 90 d después del transplante; H. annus, 50; R. communis 70; N. tabacum 70; S. sudanense, 70 y B. campestris 50. Variables de estudio Acumulación de Pb en tejido vegetal. La acumulación de Pb se define como la cantidad de la sustancia que per- manece en un organismo después de un tiempo en exposi- ción (Depledge et al., 1994). En esta investigación se con- sideró como variable principal la acumulación de plomo en tejido vegetal, ya que integra tanto el grado de absorción del metal por las plantas, así como el efecto negativo que las concentraciones excesivas de metal puede tener sobre la producción de materia seca. Con esta variable se puede evaluar el potencial efectivo de cada especie vegetal para remediación. Dicho potencial se calculó en parte aérea, raíz y total (parte aérea + raíz), mediante la multiplicación de peso seco de cada parte por la concentración de Pb en la misma. Producción de materia seca. Se extrajeron plantas completas (raíz + parte aérea) de las macetas, se lavaron con agua destilada y se llevaron a una estufa (Thelco mo- delo 28) para su secado a 75 °C, hasta peso constante. Se pesó por separado la raíz de la parte aérea, en balanza electrónica con precisión de 0.01 g. La suma de raíz y par- te aérea se consideró como el peso seco total. Las mues- tras se molieron en molino de acero inoxidable, al cual se le colocó una malla del número 10, y se guardaron en bol- sas de plástico a temperatura ambiente hasta su análisis. Concentración de Pb. Un gramo de tejido vegetal de cada muestra se colocó en crisoles de porcelana de 30 mL de capacidad, se quemó en parrilla eléctrica y las cenizas se introdujeron a una mufla a 450 °C por 4 h. Se adicionó 2 mL de HCl concentrado y se colocó en la parrilla hasta tener una evaporación de aproximadamente 80 % del áci- do. Después se adicionó 15 mL de una solución de HCl 1 N, se filtró con papel Whatman No. 41 y se aforó con agua bidestilada a 25 mL (Rodríguez y Rodríguez, 2002). La concentración de Pb se determinó por espectroscopía de absorción atómica. Se emplearon estándares certificados (Fisher) y cada muestra se analizó por triplicado. Distribución de Pb en la planta. Se hizo mediante una comparación de los porcentajes de plomo acumulado en la parte aérea de las plantas y en las raíces, con respecto a la acumulación total. Análisis estadístico Para comparar las especies en cuanto a la acumulación de Pb por maceta y la distribución de Pb en la planta, se hizo un análisis de varianza, mediante el paquete estadísti- co de diseños experimentales FAUANL (Olivares, 1994). Cuando hubo diferencias entre tratamientos, se hizo la comparación de medias mediante la prueba de Tukey (P ≤ 0.05). Para el caso de la distribución de Pb, antes de su análisis los porcentajes se transformaron con la función arc sen porcentaje (Reyes, 1992). RESULTADOS Y DISCUSIÓN Acumulación total de plomo en tejido vegetal Se detectaron diferencias significativas en Pb acumula- do entre especies, dosis de Pb y en la interacción entre ambos; es decir, los efectos principales no fueron indepen- dientes (Cuadro 1). En la Figura 1 se muestra que en esta variable que no hubo diferencias entre especies en el testi- go sin plomo, lo cual no sucedió en las demás dosis de Pb en el suelo, y revela la importancia de someter a un con- junto de especies vegetales, a las cuales se desea conocer su potencial de acumulación, a dosis crecientes del metal pesado en el suelo ya que su respuesta no es igual, pues con 500 mg de Pb kg-1 suelo la mayor acumulación de
