Bioseguridad

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Medicina & Laboratorio, Volumen 14, Números 1-2, 2008
Bioseguridad
Manual de bioseguridad en el laboratorio
Organización Mundial de la Salud
Parte 1 de 6
Prefacio
Agradecimientos
1. Principios generales
Introducción
PARTE I Directrices en materia de bioseguridad
2. Evaluación del riesgo microbiológico
Muestras para las que se dispone de información limitada
Evaluación de riesgos y microorganismos genéticamente modificados
3. Laboratorios básicos: niveles de bioseguridad 1 y 2
Código de prácticas
Diseño e instalaciones del laboratorio
Material de laboratorio
Vigilancia médica y sanitaria
Capacitación
Manipulación de desechos
Seguridad química, eléctrica y radiológica, protección contra incendios
y material de seguridad
4. El laboratorio de contención: nivel de bioseguridad 3
5. El laboratorio de contención máxima: nivel de bioseguridad 4
6. Animalarios
Animalarios: nivel de bioseguridad 1
Invertebrados
7. Directrices para la puesta en servicio de laboratorios e instalaciones
8. Directrices para la certificación de laboratorios e instalaciones

Manual de Bioseguridad en el Laboratorio
50
Prefacio
H
ace tiempo que la Organización Mundial de la Salud (OMS) reconoce que la seguridad
y, en particular, la seguridad biológica son importantes cuestiones de interés internacio-
nal. La OMS publicó la primera edición del Manual de bioseguridad en el laboratorio
en 1983. En ella se alentaba a los países a aceptar y aplicar conceptos básicos en materia de
seguridad biológica y a elaborar códigos nacionales de prácticas para la manipulación sin riesgo
de microorganismos patógenos en los laboratorios que se encuentran dentro de sus fronteras
nacionales. Desde 1983, muchos países han seguido la orientación especializada que se ofrece
en el manual para elaborar esos códigos de prácticas. En 1993 se publicó una segunda edición
del manual.
En esta tercera edición del manual, la OMS sigue proporcionando liderazgo internacional en
materia de bioseguridad al abordar los aspectos de la seguridad y la protección biológica que se
plantean en el nuevo milenio. A lo largo de toda la publicación se subraya la importancia de la
responsabilidad personal. Se han incluido nuevos capítulos que se ocupan de la evaluación de
riesgos, el uso de las tecnologías del ADN recombinante en condiciones de seguridad y el trans-
porte de material infeccioso. Los recientes acontecimientos mundiales han puesto de manifiesto
la existencia de nuevas amenazas para la salud pública derivadas de la liberación o el uso inde-
bido deliberados de agentes y toxinas microbianos. Por consiguiente, en la presente edición del
manual también se introduce el concepto de bioprotección, es decir, la protección del material
microbiológico contra el robo, la pérdida o la desviación para evitar que esos agentes se puedan
utilizar de forma indebida con el fin de atentar contra la salud pública. Esta edición también con-
tiene información sobre seguridad tomada de Safety in health-care laboratories [1], que publicó
la OMS en 1997.
La tercera edición del Manual de bioseguridad en el laboratorio de la OMS será de utilidad
como referencia y orientación para los países que acepten el reto de elaborar y establecer códi-
gos nacionales de prácticas con miras a proteger esos bienes micro biológicos y al mismo tiempo
garantizar su disponibilidad para fines clínicos, de investigación y epidemiológicos.
Dr. A. Asamoah-Baah
Subdirector General
Enfermedades Transmisibles
Ginebra (Suiza)

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Agradecimientos
La preparación de la presente edición del Manual de bioseguridad en el laboratorio ha sido
posible gracias a las contribuciones de las siguientes personas, a las que se reconoce con gratitud
la aportación de sus conocimientos especializados:
Dr. W. Emmett Barkley. Instituto Médico Howard Hughes, Chevy Chase, MDƒƒ
(EE.UU.).
Dr. Murray L. Cohen (jubilado). Centros para el Control y la Prevención deƒƒ
Enfermedades, Atlanta, GA (EE.UU.).
Dra. Ingegerd Kallings. Instituto Sueco de Lucha contra las Enfermedades Infecciosas, Es-ƒƒ
tocolmo (Suecia).
Sra. Mary Ellen Kennedy. Consultora especializada en bioseguridad, Ashton, Ontarioƒƒ
(Canadá).
Sra. Margery Kennett (jubilada). Laboratorio de Referencia de Victoria para lasƒƒ
Enfermedades Infecciosas, North Melbourne (Australia).
Dr. Richard Knudsen. Oficina de Salud y Seguridad, Centros para el Control y laƒƒ
Prevención de Enfermedades, Atlanta, GA (EE.UU.).
Dra. Nicoletta Previsani. Programa de Bioseguridad, Organización Mundial de laƒƒ
Salud, Ginebra (Suiza).
Dr. Jonathan Richmond (jubilado). Oficina de Salud y Seguridad, Centros para elƒƒ
Control y la Prevención de Enfermedades, Atlanta, GA (EE.UU.).
Dr. Syed A. Sattar. Facultad de Medicina, Universidad de Ottawa, Ottawa, Ontarioƒƒ
(Canadá).
Dra. Deborah E. Wilson, División de Salud y Seguridad Ocupacional, Institutosƒƒ
Nacionales de la Salud,Washington D.C. (EE.UU.).
Dr. Riccardo Wittek, Instituto de Biología Animal, Universidad de Lausana, Lausanaƒƒ
(Suiza).
La OMS expresa asimismo su gratitud a las siguientes personas por su asistencia:
Sra. Maureen Best, Oficina de Seguridad en el Laboratorio, Health Canada, Ottawaƒƒ
(Canadá).
Dr. Mike Catton, Laboratorio de Referencia de Victoria para las Enfermedadesƒƒ
Infecciosas, North Melbourne (Australia).
Dra. Shanna Nesby, Oficina de Salud y Seguridad, Centros para el Control y laƒƒ
Prevención de Enfermedades, Atlanta, GA (EE.UU.).
Dr. Stefan Wagener, Centro de Ciencias de la Salud Humana y Animal del Canadá,ƒƒ
Winnipeg (Canadá).
Los redactores y revisores desean reconocer también las aportaciones originales de los nume-
rosos profesionales cuya labor quedó recogida en las ediciones primera y segunda del Manual de
bioseguridad en el laboratorio y en Safety in health-care laboratories [1], publicada por la OMS
en 1997.

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1. Principios generales
Introducción
A lo largo de todo este manual, se hace referencia a los peligros relativos que entrañan los mi-
croorganismos infecciosos, clasificados por grupos de riesgo (grupos de riesgo 1, 2, 3 y 4 (OMS)).
Esta clasificación por grupos de riesgo se utilizará exclusivamente para el trabajo de laboratorio.
En el cuadro 1 se describen esos grupos de riesgo.
Los laboratorios se clasifican como sigue: laboratorio básico – nivel de bioseguridad 1; labo-
ratorio básico – nivel de bioseguridad 2; laboratorio de contención – nivel de bioseguridad 3,
y laboratorio de contención máxima – nivel de bioseguridad 4. Las designaciones del nivel de
bioseguridad se basan en una combinación de las características de diseño, construcción, medios
de contención, equipo, prácticas y procedimientos de operación necesarios para trabajar con
agentes patógenos de los distintos grupos de riesgo. En el cuadro 2 se relacionan, no se equipa-
ran, los grupos de riesgo con el nivel de bioseguridad de los laboratorios destinados al trabajo con
microorganismos de cada uno de esos grupos.
Los países o regiones deberán elaborar una clasificación nacional o regional de los microorga-
nismos en grupos de riesgo, teniendo en cuenta los siguientes factores:
La patogenicidad del microorganismo;1.
El modo de transmisión y la gama de huéspedes del microorganismo. Estos dos factores2.
Cuadro 1. Clasificación de los microorganismos infecciosos por grupos de riesgo
Grupo de riesgo 1 (riesgo individual y poblacional escaso o nulo).
Microorganismos que tienen pocas probabilidades de provocar enfermedades en el ser humano o los animales.
Grupo de riesgo 2 (riesgo individual moderado, riesgo poblacional bajo).
Agentes patógenos que pueden provocar enfermedades humanas o animales pero que tienen pocas probabilidades de
entrañar un riesgo grave para el personal de laboratorio, la población, el ganado o el medio ambiente. La exposición en
el laboratorio puede provocar una infección grave, pero existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces y el riesgo
de propagación es limitado.
Grupo de riesgo 3 (riesgo individual elevado, riesgo poblacional bajo).
Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades humanas o animales graves, pero que de ordinario no se propa-
gan de un individuo a otro. Existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces.
Grupo de riesgo 4 (riesgo individual y poblacional elevado).
Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser humano o los animales y que se transmiten
fácilmente de un individuo a otro, directa o indirectamente. Normalmente no existen medidas preventivas y terapéuticas
eficaces.
Cuadro 2. Relación de los grupos de riesgo con los niveles de bioseguridad, las prácticas y el equipo
Grupo de
riesgo
Nivel de
bioseguridad
Tipo de laboratorio Prácticas de laboratorio Equipo de seguridad
1
Básico
Nivel 1
Enseñanza básica,
investigación
TMA
Ninguno; trabajo en mesa de
laboratorio al descubierto
2
Básico
Nivel 2
Servicios de atención
primaria; diagnóstico,
investigación
TMA y ropa protectora;
señal de riesgo biológico
Trabajo en mesa al descubierto
y CBS para posibles aerosoles
3
Contención
Nivel 3
Diagnóstico especial,
investigación
Prácticas de nivel 2 más
ropa especial, acceso
controlado y flujo direc-
cional del aire
CBS además de otros medios
de contención primaria para
todas las actividades
4
Contención máxima
Nivel 4
Unidades de patóge-
nos peligrosos
Prácticas de nivel 3 más
cámara de entrada con
cierre hermético, salida
con ducha y eliminación
especial de residuos
CBS de clase III o trajes presu-
rizados junto con CBS de clase
II, autoclave de doble puerta (a
través de la pared), aire filtrado
TMA: técnicas microbiológicas apropiadas (véase la parte IV del presente manual); CBS: cámara de seguridad biológica.

