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Gobernador Constitucional del Estado de Puebla
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Secretario de Gobernación del Estado de Puebla
Gabriela Bonilla Parada
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Primera edición, México, 2023
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(CONCYTEP) B Poniente de La 16 de Sept. 4511,
Col. Huexotitla, 72534. Puebla, Pue.
ISBN: 978-607-8901-94-4
CÓDIGO IDENTIFICADOR CONCYTEP: C-L-2023-10-88
La información contenida en este documento puede ser reproducida total o
parcialmente por cualquier medio, indicando los créditos
y las fuentes de origen respectivas.
Iliana Judith Gómez Pérez
Coordinadora
207
Ingenierías y Desarrollo Tecnológico
Obtención de microcápsulas con extracto de muicle (Justicia
Spicigera) mediante la técnica de extrusión por goteo
a
Gil Gutiérrez Sarai* y a
Cid Ortega Sandro
a
Universidad Tecnológica de Izúcar de Matamoros, Programa Educativo de Ingeniería en Procesos Alimentarios.
Prolongación Reforma No. 168, Barrio de Santiago Mihuacán 74420, Izúcar de Matamoros, Puebla, México
*saraigutierrez105@gmail.com
Resumen
El objetivo de este trabajo fue obtener microcápsulas de
alginato de sodio con extracto de muicle, mediante gelifi-
cación iónica externa y utilizando la técnica de extrusión
por goteo, así como evaluar sus propiedades antioxi-
dantes. Se utilizaron hojas de muicle (Justicia spicigera) de
la región de Izúcar de Matamoros, Puebla. Se determinó
el contenido de fenoles totales (FT), flavonoides totales
(FLT) y capacidad antioxidante (CA) al extracto de muicle.
Para la obtención de microcápsulas se utilizó un diseño
factorial 2x2, dos concentraciones de alginato de sodio (2
y 3 %) y dos concentraciones de CaCl2 (2 y 3 %). La relación
alginato:extracto se mantuvo constante (3:1 v/v). El conte-
nido de FT, FLT y CA, en 100 ml de extracto de muicle, fue
de 271.45 ± 24.19 mg EAG (Equivalentes de ácido gálico),
336.37 ± 29.58 mg EQ (Equivalentes de quercetina) y
55.10 ± 0.67 mg ET (Equivalentes de trolox), respecti-
vamente, con una capacidad de inhibición del DPPH de
68.79 ± 0.68 %. La combinación de alginato de sodio al 2 %
y CaCl2 al 2 % proporcionó los mejores resultados respecto
al contenido de TP y TF (1.56 ± 0.16 mg EAG/g y 1.45 ± 0.01
mg EQ/g, respectivamente), con una eficiencia promedio
de 52 %.Las microcápsulas con extracto de muicle son una
alternativa para el desarrollo de alimentos funcionales.
Palabras clave: Justicia spicigera, Microcápsulas,
Extracto de muicle, Propiedades antioxidantes.
Abstract
This work aimed to obtain microcapsules of sodium alginate
with muicle extract, using external ionic gelation and using
the drip extrusion technique,as well as to evaluate its antiox-
idant properties. Muicle leaves (Justicia spicigera) from Izúcar
de Matamoros region,Puebla,were used.The content of total
phenols (TP), total flavonoids (TF), and antioxidant capacity
(AC) of the muicle extract, were assessed. To obtain micro-
capsules, a 2x2 factorial design was used, with two concen-
trations of sodium alginate (2 and 3 %) and two concen-
trations of CaCl2 (2 and 3 %). The alginate:extract ratio was
kept constant (3:1 v/v). The content of TP, TF, and AC, in 100
ml of muicle extract was 271.45 ± 24.19 mg GAE (Gallic acid
equivalents), 336.37 ± 29.58 mg QE (Quercetin equivalents),
and 55.10 ± 0.67 mg TE (Trolox equivalents),respectively,with
a DPPH inhibition capacity of 68.79 ± 0.68 %. The combina-
tion of 2 % sodium alginate and 2 % CaCl2 provides the best
results on the TP and TF content (1.56 ± 0.16 mg EAG/g and
1.45 ± 0.01 mg EQ/g, respectively), with an average efficiency
of 52 %. Therefore microcapsules with muicle extract are an
alternative for developing functional foods.