  • 6. CAPACIDAD DE ESPECIES VEGETALES PARA ACUMULAR PLOMO Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3), 2006 242 plomo la presentó N. tabacum, con 3.27 mg de Pb, en tan- to que R. communis y C. ciliaris sólo acumularon 2.78 y 2.22 mg de Pb, respectivamente. En el tratamiento con 1000 mg Pb kg–1 de suelo, R. communis acumuló 6.8 mg de Pb mientras que S. sudanense acumuló 2.8 veces me- nos (2.44 mg Pb). R. communis habita en diferentes zonas de la ciudad de Monterrey, lo que podría significar una ventaja desde el punto de vista económico y ecológico si se llegará a usar como agente remediador de suelos contami- nados. Cuadro 1. Análisis de varianza para la variable acumulación total de Pb en tejido vegetal. FV GL CM F calculada Especies (E) 5 14990010 862 ** Dosis (D) 2 22239672 1278 ** E x D 10 8946237 514 ** Error 51 17397 Total 71 ** = P ≤ 0.01; C V = 10.12 % En general, las especies presentaron una tendencia a acumular más Pb a medida que se incrementó la dosis de este elemento en el suelo (Figura 1). Sin embargo, N. ta- bacum y B. campestris no toleraron la dosis de 1000 mg de Pb kg-1 de suelo y murieron. Los mecanismos de fito- toxicidad de Pb están relacionados con cambios en la per- meabilidad de las membranas celulares, reacciones de gru- pos sulfihidrilo (-SH) con cationes y afinidad para reaccio- nar con grupos fosfatos y grupos activos de ADP o ATP (Alloway, 1990); este autor afirma que la toxicidad varía entre genotipo, y entre condiciones experimentales. Mien- tras tanto, los mecanismos de tolerancia al Pb se relacio- nan con un aislamiento de éste en el metabolismo de la cé- lula, que puede ser por retención en la pared celular (Mengel y Kirkby, 1982), o por fitoquelatinas de fórmula (ϒ-Glu-Cys)n- Gly, donde n = 21 (Rauser, 1995). Distribución de Pb en la planta (acumulación parte aérea vs. raíz) Se detectaron diferencias significativas en la distribu- ción de Pb en la planta entre especies, dosis de Pb, partes de la planta e interacciones (Cuadro 2). En el Cuadro 3 se observa que, en general, el porcentaje del total de Pb acu- mulado en la parte aérea se fue haciendo menor a medida que se incrementó la dosis de Pb aplicada al suelo. En el tratamiento testigo, el caso más extremo lo muestra S. su- danense con una acumulación de Pb de 97 % en parte aé- rea y 3 % en raíz. En el tratamiento 500 mg de Pb kg-1 de suelo la mayor acumulación de Pb en la parte aérea fue de N. tabacum, con 94 % (esto es, 3.08 mg de Pb en sus teji- dos aéreos). En el tratamiento de 1000 mg Pb kg-1 de suelo la mayor acumulación de Pb en la parte aérea fue de R. communis con 58 % (esto es, 3.94 mg de Pb en sus tejidos aéreos), que fue ligeramente superior a C. ciliaris y H. annus, especies que acumularon por igual 57 % del pomo en la parte aérea. S. sudanense fue la única especie que acumuló más Pb en raíz que en la parte aérea, 37 % y 63 %, respectivamente. Estos resultados muestran que la dis- tribución de Pb en la planta depende de factores como la dosis del metal en el suelo y de la especie vegetal. bc b c d a ab a b c + d ns 0 1 2 3 4 5 6 7 Testigo 500 1000 Tratamientos (mg Pb kg-1 de suelo) C. ciliaris H. annus R. communis N. tabacum S. sudanense B. campestris Figura 1. Acumulación total de Pb en seis especies vegetales cultivadas en suelo con tres dosis de 0, 500 y 1000 mg de Pb kg-1 de suelo (mg de Pb en tejido vegetal producido por planta, excepto S. sudanense que es de cuatro plantas). Medias con letras