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pueden depender de los niveles de inmunidad existentes en la población local, la densidad
y los movimientos de la población de huéspedes, la presencia de vectores apropiados y el
nivel de higiene ambiental.
La disponibilidad local de medidas preventivas eficaces, entre las que cabe citar la profilaxis3.
mediante la administración de antisueros (inmunización pasiva) o vacunas; las medidas de
higiene (higiene de los alimentos y del agua, por ejemplo), y la lucha contra los reservorios
animales o los artrópodos vectores.
La disponibilidad local de tratamientos eficaces, que comprende la inmunización pasiva, la4.
vacunación posexposición y la administración de antimicrobianos, antivíricos y quimiotera-
pia, y debe tener en cuenta la posibilidad de que aparezcan cepas farmacorresistentes.
La asignación de un agente a un nivel de bioseguridad para el trabajo de laboratorio debe
basarse en una evaluación del riesgo. Esa evaluación tendrá en cuenta el grupo de riesgo, además
de otros factores, con el fin de determinar el nivel de bioseguridad más apropiado. Por ejemplo,
un agente patógeno asignado al grupo de riesgo 2 en general requerirá instalaciones, equipo,
prácticas y procedimientos del nivel de bioseguridad 2 para trabajar sin riesgo. No obstante, si
ciertos experimentos entrañan la generación de aerosoles con elevadas concentraciones, quizá
sea más apropiado el nivel de bioseguridad 3 para proporcionar el grado necesario de seguridad,
pues garantiza una mayor contención de los aerosoles en el entorno de trabajo del laboratorio.
Por consiguiente, el nivel de bioseguridad asignado a un trabajo concreto dependerá del juicio
profesional basado en la evaluación del riesgo, y no en la asignación automática de un nivel de
bioseguridad con arreglo al grupo de riesgo particular al que pertenezca el agente patógeno con
el que se va a trabajar (véase el capítulo 2).
En el cuadro 3 se resumen los requisitos de las instalaciones en los cuatro niveles de biose-
guridad.
Cuadro 3. Resumen de los requisitos por nivel de bioseguridad
Nivel de bioseguridad
1 2 3 4
Aislamientoa
del laboratorio No No Sí Sí
Sala que pueda precintarse para ser descontaminada No No Sí Sí
Ventilación:
Flujo de aire hacia el interior‚‚
Sistema de ventilación controlada‚‚
Salida de aire con HEPA‚‚
No
No
No
Conveniente
Conveniente
No
Sí
Sí
Sí/Nob
Sí
Sí
Sí
Entrada de doble puerta No No Sí Sí
Cámara de cierre hermético No No No Sí
Cámara de cierre hermético con ducha No No No Sí
Antesala No No Sí --
Antesala con ducha No No Sí/Noc
No
Tratamiento de efluentes No No Sí/Noc
Sí
Autoclave:
En el local‚‚
En la sala de trabajo‚‚
De doble puerta‚‚
No
No
No
Conveniente
No
No
Sí
Conveniente
Conveniente
Sí
Sí
Sí
CSB No Conveniente Sí Sí
Capacidad de vigilancia de la seguridad del personald
No No Conveniente Sí
a
Aislamiento ambiental y funcional respecto del tráfico general.
b
Según la localización de la salida de aire (véase el capítulo 4).
c
Según cuáles sean los agentes empleados en el laboratorio.
d
Por ejemplo, ventana, sistema de televisión en circuito cerrado, comunicación en dos sentidos.
HEPA: filtración de partículas aéreas de gran eficiencia (del inglés High-Efficiency Particulate Air); CSB: cámara de
seguridad biológica.

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De este modo, la asignación de un nivel de bioseguridad tiene en consideración el microor-
ganismo (agente patógeno) utilizado, las instalaciones disponibles y el equipo, las prácticas y los
procedimientos necesarios para trabajar con seguridad en el laboratorio.
PARTE I. Directrices en materia de bioseguridad
2. Evaluación del riesgo microbiológico
El pilar de la práctica de la bioseguridad es la evaluación del riesgo. Aunque existen muchas
herramientas para ayudar a evaluar el riesgo que comporta un procedimiento o un experimento
determinado, el componente más importante es el juicio profesional. Las evaluaciones del riesgo
deben ser efectuadas por las personas que mejor conozcan las características peculiares de los
organismos con los que se va a trabajar, el equipo y los procedimientos que van a emplearse, los
modelos animales que pueden utilizarse y el equipo y los medios de contención disponibles. El
director o investigador principal del laboratorio es el responsable de asegurar que se realicen de
modo oportuno las evaluaciones del riesgo más apropiadas y de colaborar estrechamente con el
comité de seguridad y el personal de bioseguridad de la institución con el fin de velar por que se
disponga del equipo y los medios apropiados para el trabajo que está previsto llevar a cabo. Una
vez terminadas, las evaluaciones del riesgo deben ser consultadas periódicamente y revisadas
cada vez que sea preciso, teniendo en cuenta la obtención de nuevos datos que tengan alguna
influencia en el grado de riesgo y toda nueva información pertinente que aparezca en las publi-
caciones científicas.
Una de las herramientas más útiles de que se dispone para llevar a cabo una evaluación del
riesgo microbiológico es la asignación de los agentes microbiológicos a uno de los grupos de
riesgo (véase el capítulo 1). Sin embargo, la mera consulta del grupo de riesgo a que pertenece
cierto agente no basta para realizar una evaluación del riesgo. Otros factores que hay que tener
en cuenta, según proceda, son los siguientes:
La patogenicidad del agente y la dosis infectiva.1.
El resultado potencial de la exposición.2.
La vía natural de infección.3.
Otras vías de infección, derivadas de manipulaciones en el laboratorio (parenteral, aérea,4.
por ingestión).
La estabilidad del agente en el ambiente.5.
La concentración del agente y el volumen del material concentrado que va a manipular-6.
se.
La presencia de un huésped apropiado (personas o animales).7.
La información disponible procedente de estudios en animales y de notificaciones de in-8.
fecciones adquiridas en el laboratorio o de informes clínicos.
La actividad prevista en el laboratorio (tratamiento con ultrasonidos, producción de aero-9.
soles, centrifugación, entre otras).
Toda manipulación genética del microorganismo que pueda ampliar su gama de huéspedes10.
o su sensibilidad a los regímenes terapéuticos eficaces conocidos (véase el capítulo 16).

55
Disponibilidad local de intervenciones profilácticas o terapéuticas eficaces.11.
Sobre la base de la información obtenida durante la evaluación de riesgos, se podrá asignar
un nivel de bioseguridad al trabajo previsto, seleccionar el equipo de protección apropiado para
el personal, y elaborar procedimientos normalizados de trabajo que incorporen otras intervencio-
nes de seguridad con el fin de velar por la máxima seguridad en la realización del trabajo.
Muestras para las que se dispone de información limitada
El procedimiento de evaluación del riesgo descrito anteriormente funciona bien cuando se
dispone de información suficiente. Sin embargo, en algunas situaciones no hay información sufi-
ciente para llevar a cabo una evaluación apropiada de los riesgos, como ocurre con las muestras
clínicas o epidemiológicas recogidas sobre el terreno. En esos casos, conviene que la manipula-
ción de las muestras se realice con prudencia.
Deben adoptarse precauciones normalizadas [2] y emplearse protecciones de barrera1.
(guantes, batas, protección ocular) cada vez que se obtengan muestras de pacientes.
Las prácticas y los procedimientos básicos de contención del nivel de bioseguridad 2 deben2.
ser el requisito mínimo para la manipulación de muestras.
El transporte de muestras debe respetar las normas y reglamentos nacionales o internacio-3.
nales.
Quizá se disponga de alguna información que ayude a determinar el riesgo que entraña ma-
nipular esas muestras:
Datos médicos sobre el paciente.1.
Datos epidemiológicos (datos de morbilidad y mortalidad, presunta vía de transmisión,2.
otros datos de la investigación de brotes).
Información sobre el origen geográfico de la muestra.3.
Si se producen brotes de enfermedad de etiología desconocida, las autoridades nacionales
competentes o la OMS pueden elaborar directrices particulares apropiadas que publicarán en
la Web (como se hizo en 2003 en el caso del síndrome respiratorio agudo severo) para indicar
cómo deben prepararse las muestras para el transporte y en qué nivel de bioseguridad deben
analizarse.
Evaluación de riesgos y microorganismos genéticamente
modificados
En el capítulo 16 se ofrece un examen detallado de la evaluación de los riesgos de los orga-
nismos genéticamente modificados.
3. Laboratorios básicos: niveles de bioseguridad 1 y 2
Las orientaciones y recomendaciones que se ofrecen en el presente manual a título de requi-
sitos mínimos para los laboratorios de todos los niveles de bioseguridad atañen a los microorga-
nismos de los grupos de riesgo 1 a 4. Aunque algunas precauciones pueden parecer innecesarias
para algunos organismos del grupo de riesgo 1, son convenientes con fines de capacitación, para
fomentar el uso de técnicas microbiológicas apropiadas (es decir, seguras).

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Todos los laboratorios de diagnóstico y de atención de salud (de salud pública, clínicos o de
hospital) deben estar diseñados para cumplir, como mínimo, los requisitos del nivel de biose-
guridad 2. Dado que ningún laboratorio puede ejercer un control absoluto sobre las muestras
que recibe, el personal puede verse expuesto a organismos de grupos de riesgo más altos de lo
previsto. Esa posibilidad debe tenerse presente en la elaboración de los planes y las políticas de
seguridad. En algunos países se exige que los laboratorios clínicos estén acreditados. En general,
siempre deben adoptarse y aplicarse las precauciones normalizadas [2].
Las directrices para laboratorios básicos – niveles de bioseguridad 1 y 2 que aquí se expo-
nen son completas y detalladas, ya que son fundamentales para todo tipo de laboratorios. Las
directrices para los laboratorios de contención – nivel de bioseguridad 3 y los laboratorios de
contención máxima – nivel de bioseguridad 4 que se ofrecen más adelante (capítulos 4 y 5) son
modificaciones y adiciones a estas directrices y están concebidas para trabajar con los agentes
patógenos más peligrosos (de mayor riesgo).
Este código es una enumeración de las prácticas y los procedimientos de laboratorio esencia-
les que constituyen la base de las técnicas microbiológicas apropiadas. En muchos laboratorios y
programas nacionales, este código puede utilizarse para elaborar una guía escrita de prácticas y
procedimientos para el trabajo de laboratorio en condiciones de seguridad.
Cada laboratorio debe adoptar un manual de seguridad o de trabajo en el que se identifiquen
los riesgos conocidos y potenciales y se especifiquen las prácticas y los procedimientos enca-
minados a eliminar o reducir al mínimo esos riesgos. Las técnicas microbiológicas apropiadas
son fundamentales para la seguridad en el laboratorio y no pueden sustituirse por equipo de
laboratorio especializado, que no pasa de ser un complemento. A continuación se exponen los
conceptos más importantes.
Acceso
El símbolo y signo internacional de peligro biológico (1. figura 1) deberá colocarse en las
puertas de los locales donde se manipulen microorganismos del grupo de riesgo 2 o supe-
rior.
Sólo podrá entrar en las zonas de trabajo del laboratorio el personal autorizado.2.
Las puertas del laboratorio se mantendrán cerradas.3.
No se autorizará ni permitirá la entrada de niños en las zonas de trabajo del laboratorio.4.
El acceso a los locales que alberguen animales habrá de autorizarse especialmente.5.
No se permitirá el acceso al laboratorio de animales que no sean objeto del trabajo del6.
laboratorio.
Protección personal
Se usarán en todo momento monos, batas o uniformes especiales para el trabajo en el1.
laboratorio.
Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que puedan en-2.
trañar contacto directo o accidental con sangre, líquidos corporales y otros materiales po-
tencialmente infecciosos o animales infectados. Una vez utilizados, los guantes se retirarán

57
de forma aséptica y a continuación se
lavarán las manos.
El personal deberá lavarse las manos des-3.
pués de manipular materiales y animales
infecciosos, así como antes de abando-
nar las zonas de trabajo del laboratorio.
Se usarán gafas de seguridad, viseras u4.
otros dispositivos de protección cuando
sea necesario proteger los ojos y el rostro
de salpicaduras, impactos y fuentes de
radiación ultravioleta artificial.
Estará prohibido usar las prendas protec-5.
toras fuera del laboratorio, por ejemplo
en cantinas, cafeterías, oficinas, bibliote-
cas, salas para el personal y baños.
No se usará calzado sin puntera.6.
En las zonas de trabajo estará prohibido7.
comer, beber, fumar, aplicar cosméticos
o manipular lentes de contacto.
Estará prohibido almacenar alimentos o8.
bebidas para consumo humano en las
zonas de trabajo del laboratorio.
La ropa protectora de laboratorio no se guardará en los mismos armarios o taquillas que la9.
ropa de calle.
Procedimientos
Estará estrictamente prohibido pipetear con la boca.1.
No se colocará ningún material en la boca ni se pasará la lengua por las etiquetas.2.
Todos los procedimientos técnicos se practicarán de manera que se reduzca al mínimo la3.
formación de aerosoles y gotículas.
Se limitará el uso de jeringuillas y agujas hipodérmicas, que no se utilizarán en lugar de4.
dispositivos de pipeteo ni con ningún fin distinto de las inyecciones por vía parenteral o la
aspiración de líquidos de los animales de laboratorio.
Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a materiales infecciosos5.
se comunicarán al supervisor del laboratorio. Se mantendrá un registro escrito de esos
accidentes e incidentes.
Se elaborará y seguirá un procedimiento escrito para la limpieza de todos los derrames.6.
Los líquidos contaminados deberán descontaminarse (por medios químicos o físicos) antes7.
de eliminarlos por el colector de saneamiento. Puede ser necesario un sistema de trata-
miento de efluentes, según lo que indique la evaluación de riesgos del agente con el que
se esté trabajando.
Figura 1. Señal de advertencia de peligro biológico para las
puertas del laboratorio.