Keywords: Justicia spicigera, Microcapsules,
Muicle extract, Antioxidant properties.
Ingenierías y Desarrollo Tecnológico
208 Glosario de abreviaturas y símbolos
- CA, capacidad antioxidante
- DPPH, 2,2-Difenil-1-Picrilhidrazilo
- EAG, equivalentes de ácido gálico
- EQ, equivalentes de quercetina
- ET, equivalentes de trolox
- FT, fenoles totales
- FLT, flavonoides totales
- M, concentración molar
- rpm, revoluciones por minuto
- °Bx, grados brix
Introducción
En la actualidad, las personas están más preocupadas
por llevar una vida saludable, buscando el consumo de
compuestos bioactivos o alimentos funcionales que
impacten directamente en la salud, como los antioxidantes
que se encuentran en las frutas y verduras (Castro-Alatorre
et al., 2021). El desarrollo de alimentos funcionales ha
demostrado ser una buena estrategia para la industria,
mejorando sus productos mediante la incorporación de
compuestos bioactivos, como antioxidantes, vitaminas,
microorganismos probióticos y fibra. México es un país
donde la medicina tradicional sigue teniendo un papel
importante en el cuidado y preservación de la salud, por
lo que las plantas medicinales ofrecen posibilidades para
descubrir moléculas con actividad antimicrobiana (Vega-
Avila et al., 2012). Justicia spicigera (muicle como nombre
común) es una planta endémica de Mesoamérica que crece
en México, perteneciente a la familia Acanthaceae. Se trata
de un arbusto verde con flores tubulares de color naranja.
En los pueblos maya se le conoce como «ych-kaan», pero los
nombres más comunes son «hierba azul» y «hierba tinta»
debido al color oscuro de sus preparaciones acuosas, que
van del rojo al azul oscuro.
En México ha sido utilizada desde la época prehis-
pánica en la medicina tradicional para el tratamiento
de disentería, diabetes, leucemia y anemia. Esta planta
también se usa por sus efectos antialgésicos contra el dolor
de cabeza, hipertensión, epilepsia, dolor de estómago,
diarrea, cáncer, enfermedades circulatorias, nervios,
reumatismo e inflamación de estómago (Awad et al., 2018).
Diversas investigaciones demuestran que los extractos de
las hojas de J. spicigera poseen propiedades antioxidantes
(Sepúlveda-Jiménez etal.,2009),anticancerígenas (Alonso-
Castro et al., 2013), antidiabéticas (Girón-Cruz, 2015; Ortiz-
Andrade et al., 2012) y antidepresivas (Cassani et al., 2014).
Estas propiedades se deben a la presencia de compuestos
fenólicos y flavonoides, principalmente glucósidos del
kaempferol, siendo los más importantes kaempferitrina
(Kaempferol-3,7-diramnósido; 574.20 ± 65.10 mg/100 g de
muestra seca) y astragalina (kaempferol-3-β-D-glucopira-
nósido; 113.10 ± 15.06 mg/100 g de muestra seca) (Nazira-
Sarian et al., 2017; Cid-Ortega et al., 2021). Los principales
flavonoles que se encuentran en la mayoría de los vegetales
son la quercetina y el kaempferol; se ha sugerido un efecto
209
Ingenierías y Desarrollo Tecnológico
sinérgico de estos compuestos en la reducción de células
cancerosas (Ackland et al., 2005).