iguales, dentro de cada tratamiento de plomo en el suelo, son estadísticamente iguales (Tukey, 0.05). ns, in- dica que las seis especies vegetales obtuvieron resultados estadísticamen- te iguales. †Las plantas murieron en esta dosis. Cuadro 2. Análisis de varianza para la variable distribución de Pb en la planta (parte aérea vs. raíz). FV GL CM F calculada Especies (E) 5 1309 54** Dosis (D) 2 3970 163** Parte de la planta (P) 1 27869 1148** E x D 10 1550 64** E x P 5 4311 862** D x P 2 19477 9738** E x D x P 10 6349 634** Error 105 2549 24 Total 143 90640 ** = P ≤ 0.01; C V = 12.13 % Acumulación de Pb (mg Pb en tejido vegetal)
  • 7. RODRÍGUEZ, RODRÍGUEZ, DE LIRA, MARTÍNEZ Y LARA Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3), 2006 243 Cuadro 3. Comparación de medias de los porcentajes de Pb con respecto al total acumulado, en parte aérea y raíz, de las seis especies cultivadas con tres dosis de Pb aplicadas al suelo (0, 500, 1000 mg kg-1 suelo). Especie Testigo 500 1000 Parte aérea Raíz Parte aérea Raíz Parte aérea Raíz C. ciliaris 95 a 5 b 84 a 16 b 57 a 43 b H. annus 94 a 6 b 68 a 32 b 57 a 43 b R. communis 90 a 10 b 73 a 27 b 58 a 42 b N. tabacum 88 a 12 b 94 a 6 b † † S. sudanense 97 a 3 b 58 a 42 a 37 b 63 a B. campestris 83 a 17 b 41 a 59 a † † Medias con letra iguales por especie (fila), dentro de cada tratamiento de plomo en el suelo, son estadísticamente iguales (Tukey, 0.05). †Las plan- tas murieron en esta dosis. La mayor acumulación de Pb en parte aérea, mostrada en la mayoría de los casos, se atribuye a una mayor pro- ducción de materia seca de esta parte de la planta en com- paración con la raíz (Cuadro 4). Las especies que acumu- laron más Pb en la parte aérea en el tratamiento de 500 mg de Pb kg-1 produjeron en promedio 4.3 veces más materia seca aérea que en la raíz; mientras que C. ciliaris, en el tratamiento de 1000 mg de Pb kg-1 , fue casi cuatro veces más. Por su parte, las concentraciones de Pb en raíces fue- ron en promedio superiores a la parte aérea en 2 y 3.5 ve- ces, en los tratamiento de 500 y 1000 mg de Pb kg-1 , res- pectivamente. Lo anterior dio como resultado cocientes (acumulación) a favor de las partes aéreas de las plantas. La cualidad de acumular más Pb en la parte aérea que en la raíz es preferida en plantas que se usan con fines de fitorremediación, ya que esta parte es la que se cosecha y posteriormente se confina junto con los contaminantes que contienen. Al respecto, Brown et al. (1994) mencionaron que algunas especies podrían poseer un sistema interno muy específico de “bombear” metales de los tejidos radi- cales hacia los de la parte aérea. También se podría esti- mular la traslocación de Pb vía externa mediante el uso de quelatos como el EDTA (ácido etildiaminotriacético), co- mo reportaron Huang et al. (1997a). Estos autores encon- traron que la traslocación y la concentración de Pb en sa- via de maíz (Zea mays L.) se incrementó a 6.88 mg L-1 por la adición de 0.5 g de EDTA kg-1 de suelo y a 21.15 mg L-1 por la adición de 1 g de EDTA kg-1 de suelo, en com- paración con el testigo que obtuvo 0.15 mg Pb L-1 . Capacidad hiperacumuladora Ninguna de las seis especies logró concentrar más de 1000 mg de Pb kg-1 de materia seca, por lo que ninguna de ellas puede considerarse hasta el momento como especie hiperacumuladora de Pb, de acuerdo con el criterio esta- blecido por Baker y Brooks (1989). R. communis fue la especie que alcanzó la mayor concentración de Pb en el tratamiento de 1000 mg de Pb kg-1 , con 