El documento describe los principios básicos de la citometría de flujo, incluyendo la identificación de marcadores celulares mediante anticuerpos, la detección de moléculas intracelulares y el análisis del ADN. Explica que usa láseres para excitar fluorocromos unidos a las células, mide la luz dispersada y emitida, y provee datos sobre las características de las células de forma individual. Finalmente, destaca algunas aplicaciones como el estudio de la apoptosis, proliferación celular y expresión gén

2. Introduction to Flow Cytometry: A Learning Guide. BD Biosciences, 2002.
http://www.bu.edu/flow-cytometry/files/2010/10/BD-Flow-Cytom-
Learning-Guide.pdf Recuperado: 19/10/16.

3. • Identificación de marcadores celulares con
anticuerpos.
• Fenotipificación por antígenos de superficie.
• Detección intracelular de iones o moléculas.
• Citometría de bacterias.
• Análisis de DNA: ciclo celular, tamaño del
genoma y aneuploidías.
• Estudios de inducción de apoptosis.
Proliferación celular mediante marcaje.
• Expresión génica.
• Separación (sorting) para: estudios
funcionales en subpoblaciones definidas,
cultivo de células transfectadas, clonación de
células y enriquecimiento celular.
http://labnalcit.org/que-es-la-citometria-de-flujo/

5. • Single cells suspensions (células disgregadas)
• Genera mediciones discretas
• Provee la distribución de las características.

6. • Tres partes básicas:
Fluídica
Óptica
Electrónica

7. • La muestra se
inyecta en un
sheath fluid
• Enfoque
hidrodinámico
• Pasa por el haz
• Solo una
partícula pasa
frente al laser

8. Menor flujo:
-Más precisión
-Muy Tardado.
Mayor flujo:
-Menos precisión
-Rápido.

9. Sistemas acústicos

11. • Formados por una fuente, espejos lentes y
filtros que dirigen el haz
• Se usan láser:(The argon ion laser is commonly used in flow
cytometry because the 488-nm light that it emits excites more than
one fluorochrome )
-Que emiten longitudes estándar.
• Al entrar en contacto con una célula la luz es
espaciada (scattered y varias direcciones
Foward y Side Scatter)

13. • Pulsos de Voltaje
• Analiza altura, área y la longitud del pulso
• Trasfiere los datos

15. • El fluorocromo interacciona con el láser y
emite energía radiante, la luz emitida es de
menor energía obteniendo diferencia entre la
longitud de onda de absorción y emisión
• El uso de fluorocromos se puede detectar
hasta 3 colores por láser.

17. • La muestra a analizar debe encontrarse en
suspensión.
• Hay muestras como la sangre periférica,
médula ósea, o otros fluidos biológicos, que
precisan de un mínimo procesamiento;
• Otras muestras necesitan disgregación
(mecánica, enzimática, etc.)

19. Referencias.
• Introduction to Flow Cytometry: A Learning Guide. BD Biosciences, 2002.
http://www.bu.edu/flow-cytometry/files/2010/10/BD-Flow-Cytom-Learning-
Guide.pdf Recuperado: 19/10/16
• http://labnalcit.org/ Fecha de consulta:18/10/16, http://labnalcit.org/equipos-2/
• Jacob Frelinger, Thomas B Kepler, Cliburn Chan. Flow: Statistics, visualization and informatics
for flow cytometry, Source Code Biol Med. 2008.
• [Thermo,Fisher Scientific].(2/10/2012), The Discovery of Acoustic Focusing & the Attune®
Flow Cytometer. Recuperado de: https://www.youtube.com/watch?v=b2ilHEnugE0
• [Thermo,Fisher Scientific].(14/04/2011), Attune® Acoustic Focusing Cytometer Tutorial
Recuperado de: https://www.youtube.com/watch?v=kpkL2EEJDsU