Trabajo Publicado en Acta de Congreso de CIBIA VII.
2009. VII Congreso Iberoamericano de Ingeniería de Alimentos.
Universidad de la Sabana, Bogota , Colombia
Autores: Muñoz Ociel1, Sanhueza Mauricio1, Cid Hector1, Figuerola Fernando1, Estevez, Ana2,
1 Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos, Facultad de Ciencias Agrarias,
Universidad Austral de Chile. ocielmunoz@uach.cl
2 Departamento de Agroindustria y Enología, Facultad de Ciencias Agronómicas
Universidad de Chile.
Cibia VII: Poster de Trabajo de Investigación "Desarrollo de Metodología para la Extracción Asistida por Microondas de Polifenoles de
Linaza (Linum usitatissimum)."
2009. VII Congreso Iberoamericano de Ingeniería de Alimentos.
Universidad de la Sabana, Bogota , Colombia
Autores:Muñoz Ociel1, Sanhueza Mauricio1, Cid Hector1, Figuerola Fernando1, Estevez, Ana2,
1 Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos, Facultad de Ciencias Agrarias,
Universidad Austral de Chile.
2 Departamento de Agroindustria y Enología, Facultad de Ciencias Agronómicas
Universidad de Chile.
Cibia VII: Poster de Trabajo de Investigación "Desarrollo de Metodología para la Extracción Asistida por Microondas de Polifenoles de
Linaza (Linum usitatissimum)."
2009. VII Congreso Iberoamericano de Ingeniería de Alimentos.
Universidad de la Sabana, Bogota , Colombia
Autores:Muñoz Ociel1, Sanhueza Mauricio1, Cid Hector1, Figuerola Fernando1, Estevez, Ana2,
1 Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos, Facultad de Ciencias Agrarias,
Universidad Austral de Chile.
2 Departamento de Agroindustria y Enología, Facultad de Ciencias Agronómicas
Universidad de Chile.
"Extraccion Asistida por Microondas versus una extracción Termoregulada de Polifenóles de semillas de Linaza (Linum usitatissimum)." XVII Congreso Nacional de Ciencia y Tecnología de los Alimentos: “Chile en la Era de losAlimentos Funcionales: Regulación y proyección”. Sanhueza Mauricio, Cid Hector, Muñoz Ociel, Figuerola Fernando, Estevez Ana. Universidad Arturo Prat, Iquique, Chile.
En el tratamiento biológico de aguas residuales participan diversos microorganismos entre los que se encuentran
las bacterias filamentosas. El crecimiento excesivo e incontrolado de estos microorganismos genera problemas
asociados al esponjamiento de los fangos conocido como “bulking” y la formación de espumas o “foaming”. La
correcta identificación de estos organismos tiene un papel importante en la toma de decisiones para la correcta
operación de las plantas de tratamiento de agua residual. Los tratamientos anaerobios empleados para el
tratamiento de aguas residuales urbanas e industriales, con un contenido alto de sulfatos en el afluente, generan
efluentes que contienen concentraciones importantes de sulfuro que bajo determinadas condiciones pueden
favorecer la aparición de organismos filamentosos. En este trabajo se usan técnicas microbiológicas
convencionales y moleculares para la identificación de bacterias filamentosas (Thiothrix) asociadas a un
problema de decantación en un sistema de fangos activados que trata el agua efluente de un reactor anaerobio de
membranas sumergidas (SAnMBR) con concentraciones elevadas de sulfuro (105 ± 10 mg S·L-1). En este
estudio se comparan dos periodos de operación con el fin de determinar la influencia del tiempo de retención
hidráulico (TRH) sobre la proliferación de las bacterias filamentosas Thiothrix.
El diagnóstico molecular está basado en el análisis de los ácidos nucleicos ADN y ARN. El análisis de ADN permite obtener información de la estructura de un gen, mientras que el análisis del ARN aporta la información funcional sobre la expresión de una proteína. En la presente actividad de laboratorio se realizó la extracción de ADN de cepas de Trichoderma longibrachiarum (LIG052), Trichoderma atroviride (LIG042), Botrytis sp. (LIG035) y Stromatinia cepivorum (LIG020), y para ARN se empleó una cepa de Trichoderma harzianum (LIG064). La extracción de ADN se practicó utilizando el protocolo modificado para extracción de ADN de Crinipellis, y para ARN el protocolo de extracción de ARN de fruto de fresa, ambos propuestos por el Laboratorio de Investigaciones Genéticas UNET. Se verifico la calidad de las muestras mediante electroforesis en gel de agarosa 1%, observándose un recorrido difuso de las bandas electroforéticas debido a fallas reveladas durante el proceso.