735 mg de Pb kg-1 de materia seca en parte aérea (Figura 2). La capacidad de hiperacumular Pb no es un proceso fácil. Hasta 1989 sólo se tenían reportadas cinco especies hiperacumuladoras de Pb: Armeria martima, Thlaspi rotundifolium, Thlaspi al- pestre, Alyssum wulfenianum y Polycarpaea synandra (Ba- ker y Brooks, 1989). Por su parte, Nanda Kumar et al. (1995) reportaron que Brassica juncea cv. 426308 logró concentrar hasta 34 500 mg de Pb kg-1 de materia seca. Extracción de Pb del suelo Si se considera que la cantidad de Pb acumulado en las plantas equivale a la cantidad de Pb extraído del suelo, los resultados aquí obtenidos permiten inferir, en primera ins- tancia, que la remediación de los suelos utilizados en este experimento requerirá de mucho tiempo. Además, el sis- tema parece ser poco eficiente, ya que por un lado N. ta- bacum logró extraer 3.27 mg de Pb, de los cuales 94 % fue acumulado en la parte aérea de la planta (Figura 1 y Cuadro 3); es decir, 3.08 mg de Pb en el tratamiento 500 mg de Pb kg-1 de suelo. Por su parte, R. communis extrajo 6.79 mg de Pb, los cuales 58 % (3.94 mg Pb) fue acumu- lado en la parte aérea de la planta (Figura 1 y Cuadro 3) en el tratamiento1000 mg de Pb kg-1 . Cuadro 4. Comparación de medias de la producción de materia seca en parte aérea y raíz, en las seis especies vegetales crecidas en tres dosis de Pb apli- cadas al suelo (0, 500, 1000 mg kg-1 suelo). Materia seca * Especie Testigo 500 1000 Parte aérea Raíz Parte aérea Raíz Parte aérea Raíz C. ciliaris 13 a 3.2 b 11 a 2.3 b 4 a 1.2 b H. annus 8 a 1.2 b 4.1 a 0.8 b 3.3 a 0.6 b R. communis 10.4 a 3.2 b 7.1 a 2.5 b 4.7 a 1.8 b N. tabacum 9.8 a 2.2 b 6.2 a 1.5 b † † S. sudanense 6 a 2.1 b 5.5 a 1.8 b 3.7 a 1.5 b B. campestris 2.7 a 0.2 b 1.2 a 0.1 b † † * g de materia seca contenida por planta (para S. sudanense es de cuatro plantas). Medias con letra iguales por fila, dentro de cada tratamiento de plomo en el suelo, son estadísticamente iguales (Tukey, 0.05). †Las plantas murieron en esta dosis.
  • 8. CAPACIDAD DE ESPECIES VEGETALES PARA ACUMULAR PLOMO Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3), 2006 244 Figura 2. Concentración de plomo en la parte aérea de seis especies ve- getales (mg de Pb kg-1 de materia seca). Sin embargo, hay dos aspectos a considerar. El prime- ro es que no se necesita reducir el contaminante a un valor de cero en un determinado suelo, sino reducirlo a niveles que no representen un riesgo mayor a la salud humana y al ambiente. Estos niveles dependerán de diversos factores, entre ellos los niveles máximos permisibles de Pb en el suelo establecidos por las legislaciones ambientales de cada país. El segundo es que las plantas sólo extraen el Pb bio- disponible del suelo, que en la mayoría de los casos es mí- nima con respecto al contenido total de plomo (< 4 mg Pb L-1 de solución del suelo, para un suelo que contiene 2500 mg Pb kg-1 ; Huang et al., 1997b). Bajo esta perspectiva, el extraer esas cantidades podría ser altamente significativo ya que esta última fracción representa la de mayor riesgo ambiental de manera directa, ya que el contaminante tiene la capacidad de ingresar a la cadena alimenticia vía absor- ción vegetal (Alloway, 1990). Por otro lado, es evidente la necesidad de ampliar las investigaciones para el desarrollo de esta tecnología. Con base en estos resultados, se recomienda enfatizar los es- fuerzos hacia la selección de un mayor número de especies vegetales de alta producción de biomasa aunada a