una diapositiva sobre los microscopios y su importancia

1. Introducción
La palabra microscopio deriva de las voces
griegas micros/pequeño y skopein/observar.
Es un instrumento que permite visualizar
cerca y aumentado, cuerpos pequeños y sus
detalles estructurales, cuyas dimensiones
son inferiores al limite del poder de
resolución del ojo humano calculado en 70
- 100 um (0.1 mm).

2. El conocimiento de las
estructuras del ser vivo está
basado casi totalmente en el
estudio con el microscopio.
El microscopio óptico es un
instrumento que permite la
observación de objetos y
detalles de estructuras tan
pequeñas que no podrían ser
observadas a simple vista. Con
él, nuestro grado de visibilidad
se amplía en cientos o miles
de veces, gracias a un conjunto
de lentes, dispuestos
convenientemente.

3. Las principales dificultades en
la observación y estudio de
estructuras biológicas son su
REDUCIDO TAMAÑOY SU
TRANSPARENCIA a la luz
visible. Dado que el
microscopio permite superar
estas dos dificultades, su uso y
el conocimiento de los
principios y técnicas en
microscopía, resultan
fundamentales para el
desarrollo de la investigación
en ciencias biológicas.

4. En el laboratorio es importante conocer la
magnificación o el grado de aumento que ha
sufrido la imagen del objeto que está siendo
observado. Es importante también el poder de
resolución del microscopio, es decir el poder
separar dos puntos que se encuentran muy
próximos entre sí. El poder de resolución de
un microscopio depende de su abertura
numérica y de la longitud de onda que usa. A
menor longitud de onda, mayor poder de
resolución.

5. Objetivos:
▪ Explicar y diferenciar las
partes del microscopio
compuesto.
▪ Manejar adecuadamente
el microscopio en la
observación de una
muestra en fresco.

6. Materiales:
▪ Microscopio Óptico

7. Procedimiento:
El microscopio óptico se puede agrupar en
cuatro sistemas:
▪ EL SISTEMA DE SOPORTE.
▪ EL SISTEMA DE AUMENTO.
▪ EL SISTEMA DE ILUMINACIÓN.
▪ EL SISTEMA DE AJUSTE.

8. Sistema de Soporte:
1.- EL PIE
Es la parte que sostiene al microscopio, asegurando perfecta estabilidad del
aparato en posición vertical, inclinado u horizontal. Presenta diferentes formas
siendo la más común la de herradura.
2.- LA COLUMNA, BRAZO O BASTIDOR
Es la parte articulada al pie por medio de una bisagra llamada charnela (en algunos
casos), sostiene la platina, el tubo óptico, lleva los tornillos macrométrico y
micrométrico. Generalmente tiene la forma de un arco, es por donde se toma
para su traslado de un lugar a otro.
3.- LA PLATINA
Es una plancha metálica colocada en posición horizontal, presenta un orificio en
la parte central que permite el paso de luz proveniente del sistema de
iluminación. En algunos modelos la platina lleva adherida un par de pinzas que
sirven para sujetar la lámina porta-objeto o un carro móvil (charriot) para el
desplazamiento del preparado hacia la derecha o izquierda durante la
observación.
4.-EL REVOLVER (CAMBIADOR DE OBJETIVOS)
Es un dispositivo metálico de forma circular, atornillado en la parte inferior del
tubo óptico, gira sobre su eje central; presenta 3 o 4 orificios a los que van
atornillados los objetivos. Este dispositivo sirve para cambiar la posición de los
objetivos durante las observaciones.

10. Sistema de Aumento:
1.- EL OCULAR. Denominado así porque va cerca al ojo del
observador, dispuesto en un tubo cilíndrico de metal, con un diafragma
intermedio, ambos lentes presentan las caras planas hacia el ojo del
observador y las caras convexas hacia el objeto. La lente que va cerca al
ojo del observador se denomina ocular propiamente dicho y la lente
inferior como lente de campo; en la parte lateral y superior del tubo
cilíndrico lleva una numeración que indica el número de aumento propio
del ocular.
Aumento. El poder de aumento se encuentra marcado en el ocular:
Un ocular x 4, aumenta 4 veces la imagen que produce el objetivo.
Un ocular x 6, aumenta la imagen 6 veces.
Un ocular x 10, aumenta la imagen 10 veces.
El poder de aumento de los microscopios utilizados en los laboratorios
médicos oscila entre 50 y 1000.