58
Los documentos escritos que hayan de salir del laboratorio se protegerán de la contamina-8.
ción mientras se encuentren en éste.
Zonas de trabajo del laboratorio
El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no relacionados con el1.
trabajo.
Las superficies de trabajo se descontaminarán después de todo derrame de material poten-2.
cialmente peligroso y al final de cada jornada de trabajo.
Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados deberán ser descontaminados antes3.
de eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a utilizar.
El embalaje y el transporte de material deberán seguir la reglamentación nacional o inter-4.
nacional aplicable.
Las ventanas que puedan abrirse estarán equipadas con rejillas que impidan el paso de5.
artrópodos.
Gestión de la bioseguridad
I1. ncumbirá al director del laboratorio (la persona que tiene responsabilidad inmediata res-
pecto del laboratorio) garantizar la elaboración y la adopción de un plan de gestión de la
bioseguridad y de un manual de seguridad o de operación.
El supervisor del laboratorio (que dependerá del director) velará por que se proporcione2.
capacitación periódica en materia de seguridad en el laboratorio.
Se informará al personal de los riesgos especiales y se le exigirá que lea el manual de se-3.
guridad o de trabajo y siga las prácticas y los procedimientos normalizados. El supervisor
del laboratorio se asegurará de que todo el personal los comprenda debidamente. En el
laboratorio estará disponible una copia del manual de seguridad o de trabajo.
Habrá un programa de lucha contra los artrópodos y los roedores.4.
Se ofrecerá a todo el personal en caso de necesidad un servicio apropiado de evaluación,5.
vigilancia y tratamiento médico, y se mantendrán los debidos registros médicos.
Al diseñar el laboratorio y asignarle determinados tipos de trabajo, se prestará especial aten-
ción a aquellas condiciones que se sepa que plantean problemas de seguridad. Entre ellas figu-
ran:
La formación de aerosoles.1.
El trabajo con grandes cantidades o altas concentraciones de microorganismos.2.
El exceso de personal o de material.3.
La infestación por roedores y artrópodos.4.
La entrada de personas no autorizadas.5.

59
El circuito de trabajo: utilización de muestras y reactivos concretos.6.
En las figuras 2 y 3, respectivamente, aparecen ejemplos de diseños de laboratorios de los
niveles de bioseguridad 1 y 2.
Características de diseño
Se dispondrá de espacio suficiente para realizar el trabajo de laboratorio en condiciones de1.
seguridad y para la limpieza y el mantenimiento.
Las paredes, los techos y los suelos serán lisos, fáciles de limpiar, impermeables a los líqui-2.
dos y resistentes a los productos químicos y desinfectantes normalmente utilizados en el
laboratorio. Los suelos serán antideslizantes.
Las superficies de trabajo serán impermeables y resistentes a desinfectantes, ácidos, álcalis,3.
disolventes orgánicos y calor moderado.
La iluminación será adecuada para todas las actividades. Se evitarán los reflejos y brillos4.
molestos.
El mobiliario debe ser robusto y debe quedar espacio entre mesas, armarios y otros mue-5.
bles, así como debajo de los mismos, a fin de facilitar la limpieza.
Habrá espacio suficiente para guardar los artículos de uso inmediato, evitando así su acu-6.
mulación desordenada sobre las mesas de trabajo y en los pasillos. También debe preverse
espacio para el almacenamiento a largo plazo, convenientemente situado fuera de las zo-
nas de trabajo.
Se preverán espacio e instalaciones para la manipulación y el almacenamiento seguros de7.
disolventes, material radiactivo y gases comprimidos y licuados.
Los locales para guardar la ropa de calle y los objetos personales se encontrarán fuera de8.
las zonas de trabajo del laboratorio.
Los locales para comer y beber9.
y para descansar se dispondrán fuera
de las zonas de trabajo del laborato-
rio.
En cada sala del laboratorio ha-10.
brá lavabos, a ser posible con agua
corriente, instalados de preferencia
cerca de la salida.
Las puertas irán provistas de mi-11.
rillas y estarán debidamente protegi-
das contra el fuego; de preferencia se
cerrarán automáticamente.
En el nivel de bioseguridad 2 se12.
dispondrá de una autoclave u otro
medio de descontaminación debida-
mente próximo al laboratorio.
Figura 2. Laboratorio típico del nivel de bioseguridad 1. (Ilustración ama-
blemente cedida por CUH2A, Princeton, NJ (EE.UU.))

60
Los sistemas de seguridad deben13.
comprender medios de protección
contra incendios y emergencias eléc-
tricas, así como duchas para casos de
urgencia y medios para el lavado de
los ojos.
Hay que prever locales o salas de14.
primeros auxilios, convenientemente
equipados y fácilmente accesibles
(véase el anexo 1).
Cuando se planifique una nue-15.
va instalación, habrá que prever un
sistema mecánico de ventilación que
introduzca aire del exterior sin recir-
culación. Cuando no se disponga de
ventilación mecánica, las ventanas
deberán poder abrirse y, a ser posi-
ble, estarán provistas de mosquite-
ras.
Es indispensable contar con un16.
suministro regular de agua de buena
calidad. No debe haber ninguna conexión entre las conducciones de agua destinada al
laboratorio y las del agua de bebida. El sistema de abastecimiento público de agua estará
protegido contra el reflujo por un dispositivo adecuado.
Debe disponerse de un suministro de electricidad seguro y de suficiente capacidad, así17.
como de un sistema de iluminación de emergencia que permita salir del laboratorio en
condiciones de seguridad. Conviene contar con un grupo electrógeno de reserva para
alimentar el equipo esencial (estufas, CSB, congeladores, entre otros), así como para la
ventilación de las jaulas de los animales.
Es esencial un suministro fiable y adecuado de gas. La instalación debe ser objeto del de-18.
bido mantenimiento.
Tanto los laboratorios como los locales destinados a los animales son a veces objeto de ac-19.
tos de vandalismo. Hay que prever sistemas de protección física y contra incendios. Cabe
mejorar la seguridad reforzando las puertas, protegiendo las ventanas y limitando el núme-
ro de llaves en circulación. Se podrán estudiar y aplicar otras medidas, según proceda, para
incrementar la seguridad (véase el capítulo 9).
Junto con los procedimientos y prácticas correctos, el uso de material de seguridad ayudará a
reducir los riesgos cuando se trabaje con agentes biológicos que entrañen peligro. En la presente
sección se exponen los principios fundamentales relacionados con el material apropiado para
los laboratorios de todos los niveles de bioseguridad. Los requisitos en relación con el material
de laboratorio correspondiente a niveles de bioseguridad más altos se detallan en los capítulos
pertinentes.
blemente cedida por CUH2A, Princeton, NJ (EE.UU)). Los procedimien-
tos que pueden generar aerosoles se efectúan dentro de una cámara
de seguridad biológica. Las puertas se mantienen cerradas y llevan las
debidas señales de riesgo biológico. Los residuos potencialmente con-
taminados se separan del circuito general de residuos.

61
Tras consultar con el funcionario de bioseguridad y el comité de seguridad (en caso de que
se haya designado), el director del laboratorio debe velar por que el material sea apropiado y se
utilice debidamente. Para elegir el material de laboratorio habrá que cerciorarse de que responda
a los siguientes principios generales:
Que su diseño permita limitar o evitar los contactos entre el trabajador y el material infec-1.
cioso.
Que esté construido con materiales impermeables a los líquidos, resistentes a la corrosión2.
y acordes con las normas de resistencia estructural.
Que carezca de rebabas, bordes cortantes y partes móviles sin proteger.3.
Que esté diseñado, construido e instalado con miras a simplificar su manejo y conserva-4.
ción, así como a facilitar la limpieza, la descontaminación y las pruebas de certificación;
siempre que se pueda, se evitará el material de vidrio y otro material rompible.
Para cerciorarse de que el material posee las características de seguridad requeridas quizá
sea necesario consultar sus especificaciones detalladas de funcionamiento y construcción (véanse
también los capítulos 10 y 11).
Material de bioseguridad indispensable
Dispositivos de pipeteo para evitar que se pipetee con la boca. Existen muchos modelos1.
diferentes.
CSB, que se utilizarán en los siguientes casos:2.
Siempre que se manipule material infeccioso; ese material puede ser centrifugado en elƒƒ
laboratorio ordinario si se utilizan vasos de centrifugadora con tapas herméticas de segu-
ridad y si éstos se cargan y descargan en una CSB;
Cuando haya un alto riesgo de infección transmitida por vía aérea.ƒƒ
Cuando se utilicen procedimientos con grandes posibilidades de producir aerosoles, comoƒƒ
la centrifugación, trituración, homogeneización, agitaciones o mezcla vigorosa, desinte-
gración ultrasónica, apertura de envases de materiales infecciosos cuya presión interna
pueda diferir de la presión ambiental, inoculación intranasal a animales y recolección de
tejidos infecciosos de animales y huevos.
Asas de siembra de plástico desechables. También pueden utilizarse incineradores eléctri-5.
cos de asas dentro de la CSB para reducir la formación de aerosoles.
Frascos y tubos con tapón de rosca.6.
Autoclaves u otros medios apropiados para esterilizar el material contaminado.7.
Pipetas de Pasteur de plástico desechables, cuando estén disponibles, en sustitución del8.
vidrio.
Los aparatos como las autoclaves y las CSB deben ser validados con métodos apropiados9.
antes de usarlos. A intervalos periódicos deben ser nuevamente certificados, de acuerdo
con las instrucciones del fabricante (véase el capítulo 7).