la alta capacidad de absorción, traslocación y tolerancia de los metales pesados, que en conjunto le conferirán una alta habilidad para acumular metales pesados (como el Pb), y mayor extracción de los contaminantes del suelo. Otros puntos a considerar para la selección de especies vegetales biorremediadoras, serán: 1) Reducir al máximo la posibili- dad de un disturbio ecológico por la posible introducción de especies o genes de éstas a nuevos ecosistemas; 2) La posibilidad de ser cultivadas y de responder a prácticas agronómicas; y 3) Adaptación a la zona. También será de- cisivo el aumentar esas capacidades naturales, lo que se podría lograr mediante la biotecnología vegetal (Pilon- Smits y Pilon, 2002), así como de prácticas agronómicas como la fertilización nitrogenada, uso de quelatos y densi- dad poblacional óptima (Bennett et al., 1998; Kulli et al., 1999; Chaney et al., 2000) u otras técnicas. CONCLUSIONES Las seis especies vegetales ensayadas variaron en su capacidad de acumular plomo. El orden de tales capacida- des en el tratamiento de 500 mg de Pb kg-1 de suelo, fue- ron: N. tabacum (3.27 y 3.08 mg de Pb kg-1 en la materia seca total y en la parte aérea, respectivamente) > R. com- munis > C. ciliaris > S. sudanense > B. campestris > H. annus. Mientras en el tratamiento de 1000 mg de Pb kg-1 de suelo, fueron: R. communis (6.79 y 3.94 mg de Pb kg-1 en la materia seca total y en la parte aérea respectivamen- te) > S. sudanense > C. ciliaris > H. annus > N. tabacum = B. campestris. Basados en la literatura especializada, ninguna de las seis especies se puede clasificar como “hi- peracumuladora” de plomo. BIBLIOGRAFÍA Alloway B J (1990) Heavy Metals in Soils. John Wiley and Sons, Inc. New York. pp:7-28, 25-26, 120-121. Baker A J M, R R Brooks (1989) Terrestrial higher plants which hyper- accumulate metallic elements- A review of their distribution, ecology and phytochemistry. Biorecovery 1:81-126. Bennett F A, E K Tyler, R R Brooks, P E H Gregg, R B Stewart (1998) Fertilisation of hyperaccumulators to enhance their poten- tial for phytoremediation and phytomining. In: Plants that Hy- peraccumulate Heavy Metals. R R Brooks (ed). CAB Int. pp:249-259. Bowen H J K (1979) Environmental Chemistry of the Elements. Aca- demic Press, New York. 333 p. Brown R L, A J S Chaney, A J M Baker (1994) Phytoremediation potential of Thlaspi caerulescens and Bladder campion for zinc and cadmium contaminated soil. J. Environ. Qual. 23:1151- 1157. Chaney R L (1983) Zinc phytotoxicity. In: Zinc in Soils and Plants. A D Robson (ed). Kluwer Academic Pub. Dordrecht, The Nether- lands. pp:135-150. Chaney, R L , J A Ryan (1994) Risk Based Standards for Arsenic, Lead and Cadmium in Urban Soils. Dechema, Frankfurt, Germany. 130 p. Chaney, R L , Y M Li, S L Brown, F A Homer, M Malik, J S Angle, A J M Baker, R D Reeves, M Chin (2000) Improving metal hyperaccumulator wild plants to developed commercial phytoex- traction systems: approaches and progress. In: Phytoremediation of Contaminated Soil and Water. N Terry, G Bañuelos (eds). Lewis, Boca Raton, Florida. pp:129-158. 0 100 200 300 400 500 600 700 800 Especie 0 100 200 300 400 500 600 700 800 C.ciliaris H. annus R. communis N. tabacum S. sudanense B. campestris Testigo 500 mg Pb-1 de suelo 1000 mg Pb-1 de suelo Concentración (mg Pb kg -1 de material seca)