2009 - Parámetros biológicos relacionados con la eliminación de nitrógeno en ...WALEBUBLÉ
Artículo publicado en las VI Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo (2009), Sevilla. Spain.
Asociación Científica Grupo Bioindicación de Sevilla
Obtención del colorante de la semilla de achiote (bixa orellana) utilizando m...Andy Romeo Cotrina Escobal
El presente estudio se llevo a cabo con la finalidad de extraer el colorante bixina, presente en la semilla del achiote, ampliamente utilizado por la industria alimentaria, mediante un tratamiento que ofrezca además de buenos rendimientos, un producto libre de componentes tóxicos. El proceso se basa en el uso de microorganismos productores de celulasas, capaces de degradar la pared celular de las semillas donde se encuentra el pigmento para facilitar su liberación en un medio acuoso, obteniéndose rendimientos del 81%, mayores a los ofrecidos por extracción acuosa y ligeramente menores que los obtenidos con tratamiento ácido-base, cuestionados por la comunidad Europea, obteniéndose una pasta que muestra picos en el intervalo de los 1600 cm-1 representativo de los grupos carbonilos característicos de la estructura de la bixina.
Palabras clave: Bixina, achiote, microorganismos celulolíticos.
El uso de agentes de control biológico antagonistas del suelo, tales como Trichoderma sp., es reconocido ampliamente como un método de lucha contra enfermedades causadas por hongos del suelo. Diversas cepas han sido evaluadas, determinando su efecto inductor de mecanismos de defensa local y sistémico, por medio de interacciones entre el antagonista con las raíces, conduciendo a la acumulación de moléculas de defensa, como las peroxidasas. Al efecto, para evaluar la presencia de diferentes compuestos inductores de la resistencia a diversas enfermedades se realizó la presente actividad de laboratorio, evaluando las cepas de Trichoderma sp. LIG064 y LIG006. El material para la extracción de proteínas e isoenzimas, y la separación mediante electroforesis en geles de poliacrilamida SDS-PAGE, se realizó siguiendo el protocolo modificado citado por Salazar et al. (2011). En general, la lectura de las bandas permitió diferenciar la presencia de elementos inductores de control biológico en las cepas de Trichoderma sp. evaluadas.
"Extraccion Asistida por Microondas versus una extracción Termoregulada de Polifenóles de semillas de Linaza (Linum usitatissimum)." XVII Congreso Nacional de Ciencia y Tecnología de los Alimentos: “Chile en la Era de losAlimentos Funcionales: Regulación y proyección”. Sanhueza Mauricio, Cid Hector, Muñoz Ociel, Figuerola Fernando, Estevez Ana. Universidad Arturo Prat, Iquique, Chile.
En el tratamiento biológico de aguas residuales participan diversos microorganismos entre los que se encuentran
las bacterias filamentosas. El crecimiento excesivo e incontrolado de estos microorganismos genera problemas
asociados al esponjamiento de los fangos conocido como “bulking” y la formación de espumas o “foaming”. La
correcta identificación de estos organismos tiene un papel importante en la toma de decisiones para la correcta
operación de las plantas de tratamiento de agua residual. Los tratamientos anaerobios empleados para el
tratamiento de aguas residuales urbanas e industriales, con un contenido alto de sulfatos en el afluente, generan
efluentes que contienen concentraciones importantes de sulfuro que bajo determinadas condiciones pueden
favorecer la aparición de organismos filamentosos. En este trabajo se usan técnicas microbiológicas
convencionales y moleculares para la identificación de bacterias filamentosas (Thiothrix) asociadas a un
problema de decantación en un sistema de fangos activados que trata el agua efluente de un reactor anaerobio de
membranas sumergidas (SAnMBR) con concentraciones elevadas de sulfuro (105 ± 10 mg S·L-1). En este
estudio se comparan dos periodos de operación con el fin de determinar la influencia del tiempo de retención
hidráulico (TRH) sobre la proliferación de las bacterias filamentosas Thiothrix.
El diagnóstico molecular está basado en el análisis de los ácidos nucleicos ADN y ARN. El análisis de ADN permite obtener información de la estructura de un gen, mientras que el análisis del ARN aporta la información funcional sobre la expresión de una proteína. En la presente actividad de laboratorio se realizó la extracción de ADN de cepas de Trichoderma longibrachiarum (LIG052), Trichoderma atroviride (LIG042), Botrytis sp. (LIG035) y Stromatinia cepivorum (LIG020), y para ARN se empleó una cepa de Trichoderma harzianum (LIG064). La extracción de ADN se practicó utilizando el protocolo modificado para extracción de ADN de Crinipellis, y para ARN el protocolo de extracción de ARN de fruto de fresa, ambos propuestos por el Laboratorio de Investigaciones Genéticas UNET. Se verifico la calidad de las muestras mediante electroforesis en gel de agarosa 1%, observándose un recorrido difuso de las bandas electroforéticas debido a fallas reveladas durante el proceso.