11. 2. OBJETIVOS. Llamado así porque va cerca del objeto a
observar, constituye la parte más importante del microscopio de
los cuales depende su alcance. Está constituido por un tubo
metálico cilíndrico cónico, que lleva en su interior un sistema de
lentes destinados a dar la imagen real e invertida del objeto.
a. Objetivos Secos. Son aquellos en los que, entre el lente frontal
y el preparado a observar, no existe sustancia alguna, excepto el
aire. Se utiliza generalmente para observaciones de preparados
en fresco.
Por el número de aumentos son de tres clases:
 Pequeño aumento o panorámico: mayor de 0 y menor de 10 X
 Mediano aumento: mayor de 10 y menor de 30 X.
 Gran aumento: mayor de 30 y menor de 80 X.
b. Objetivos de Inmersión. Son aquellos en los que, entre el lente
frontal y el preparado a observar, se interpone una sustancia
líquida, comúnmente el aceite de cedro, cuyo índice de refracción
es de 1.5; se utilizan generalmente para observaciones de
preparados en seco.

12. Características del Objetivo de Inmersión:
Es el de mayor aumento: 80X, 100X, 120X, 150X.
El lente frontal es más pequeño.
Lleva inscrito una fracción: 1/12; o un decimal: 1.20; 1.30.
De acuerdo a la procedencia lleva una franja o una raya negra para facilitar su
identificación.
La Abertura Numérica (AN)
La AN también se halla grabada en la manga de la lente, junto a la indicación del
poder de aumento; v. g.
0.30 en el objetivo de 10.
0.65 en el objetivo de 40
1.30 en el objetivo de 100
Distancia Focal:
Es la distancia que media entre la parte inferior del lente frontal y del objeto a
observar, cuando se tiene un enfoque perfecto.
Estas distancias focales para los diferentes objetivos son:
Pequeño aumento: entre 0.5 y 3 cm
Mediano aumento: entre 3 mm y 0.5 cm
Gran aumento: 1 mm y 3 mm entre 0.8 mm y 1.20 mm

13. Sistema de Iluminación:
Se encuentra ubicado en la parte inferior de la platina y comprende:
1.- El espejo. De forma circular, presenta dos caras, una plana y otra
cóncava, sujeto por medio de un eje giratorio. Se utiliza para enviar
los rayos luminosos hacia el preparado. Para trabajos con poco
aumento puede utilizarse la superficie cóncava; mientras que para
trabajo con gran aumento es necesario utilizar la cara plana.
2.- El diafragma. Es un dispositivo constituido por un sistema de
laminillas metálicas dispuestas concéntricamente, de tal forma que
permita cerrar y abrir, regulando de esta manera la entrada de luz
emitida por el espejo.
3.- El condensador. Es un dispositivo constituido, por un sistema de
dos o más lentes montadas dentro de un cilindro cónico truncado
de metal, está situado por debajo de la platina. Este sistema óptico
sirve para concentrar o condensar los rayos luminosos emitidos por
el espejo; funciona accionando un tornillo.
4.- Porta filtro. Es un dispositivo que permite colocar filtros de
diferentes colores, los cuales facilitan la observación.

14. Sistema de Ajuste:
El sistema comprende:
1.-TORNILLO MACROMETRICO. Se utiliza primero para lograr la aproximación del
enfoque. Se encuentra situado en la parte superior o inferior de la columna, permite
desplazamiento del tubo óptico y de la platina.
2.- TORNILLO MICROMETRICO. Hace que el objetivo se desplace más lentamente.
Se encuentra situado en la parte superior o inferior de la columna por debajo del
macrométrico. En los microscopios modernos, el micrométrico y el macrométrico se
encuentran accionados por un solo tornillo.
3.- TORNILLO DE AJUSTE DEL CONDENSADOR. Se utiliza para elevar el
condensador y aumentar la iluminación o descenderlo y reducir la iluminación.
4.- TORNILLOS PARA CENTRAR EL CONDENSADOR. Puede haber tres tornillos
colocados alrededor del condensador: uno al frente, uno en la izquierda y otro a la
derecha. Se usan para centrar el condensador exactamente en relación con el
objetivo.
5.- ELEVADOR DEL DIAFRAGMA IRIS. Este es un pequeño elevador que se
encuentra fijo al condensador. Se puede mover para cerrar o abrir el diafragma,
reduciendo o aumentando así el ángulo y la intensidad de la luz.
6.- REGULADORES DE LA PLATINA METALICA. Se utilizan para desplazar el
portaobjeto sobre la platina (presente en los microscopios mejorados).

