Este documento describe la tinción de Gram, un método para visualizar bacterias bajo el microscopio. Explica que las bacterias gram-positivas y gram-negativas se tiñen de forma diferente debido a las diferencias en la estructura de sus paredes celulares. También proporciona detalles sobre cómo se realiza la tinción de Gram y cómo se ven las bacterias bajo el microscopio después del proceso.

1. TINCIÓN DE GRAM
AUTOR:
KEVIN ZAMORA LARREA

2. Tipo de tinción diferencial empleado en
microbiología para la visualización de
bacterias, sobre todo en muestras
clínicas.
Debe su nombre al bacteriólogo danés
Christian Gram, que desarrolló la
técnica en 1884.
Se utiliza para referirse a la morfología
celular bacteriana como para realizar
una primera aproximación a la
diferenciación bacteriana.

3. ¿Cómo visualizo las
bacterias?

4. Las bacterias gram-positivas y gram-negativas tiñen de forma
distinta debido a las diferencias constitutivas en la estructura
de sus paredes celulares.
La pared de la célula gram-positiva es gruesa y consiste en
varias capas interconectadas de Peptidoglicano así como algo
de ácido teicoico. Generalmente, 80%-90% de la pared de la
célula gram-positiva es Peptidoglicano.
La pared de la célula gram-negativa, por otro lado, contiene
una capa mucho más delgada, únicamente de peptidoglicano
y está rodeada por una membrana exterior compuesta de
fosfolípidos, lipopolisacáridos, y lipoproteínas.
Sólo 10% - 20% de la pared de la célula gram-negativa es
peptidoglicano.

5. Las células fijadas al calor sobre un portaobjetos se tiñen,
primero con una solución de cristal violeta (otros colorantes
básicos no son tan efectivos) y son lavadas después para quitar
el exceso de colorante. En este estado, todas las células, tanto las
grampositivas como las gramnegativas, están teñidas de azul.
El portaobjetos se cubre entonces con una solución de yodo-
yoduro potásico. El ingrediente activo es aquí el I2; el KI
simplemente hace soluble el I2 en agua. El I2 entra en las células y
forma un complejo insoluble en agua con el cristal violeta. De
nuevo tanto las células grampositivas como las gramnegativas se
encuentran en la misma situación.
Se lleva a cabo después la decoloración, usando una mezcla de
alcohol-acetona, sustancias en las que es soluble el complejo I2-
cristal violeta.

6. • Mycobacterias (están encapsuladas).
• Mycoplasmas (no tienen pared).
• Formas L (pérdida ocasional de la pared).
• Protoplastos y Esferoplastos (eliminación
total y parcial de la pared, respectivamente).
Bacterias resistentes a la tinción Gram:
Bacterias de naturaleza grampositiva que tiñen como
gramnegativas

7. Causas que
alteran la
tinción de
Gram
Uso de
antibióticos.
Errores
del
operador.
Edad de
la
bacteria.

8. ESTAFILOCOCOS
Reconocidos por primera vez por
Koch en 1878. Descritos por
Pasteur en 1880

9. • Son bacterias en forma de grano que se
agrupan en racimos. No forman esporas,
pilis ni flagelos. Comprenden 32 especies
y 15 subespecies; las especies de
importancia médica son: S. aureus, S
epidermidis y S. saprophyticus.
Kilmara Ayala

10. • Desde el punto de vista de la medicina. S.
Aureus es la bacteria más importante de
este género, porque produce coagulasa
(fibrina se aglomere «coágulo»)

11. PATOLOGÍA
• Se ha mencionado que todos los tejidos
de la economía pueden ser colonizados o
infectados pro estas bacterias, de tal
manera que pueden producir:
• Impétigo
• Forúnculo
• Celulitis
• Abcesos
• Antrás estafilocócico

12. S. AUREUS

13. PARED CELULAR
• Los componentes fundamentales de la
pared celular son el peptidoglicano y los
ácidos teicoicos. El peptidoglicano
representa la mitad del peso de la pared y
proporciona forma y estabilidad al
microorganismo; además, tiene actividad
de tipo endotoxina.

14. • La mayoría de cepas de S. Aureus están
recuerbiertas uniformemente por una
proteína A y también por la proteína
coagulasa (coagulasa ligada, coagulasa
libre)
• La prueba de coagulasa es la más
utilizada para identificar el S. Aureus
PARED CELULAR

15. Kilmara Ayala

16. ESTREPTOCOCOS

17. • Son pequeños granos agrupados en cadenas,
grampositivos. La mayor parte de ellos
desarrollan fimbrias, no tiene flagelos ni
esporas.
• Hay alrededor de 20 especies, siendo las más
importantes como patógenos para el hombre:
Streptococcus pyogenes del grupo A,
Streptococcus agalactiae del grupo B,
Streptococcus faccalis del grupo D,
Strptococcus pneumoniae y el grupo vidirans

18. PATOLOGÍA
• Producen infecciones caracterizadas por
procesos inflamatorios supurativos, o bien, no
supurativos.
• Faringoamigdalitis
• Escarlatina
• Erisipela
• Impétigo
• Síndrome de choque
tóxico, etc