2009 - Parámetros biológicos relacionados con la eliminación de nitrógeno en ...WALEBUBLÉ
Artículo publicado en las VI Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo (2009), Sevilla. Spain.
Asociación Científica Grupo Bioindicación de Sevilla
Obtención del colorante de la semilla de achiote (bixa orellana) utilizando m...Andy Romeo Cotrina Escobal
El presente estudio se llevo a cabo con la finalidad de extraer el colorante bixina, presente en la semilla del achiote, ampliamente utilizado por la industria alimentaria, mediante un tratamiento que ofrezca además de buenos rendimientos, un producto libre de componentes tóxicos. El proceso se basa en el uso de microorganismos productores de celulasas, capaces de degradar la pared celular de las semillas donde se encuentra el pigmento para facilitar su liberación en un medio acuoso, obteniéndose rendimientos del 81%, mayores a los ofrecidos por extracción acuosa y ligeramente menores que los obtenidos con tratamiento ácido-base, cuestionados por la comunidad Europea, obteniéndose una pasta que muestra picos en el intervalo de los 1600 cm-1 representativo de los grupos carbonilos característicos de la estructura de la bixina.
Palabras clave: Bixina, achiote, microorganismos celulolíticos.
El uso de agentes de control biológico antagonistas del suelo, tales como Trichoderma sp., es reconocido ampliamente como un método de lucha contra enfermedades causadas por hongos del suelo. Diversas cepas han sido evaluadas, determinando su efecto inductor de mecanismos de defensa local y sistémico, por medio de interacciones entre el antagonista con las raíces, conduciendo a la acumulación de moléculas de defensa, como las peroxidasas. Al efecto, para evaluar la presencia de diferentes compuestos inductores de la resistencia a diversas enfermedades se realizó la presente actividad de laboratorio, evaluando las cepas de Trichoderma sp. LIG064 y LIG006. El material para la extracción de proteínas e isoenzimas, y la separación mediante electroforesis en geles de poliacrilamida SDS-PAGE, se realizó siguiendo el protocolo modificado citado por Salazar et al. (2011). En general, la lectura de las bandas permitió diferenciar la presencia de elementos inductores de control biológico en las cepas de Trichoderma sp. evaluadas.
Similar a CIBIA VII: Desarrollo de Metodología para la Extracción Asistida por Microondas de Polifenóles de Semillas de Linaza (Linum usitatissimum). (20)
(PROYECTO) Límites entre el Arte, los Medios de Comunicación y la Informáticavazquezgarciajesusma
En este proyecto de investigación nos adentraremos en el fascinante mundo de la intersección entre el arte y los medios de comunicación en el campo de la informática.
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Continuando con el desarrollo de nuestro proyecto haremos uso del método inductivo porque organizamos nuestra investigación a la particular a lo general. El diseño metodológico del trabajo es no experimental y transversal ya que no existe manipulación deliberada de las variables ni de la situación, si no que se observa los fundamental y como se dan en su contestó natural para después analizarlos.
El diseño es transversal porque los datos se recolectan en un solo momento y su propósito es describir variables y analizar su interrelación, solo se desea saber la incidencia y el valor de uno o más variables, el diseño será descriptivo porque se requiere establecer relación entre dos o más de estás.
Mediante una encuesta recopilamos la información de este proyecto los alumnos tengan conocimiento de la evolución del arte y los medios de comunicación en la información y su importancia para la institución.
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CIBIA VII: Desarrollo de Metodología para la Extracción Asistida por Microondas de Polifenóles de Semillas de Linaza (Linum usitatissimum).
1. Desarrollo de Metodología para la Extracción Asistida por Microondas de
Polifenóles de Semillas de Linaza (Linum usitatissimum).
Muñoz Ociel1, Sanhueza Mauricio1, Cid Hector1, Figuerola Fernando1, Estevez, Ana2,
1 Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos, Facultad de Ciencias Agrarias,
Universidad Austral de Chile. ocielmunoz@uach.cl
2 Departamento de Agroindustria y Enología, Facultad de Ciencias Agronómicas
Universidad de Chile.