La ingesta regular de antioxidantes se ha convertido en
una necesidad para lograr la prevención de algunas enfer-
medades (Aguirre-Calvo y Santagapita,2017).Sin embargo,
la incorporación de ingredientes funcionales en los
alimentos suele verse limitada por su inestabilidad durante
el procesamiento y el almacenamiento. Por lo tanto, encon-
trar una manera de obtener una entrega natural y eficaz al
cuerpo humano se ha convertido en uno de los principales
objetivos de la industria alimentaria. La protección de
compuestos antioxidantes mediante encapsulación se ha
vuelto importante en la formulación de alimentos funcio-
nales (Castro-Alatorre et al., 2021). Los procesos de encap-
sulación fueron desarrollados entre los años 1930 y 1940
por la National Cash Register para la aplicación comercial
de un tinte a partir de gelatina como agente encapsulante
mediante un proceso de coacervación. Las técnicas de
encapsulación se han estudiado por sus notables efectos
en la protección y conservación de alimentos durante su
almacenamiento por un período prolongado de tiempo
(Aguirre-Calvo y Santagapita,2017).La microencapsulación
es una técnica que consiste en transformar los alimentos de
forma líquida a sólida.Se utiliza en la industria alimentaria
para proteger los ingredientes alimentarios funcionales y
compuestos bioactivos de la evaporación,oxidación,degra-
dación, pérdida de volátiles y disminución de la estabilidad
y vida útil (Castro-Alatorre et al., 2021). Por lo anterior, el
objetivo de este trabajo fue obtener microcápsulas de algi-
nato con extracto de muicle, mediante gelificación iónica
externa y utilizando la técnica de extrusión por goteo, así
como evaluar sus propiedades antioxidantes.
Materiales y métodos
Material vegetal
Se utilizaron hojas de muicle (Justicia spicigera) de la región
de Izúcar de Matamoros,Puebla.Las hojas fueron seleccio-
nadas, lavadas y secadas a temperatura ambiente (31 ± 1° C;
humedad relativa de 75 ± 7 %) hasta una humedad menor al
10 %.Las hojas secas se molieron en un molino pulverizador
de acero inoxidable marca Veyco modelo MPV 100 (México)
con malla de 0.5 mm. El polvo obtenido se hizo pasar por
una malla Tyler No. 14 (1.4 mm de luz) y se almacenó en
bolsas herméticas.Se determinó su contenido de humedad,
actividad de agua y pH. Todos los análisis se realizaron por
triplicado.
Propiedades fisicoquímicas
Humedad
Se determinó de acuerdo al método de la norma oficial
mexicana NOM-116-SSA1 (1994). La muestra se deshidrató
a 100 °C durante 4 horas a presión atmosférica en un
horno de secado digital (Novatech HS35-ED, Quimilab Inc.
Tlaquepaque, Jalisco, México).
Actividad de agua (aw)
Se realizó utilizando un higrómetro AQUA-LAB modelo
4TE (Decagon Devices Inc. Pullman, WA, USA) con control
de temperatura interna (15-50 ± 0.2° C).El equipo se calibró
con soluciones estándar de NaCl 6.0 M (aw = 0.76 ± 0.003) y
LiCl 8.57 M (aw = 0.50 ± 0.003) (Decagon Devices Inc. 2008).
La temperatura de medición fue de 25 ± 0.01° C.
pH
Se realizó de acuerdo al método 10.035 de la AOAC (1980).
Se utilizaron 5 g de muestra, a los cuales se les adicionaron
10 ml de agua destilada, se mezcló hasta obtener una pasta
uniforme y se introdujo el electrodo directamente de
manera que lo cubriera perfectamente. El potenciómetro
(Conductronic pH 120, Conductronic S. A. Puebla, México)
se calibró con soluciones reguladoras de pH 4, 7 y 10.
Sólidos solubles totales (SST)
Se determinaron de acuerdo al método 932.14C de la
AOAC (1995), mediante un refractómetro manual Atago
modelo Master-M (Atago Co. LTD, Tokio, Japón) con una
escala de 0-32° Bx. Las lecturas se corrigieron a 20 °C, utili-
zando los valores establecidos en las tablas de referencia del
AOAC (1995).
