UNIVERSIDAD NACIONAL
DEL CENTRO DEL PERÚ
Dr. Ciro Rodríguez
Aliaga
CATEDRÁTICO
CÁTEDRA
Laboratorio Clínico
TEMA
Sífilis y Chagas
SIFILIS
(TREPONEMA PALLIDUM)
TREPONEMA
PALLIDUM
T. PALLIDUM
T. ENDEMICUS
T. PERTENUE
INCAPACES DE
DESARROLLARSE EN
MEDIOS ACELULARES
NO REALIZAN EL CICLO
DE LOS ACIDOS
TRICARBOXILICOS
ESPIROQUETA GRAM-NEGATIVA
0.1 a 0.2 x 6 a 20 µm diámetro
CARENCIA DE GENES PARA
CATALASA Y SUPEROXIDO
DISMUTASA
MICROAEROFILAS
O ANAEROBIAS
ENTRA AL ORGANISMO A TRAVÉS DE
UNA MEMBRANA MUCOSA O POR
ABRASIÓN
FIBRONECTINA. TPN83 Y 92
SE MULTIPLICA
CON RAPIDEZ EN
SITIO SE DISEMINA A TRAVES DE LA
CIRCULACION LINFATICA Y
SISTEMICA (10 A 120 DIAS)
Movilidad en
sacacorchos
Respuesta
inflamatoria en sitio
de entrada
ENDOTELIOS CAPILARES DEL ÁREA
SE INFLAMAN Y LA REGIÓN SE
INFILTRA CON CÉLULAS
PLASMÁTICA Y MONOCITOS Y
LINFOCITOS. (CHANCRO)
LOS GANGLIOS
LINFÁTICOS QUE DRENAN
AL CHANCRO EN
OCASIONES SE INFLAMAN
(GOMAS SATELITALES)
MCP
1
MCP
2TROM
PS
CD14 Th1
GENERACIÓN DE CITOCINAS
PROINFLAMATORIAS IL2,12 Y
INF Y
HIALURONIDASA
SIFILIS
(TREPONEMA PALLIDUM)
PRUEBAS
SEROLOGICAS
DIAGNOSTICO DE
LABORATORIO
MICROSCOPIA
CULTIVO
SIFILIS
(TREPONEMA PALLIDUM)
INCAPACIDAD DE CRECER EN MEDIOS
ACELULARES
PCR EN LCR, SANGRE Y LESIONES
GENITALES
PRUEBAS NO TREPONEMICAS
PRUEBAS TREPONEMICAS
RPR (Reagina Plasmática
Rápida)
VDRL (Venereal Disease
Research Laboratory)
PRUEBAS
BASADAS EN ACIDOS
NUCLEICOS
FTA-ABS
TP-PA
MICROSCOPIA DE CAMPO OSCURO PRUEBA DE
ANTICUERPOS FLUORESCENTES DIRECTOS
PRUEBAS NO
TREPONEMICAS
ANTICUERPOS IgG e IgM
(anticuerpos reagínicos) FRENTE
A LIPIDOS DE SUPERFICIE DEL
TREPONEMA
SENSIBILIDAD 70-85%
ESPECIFICIDAD 98-99%
INACTIVACION DEL
SISTEMA DEL
COMPLEMENTO
Miden la floculación del
antígeno cardiolipinico con el
suero del paciente
SIFILIS
(TREPONEMA PALLIDUM)
PRUEBA V.D.R.L. CUALITATIVO
 COMPONENTES
 Lecitina
 Cardiolipina
 Colesterol
 Buffer
1. Extraer sangre venosa 2 ml. aproximadamente con anticoagulante o
sin anticoagulante.
2. Centrifugar cuidadosamente a 2,500 r.p.m. por 5 minutos.
3. Inactivar el suero a 56 por 30 minutos en baño María.(VDRL)
4. Tomar el suero inactivado 50 l. en una superficie plano con anillo y
una gota de antígeno preparado con una aguja calibre Nº l8.
5. Homogeneizar y colocar la lámina en un rotador eléctrico por 4
minutos a l80 Rpm.
