Este documento describe la sífilis, una enfermedad infecciosa causada por la bacteria Treponema pallidum que se transmite principalmente a través del contacto sexual. Explica los métodos de diagnóstico como pruebas serológicas no treponémicas (VDRL, RPR) y treponémicas (FTA-ABS, ELISA, pruebas rápidas), así como la interpretación clínica de los resultados. También proporciona detalles sobre el procesamiento y envío adecuado de muestras para el diagnóstico de

2. La Sífilis es una
enfermedad infecciosa
sistémica exclusiva del
humano como único
reservorio, de
transmisión sexual,
sanguínea y perinatal,
causada por una
bacteria, la cual penetra
en la piel o mucosas
lesionadas.
La transmisión sexual se
produce por inoculación
del microorganismo en
abrasiones causadas por
micro traumatismos en
piel o mucosas durante
las relaciones sexuales,
evolucionando a
erosiones y
posteriormente a úlceras.
Si la enfermedad no es tratada
durante la fase aguda,
evoluciona hacia una
enfermedad crónica con
manifestaciones
potencialmente graves. La
infección puede clasificarse
como congénita (transmitida de
madre a hijo in útero) o
adquirida (transmitida por vía
sexual o transfusional).

3. • PRUEBAS NO TREPONÉMICAS:
VDRL, RPR,
• PRUEBAS TREPONÉMICAS:
FTA- ABS, , ELISA IGM IGG, PRUEBAS RÁPIDAS.

4. • VDRL (VENEREAL DISEASE RESEARCH
LABORATORY)
• Permite una reacción antígeno-
anticuerpo de floculación en lámina.
• Muestra: suero o LCR
• El Ag es una solución alcohólica incolora
que contiene cardiolipina, colesterol y
lecitina para producir una reactividad.
• Permite análisis cualitativo y cuantitativo

5. • RPR (RAPID PLASMA REAGENT)
o Las "reaginas" presentes en el suero de individuos
infectados con Treponema pallidum, se detectan
por acción de las mismas con antígeno de
cardiolipina, lecitina y colesterol adsorbido sobre
partículas de carbón.
o La reacción produce una aglutinación visible
macroscópicamente, favorecida por las partículas de
carbón. Las reacciones inespecíficas se evitan con el
empleo de antígeno altamente purificado y el
agregado de cloruro de colina, por lo que no es
necesario inactivar la muestra.

6. R= reactivo Rm= mínima reactividad N= no reactivo
Dilución de suero Reporte
Suero no
diluido 1:1
1:2 1:4 1:8 1:16
R R N N N Reactivo dilución 1:2 o 2 dils.
R R R N N Reactivo dilución 1:4 o 4 dils.
R R R Rm N Reactivo dilución 1:8 o 8 dils.

7. LAS PRUEBAS TREPONÉMICAS USAN AL T. PALLIDUM O COMPONENTES DE ESTE COMO
ANTÍGENO PARA LA DETECCIÓN DE ANTICUERPOS TREPONÉMICOS.
ESTAS PRUEBAS SE UTILIZAN PARA VERIFICAR LA REACTIVIDAD DE LAS PRUEBAS NO
TREPONÉMICAS, PUEDEN SER USADAS PARA CONFIRMAR UNA SOSPECHA CON
EVIDENCIA CLÍNICA DE SÍFILIS COMO OCURRE EN LA SÍFILIS TARDÍA Y CUANDO LAS
PRUEBAS NO TREPONÉMICAS SON NO REACTIVAS.
MHA-TP, FTA-ABS, ELISA. PRUEBAS RÁPIDAS.

8. TÉCNICAS TREPONÉMICAS FTA-ABS
 ES EL MÉTODO DE REFERENCIA PARA LA
DETECCIÓN DE ANTICUERPOS
 MUESTRA DE SUERO INACTIVADO A 56ºC
EN BAÑO TERMORREGULADO POR 30
MINUTOS.
 USA FRACCIONES DE TREPONEMAS COMO
ANTÍGENO.
 EL CONJUGADO CONSISTE EN
ANTIGLOBULINA HUMANA CON
ISOTIOCIANATO DE FLUORESCEÍNA
 ES UNA TÉCNICA COMPLEJA Y DE ALTO
COSTO, SE REQUIERE EQUIPAMIENTO Y
PERSONAL ADIESTRADO.
 MICROSCOPIO INMUNOFLUORESCENCIA
 PERMANECE POSITIVA DE POR VIDA.

9.  UTILIZA GLÓBULOS ROJOS DE POLLO COMO
FASE SÓLIDA, SENSIBILIZADOS CON
PROTEÍNAS DE TREPONEMA PALLIDUM.
 MÉTODO DE AGLUTINACIÓN
 ES UNA TÉCNICA SENCILLA
 NO REQUIERE DE EQUIPAMIENTO COMPLEJO.
ESPEJO LECTOR Y MICROPLACAS CON FONDO
CÓNCAVO.
 LA LECTURA SE REALIZA A TRAVÉS DE
DILUCIONES SUCESIVAS DEL SUERO HASTA
1:80
 LA INTENSIDAD DE LA REACCIÓN SE DECLARA
EN CRUCES, DE ACUERDO A LA INTENSIDAD
DE LA AGLUTINACIÓN
Técnicas treponémicas MHA-
Tp

10. Pruebas treponémicas ELISA
• Es una ELISA usada como prueba
confirmatoria en el diagnostico de
sífilis. Detecta IgG e IgM
• Consiste en micropozos
sensibilizados con T. pallidum, que
al adicionar suero del paciente con
anticuerpos específicos reaccionan
revelando un color detectable por
absorbancia.