62
La entidad que emplea al personal del laboratorio tiene la obligación de cerciorarse, por me-
dio del director de éste, de que la salud de dicho personal esté sometida a la debida vigilancia. El
objetivo de esa vigilancia es detectar posibles enfermedades contraídas durante el trabajo. Entre
las actividades apropiadas para alcanzar ese objetivo figuran las siguientes:
Proporcionar inmunización activa o pasiva cuando esté indicada (véase el anexo 2).1.
Facilitar la detección temprana de infecciones adquiridas en el laboratorio.2.
Excluir a las personas muy susceptibles (por ejemplo, embarazadas o personas inmunode-3.
ficientes) de las tareas de laboratorio que entrañen mucho riesgo.
Proporcionar material y procedimientos eficaces de protección personal.4.
Normas para la vigilancia de los trabajadores que manipulan microorganismos en
el nivel de bioseguridad 1
La experiencia indica que estos microorganismos tienen pocas probabilidades de provocar
enfermedades humanas o enfermedades animales de importancia veterinaria. No obstante, lo
ideal es someter a todo el personal a un reconocimiento médico previo a la contratación en
el que se anoten los antecedentes médicos de cada persona. Conviene que se notifiquen rápi-
damente las enfermedades o accidentes de laboratorio y que todos los miembros del personal
comprendan la importancia de aplicar técnicas microbiológicas apropiadas.
Normas para la vigilancia de los trabajadores que manipulan microorganismos en
el nivel de bioseguridad 2
El reconocimiento médico previo al empleo o a la asignación de un puesto es indispensa-1.
ble. Debe registrarse el historial médico de la persona y realizar una evaluación de la salud
ocupacional para los fines del laboratorio.
El director del laboratorio debe mantener un registro de enfermedades y bajas laborales.2.
Las mujeres en edad fecunda deberán ser informadas de los riesgos que supone para el feto3.
la exposición profesional a ciertos microorganismos, como el virus de la rubéola. Las medi-
das concretas que se adopten para proteger al feto dependerán de los microorganismos a
los que pueda estar expuesta la mujer.
Capacitación
Los errores humanos y las técnicas incorrectas pueden poner en peligro incluso las mejores
medidas destinadas a proteger al personal de laboratorio. Por esta razón, el elemento clave para
prevenir las infecciones adquiridas, los incidentes y los accidentes en el laboratorio es un per-
sonal preocupado por la seguridad y bien informado sobre la manera de reconocer y combatir
los peligros que entraña su trabajo en ese entorno. En consecuencia, la formación continua en
el servicio acerca de las medidas de seguridad es primordial. El proceso empieza por el personal
directivo, que debe velar por que los procedimientos y prácticas de seguridad en el laboratorio
formen parte de la capacitación básica de los empleados. La formación en medidas de seguridad
siempre debe estar integrada en la capacitación inicial de los nuevos empleados. Deben ponerse
a disposición del personal el código de prácticas y las directrices locales, incluido el manual de
seguridad o de operaciones. Se adoptarán medidas para garantizar que los empleados hayan

63
leído y comprendido las directrices, como pueden ser las páginas de firmas. Los supervisores del
laboratorio deben desempeñar el papel principal en la formación de sus subordinados inmedia-
tos acerca de las técnicas correctas de laboratorio. El funcionario encargado de la bioseguridad
puede colaborar en esa formación y contribuir a la elaboración de materiales y documentos de
capacitación (véase también el capítulo 21).
La capacitación del personal debe comprender siempre la enseñanza de métodos seguros
para utilizar procedimientos peligrosos que habitualmente afectan a todo el personal de labora-
torio y que entrañan los siguientes riesgos:
Riesgo de inhalación (es decir, formación de aerosoles): uso de asas, siembra de placas de1.
agar, pipeteo, preparación de frotis, apertura de recipientes de cultivo, toma de muestras
de sangre/suero, centrifugación, entre otros.
Riesgo de ingestión al manipular muestras, frotis y cultivos.2.
Riesgo de inoculación cutánea al emplear jeringuillas y agujas.3.
Riesgo de mordeduras y arañazos en la manipulación de animales.4.
Manipulación de sangre y otros materiales patológicos potencialmente peligrosos.5.
Descontaminación y eliminación de material infeccioso.6.
Manipulación de desechos
Se considera desecho todo aquello que debe descartarse. En los laboratorios, la descontami-
nación y la eliminación de desechos son operaciones estrechamente relacionadas. En el trabajo
cotidiano, son pocos los materiales contaminados que es preciso retirar del laboratorio o destruir.
La mayor parte de la cristalería, los instrumentos y la ropa del laboratorio vuelve a utilizarse o se
recicla. El principio básico es que todo el material infeccioso ha de ser descontaminado, esterili-
zado en autoclave o incinerado en el laboratorio.
Las principales preguntas que hay que hacerse antes de eliminar cualquier objeto o material
de un laboratorio que trabaja con microorganismos o tejidos animales potencialmente infeccio-
sos son las siguientes:
¿Se han descontaminado o desinfectado realmente los objetos o el material por un proce-1.
dimiento aprobado?
De lo contrario, ¿se han embalado con un método aprobado para ser incinerados inmedia-2.
tamente in situ o transferidos a otro laboratorio que tenga capacidad para incinerar?
¿Entraña la eliminación de los objetos o materiales descontaminados algún otro peligro,3.
biológico o de otra clase, para quienes realizan las operaciones de eliminación inmediata
o para quienes puedan entrar en contacto con los objetos o materiales desechados fuera
del recinto del laboratorio?
Descontaminación
El tratamiento en autoclave de vapor constituye el método de elección para todos los pro-
cesos de descontaminación. El material destinado a la descontaminación y eliminación debe
introducirse en recipientes (por ejemplo en bolsas de plástico resistentes al tratamiento en auto-

64
clave) que tengan un código de color para indicar si el contenido ha de pasar a la autoclave o a la
incineración. Sólo se recurrirá a otros métodos si éstos eliminan o destruyen los microorganismos
(para más detalles, véase el capítulo 14).
Procedimientos de manipulación y eliminación de material y desechos
contaminados
Deberá adoptarse un sistema de identificación y separación del material infeccioso y sus reci-
pientes. Se seguirán las normas nacionales e internacionales y se tendrán en cuenta las siguientes
categorías:
Desechos no contaminados (no infecciosos) que puedan reutilizarse o reciclarse o eliminar-1.
se como si fueran «basura» en general.
Objetos cortantes y punzantes contaminados (infecciosos): agujas hipodérmicas, bisturís,2.
cuchillas, vidrio roto; se recogerán siempre en recipientes a prueba de perforación dotados
de tapaderas y serán tratados como material infeccioso.
Material contaminado destinado al tratamiento en autoclave que después pueda lavarse y3.
volverse a utilizar o reciclarse.
Material contaminado destinado al tratamiento en autoclave y a la eliminación.4.
Material contaminado destinado a la incineración directa.5.
Objetos cortantes y punzantes
Las agujas hipodérmicas no se deben volver a tapar, cortar ni retirar de las jeringuillas dese-
chables después de utilizarlas. El conjunto completo debe colocarse en un recipiente de elimi-
nación específico. Las jeringuillas desechables, utilizadas con o sin aguja, se introducirán en re-
cipientes de eliminación apropiados y se incinerarán, esterilizándolas previamente en autoclave
si fuera necesario.
Los recipientes de eliminación de objetos cortantes y punzantes serán resistentes a la perfora-
ción y no se llenarán por completo. Cuando estén llenos en sus tres cuartas partes se colocarán en
un recipiente de «desechos infecciosos» y se incinerarán, esterilizándolos primero en autoclave
si la práctica del laboratorio lo exige. Los recipientes de eliminación de objetos cortantes y pun-
zantes no se desecharán en vertederos.
Material contaminado (potencialmente infeccioso) para ser tratado en
autoclave y reutilizado
No se efectuará limpieza alguna de ningún material contaminado (potencialmente infeccioso)
que vaya a ser tratado en autoclave y reutilizado. Cualquier limpieza o reparación que se revele
necesaria se realizará siempre después del paso por la autoclave o la desinfección.
Material contaminado (potencialmente infeccioso) para ser eliminado
Aparte de los objetos cortantes y punzantes mencionados más arriba, todo el material con-
taminado (potencialmente infeccioso) debe ser introducido en recipientes impermeables (por
ejemplo en bolsas de plástico que resistan el tratamiento en autoclave marcadas con un código
de color) y tratado en autoclave antes de proceder a su eliminación. Después de pasar por la au-
toclave, el material puede colocarse en recipientes apropiados para ser transportado al incinera-

65
dor. Si es posible, el material procedente de actividades relacionadas con la atención sanitaria no
debe desecharse en vertederos, ni siquiera después de haber sido descontaminado. Si se dispone
de un incinerador en el laboratorio, no es necesario el tratamiento en autoclave: el material con-
taminado se coloca en recipientes especialmente marcados (por ejemplo, bolsas con un código
de color) y se transporta directamente al incinerador. Los recipientes de transporte reutilizables
deben ser impermeables y tener tapas que ajusten debidamente. Se desinfectarán y limpiarán
antes de devolverlos al laboratorio para un uso ulterior.
En cada puesto de trabajo deben colocarse recipientes, tarros o cubetas para desechos, de
preferencia irrompibles (por ejemplo, de plástico). Cuando se utilicen desinfectantes, los mate-
riales de desecho deben permanecer en contacto íntimo con éstos (es decir, sin estar protegidos
por burbujas de aire) durante el tiempo apropiado, según el desinfectante que se utilice (véase
el capítulo 14). Los recipientes para desechos habrán de ser descontaminados y lavados antes de
su reutilización.
La incineración de desechos contaminados deberá contar con la aprobación de las autorida-
des encargadas de la salud pública y la contaminación del aire, así como la del funcionario de
bioseguridad del laboratorio (véase la sección relativa a la incineración en el capítulo 14).
Seguridad química, eléctrica y radiológica, protección contra
incendios y material de seguridad
Los incendios o los accidentes de origen químico, eléctrico o radiológico pueden tener como
consecuencia indirecta un fallo de las medidas de contención de organismos patógenos. Así
pues, en cualquier laboratorio de microbiología es indispensable mantener un nivel elevado de
seguridad en esos aspectos. La promulgación de normas y reglamentos sobre cada una de estas
formas de protección incumbe normalmente a las autoridades nacionales y locales competentes,
cuya ayuda debe recabarse siempre que sea necesario. Los riesgos químicos, eléctricos, radioló-
gicos y derivados de los incendios se examinan en más detalle en la Parte IV del presente manual
(capítulos 17 y 18).
En el capítulo 11 se ofrece más información acerca del material de seguridad.
4. El laboratorio de contención: nivel de bioseguridad 3
El laboratorio de contención – nivel de bioseguridad 3 está concebido e instalado para tra-
bajar con microorganismos del grupo de riesgo 3, así como con grandes volúmenes o concen-
traciones de microorganismos del grupo de riesgo 2, por entrañar un mayor riesgo de difusión
de aerosoles. Este nivel de contención exige fortalecer los programas de trabajo y de seguridad
correspondientes a los laboratorios básicos – niveles de bioseguridad 1 y 2 (véase el capítulo 3).
Las directrices que se ofrecen en este capítulo se presentan en forma de adiciones a las enun-
ciadas para los laboratorios básicos – niveles de bioseguridad 1 y 2, que por ello deberán aplicar-
se antes de las destinadas específicamente al laboratorio de contención – nivel de bioseguridad
3. Las principales adiciones y modificaciones se refieren a los siguientes aspectos:
Código de prácticas.1.
Diseño e instalaciones del laboratorio.2.
Vigilancia médica y sanitaria.3.