6. Lectura al microscopio con lente de 40 x.
Reacción de Wassermann
Colocar 50 l. de
suero fisiológico al
0.9 % del 1º al 5º
círculo de la
tarjeta
Colocar 50 ul del suero problema en el
primer circulo , mezcle bien y transfiera 50
ul al tercer circulo, mezcle y transfiera 50 ul
al 4° circulo , mezcle y descarte 50 ul del
ultimo circulo.
Usando un aplicador, extienda
la mezcla en cada círculo
comenzando en el 5º y
terminando en el 1º círculo.
Adicionar 01 gota de
antígeno a cada uno de
los círculos del 1º al 5º ,
homogeneizar y rotar
por 8 minutos.
La lectura sigue los
mismos parámetros
que para la prueba
cualitativa.
Reportar el título en términos
de la más alta dilución en que se
produzca un resultado reactivo
(Reactivo débil).
RPR CUALITATIVO Y
SEMICUANTITATIVO
COMPONENTES
 Cardiolipina
 Lecitina
 Colesterol
 EDTA
 Acetilcolina
 Carbón
SIFILIS
(TREPONEMA PALLIDUM)
SIFILIS
(TREPONEMA PALLIDUM)
Positivo Débil.- Se detecta
por la acumulación de finos
agregados negros
circundados por un área
difusa de finos agregados
negros.
RPR CUALITATIVO Y
SEMICUANTITATIVO
Reacción Positiva.- Se
observa la producción
de agregados negros
observados
normalmente por todo
el círculo de la prueba.
Reacción Negativa.- Está
dada por la acumulación
de carbono en el centro
del círculo.
FTA – ABS (Prueba de absorción de anticuerpos
treponemicos fluorescentes)
PRUEBAS
TREPONEMICAS
SENSIBILIDAD 80%
ESPECIFICIDAD 98%
Utiliza T. Pallidum
como antígeno.
Usa antibioticos
antihumanos marcados
con isotiocianato
fluoresceina
Son confirmatorias
Es útil en todas las
etapas de la enfermedad
La reactividad se
declara en cruces por
la intensidad de la
fluorescencia.
Presenta alrededor
de un 1% de falsos
positivos
!MUCHAS
GRACIAS!

sifilis

  • 1.
    UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRODEL PERÚ Dr. Ciro Rodríguez Aliaga CATEDRÁTICO CÁTEDRA Laboratorio Clínico TEMA Sífilis y Chagas
  • 2.
    SIFILIS (TREPONEMA PALLIDUM) TREPONEMA PALLIDUM T. PALLIDUM T.ENDEMICUS T. PERTENUE INCAPACES DE DESARROLLARSE EN MEDIOS ACELULARES NO REALIZAN EL CICLO DE LOS ACIDOS TRICARBOXILICOS ESPIROQUETA GRAM-NEGATIVA 0.1 a 0.2 x 6 a 20 µm diámetro CARENCIA DE GENES PARA CATALASA Y SUPEROXIDO DISMUTASA MICROAEROFILAS O ANAEROBIAS
  • 3.
    ENTRA AL ORGANISMOA TRAVÉS DE UNA MEMBRANA MUCOSA O POR ABRASIÓN FIBRONECTINA. TPN83 Y 92 SE MULTIPLICA CON RAPIDEZ EN SITIO SE DISEMINA A TRAVES DE LA CIRCULACION LINFATICA Y SISTEMICA (10 A 120 DIAS) Movilidad en sacacorchos Respuesta inflamatoria en sitio de entrada ENDOTELIOS CAPILARES DEL ÁREA SE INFLAMAN Y LA REGIÓN SE INFILTRA CON CÉLULAS PLASMÁTICA Y MONOCITOS Y LINFOCITOS. (CHANCRO) LOS GANGLIOS LINFÁTICOS QUE DRENAN AL CHANCRO EN OCASIONES SE INFLAMAN (GOMAS SATELITALES) MCP 1 MCP 2TROM PS CD14 Th1 GENERACIÓN DE CITOCINAS PROINFLAMATORIAS IL2,12 Y INF Y HIALURONIDASA SIFILIS (TREPONEMA PALLIDUM)
  • 4.
