El documento explora el encuentro entre Nicodemo, un fariseo y líder judío, y Jesús, quien le enseña sobre la necesidad del nuevo nacimiento espiritual para entrar al reino de Dios. Nicodemo, confundido entre el nacimiento físico y el espiritual, recibe la instrucción de que el verdadero renacer es una obra del Espíritu Santo que transforma y persiste en la vida del creyente. La conclusión enfatiza que la salvación requiere recibir a Cristo y creer en su nombre.