66
Los laboratorios de esta categoría deben figurar en un registro o una lista que establecerán las
autoridades sanitarias nacionales u otra autoridad competente.
El código de prácticas de los laboratorios básicos – niveles de bioseguridad 1 y 2 también se
aplica en este caso, con las siguientes modificaciones:
El símbolo y signo internacional de advertencia de peligro biológico (véase la1. figura 1)
expuesto en las puertas de acceso al laboratorio debe especificar el nivel de bioseguridad
y el nombre del supervisor del laboratorio que controla el acceso a éste, así como indicar
cualquier condición especial de entrada en la zona, como puede ser la inmunización.
En el laboratorio se debe llevar ropa protectora apropiada (batas sin abertura delantera o2.
envolventes, trajes de dos piezas de tipo pijama, monos, gorros y, si corresponde, protec-
ción para el calzado o calzado especial). No son apropiadas las batas de laboratorio abo-
tonadas por delante, ni las mangas que no cubran por completo los antebrazos. La ropa
de laboratorio no debe usarse fuera de éste y debe descontaminarse antes de enviarla a la
lavandería. En ciertos casos, como cuando se trabaja con agentes agrícolas o zoonóticos,
está justificado quitarse la ropa de calle y utilizar ropa de laboratorio especial.
Toda manipulación abierta de material potencialmente infeccioso debe realizarse dentro3.
de una CSB u otro dispositivo de contención primaria (véase también el capítulo 10).
Puede ser necesario utilizar equipo de protección respiratoria para ciertos procedimientos4.
de laboratorio o para el trabajo con animales que estén infectados con ciertos agentes pa-
tógenos (véase el capítulo 11).
Las directrices sobre diseño e instalaciones del laboratorio correspondientes a los laboratorios
básicos – niveles de bioseguridad 1 y 2 se aplican también en este caso, con las siguientes mo-
dificaciones:
El laboratorio debe estar separado de las zonas del edificio por las que se puede circular sin1.
restricciones. Puede conseguirse una separación suplementaria habilitando el laboratorio al
fondo de un pasillo o instalando un tabique con puerta o un sistema de acceso que delimi-
te un pequeño vestíbulo (por ejemplo, entrada de doble puerta o laboratorio básico – nivel
de bioseguridad 2) destinado a mantener la diferencia de presiones entre el laboratorio y
el espacio adyacente. El vestíbulo debe contar con una zona para separar la ropa limpia de
la sucia, y también puede ser necesaria una ducha.
Las dobles puertas de acceso al laboratorio deben ser de cierre automático y disponer2.
de un mecanismo de interbloqueo, de modo que sólo una de ellas esté abierta al mismo
tiempo. Para uso en caso de emergencia es posible colocar una mampara que se pueda
romper.
Las superficies de las paredes, suelos y techos deben ser impermeables y fáciles de limpiar.3.
Todas las aberturas existentes en esas superficies (por ejemplo, para tuberías de servicio)
deben estar obturadas para facilitar la descontaminación de los locales.
La sala del laboratorio debe poderse precintar para proceder a su descontaminación. Los4.
sistemas de conducción de aire han de estar construidos de modo que sea factible la des-
contaminación con gases.

67
Las ventanas deben estar cerradas herméticamente y llevar cristales resistentes a la rotura.5.
En las inmediaciones de todas las puertas de salida del laboratorio habrá un lavabo que no6.
necesite ser accionado con la mano.
Debe haber un sistema de ventilación que establezca un flujo direccional hacia el labora-7.
torio. Se instalará un dispositivo de vigilancia visual, con o sin alarma, para que el personal
pueda comprobar en todo momento que la corriente de aire circula en el sentido desea-
do.
El sistema de ventilación del edificio debe estar construido de modo que el aire del labor8.
torio de contención – nivel de bioseguridad 3 no se dirija a otras zonas del edificio. El aire
puede ser filtrado por un sistema HEPA, reacondicionado y recirculado dentro del labora-
torio. Cuando el aire del laboratorio (no de las CSB) se expulsa directamente al exterior del
edificio, debe dispersarse lejos de los edificios ocupados y de las tomas de aire. Según los
agentes con los que se esté trabajando, ese aire puede evacuarse a través de filtros HEPA.
Puede instalarse un sistema de control de la calefacción, la ventilación y el aire acondicio-
nado para impedir una presión positiva sostenida en el laboratorio. Cabe estudiar la posibi-
lidad de instalar alarmas audibles o claramente visibles para alertar al personal de posibles
fallos del sistema de calefacción, ventilación y aire acondicionado.
Todos los filtros HEPA deberán estar instalados de modo que permitan la descontaminación9.
con gases y la realización de pruebas.
Las CSB deben estar alejadas de las zonas de paso y de los lugares de cruce de corrientes10.
procedentes de puertas y sistemas de ventilación (véase el capítulo 10).
El aire que sale de las CSB de las11.
clases I o II (véase el capítulo 10), y
que habrá pasado por filtros HEPA,
deberá expulsarse de manera que no
se perturbe el equilibrio del aire en
la cámara ni en el sistema de evacua-
ción del edificio.
Dentro del laboratorio de con-12.
tención debe haber una autoclave
para descontaminar el material de
desecho infectado. Si hay que sacar
ese material de desecho del labora-
torio de contención para su descon-
taminación y eliminación, habrá que
transportarlo en recipientes herméti-
cos, irrompibles e impermeables de
acuerdo con las normas nacionales o
internacionales, según proceda.
El sistema de abastecimiento de13.
agua debe estar dotado de dispositi-
vos contra el reflujo. Los tubos de va-
cío deben estar protegidos con sifo-
nes con desinfectante líquido y filtros
HEPA o su equivalente. Las bombas
blemente cedida por CUH2A, Princeton, NJ (EE.UU.)). El laboratorio está
separado de la circulación general y se accede a él por un vestíbulo
(entrada de doble puerta o laboratorio básico – nivel de bioseguridad 2)
o una cámara de cierre hermético. Dentro de la sala se dispone de una
autoclave para la descontaminación de residuos antes de su eliminación.
Hay también un lavabo con grifo que puede accionarse sin usar las ma-
nos. La corriente de aire circula hacia el interior y todo el trabajo con
material infeccioso se efectúa en una cámara de seguridad biológica.

68
Fotografía
del
titular
de vacío alternativas también deben estar debidamente protegidas con sifones y filtros.
El diseño de las instalaciones y los procedimientos de trabajo del laboratorio de contención14.
– nivel de bioseguridad 3 deben estar documentados.
En la figura 4 se presenta un ejemplo de diseño de un laboratorio de nivel de bioseguridad 3.
Los principios aplicables a la selección del material, incluidas las CSB (véase el capítulo 10)
son los mismos que se enunciaron para el laboratorio básico – nivel de bioseguridad 2, con la ex-
cepción de que todas las actividades de manipulación de todo el material potencialmente infec-
cioso deben realizarse dentro de una CSB u otro dispositivo de contención física primaria. Debe
tenerse en cuenta que si se utilizan aparatos como centrifugadoras, éstas necesitarán accesorios
de contención suplementarios como cubetas de seguridad o rotores de contención. Algunas cen-
trifugadoras y otro material, como los separadores de células, destinados al trabajo con células
infectadas pueden necesitar sistemas suplementarios de ventilación y evacuación local con filtros
HEPA para una contención eficiente.
Los objetivos de los programas de vigilancia médica y sanitaria enunciados para los laborato-
rios básicos – niveles de bioseguridad 1 y 2 se aplican también a los laboratorios de contención
– nivel de bioseguridad 3, con las siguientes modificaciones:
El reconocimiento médico de todo el personal que trabaja en el laboratorio de contención1.
– nivel de bioseguridad 3 es obligatorio y debe comprender una historia clínica detallada y
un reconocimiento físico orientado a la actividad laboral.
Una vez pasado el reconocimiento médico con un informe favorable, se entregará a la2.
persona examinada una tarjeta de contacto médico (véase el ejemplo de la figura 5) en la
que se declare que trabaja en un centro que tiene un laboratorio de contención – nivel de
bioseguridad 3. Esa ficha tendrá el tamaño de un billetero, llevará la fotografía del titular y
éste la llevará siempre consigo. Quienes figurarán como «contacto» en la tarjeta es algo que
tendrá que acordarse en el plano local, pero entre esas personas deben estar el director del
laboratorio, el asesor médico o el funcionario responsable de la bioseguridad.
A. Anverso
INFORMACIÓN PARA LA VIGILANCIA DE ENFERMEDADES
Nombre
AL EMPLEADO
Conserve esta tarjeta en su poder. En caso de enfermedad febril inexplicada, muéstrela a su
médico y avise a uno de los siguientes médicos en el orden indicado:
Dr._____________________________Tel (Consultorio)________________________________________
_______________________________ Tel (Domicilio)__________________________________________
Dr. ____________________________ Tel (Consultorio)________________________________________
_______________________________ Tel (Domicilio)__________________________________________

69
Figura 5. Formato sugerido para la ficha de contacto médico.
B. Reverso
AL MÉDICO
El titular de esta tarjeta trabaja en ________________________________________________________
donde existen virus, rickettsias, bacterias, protozoos o helmintos patógenos. En caso de enferme-
dad febril inexplicada, sírvase pedir al empleador información sobre los agentes a los que puede
haber estado expuesto este empleado.
Nombre del laboratorio__________________________________________________________________
Dirección______________________________________________________________________________
Teléfono_______________________________________________________________________________
5. El laboratorio de contención máxima:
nivel de bioseguridad 4
El laboratorio de contención máxima – nivel de bioseguridad 4 está concebido para trabajar
con microorganismos del grupo de riesgo 4. Antes de construir y poner en funcionamiento un
laboratorio de contención máxima se requiere una labor intensiva de consulta con instituciones
que tengan experiencia en la utilización de instalaciones de este tipo. Los laboratorios de con-
tención máxima – nivel de bioseguridad 4 en funcionamiento deben estar sometidos al control
de las autoridades sanitarias nacionales, u otras apropiadas. La información que sigue tiene como
propósito servir solamente como material de presentación. Las entidades que tengan intención
de poner en funcionamiento un laboratorio de este nivel deben ponerse en contacto con el pro-
grama de Bioseguridad de la OMS para obtener más información.1
El código de prácticas correspondiente al nivel de bioseguridad 3 se aplica también a este
nivel con las siguientes modificaciones:
Hay que aplicar la regla del trabajo realizado por dos personas, en virtud de la cual ninguna1.
persona debe trabajar sola en el interior del laboratorio. Esto es particularmente importante
si el trabajo se realiza con ropa especial del nivel de bioseguridad 4.
Al entrar y al salir del laboratorio es imprescindible un cambio completo de ropa y calza-2.
do.
El personal debe recibir capacitación en procedimientos de evacuación de emergencia en3.
caso de que un miembro del personal sufra lesiones o caiga enfermo.
Debe establecerse un método de comunicación entre el personal que trabaja dentro del4.
laboratorio del nivel de bioseguridad 4 y el personal de apoyo que se encuentra fuera del
laboratorio para la comunicación ordinaria y de emergencia.
1 Programa de Bioseguridad, Departamento de Enfermedades Transmisibles (Vigilancia y Respuesta), Organización
Mundial de la Salud, 20 Avenue Appia, 1211 Ginebra 27, Suiza (http://www.who.int/csr/).