    PRUEBAS SEROLOGICAS DIAGNOSTICO DE LABORATORIO MICROSCOPIA CULTIVO SIFILIS (TREPONEMA PALLIDUM) INCAPACIDADDE CRECER EN MEDIOS ACELULARES PCR EN LCR, SANGRE Y LESIONES GENITALES PRUEBAS NO TREPONEMICAS PRUEBAS TREPONEMICAS RPR (Reagina Plasmática Rápida) VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) PRUEBAS BASADAS EN ACIDOS NUCLEICOS FTA-ABS TP-PA MICROSCOPIA DE CAMPO OSCURO PRUEBA DE ANTICUERPOS FLUORESCENTES DIRECTOS
  • 5.
    PRUEBAS NO TREPONEMICAS ANTICUERPOS IgGe IgM (anticuerpos reagínicos) FRENTE A LIPIDOS DE SUPERFICIE DEL TREPONEMA SENSIBILIDAD 70-85% ESPECIFICIDAD 98-99% INACTIVACION DEL SISTEMA DEL COMPLEMENTO Miden la floculación del antígeno cardiolipinico con el suero del paciente SIFILIS (TREPONEMA PALLIDUM) PRUEBA V.D.R.L. CUALITATIVO  COMPONENTES  Lecitina  Cardiolipina  Colesterol  Buffer 1. Extraer sangre venosa 2 ml. aproximadamente con anticoagulante o sin anticoagulante. 2. Centrifugar cuidadosamente a 2,500 r.p.m. por 5 minutos. 3. Inactivar el suero a 56 por 30 minutos en baño María.(VDRL) 4. Tomar el suero inactivado 50 l. en una superficie plano con anillo y una gota de antígeno preparado con una aguja calibre Nº l8. 5. Homogeneizar y colocar la lámina en un rotador eléctrico por 4 minutos a l80 Rpm. 6. Lectura al microscopio con lente de 40 x. Reacción de Wassermann
  • 6.
    Colocar 50 l.de suero fisiológico al 0.9 % del 1º al 5º círculo de la tarjeta Colocar 50 ul del suero problema en el primer circulo , mezcle bien y transfiera 50 ul al tercer circulo, mezcle y transfiera 50 ul al 4° circulo , mezcle y descarte 50 ul del ultimo circulo. Usando un aplicador, extienda la mezcla en cada círculo comenzando en el 5º y terminando en el 1º círculo. Adicionar 01 gota de antígeno a cada uno de los círculos del 1º al 5º , homogeneizar y rotar por 8 minutos. La lectura sigue los mismos parámetros que para la prueba cualitativa. Reportar el título en términos de la más alta dilución en que se produzca un resultado reactivo (Reactivo débil). RPR CUALITATIVO Y SEMICUANTITATIVO COMPONENTES  Cardiolipina  Lecitina  Colesterol  EDTA  Acetilcolina  Carbón SIFILIS (TREPONEMA PALLIDUM)
  • 7.
    SIFILIS (TREPONEMA PALLIDUM) Positivo Débil.-Se detecta por la acumulación de finos agregados negros circundados por un área difusa de finos agregados negros. RPR CUALITATIVO Y SEMICUANTITATIVO Reacción Positiva.- Se observa la producción de agregados negros observados normalmente por todo el círculo de la prueba. Reacción Negativa.- Está dada por la acumulación de carbono en el centro del círculo. FTA – ABS (Prueba de absorción de anticuerpos treponemicos fluorescentes) PRUEBAS TREPONEMICAS SENSIBILIDAD 80% ESPECIFICIDAD 98% Utiliza T. Pallidum como antígeno. Usa antibioticos antihumanos marcados con isotiocianato fluoresceina Son confirmatorias Es útil en todas las etapas de la enfermedad La reactividad se declara en cruces por la intensidad de la fluorescencia. Presenta alrededor de un 1% de falsos positivos
  • 8.