11. o Es un ensayo sándwich con una
incubación basado en el principio
de quimioluminiscencia.
o Permite la determinación
cualitativa de anticuerpos
específicos totales dirigidos
contra Treponema pallidum en
muestras de suero o plasma
humano.
o No es capaz de discriminar entre
las diferentes clases de
anticuerpos.
o La detección de los anticuerpos
totales anti-Treponema pallidum
puede indicar una infección
reciente, pasada o tratada con
éxito.
LIAISON Treponema
Screen

12. Negative
Positive
Put 20ul of WB(10ul of S,P)
into the sample hole
Add 3~4 drops of assay diluent
into the sample hole
5'~20'
Interpret test result at
5~20minutes.
PRUEBA RÁPIDA PARA SÍFILIS
LAS PRUEBAS RÁPIDAS PARA LA DETERMINACIÓN DE SÍFILIS SON UN
ENSAYO INMUNOCROMATOGRÁFICO EN FASE SÓLIDA PARA DETECCIÓN
CUALITATIVA DE ANTICUERPOS TIPO IG G, IG M E IG A CONTRA
TREPONEMA PALLIDUM.

13. Interpretación clínica de las pruebas
Diagnostico PRUEBA NO
TREPONEMICA
TITULO PRUEBA
CONFIRMATORIA
Infección activa Reactiva Menor 1:8 Reactiva
Sífilis latente Reactiva A menudo <1 : 4 Reactiva
Falsos positivos Reactiva Generalmente <1 : 4 Negativo
Tratamiento exitoso Reactiva ò
No Reactiva
disminución de 2
concentraciones (por
ej., de 1:16 a 1:4)
Reactivo

14. Sangre completa para serología
•El tubo debe ir debidamente identificado (nombre, cédula y fecha de toma de la muestra) y acompañado del
Formulario para la Notificación Obligatoria individual de eventos de Salud Pública.
•Extraer del paciente 1 tubo con 3 a 5 ml de sangre, utilizar tubo seco sinanticoagulante.
Sangre completa para pruebas moleculares
•El tubo debe ir debidamente identificado (nombre, cédula y fecha de toma de la muestra) y acompañado del
Formulario para la Notificación Obligatoria individual de eventos de Salud Pública.
•Extraer del paciente 1 tubo con 4 ml de sangre, utilizar tubos con EDTA.
•Recibe las muestras de LCR las cuales deben ser tomadas por un médico.
•Realizar pruebas de microhemaglutinación y floculación para la detección de:
• Anticuerpos IgM para Sífilis y Anticuerpos contra antígeno lipoideo (VDRL o RPR).
Informe de resultados a:
•Servicio solicitante de la institución Epidemiología del nivel local
Envio de muestras
•Aquellas muestras que el laboratorio local no pueda procesar, deben ser enviadas al laboratorio regional
correspondiente, debidamente rotuladas, embaladas, manteniendo la cadena de frío (4°C) y acompañadas
por el formulario de notificación.
Laboratorio a Nivel Local: Se encarga de la toma de muestras de sangre para detección de
antígenos y/o anticuerpos por métodos serológicos y/o moleculares para sífilis.

15. Laborator
io a Nivel
Regional
Es el encargado del monitoreo para que la
muestra sea tomada de acuerdo a las
normas y garantizar que de ser necesario
el envío de la muestra, se haga de acuerdo
a los protocolos establecidos.
Debe cumplir las responsabilidades del
nivel local en el caso que éste no pueda
cumplir con las indicaciones descritas para
el manejo y procesamiento de la muestra.

16. Recibir las muestras del
nivel local o regional e
informar por lo menos
en las primeras 48
horas sobre la calidad
de la muestra y
comunicar a
epidemiología nacional,
regional y a la instancia
que envía la muestra.
Procesar las muestras
de acuerdo a las
metodologías
serológicas y
moleculares en caso que
los laboratorios locales
o regionales no cuenten
con la capacidad de
hacerlas.
Notificar de forma
mediata los resultados
de las pruebas de
laboratorio al servicio
solicitante de la
institución y a
epidemiología del nivel
local en menos de 15
días.
Custodiar las muestras y
conservar alícuota de las
mismas a menos 80°C.
Participar anualmente
en el Programa de
Control de Calidad
Externa de Sífilis.
Laboratorio a Nivel Regional

17. Es considerado como la enfermedad viral más importante originada por
artrópodos
El antígeno NS1 es encontrado a partir del primer día y hasta nueve días después
del ataque de fiebre.
Usualmente la IgM no es detectable hasta cinco o diez días después del inicio de
la enfermedad en los casos de infección primaria por dengue y hasta cuatro o
cinco días después del inicio de la enfermedad en infecciones secundarias.
En infecciones primarias, la IgG aparece hacia el día catorce y persiste de por
vida.
Las infecciones secundarias muestran elevaciones de IgG a partir del día uno o
dos del inicio de síntomas.