  • 9. RODRÍGUEZ, RODRÍGUEZ, DE LIRA, MARTÍNEZ Y LARA Rev. Fitotec. Mex. Vol. 29 (3), 2006 245 Cooper E M, J T Sims, S D Cunningham, J W Huang, W R Berti (1999) Chelate-assisted phytoextraction of lead from contami- nates soils. J. Environ. Qual. 28:1709-1719. Cunningham S D, W. R. Berti, J W Huang (1995) Phytoremediation of contaminated soils. Biotechnology 13:393-397. Depledge M H, J M Weeks, P Bjerregaard (1994) Heavy metals. In: Handbook of Ecotoxicology. P Calow (ed). Blackwell Publ. Cambridge. pp:79-105. Diario Oficial de la Federación de los Estados Unidos Mexicanos (1988) Ley General de Equilibrio Ecológico y la Protección al Ambiente. Artículo 134. Publicada el 28 de enero de 1988. Ebbs S D, M M Lasat, D J Brady, J E Cornish, R Gordon, L V Ko- chian (1997) Phytoextraction of cadmium and zinc from conta- minated soil. J. Environ. Qual. 26:1424-1430. Huang J W, J Chen, S D Cunningham (1997a) Phytoextraction of lead from contaminated soils. In: Phytoremediation of Soils and Wa- ter Contaminants. E L Kruger, T A Anderson, J R Coats (eds). Am. Chem. Soc. Washington, D.C. pp:283-298. Huang J, J Chen, W R Berti, S D Cunningham (1997b) Phytoreme- diation of lead-contaminated soils: Role of synthetic chelates in lead phytoextraction. Environ. Sci. & Technol. 31:800-805. Juárez N (1999) Supera plomo en calles a balcones de Anáhuac. In: Dia- rio El Norte, sección local. 26 de agosto. Monterrey, Nuevo León, México. Kulli B, M Balmer, R Krebs, B Lothenbach, G Geiger, R. Schulin (1999) The influence of nitriloacetate on heavy metal uptake of lettuce and ryegrass. J. Environ. Qual. 28:1699-1705. McGrath S P (1998) Phytoextraction for soil remediation. In: Plants that Hyperaccumulate Heavy Metals. R R Brooks (ed). CAB Int. pp:261-287. Mengel K, E A Kirkby (1982) Principles of Plant Nutrition. Int. Potash Inst. Bern, Switzerland. 655 p. Mench M, J Tancogne, A Gomez, C Juste (1989) Cadmium bioaval- ability to Nicotiana tabacum L., Nicotiana rustica L., and Zea mays L. grown in soil amended with cadmium nitrate. Biol. Fer- til. Soils 8:48-53. Nanda Kumar P B A, V Dushenkov, H Motto, A I Raskin (1995) Phy- toextraction: The use of plants to remove heavy metals from soils. Environ. Sci. & Technol. 29:1232-1238. Olivares S E (1994) Paquete de Diseños Experimentales FAUANL. Ver- sión 2.5. Facultad de Agronomía. UANL. Marín, N. L. México. Pais István, J B Jones (1997) The Handbook of Trace Elements. CRC Press, Boca Raton, FL. 223 p. Pilon-Smits, M Pilon (2002) Phytoremediation of metals using trans- genic plants. Crit. Rev. Plant Sci. 21:439–456. Rauser W E (1995) Phytochelatins and related peptides. Plant Phy- siol.109:1141-1149. Reyes Castañeda P (1992) Diseño de Experimentos Aplicados. Ed. Tril- las. pp:302-309. Rodríguez F H, J Rodríguez Absi (2002) Métodos de Análisis de Suelos y Plantas. Criterios de Interpretación. Ed. Trillas. México, D. F. 196 p. Santillana J R (2005) Immsa: remediación de un año pero con resultados inmediatos. In: Diario El Sol de San Luis, sección local. 16 de julio del 2005. San Luis Potosí, S. L. P. México. Smith L A, A Means, B Chen, C C Alleman, J S Chapman, Jr Tix- ier, S E Brauning, A R Gavaskar, M D Royer (1995) Reme- dial options for metals-contaminated sites. Lewis Pub. Boca Ra- ton, Florida. 221 p. Temmerman L O, M Hoenig, P O Scokart (1984) Determination of “normal” levels and upper limit values of trace elements in soils. Z. Pflanzen. Bodenk. 147: 687-694. USEPA (U. S. Environmental Protection Agency) (1996) Soil Screen- ing Guidance. Technical Background Document. U. S. Gov. Print. Office, Washington, D. C. USEPA Rep. 540/R-95/128. View publication stats View publication stats