15. Iluminación y Enfoque
La iluminación y enfoque son dos condiciones principales
para realizar una observación microscópica. La iluminación
se consigue utilizando fuentes luminosas adecuadas, que
pueden ser: natural o artificial. Los rayos de luz son
reflejados por el espejo o por la lámpara de iluminación
hacia el objeto o preparado.
Cuando se examina con grandes aumentos, la luz debe ser
intensa, en cambio cuando se hacen con menores aumentos,
la luz debe ser menos intensa, lo que se consigue
desplazando en forma vertical (arriba o abajo) al
condensador, y graduando la abertura del diafragma.
Obtenida la iluminación conveniente, se efectuará el enfoque
del preparado, utilizando primero el macrométrico hasta
encontrar la imagen (enfoque aproximado), y por último
accionando el tornillo micrométrico que permite el enfoque
perfecto (visualización de la imagen).

16. Condiciones necesarias para la
iluminación y el enfoque:
Son las siguientes:
▪ Objetivo a menor aumento (panorámico).
▪ Diafragma abierto.
▪ Espejo en posición correcta, dirigido hacia la fuente de luz.
▪ Descienda el objetivo hasta que se encuentre inmediatamente por
arriba de la preparación que se encuentra en el porta objetos.
▪ Utilizando el tornillo macrométrico eleve el objetivo hasta que
observe una imagen clara a través del ocular.
Nota: Al realizar el enfoque perfecto se debe tener en
cuenta las distancias focales a las que trabajan los
diferentes objetivos, a fin de evitar las rupturas de los
lentes frontales y destrucción del preparado a observar.

17. Amplificación
Cuando se trabaja en el laboratorio con el
microscopio, es de gran importancia conocer los
poderes o grados de aumento de magnificación de
los objetos observados.Así tenemos que, el grado de
aumento es la amplificación que ha sufrido la imagen
del objeto que está siendo observado. Para obtener
la amplificación se multiplica el número de aumento
del ocular por el número de aumento del objetivo.
Ejemplo:
La lente ocular presenta el número 10X y el número
de la lente del objetivo es 4X, el poder de
amplificación del microscopio cuando se trabaja
simultáneamente con estas dos lentes será de:
Amplificación: 10X x 4X = 40 diámetros.

18. Cuidado del Microscopio
El microscopio es un instrumento muy delicado y de costo muy alto, de allí
que se deben seguirse los siguientes cuidados para su uso:
▪ Limpiar los lentes con papel especial, papel de silicona para no rayarlos.
▪ Al transportarlo de un sitio a otro se tomará con la mano derecha la
columna del microscopio y con la mano izquierda el pie del microscopio. El
instrumento debe ir ligeramente inclinado hacia atrás para evitar la caída de
los lentes o espejos.
▪ El microscopio se utiliza en posición vertical.
▪ Al realizar la observación de preparados en fresco, evite que el agua fluya
sobre la platina.
▪ No colocar los dedos sobre los lentes o el espejo, pues la grasa ocasiona que
estos elementos se empañen dificultando la buena visión. Por otro lado, la
grasa facilita el desarrollo de microorganismos que deterioran el
microscopio.
▪ Cuando se use el objetivo de inmersión, procure usar poca cantidad de
aceite de cedro. Luego de finalizar la observación, limpie el objetivo con xilol
▪ Cuando termine de utilizar los microscopios de luz incorporada, desconecte
cuidadosamente los enchufes del tomacorriente. No tire del enchufe para
evitar su maltrato.

19. Bibliografía:
▪ Lehninger,A.,1987; Bioquímica; Edic.2º; Edit.
Mundiales. Madrid - España. 430 pp.
▪ Solomon, E.P.; Berg, L. Martín, D. 2001; Biología;
Edic. 5ta, Edit. McGraw-Hill Interamericana de
México S.A. de C.V.1237 pp.
▪ Villee, C.A.1988; Biología; Edic. 4º, Edit. McGraw-
Hill Interamericana de México S.A. de C.V.875 pp.

20. …gracias por su atención!!!
Marysol Salguero Rodríguez