70
Los requisitos del laboratorio de contención – nivel de bioseguridad 3 se aplican también a los
laboratorios de contención máxima – nivel de bioseguridad 4, con la adición de los siguientes:
Contención primaria.1. Debe existir un sistema eficiente de contención primaria que com-
prenda uno o más de los siguientes elementos:
Laboratorio con CSB de clase III.ƒƒ Se exige el paso a través de un mínimo de dos puertas
antes de acceder a la sala que contiene la CSB de clase III (sala de la cámara). En este
diseño de laboratorio la CSB de clase III proporciona la contención primaria. Es necesaria
una ducha personal con vestuarios interior y exterior. Los utensilios y materiales que no
ingresan en la sala de la cámara a través de la zona de vestuario se introducen por una
autoclave o una cámara de fumigación de doble puerta. Una vez debidamente cerrada la
puerta exterior, el personal que se encuentra dentro del laboratorio puede abrir la puerta
interior para recoger los materiales. Las puertas de la autoclave o la cámara de fumigación
están diseñadas de tal modo que la puerta exterior no pueda abrirse a menos que la au-
toclave haya completado un ciclo de esterilización o la cámara de fumigación haya sido
descontaminada (véase el capítulo 10).
Laboratorio diseñado para trabajar con trajes especiales.ƒƒ El diseño y las instalaciones de
un laboratorio destinado al trabajo con trajes protectores con respirador autónomo difiere
considerablemente de un laboratorio de nivel de bioseguridad 4 con CSB de clase III. Las
salas de este tipo de laboratorio están dispuestas de tal manera que se dirige al personal
a través de las zonas de vestuario y descontaminación antes de entrar en las zonas donde
se manipula el material infeccioso.Debe existir una ducha de descontaminación de trajes,
que será utilizada por el personal antes de abandonar la zona de contención del labora-
torio. Habrá otra ducha personal con vestuarios interior y exterior. El traje especial será
de una pieza, dotado de presión positiva y con suministro de aire filtrado por HEPA. El
aire del traje será suministrado por un sistema que tenga una capacidad redundante del
100% con una fuente de aire independiente, para utilizarla en caso de emergencia. La
entrada en la zona del laboratorio destinada al trabajo con trajes especiales se realizará
por una cámara dotada de puertas de cierre hermético. Estos laboratorios dispondrán de
un sistema apropiado de alarma que el personal pueda utilizar en caso de fallo del sistema
mecánico o de aire (véase el capítulo 10).
Acceso controlado.2. El laboratorio de contención máxima – nivel de bioseguridad 4 debe
estar situado en un edificio independiente o en una zona claramente delimitada en el
interior de un edificio protegido. La entrada y la salida del personal y de los suministros
se harán a través de cámaras de cierre hermético o sistemas de caja de paso. Al entrar, el
personal se mudará por completo de ropa y al salir se duchará antes de volver a ponerse
la ropa de calle.
Sistema de ventilación controlada.3. Debe mantenerse la presión negativa dentro de las ins-
talaciones. Tanto el aire de entrada como el de salida debe pasar por filtros HEPA. Existen
diferencias considerables entre los sistemas de ventilación de los laboratorios con CSB de
clase III y los laboratorios donde hay que trabajar con trajes especiales:
Laboratorio con cámara biológica de clase III.ƒƒ El aire suministrado a las CSB de clase III
puede proceder del interior de la sala y atravesar un filtro HEPA montado en la cámara o
directamente del sistema de entrada de aire. El aire evacuado de la CSB de clase III debe
atravesar dos filtros HEPA antes de salir al exterior del edificio. La cámara debe funcionar

71
en todo momento a presión negativa respecto del laboratorio circundante. Se requiere un
sistema de ventilación exclusivo que no haga recircular el aire para el laboratorio.
Laboratorio diseñado para trabajar con trajes especiales.ƒƒ Se requieren sistemas exclusivos
de suministro y evacuación del aire de la sala. Los componentes de suministro y evacua-
ción del sistema de ventilación estarán equilibrados de tal forma que el flujo de aire den-
tro de la zona de trabajo con traje protector vaya desde las zonas de menos peligro a las
de mayor peligro. Se necesitan ventiladores extractores redundantes para garantizar que
las instalaciones se mantienen en todo momento a presión negativa. Deben vigilarse las
diferencias de presión dentro del laboratorio y entre el laboratorio y las zonas adyacentes,
así como el flujo del aire en los componentes de suministro y evacuación del sistema de
ventilación, y debe utilizarse un sistema de control apropiado para impedir la presuriza-
ción del laboratorio. El aire suministrado a la zona de trabajo con trajes especiales y a la
ducha y a las cámaras de descontaminación con cierre hermético debe pasar por filtros
HEPA. El aire evacuado del laboratorio debe atravesar dos filtros HEPA antes de salir al
exterior. Otra posibilidad es que, tras una doble filtración por HEPA, el aire se recircule,
pero sólo dentro del laboratorio; en ninguna circunstancia el aire evacuado del laborato-
rio de nivel de bioseguridad 4 diseñado para trabajar con trajes especiales se reciclará a
otras zonas. Debe obrarse con la máxima precaución si se elige el sistema de recirculación
de aire dentro del laboratorio. Deben tenerse en cuenta los tipos de investigación que
se realicen, el equipo, las sustancias químicas y otros materiales utilizados, así como las
especies de animales que puedan intervenir en la investigación.
Todos los filtros HEPA serán probados y certificados una vez al año. Los filtros HEPA estarán
instalados de tal modo que permitan su descontaminación in situ antes de retirarlos. Otra posibi-
lidad es retirar el filtro y colocarlo en un recipiente primario cerrado y hermético para su ulterior
descontaminación y/o destrucción por incineración.
Descontaminación de efluentes.4. Todos los efluentes de la zona de trabajo con trajes espe-
ciales, la cámara y la ducha de descontaminación o la CSB de clase III serán descontami-
nados antes de su eliminación definitiva. El método de elección es el tratamiento térmico.
Será necesario corregir el pH de algunos efluentes antes de evacuarlos. El agua de la ducha
personal y los retretes se puede verter directamente al alcantarillado sin tratamiento pre-
vio.
Esterilización de los desechos y materiales.5. La zona del laboratorio debe contar con una
autoclave de doble puerta. Debe disponerse de otros métodos de descontaminación para
aquellos elementos del equipo que no soporten la esterilización por vapor.
Accesos con entrada de cierre hermético6. para muestras, materiales y animales.
Deben existir7. líneas de suministro eléctrico exclusivas y de emergencia.
Se instalarán8. sumideros de contención.
Dada la gran complejidad de las características técnicas, el diseño y la construcción de las
instalaciones del nivel de bioseguridad 4, tanto en la modalidad de CSB como en la de trajes
especiales, no se han incluido representaciones esquemáticas de esas instalaciones.
Del mismo modo, la gran complejidad del trabajo que se lleva a cabo en los laboratorios del
nivel de bioseguridad 4 hace necesario elaborar un manual de trabajo detallado y aparte que
se ensayará en los ejercicios de capacitación. Además, se elaborará un programa de emergencia
(véase el capítulo 13). En la preparación de este programa habrá que contar con la colaboración
activa de las autoridades sanitarias nacionales y locales, y la participación de otros servicios de
emergencia (por ejemplo bomberos, policía y servicios hospitalarios).

72
6. Animalarios
El empleo de animales de laboratorio con fines experimentales y de diagnóstico impone al
usuario la obligación moral de adoptar todas las medidas necesarias para evitar que aquéllos pa-
dezcan dolores o sufrimientos innecesarios. Hay que proporcionar a los animales un alojamiento
cómodo, higiénico y de dimensiones suficientes, así como agua y comida de buena calidad y en
cantidad suficiente. Al final del experimento habrá que sacrificarlos con el procedimiento menos
cruel posible.
Por motivos de seguridad, los animales deben estar alojados en un local independiente, se-
parado del laboratorio. Si se trata de un local contiguo, deberá estar construido de tal modo que
sea posible aislarlo de las partes públicas del laboratorio en caso de necesidad, así como para las
operaciones de descontaminación y desinfestación.
Al igual que los laboratorios, los animalarios pueden clasificarse en cuatro niveles de bio-
seguridad, con arreglo a una evaluación del riesgo y al grupo de riesgo al que pertenecen los
microorganismos investigados.
En lo que respecta a los agentes patógenos que van a utilizarse en el laboratorio de animales,
hay que tener en cuenta los siguientes factores:
La vía normal de transmisión.1.
Los volúmenes y las concentraciones que van a manejarse.2.
La vía de inoculación.3.
En su caso, la vía de excreción de los agentes.4.
En cuanto a los animales que van a usarse en el laboratorio, los factores que hay que tener en
cuenta son los siguientes:
El carácter de los animales, es decir, su grado de agresividad y tendencia a morder o ara-1.
ñar.
Sus endoparásitos y ectoparásitos naturales.2.
Las zoonosis a las que son susceptibles.3.
La posible diseminación de alérgenos.4.
Como en el caso de los laboratorios, los requisitos relativos a las características de diseño, el
equipo y las precauciones son cada vez más estrictos a medida que aumenta el nivel de seguri-
dad. Esos requisitos se describen a continuación y se resumen en el cuadro 4. Las directrices son
acumulativas; es decir, cada nivel incorpora los requisitos de los niveles inferiores.
Animalarios – nivel de bioseguridad 1
Este nivel es el apropiado para mantener a la mayoría de los animales después de la cuaren-
tena (salvo los primates no humanos, respecto de los cuales debe consultarse a las autoridades
nacionales) y para los animales que son inoculados deliberadamente con agentes del grupo de
riesgo 1. Se necesitan técnicas microbiológicas apropiadas. El director del animalario debe de-
terminar las políticas, procedimientos y protocolos para todas las operaciones, así como para el
acceso al animalario. Se instituirá un programa apropiado de vigilancia médica para el personal
y se preparará y adoptará un manual de seguridad de las operaciones.

73
Este nivel es apropiado para el trabajo con animales a los que se inoculan deliberadamente
microorganismos del grupo de riesgo 2. Se aplicarán las siguientes precauciones de seguridad:
Se cumplirán todos los requisitos de los animalarios del nivel 1.1.
Se colocarán señales de advertencia del peligro biológico (véase la2. figura 1) en las puertas
y otros lugares apropiados.
El local estará diseñado de modo que sea fácil de limpiar y mantener.3.
Las puertas deben abrirse hacia dentro y cerrarse solas.4.
La calefacción, la ventilación y la iluminación deben ser apropiadas.5.
Si se instala ventilación mecánica, el flujo de aire debe dirigirse hacia dentro. El aire utiliza-6.
do se evacuará al exterior y no se reciclará a ninguna otra parte del edificio.
El acceso se limitará a las personas autorizadas.7.
No se admitirá ningún animal distinto de los utilizados con fines experimentales.8.
Existirá un programa de lucha contra artrópodos y roedores.9.
Si hay ventanas, estas serán seguras, irrompibles y, si se pueden abrir, llevarán rejillas a10.
prueba de artrópodos.
Las superficies de trabajo habrán de ser descontaminadas con desinfectantes eficaces des-11.
pués del trabajo (véase el capítulo 14).
Se dispondrá de CSB (clases I o II) o jaulas aislantes con suministro especial de aire y12.
evacuación de aire a través de filtros HEPA para aquellas tareas que puedan entrañar la
generación de aerosoles.
Se dispondrá de una autoclave in situ o cerca del animalario.13.
El material de los lechos de los animales se eliminará de modo que se reduzca al mínimo14.
Cuadro 4. Niveles de contención de los animalarios: resumen de los procedimientos y equipo de seguri-
dad
Grupo de
riesgo
Nivel de contención Procedimientos de laboratorio y equipo de seguridad
1 NBSA-1 Acceso restringido, ropa y guantes protectores.
2 NBSA-2
Procedimientos del NBSA-1, más señales de advertencia del riesgo.
CSB de clase I o II para las actividades que producen aerosoles.
Descontaminación de desechos y jaulas antes del lavado.
3 NBSA-3
Procedimientos del NBSA-2, más acceso controlado. CSB y ropa
protectora especial para todas las actividades.
4 NBSA-4
Procedimientos del NBSA-3, más acceso estrictamente restringido.
Muda de ropa antes de entrar. CSB de clase III o trajes de presión
positiva. Ducha a la salida. Descontaminación de todos los desechos
antes de su salida de las instalaciones.
NBSA: nivel de bioseguridad de las instalaciones para los animales; CSB: cámaras de seguridad biológica.