RESUMEN
El objetivo de este trabajo fue obtener un
método para la extracción de polifenóles
desde semillas de linaza el cual fuera
rápido y de bajo costo. Por lo cual se
evaluó un método de extracción asistido
por microondas (MAE), utilizando un
microondas domestico. La muestra fue
extraída con una solución compuesta de
70% MeOH y 30% NaOH 1 M en 6 ciclos
de 30 segundos a 700 Watt, con 120
segundos de reposo entre ciclo. Para la
determinación del contenido de polifenóles
totales se utilizo el método Folin-Ciocalteau
utilizando una curva estándar de ácido
gálico para la determinación del contenido
de polifenóles totales presentes en las
muestras tratadas con la extracción asistida
por microondas, lo que permitió obtener
una extracción promedio de 503 ppm de
polifenóles en 13 minutos. El sistema MAE
desarrollado, demostró que en corto tiempo
se obtiene una alta extracción de
polifenóles, además de ser un método
barato
al
no
necesitar
de
gran
implementación.
INTRODUCCIÓN
Las semillas de Linaza son ampliamente
consumidas como alimento, ya que son
altamente
saludables,
al
prevenir
enfermedades del corazón y cáncer
(Hertog et al. 1994) gracias a su alta
composición de fibra y especialmente por
sus propiedades antioxidantes (Skerget et
al. 2005), esta característica se deben a la
gran cantidad de polifenóles que poseen
estas semillas, ya que este grupo de
compuestos actúan frente a los radicales
libres protegiendo al organismo del daño
causado por la oxidación, evitando daño
degenerativo que producen los radicales
libres. Los polifenóles son una gran
variedad de compuestos que se encuentran
presentes en alimentos de origen vegetal
(Velioglu et al. 1998), en estos organismos
son
producidos
como
metabolitos
secundarios, por lo que el consumo de
estos alimentos permite que sean una gran
fuente de compuestos antioxidantes (Moure
et al., 2001).
Las
propiedades
antioxidantes
que
presentan los polifenóles hacen que la
determinación de estas moléculas sea
crucial al evaluar las propiedades
bioactivas de la linaza. Existen diferentes
métodos de extracción para las distintos
compuestos fenólicos (Naczk et al.,. 2004;
Marino et al., 2001; ASAMI et al. 2003;
DAE-OK KIM et al., 2003) tal como la
solubilización en etanol o metanol, o
sistemas más complejos que requieren de
largos periodos para su realización (Hano
et al. 2006),como ejemplo en un sistemas
de extracción convencional como el
descrito Beejmohun et al. (2007) donde se
necesita tratar la muestra por 3 h con una
solución 70% de MeOH, luego se realiza
una hidrólisis alcalina con NaOH por 3 h
mas. En general la mayoría de los
tratamientos no son muy efectivos y
requieren mucho tiempo, además la semilla
de linaza presenta en su estructura una
goma que se coextrae con metanol, la cual
interfiere en las determinaciones de
polifenóles totales. Por estas razones se
utilizo y desarrollo un método de extracción
asistido por microondas (MAE) (Beejmohun
et al 2007) para extraer los polifenóles
presentes en las semillas de linaza,
aprovechando que la exposición a las
ondas
electromagnéticas
de
microondas ocasionan movilidad iónica
del medio junto con la rotación de las
moléculas, lo que
provoca la
generación de calor
así como el
movimiento de las moléculas en el
sistema (Kaufmann et al., 2002). Con este
método se busca obtener un mejoramiento
en la extracción en comparación con los
métodos convencionales.
2. MATERIALES Y MÉTODOS
Cuantificación de polifenóles.
Materiales
Se uso el método de Folin-Ciocalteau
según Singleton et al. (1965) para la
cuantificación de polifenóles totales. En
tuvo de ensayo se tomaron 40 μL de
muestra; 3,16 mL de agua destilada y 200
μL
de
reactivo
Folin-Ciocalteauen.
Posteriormente se agregan 600 μL de
solución de carbonato de sodio 20%, y se
dejo en oscuridad por dos horas. La
absorbancia fue determinada a 765 nm. Se
cuantifico utilizando curvas de calibración
con acido gálico, por lo que la relación de
concentración se expresan en función del
acido gálico.
Se utilizaron: semillas de linaza (linum
usitatissimum) de la variedad “Celestina”
cosecha 2007, un microondas domestico
LG modelo MS-1948 JL, un vaso de teflón
con tapa rosca de 100 ml hecho en el
laboratorio,
reactivo
Folin-Ciocalteau
(Merck), carbonato de sodio (Merck),
espectrofotómetro Génesis, una centrifuga
para tubos falcon y acido gálico (Sigma),
todos los solventes utilizados fueron a lo
menos de grado P.A.