18. Tiempo en días
Día 0 Día 3 Día 5 Día 8 Día
15
Fase Aguda Fase Convaleciente
Detecto Virus Detecto Anticuerpos

19. TODO DIAGNOSTICO DE DENGUE REQUIERE DE UNA BUENA HISTORIA CLINICA Y
DE LA ESCOGENCIA ADECUADA DE LA PRUEBA DE LABORATORIO

20. SUERO
• EXTRAER 5 A 7 ML DE SANGRE (TUBO SIN ANTICOAGULANTE) / DOS MICROTUBOS EN NEONATOS
DEBIDAMENTE IDENTIFICADO
• FORMULARIO DE LABORATORIO PARA DENGUE/ CHIKUNGUNYA / ZIKA.
ADICIONALMENTE RECOLECTAR EN MUJERES EMBARAZADAS:
• ORINA DE HASTA 14 DÍAS DE EVOLUCIÓN
• LÍQUIDO AMNIÓTICO (A CRITERIO MÉDICO);
Y EN PACIENTES CON SOSPECHA DE SÍNDROMES NEUROLÓGICOS RECOLECTAR
• ORINA Y LCR (A CRITERIO MÉDICO).
DEFUNCIONES: HÍGADO, BAZO, CEREBRO
• ENVASE ESTÉRIL
• SIN PRESERVANTES

21. Para casos agudos de 0-3 días (0-72 horas) de
evolución según tipo de muestra
•Suero: Biología Molecular Detección de ARN viral por Transcripción
Reversa- Reacción en Cadena de la Polimerasa (RT-PCR) en tiempo
real o final, ELISA para Ag NS1, Cultivo viral, Prueba rápida para Ag
NS1
•Tejido y Suero (casos fatales): PCR en tiempo real y cultivo viral
Para casos convalecientes de 5-21 días de evolución
según tipo de muestra
•Suero: ELISA para Ac IgM/IgG, prueba rápida para Ac IgM/IgG
•Tejidos (sólo en casos fatales): RT-PCR

22. RT-PCR:
Resultado Positivo: Se confirma
presencia del material genético del virus,
y puede determinarse el serotipo
circulante. La muestra original de suero
o tejido será procesada para cultivo
viral.
Resultado Negativo: No se registra la
presencia del material genético del virus.
Se recomienda el análisis serológico de
una segunda muestra tomada entre el 5º
y 21º día de inicio de síntomas. La
muestra original de suero o tejido
Pruebas de ELISA para
Antígeno NS1 tomadas
de 0-3 días de
evolución con:
Resultado Positivo: Se confirma infección
por dengue. Una prueba de ELISA para
antígeno NS1 positiva se considera como
caso confirmado y no necesita una
segunda muestra para su confirmación.
Resultado Negativo: No descarta
totalmente la infección por dengue, por
lo cual se requerirá tomar segunda
muestra (dentro del 5º al 21º día de
evolución) para detección de anticuerpo
Ig M e IgG por ELISA.
Pruebas rápidas para
antígeno NS1 tomadas
de 0-3 días de
evolución:
Resultado Positivo: Confirma el caso y
no requieren confirmación
. Resultado Negativo: Requiere
confirmación del resultado con método
de ELISA. No descarta totalmente la
infección por dengue, por lo cual se
requerirá tomar segunda muestra
(dentro del 5º al 21º día de evolución)
para detección de anticuerpo IgM e IgG
por ELISA.
Pruebas rápidas para
anticuerpo IgM/IgG
tomadas de5-21 días
de evolución:
Resultados positivos y negativos: deben
ser confirmadas por la técnica de ELISA
para detección de Anticuerpos IgM/IgG
con la misma muestra.

24. ● Todas las instalaciones que forman parte de la Red de Dengue debe mandar al ICGES el 10% de
las muestras positivas y negativas para detección de anticuerpos de forma mensual para el Control
de Calidad.
● Todas las instalaciones que procesan muestras para detección de NS1, deben enviar al ICGES el
10% de las muestras con resultados positivos y 10% de muestras con resultados negativos para
realizar el control de calidad, detección del ARN viral por RT-PCR e intento de aislamiento.
● En caso de brotes o epidemias el Departamento Nacional de Epidemiología por conducto de la
Dirección General del MINSA - C.S.S. - I.C.G.E.S. - OPS Ministerio de Salud indicará el porcentaje
o cantidad de muestras agudas que deben ser enviadas al ICGES.

25. • 2-8° C ( DESDE LA TOMA DE LA MUESTRA Y DURANTE TODO EL TRANSPORTE HACIA
EL ICGES)
• UTILIZAR PADS DE HIELO (FRIOS /CONGELADOS) DURANTE SU TRANSPORTE.

26. Fuente: Laboratorio ICGES

27. Formulario de Toma de Muestra