1. ENZIMAS
MITOCONDRIALES
Laura Quintero
Camila Arévalo
Claudia Castro
Margarita Suarez
Karoll Ávila

3. ENZIMA CITOCROMO
OXIDASA
Pertenece a la clase Óxido-reductasa.
 Última enzima de la cadena de transporte de electrones, recibiendo
un electrón de cada uno de las cuatro moléculas de citocromo c;
después, los transfiere a una molécula de oxígeno, reduciéndola a
dos moléculas de agua. Acoplada A este proceso, se produce una
translocación de protones a través de la membrana, lo cual genera
un gradiente electroquímico que la enzima ATP sintasa emplea para
sintetizar adenosín trifosfato (ATP).
 La reacción catalizada por la enzima puede resumirse como sigue (el
término: 4 H+FUERA Hace referencia a protones expulsados al espacio
intermembrana mitocondrial).
4 Fe2+-citocromo C+ 8H+
in+ O2 4 Fe3+-citocromo C+ 2 H2O + 4 H+

4. DESHIDROGENASA
LACTICA
La deshidrogenasa láctica (DHL) es una enzima (proteína capaz de
"acelerar" una reacción química) que se encuentra en casi todos los
tejidos del cuerpo. La DHL está principalmente involucrada en
la producción de energía en las células, lo que explica su amplia
distribución
En primer lugar entra el NADH seguido por el piruvato y tras el paso
catalítico se libera secuencialmente lactato y NAD+.
ésta reacción puede producirse en dirección contraria en función de
la relación de concentraciones de sustratos y productos. Esto se
manifiesta con claridad en el Ciclo de Cori: mientras que en el
músculo esquelético, especialmente durante el ejercicio físico
intenso, la reacción se produce en la dirección descrita, en el hígado
y el músculo cardiaco (metabolismo oxidativo), el lactato procedente
del músculo esquelético se re oxida a piruvato para su utilización por
la gluconeogénesis y por el ciclo de Krebs.

6. REACTIVOS USADOS
 Buffer de fosfatos, succinato de sodio, cianuro de potasio, azul de
metileno y malonato de sodio.

7. BUFFER DE FOSFATOS
Se emplea como vehículo neutro para células, ya que no modifica el
perfil de expresión y funcionamiento celular normal. El uso de esta
solución es muy común para lavar células a través de centrifugación.
El PBS puede emplearse como diluyente para métodos de desecación
de biomoléculas, ya que las moléculas de agua presentes en el PBS se
adhieren alrededor de la biomolécula y permiten inmovilizarla a una
superficie sólida. Esta monocapa de agua evita que la biomolécula sea
desnaturalizada (o sufra modificaciones conformacionales) en el
proceso de desecación.

8. SUCCINATO DE SODIO
En forma de anión succinato, interviene en el ciclo de
Krebs, reduciendo el coenzima FAD y permitiendo así la consecución
de energía por fosforilación oxidativa tras la cesión de electrones a
intermediarios de la cadena de transporte de electrones, según la
reacción siguiente:
Succinato + FAD → fumarato + FADH2

9. CIANURO DE POTASIO
Inhibe irreversiblemente este complejo enzimático y se interrumpe el
transporte de electrones produciéndose una cianosis celular.

10. AZUL DE METILENO
Evidencia el proceso de las enzimas, que es coloreado cuando se
encuentra oxidado e incoloro cuando se reduce, en la medida en que
se re oxida la coenzima FAD.

11. MALONATO DE SODIO
El malonato es un inhibidor de la respiración celular, porque se une
al sitio activo de la succinato deshidrogenasa en el ciclo del ácido
cítrico, pero no reacciona, compitiendo con el succinato. En la
reacción de fosforilación oxidativa, el malonato es un inhibidor del
complejo II que, nuevamente, contiene succinato deshidrogenasa.