MÉTODOS
RESULTADOS
Extracción de Polifenóles (MAE).
Las semillas de linaza fueron molidas y
posteriormente desgrasadas con éter etílico
en un extractor soxhlet por 2.5 h. La
extracción de los polifenóles se llevó a
cabo en un vaso de teflón con tapa rosca
de 100 ml, en el cual se agrego 1 gr de
harina de linaza desgrasada con 5 ml de
una solución de 70% de metanol y 30%
NaOH 0,1 M y 1,0 M. Se utilizo un
microondas domestico al cual antes de su
utilización se le realizó un mapeo de los
puntos de mayor incidencia de irradiación,
sitio donde se coloco el vaso de teflón con
la muestra. El reactor fue sometido a 8
ciclos de 30 segundos a 700 W de potencia
(Figura 1), con intervalos de 120 segundos
entre cada ciclo, después el solvente se
extrae con micropipeta y es centrifugado
por 2 minutos a 3000 rpm para la obtener la
muestra con los polifenóles disueltos. Se
realizaron múltiples ensayos para obtener
muestras en cada ciclo, lo cual permitió
obtener un perfil de extracción de
polifenóles a medida que transcurría el
tiempo.
Figura 1: Esquema del modelo empleado
en la extracción asistida con microondas
(MAE).
Con el objeto de determinar cual era la
forma óptima de extracción de polifenóles
con
el
MAE
se
evaluaron
dos
concentraciones distintas de NaOH 0,1 M y
1, 0 M para la mezcla de solvente. Para
obtener cual era la concentración más
adecuada se determino la concentración de
polifenóles en cada ciclo, además esto
permitió apreciar cual es el tiempo
apropiado de extracción.
Con la medición de polifenóles totales
realizadas en cada ciclo, como se puede
observar en la figura 2, al utilizar la solución
de 70% MeOH y 30% NaOH 0.1 M se
obtuvieron
valores
crecientes
de
concentración, alcanzando 360 ppm
aproximadamente en el octavo ciclo, con
una notoria línea recta representada en la
figura 2, pero al comparar los resultados
con la solución 70% MeOH y 30% NaOH
1 M esta ultima presenta una mejor
extracción de polifenóles. Como se aprecia
en la figura 2 desde el cicló 5 al 8 se
registraron niveles similares de extracción
(ciclo 5: 499 ppm, ciclo 6: 503 ppm, ciclo 7:
485 ppm, ciclo 8: 490 ppm) en donde al
sexto ciclo hay un leve aumento de
concentración y posterior a este punto
comienza a mantenerse dentro de los
mismos rangos. Por el nivel de irradiación
que sufren los compuestos durante el
tratamiento con las ondas de microondas
se estimó que el sexto ciclo correspondería
al punto más adecuado para el
establecimiento de la metodología.
3. AGRADECIMIENTOS
Concentracion de polifenoles ( ppm )
600
A la universidad Austral de Chile y al
proyecto Fondecyt 1080277
500
400
REFERENCIAS.
300
−
200
100
0
50
100
150
200
250
300
Tiempo ( seg )
NaOH 1 M
NaOH 0,1 M
Figura
2:
Grafico
comparativo
de
concentración promedio de polifenóles en
tratamiento de extracción asistido por
microondas (MAE) con soluciones de 0,1M
y 1,0 M de NaOH.
Los ensayos revelan que el uso de una
solución de 70% de metanol y 30% NaOH
1, 0 M logra una mayor extracción que con
0,1M de NaOH. El tiempo necesario de
irradiación de microondas se produce al
sexto ciclo, es decir que a los 180
segundos se produce la máxima extracción
de polifenóles, ya que con tiempos mas
prolongados como en los ciclos 7 y 8 no
hay un aumento en la extracción.
−
−
−
−
CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados obtenidos en
este estudio, las concentraciones de
polifenóles totales de las muestras de
semillas de linaza que fueron sometidas a
la extracción asistida con microondas,
indican que el método de extracción mas
adecuado como se puede ver en la figura
2, es con NaOH 1 M, con 6 ciclos en el
microondas a 700 W, con 120 segundos
entre ciclo.
El sistema MAE desarrollado, demostró
que en corto tiempo obtiene una alta
extracción
de
polifenóles,
ventaja
importante en el consumo del tiempo al
compararla con metodologías tradicionales
que requieren de varias horas de
tratamientos, además es un método barato
en comparación a otros métodos MAE que
usan microondas de laboratorio que son de
altos costos.
−
−
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−
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