74
la producción de aerosoles y polvo.
Todos los materiales de desecho y de los lechos deben descontaminarse antes de ser eli-15.
minados.
Se restringirá en lo posible el uso de instrumentos punzantes o cortantes. éstos se recogerán16.
siempre en recipientes resistentes y a prueba de perforación, provistos de tapa, y serán
tratados como material infeccioso.
El material destinado al tratamiento con autoclave o a la incineración debe transportarse17.
sin riesgo en recipientes cerrados.
Las jaulas de los animales se descontaminarán después de su uso.18.
Los cadáveres de los animales serán incinerados.19.
En el local se utilizará ropa y equipo de protección, que se retirará a la salida.20.
Se instalarán lavabos y el personal se lavará las manos antes de salir del animalario.21.
Todas las lesiones, por leves que sean, deberán ser tratadas de forma apropiada, notificadas22.
y registradas.
Estará prohibido comer, beber, fumar y aplicar cosméticos dentro del animalario.23.
Todo el personal deberá recibir capacitación apropiada.24.
Este nivel es apropiado para trabajar con animales que son inoculados deliberadamente con
agentes incluidos en el grupo de riesgo 3, o cuando así lo indique la evaluación del riesgo. Todos
los sistemas, prácticas y procedimientos habrán de ser revisados y certificados nuevamente una
vez al año. Se aplicarán las siguientes precauciones de seguridad:
Deben cumplirse todos los requisitos correspondientes a los animalarios de los niveles de1.
bioseguridad 1 y 2.
El acceso debe estar estrictamente controlado.2.
El animalario estará separado de otros locales del laboratorio y destinados a animales por3.
dos puertas que formen un vestíbulo o antesala.
En el vestíbulo se instalarán lavabos.4.
En el vestíbulo se instalarán duchas.5.
Habrá que disponer de ventilación mecánica que asegure un flujo continuo de aire en to-6.
dos los locales. El aire de salida pasará por filtros HEPA antes de ser evacuado a la atmósfera
sin ningún tipo de recirculación. El sistema estará diseñado de tal modo que impida el flujo
de retorno accidental y que haya una presión positiva en todas partes del animalario.
Se dispondrá de una autoclave situada en un lugar cómodo respecto del alojamiento de los7.
animales y donde el riesgo biológico esté contenido. Los residuos infecciosos se tratarán en
la autoclave antes de trasladarlos a otros lugares de la instalación.

75
Se dispondrá de un incinerador de fácil acceso en la instalación o se tomarán otras dispo-8.
siciones al mismo efecto con las autoridades competentes.
Los animales infectados con microorganismos del grupo de riesgo 3 estarán alojados en9.
jaulas aisladas o en locales con salidas de ventilación situadas detrás de las jaulas.
Los lechos de los animales tendrán el mínimo polvo que sea posible.10.
Toda la ropa protectora deberá ser descontaminada antes de enviarla a la lavandería.11.
Las ventanas estarán herméticamente cerradas y serán resistentes a la rotura.12.
Se ofrecerá al personal la posibilidad de inmunizarse, si procede.13.
El trabajo que se realice en estas instalaciones normalmente guardará relación con el del labo-
ratorio de contención máxima – nivel de bioseguridad 4, y habrá que armonizar las normas y los
reglamentos nacionales y locales para aplicarlos a ambos tipos de instalaciones. Para el trabajo en
laboratorios que requieren trajes especiales se utilizarán prácticas y procedimientos especiales,
además de los que se describen a continuación (véase el capítulo 5).
Se cumplirán todos los requisitos de los animalarios de los niveles de bioseguridad 1, 2 y 3.1.
El acceso estará estrictamente controlado; sólo tendrá autorización para entrar el personal2.
designado por el director del establecimiento.
Ninguna persona deberá trabajar sola: se aplicará la regla de las dos personas.3.
El personal habrá recibido el máximo nivel posible de formación en microbiología y estará4.
familiarizado con los riesgos que entraña su trabajo y las precauciones necesarias.
Las zonas en las que se alojen los animales infectados con agentes del grupo de riesgo 45.
mantendrán los criterios de contención descritos y aplicados en los laboratorios de conten-
ción máxima – nivel de bioseguridad 4.
Se entrará en la instalación por un vestíbulo de cierre hermético cuya parte limpia estará6.
separada de la parte restringida por las instalaciones de cambio de ropa y duchas.
El personal deberá quitarse la ropa de calle al entrar y ponerse ropa protectora especial.7.
Después del trabajo se quitará la ropa, la separará para ser tratada en autoclave, y se du-
chará antes de salir.
La instalación estará ventilada por un sistema de evacuación de aire con filtros HEPA que8.
asegure una presión negativa (flujo de aire hacia el interior).
El sistema de ventilación estará diseñado de modo que impida el flujo de retorno y la pre-9.
surización positiva.
Para el intercambio de materiales se dispondrá de una autoclave de doble puerta con el10.
extremo limpio situado en una sala exterior a las salas de contención.

76
Para el intercambio de materiales que no puedan ser tratados en la autoclave se dispondrá11.
de una caja de paso con cierre hermético cuyo extremo limpio estará situado fuera de salas
de contención.
Todas las manipulaciones de animales infectados con agentes del grupo de riesgo 4 se rea-12.
lizarán en condiciones de contención máxima – nivel de bioseguridad 4.
Todos los animales estarán alojados en aisladores.13.
Todos los desechos y el material de los lechos de los animales se tratarán en la autoclave14.
antes de sacarlos del animalario.
Se someterá al personal a vigilancia médica.15.
Invertebrados
Como en el caso de los vertebrados, el nivel de bioseguridad de las instalaciones para estos
animales vendrá determinado normalmente por el grupo de riesgo del agente estudiado o según
lo que indique la evaluación del riesgo. No obstante, con ciertos artrópodos, en particular los
insectos voladores, se necesitan además algunas precauciones especiales:
Se dispondrá de locales distintos para los invertebrados infectados y no infectados.1.
Esos locales podrán sellarse para ser fumigados.2.
Se dispondrá con facilidad de pulverizadores de insecticidas.3.
Se dispondrá de instalaciones de «enfriamiento» para reducir, cuando sea preciso, la acti-4.
vidad de los invertebrados.
El acceso se hará a través de un vestíbulo provisto de mosquiteras en las puertas y trampas5.
para insectos.
Todos los conductos de salida de la ventilación y las ventanas que puedan abrirse estarán6.
equipados con mosquiteras.
No se permitirá que se sequen los sifones de los fregaderos y desagües.7.
Todos los residuos se descontaminarán en la autoclave, ya que algunos invertebrados son8.
resistentes a algunos insecticidas.
Se controlará el número de larvas y formas adultas de artrópodos voladores, reptadores y9.
saltadores.
Los recipientes para garrapatas y ácaros se depositarán en cubetas con aceite.10.
Los insectos voladores infectados o potencialmente infectados se albergarán en jaulas de11.
doble malla.
Los artrópodos infectados o potencialmente infectados se manipularán en CSB o cámaras12.
aislantes.
Los artrópodos infectados o potencialmente infectados podrán manipularse en bandejas13.
de enfriamiento.
Puede obtenerse más información en las referencias 3 a 6.

77
7. Directrices para la puesta en servicio de laboratorios e
instalaciones
La puesta en servicio de laboratorios e instalaciones afines puede definirse como el proceso
de comprobación sistemática y documentación de que los componentes estructurales y los siste-
mas y/o componentes de sistemas del laboratorio han sido instalados, inspeccionados, sometidos
a pruebas funcionales y verificados para determinar si cumplen las normas nacionales o interna-
cionales, según proceda. Esos requisitos son establecidos por los criterios de diseño del sistema y
la función de cada edificio. En otras palabras, los laboratorios de los niveles de bioseguridad 1 a 4
tendrán distintos requisitos, cada vez más complejos, en materia de puesta en servicio. Las con-
diciones geográficas y climáticas, como las fallas tectónicas o el calor, frío y humedad extremos,
también pueden influir en el diseño del laboratorio y, por tanto, en los requisitos de la puesta en
servicio. Al final del proceso de puesta en servicio, los componentes estructurales y los sistemas
de apoyo pertinentes habrán sido sometidos a las diversas condiciones de funcionamiento que
razonablemente cabe esperar, así como a distintas modalidades de fallo, y habrán recibido la
aprobación necesaria.
El proceso de puesta en servicio y los criterios de aceptación de las instalaciones deberán
determinarse en una fase temprana, preferiblemente durante la programación del proyecto de
construcción o renovación. Al tener en cuenta el proceso de puesta en servicio durante las pri-
meras fases del proyecto, los arquitectos, los ingenieros, el personal de seguridad e higiene y, en
última instancia, los ocupantes del laboratorio comprenderán los requisitos de funcionamiento
del laboratorio de que se trate y tendrán expectativas uniformes en cuanto al rendimiento de
las instalaciones. El proceso de puesta en servicio proporciona a la institución y a la comunidad
circundante un mayor grado de confianza al asegurar que los sistemas estructural, eléctrico,
mecánico y de conducciones, los sistemas de contención y descontaminación y los sistemas de
seguridad y alarma funcionarán conforme a lo previsto para garantizar la contención de todo
microorganismo potencialmente peligroso con el que se esté trabajando en ese laboratorio o
animalario.
Las actividades de puesta en servicio suelen comenzar durante la fase de programación del
proyecto y avanzan a lo largo de la construcción y el ulterior período de garantía del laboratorio
o la instalación. Los períodos de garantía normalmente deben ser de un año tras la ocupación de
las instalaciones. Se recomienda recurrir a un agente de puesta en servicio que sea independiente
de las empresas de arquitectos, ingenieros y constructores que han intervenido en el diseño y la
construcción del laboratorio. El agente actúa como defensor de la institución que construye o re-
nueva el laboratorio y debe ser considerado miembro del equipo de diseño; su participación en
las primeras fases de programación del proyecto es indispensable. En algunos casos, la propia ins-
titución puede desempeñar ese papel. Cuando se trate de laboratorios más complejos (niveles de
bioseguridad 3 ó 4), quizá la institución desee recurrir a un agente externo que haya demostrado
experiencia y buen hacer en la puesta en servicio de otros laboratorios y animalarios complejos.
Aunque se recurra a un agente independiente, la institución debe formar parte del equipo de
puesta en servicio. Se recomienda que, además del agente de puesta en servicio, formen también
parte del equipo el funcionario de seguridad y el oficial de proyectos de la institución, el director
del programa y un representante del personal de operaciones y mantenimiento.
A continuación se enumeran, de forma no exhaustiva, los sistemas y componentes del labora-
torio que pueden incluirse en un plan de puesta en servicio para un ensayo de funcionamiento,
según el nivel de contención de las instalaciones que se estén renovando o construyendo. Evi-
dentemente, el plan de puesta en servicio efectiva reflejará la complejidad del laboratorio que
se esté planificando.

