1. PRÁCTICA 8: NUMERO MÁS PROBABLE N.M.P. DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES
N.M.P. DE COLIFORMES TOTALES
Materiales
• Diluciones de la muestra
• Incubadora a 35°C
• Gradilla
• Pipetas de 1 mL estériles
• Asa bacteriológica
• 9 tubos de 150 x 15 mm conteniendo 10 mL de Caldo Bilis Verde Brillante con tubo de
fermentación de 70 x 10 mm
Procedimiento
Inocular de cada una de las diluciones 10-1, 10-2, 10-3, 1 ml a cada uno de 3 tubos conteniendo
Caldo Bilis Verde Brillante.
Incubar los tubos a 35°C durante 24-48 horas
Observar los tubos que presenten producción de gas
Comparar en la tabla de N.M.P. e informar como Coliformes Totales por gramo ó ml
Puede continuarse con pruebas para Coliformes Fecales.
N.M.P. DE COLIFORMES FECALES
(PRUEBA DE MACKENZIE)
Materiales
• Asa bacteriológica
• Baño de agua a 44°C
• Tubos con 10 mL de Caldo Bilis Verde Brillante con tubos de fermentación
• Gradillas
• Tubos con Agua de triptona
• Reactivo de Indol según Kovac
Procedimiento
De cada tubo positivo en Caldo Bilis Verde Brillante de la Prueba de Coliformes totales, inocular
con asa a un tubo con Caldo Bilis Verde Brillante y un tubo con Agua de triptona
Incubar a 44°C durante 24 horas
Observar la formación de gas en Caldo Bilis Verde Brillante
Efectuar prueba de Indol sobre el agua de triptona
Los tubos con producción de gas y reacción de Indol positivo, se tienen en cuenta para el
reporte como coliformes fecales
Comparar en la tabla N.M.P. e informar como Coliformes Fecales por gramo o mililitro.