78
Sistemas automatizados del edificio, incluidos los enlaces con puntos de vigilancia y control1.
remotos.
Sistemas electrónicos de vigilancia y detección.2.
Cierres electrónicos de seguridad y dispositivos lectores de proximidad.3.
Sistemas de calefacción, ventilación (suministro y extracción) y aire acondicionado.4.
Sistemas de filtración HEPA.5.
Sistemas de descontaminación por filtros HEPA.6.
Controles de los sistemas de calefacción, ventilación, aire acondicionado, evacuación de7.
aire, y cierre con dispositivo de interbloqueo.
Compuertas aislantes de cierre hermético.8.
Sistema de refrigeración del laboratorio.9.
Calderas y sistema de vapor.10.
Sistemas de detección, alarma y extinción de incendios.11.
Sistemas de prevención de reflujo del agua de uso doméstico.12.
Sistemas de agua tratada (es decir, ósmosis inversa, agua destilada).13.
Sistemas de tratamiento y neutralización de efluentes líquidos.14.
Sistemas de fontanería y desagües.15.
Sistemas de descontaminación química.16.
Sistemas de gases para laboratorios médicos.17.
Sistemas de aire para respirar.18.
Sistemas de aire para servicios e instrumentos.19.
Verificación de la cascada de presiones diferenciales en los laboratorios y zonas auxiliares.20.
Sistemas de red de área local (LAN) y de datos informáticos.21.
Sistemas de energía ordinarios.22.
Sistemas de energía de emergencia.23.
Sistemas de energía ininterrumpibles.24.
Sistemas de alumbrado de emergencia.25.
Juntas aislantes de los elementos de alumbrado.26.
Juntas aislantes de los dispositivos eléctricos y mecánicos.27.
Sistemas telefónicos.28.
Controles de los dispositivos de interbloqueo de las puertas de cierre hermético.29.

79
Juntas de estanqueidad de las puertas de cierre hermético.30.
Juntas de estanqueidad de ventanas y mirillas.31.
Cajas de paso a través de barreras.32.
Verificación de la integridad estructural: suelos, paredes y techos de hormigón.33.
Verificación de revestimientos de barrera: suelos, paredes y techos.34.
Funciones de presurización y aislamiento en la zona de contención del nivel de biosegu-35.
ridad 4.
CSB.36.
Autoclaves.37.
Sistema de nitrógeno líquido y alarmas.38.
Sistema de detección de agua (por ej., en caso de inundación de la zona de contención).39.
Duchas de descontaminación y sistema de aditivos químicos.40.
Sistemas de lavado y neutralización para jaulas.41.
Gestión de desechos.42.
8. Directrices para la certificación de laboratorios e
instalaciones
Los laboratorios son entornos complejos y dinámicos. Un laboratorio clínico o de investiga-
ción biomédica moderno debe ser capaz de adaptarse rápidamente a las necesidades y presiones
cada vez mayores en materia de salud pública. Buen ejemplo de ello es la necesidad de que los
laboratorios ajusten sus prioridades para hacer frente a los retos planteados por las enfermedades
infecciosas emergentes o reemergentes. Para velar por que esos entornos dinámicos que son los
laboratorios se adapten y estén mantenidos de modo apropiado y sin riesgos, todos los laborato-
rios clínicos y de investigación biológica deben ser certificados periódicamente. Esa certificación
permite garantizar que:
Se estén utilizando controles técnicos apropiados que funcionan debidamente y con arre-1.
glo al diseño.
Existan los debidos controles administrativos respecto del lugar y de los protocolos.2.
El equipo de protección personal sea el indicado para las tareas que se realizan.3.
La descontaminación de desechos y materiales se haya estudiado y existan los debidos4.
procedimientos de gestión de desechos.
Se observen las normas generales de seguridad en el laboratorio, entre ellas las relativas a5.
la seguridad física, eléctrica y química.
La certificación del laboratorio difiere de las actividades de puesta en servicio (capítulo 7) en
varios aspectos importantes. La certificación del laboratorio es el examen sistemático de todas
las características y procesos de seguridad dentro del laboratorio (controles técnicos, equipo de
protección personal y controles administrativos). También se examinan las prácticas y los proce-
dimientos en materia de bioseguridad. La certificación es una actividad sostenida de garantía de
la calidad y la seguridad que debe efectuarse con carácter periódico.

80
Las actividades de certificación de laboratorios pueden ser realizadas por profesionales de
seguridad y salud o de bioseguridad debidamente adiestrados. Las instituciones pueden contratar
a personal que cuente con los conocimientos necesarios para llevar a cabo auditorías, encuestas
o inspecciones (términos que se emplean indistintamente) asociadas al proceso de certificación.
También puede darse el caso de que las instituciones prefieran o se les exija recurrir a terceros
para prestar esos servicios.
Los laboratorios clínicos y de investigación biomédica pueden poner a punto instrumentos
de auditoría, encuesta o inspección para lograr cierta coherencia en el proceso de certificación.
Esos instrumentos deben ser lo bastante flexibles como para amoldarse a las diferencias físicas y
de procedimiento que existen entre unos laboratorios y otros y que dependen del tipo de tra-
bajo que realizan, y al mismo tiempo aplicar un criterio uniforme dentro de la institución. Debe
procurarse que esos instrumentos sólo sean utilizados por personal adecuadamente adiestrado,
para que no se tomen como un mero sustituto de una correcta evaluación profesional de la
bioseguridad. En los cuadros 5 a 7 se ofrecen ejemplos de esos instrumentos. Los resultados de
la auditoría, encuesta o inspección deben comentarse con el personal y la dirección del labora-
torio. Dentro del laboratorio, habrá que designar a una persona responsable de velar por que se
adopten las medidas necesarias para corregir toda deficiencia que haya puesto de manifiesto la
auditoría. La certificación del laboratorio no estará completa, y el laboratorio no deberá funcio-
nar, hasta que las deficiencias se hayan subsanado debidamente.
Por su complejidad, las operaciones de los laboratorios del nivel de bioseguridad 4 quedan
fuera del alcance del presente manual. Si se desean más detalles e información, puede consultar-
se al Programa de Bioseguridad de la OMS1 (véase también el anexo 3).
1
Programa de Bioseguridad, Departamento de Enfermedades Transmisibles (Vigilancia y Respuesta), Organización
Mundial de la Salud, 20 Avenue Appia, 1211 Ginebra 27, Suiza (http://www.who.int/csr/).
Cuadro 5. Laboratorio básico – nivel de bioseguridad 1: encuesta sobre la seguridad en el laboratorio
LUGAR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . FECHA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
ENCARGADO DEL LABORATORIO . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
COMPROBADO (FECHA) SÍ NO N/A OBSERVACIONES
Laboratorio
Señalización apropiada: radiación ultravioleta, láser,‚‚
material radiactivo, etc.
Directrices de bioseguridad apropiadas disponibles‚‚
Adjuntar el y cumplidas
Equipo de laboratorio debidamente rotulado (peligro‚‚
encuesta del nivel biológico, radiactivo, tóxico, etc.)
o
o
o
o
o
o
o
o
o
Nivel de bioseguridad:
Adjuntar el formulario
de encuesta del nivel
de bioseguridad que
corresponda.
Diseño del laboratorio
Facilidad de limpieza‚‚
Alumbrado ultravioleta en la sala con interruptor de‚‚
interbloqueo
Todas las estanterías están fijadas con firmeza‚‚
Mostradores impermeables y resistentes a ácidos,‚‚
álcalis, disolventes orgánicos y calor
Iluminación suficiente‚‚
Suficiente espacio de almacenamiento, que se apro-‚‚
vecha debidamente
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
Bombonas de gas
Todas las bombonas bien aseguradas‚‚
Bombonas de reserva con sus tapas correspondien-‚‚
tes
Gases asfixiantes y peligrosos sólo en salas venti-‚‚
ladas
Cantidad excesiva de bombonas o bombonas va-‚‚
cías
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o

81
COMPROBADO (FECHA) SÍ NO N/A OBSERVACIONES
Sustancias químicas
Sustancias inflamables almacenadas en armario es-‚‚
pecia
Sustancias formadoras de peróxidos con doble fe-‚‚
cha (recepción y apertura)
Sustancias químicas debidamente separadas‚‚
Sustancias químicas peligrosas almacenadas por‚‚
encima del nivel de los ojos
Sustancias químicas almacenadas en el suelo‚‚
Recipientes abiertos‚‚
Todas las soluciones debidamente rotuladas‚‚
Termómetros de mercurio en uso‚‚
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
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o
o
Frigoríficos/congeladores/cámaras de frío
Presencia de alimentos para consumo humano‚‚
Sustancias inflamables en unidades a prueba de ex-‚‚
plosión
Rótulos exteriores si contienen sustancias canceríge-‚‚
nas, radiactivas o con peligro biológico
Cámaras de frío con apertura de emergencia‚‚
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
Equipo eléctrico
Cables alargadores‚‚
Enchufes con toma de tierra y la debida polaridad‚‚
Conexiones cerca de fregaderos, duchas, etc.‚‚
Equipo sin cables desgastados o en mal estado‚‚
Enchufes o tomas eléctricas sobrecargados‚‚
Tomas de corriente montadas fuera del suelo‚‚
Fusibles apropiados‚‚
Las tomas eléctricas cercanas a puntos de agua‚‚
cumplen las normas locales
Toma de tierra en cables eléctricos‚‚
Calefactores portátiles‚‚
o
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o
o
Equipo de protección personal
Material para lavado de ojos en el laboratorio‚‚
Ducha de seguridad disponible‚‚
Equipo de protección personal disponible (guantes,‚‚
batas, gafas de protección, etc.)
Ocupantes debidamente vestidos‚‚
Las batas, camisas, guantes y otras prendas de ves-‚‚
tir no se usan fuera del laboratorio
Equipo de protección personal para el almacena-‚‚
miento criogénico
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
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o
o
o
o
Gestión de residuos
Signos de gestión indebida de residuos‚‚
Desechos debidamente separados en los recipien-‚‚
tes apropiados
Recipientes para residuos químicos rotulados, fe-‚‚
chados y cerrados
Recipientes para residuos químicos debidamente‚‚
manipulados y almacenados
Recipientes para objetos cortantes y punzantes debi-‚‚
damente utilizados y eliminados
Ausencia de basura en el suelo‚‚
Procedimientos de eliminación de residuos expues-‚‚
tos en el laboratorio
o
o
o
o
o
o
o
o
o
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o
o
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o
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o
o
o
o
Programas de salud y seguridad en el trabajo
Comunicación de riesgos‚‚
Protección respiratoria‚‚
Conservación de la audición‚‚
Vigilancia del formaldehído‚‚
Vigilancia del óxido de etileno‚‚
Vigilancia de gases anestésicos‚‚
o
o
o
o
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o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
Controles técnicos generales
La presión en el laboratorio es negativa respecto de‚‚
las zonas de ocupación general, los pasillos y las
oficinas
Los sumideros de las pilas actúan como respirade-‚‚
ros
o
o
o
o
o
o

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