Propiedades antioxidantes
Obtención de extractos
Las extracciones se realizaron a reflujo en un equipo de
extracción múltiple (modelo 5000, Lab-Line Instruments,
Inc. IL, EE.UU.), utilizando 1 g de polvo seco en 50 ml de
etanol (0.02 g/ml) (Baqueiro-Peña y Guerrero-Beltrán,2017)
al 50 % p/p, a una temperatura de 60 ºC, durante 45 min.
Las mezclas se filtraron a través de papel filtro Whatman
No. 4 y se colocaron en matraces de 50 ml, forrados con
papel aluminio. Posteriormente, el etanol fue removido
utilizando un rota-evaporador RV 8 V (IKA, Suecia) a una
temperatura de 55 ± 1° C y presión de vacío de 54 cmHg
(Cid-Ortega y Guerrero-Beltrán, 2014). Los extractos se
almacenaron en refrigeración (4 ºC) en frascos forrados con
papel aluminio para su posterior análisis.
Contenido de fenoles totales
Se determinó mediante el método espectrofotométrico
desarrollado por Folin y Ciocalteu (Singleton y Rossi, 1965).
En un tubo de ensayo (cubierto con papel aluminio) se
Ingenierías y Desarrollo Tecnológico
210
colocaron 5 µL de extracto de muicle (o 1000 µL del extracto
de microcápsulas), 3 ml de agua destilada, 250 µL del
reactivo de Folin-Ciocalteu, 750 µL de Na2CO3 al 20 % y se
aforó con agua destilada (995 µL) a 5 ml.Se agitó durante 30
segundos en un Vortex (Thermolyne M37615,Iowa,EE.UU.)
y se dejó reposar 1 hora a temperatura ambiente (29 ± 2° C)
en la oscuridad. Posteriormente se midió la absorbancia
a 765 nm en un espectrofotómetro UV-visible Jenway
7315 (Bibby Scientific Ltd, Stone, Staffs, Reino Unido). En
cada determinación se realizaron curvas estándar por
duplicado a diferentes concentraciones de ácido gálico
(98.5 %, Sigma): 0, 0.0080, 0.0160, 0.0240, 0.0320, 0.0400,
0.0480, 0.0560 y 0.0640 mg. La curva estándar fue:
Abs = 25.83 ± 2.95 (1/mg EAG)*X (mg EAG) + 0.03 ± 0.01,
R2
= 0.997 ± 0.003. Los resultados se expresaron como mg
equivalentes de ácido gálico (EAG) en 1 g de hojas secas o en
1 g de microcápsulas.
Contenido de flavonoides totales
Se realizó de acuerdo al método descrito por Nanasombat
et al. (2015) con algunas modificaciones. El extracto de
muicle (10 µL) o extracto de microcápsulas (3000 µL) se
mezcló con 1.25 ml de agua destilada y 75 µL de NaNO2
(5 %, p/p). Después de 5 min, se agregaron 150 µL de AlCl3
(10 %, p/p), se mezclaron y se dejó reposar por 6 min.
Posteriormente, se adicionaron 500 µL de NaOH (1 M)
y se ajustó el volumen final a 4 ml con agua destilada.
La mezcla se agitó durante 30 segundos en un Vortex
(Thermolyne M37615, Iowa, EE. UU.) e inmediatamente se
midió la absorbancia a 510 nm utilizando un blanco para
ajustar el equipo a cero. Se utilizó un espectrofotómetro
UV-visible Jenway 7315 (Bibby Scientific Ltd, Stone, Staffs,
Reino Unido). En cada determinación se realizaron curvas
estándar por duplicado a diferentes concentraciones de
quercetina (95 %, Sigma): 0, 0.020, 0.060, 0.100, 0.140,
0.180, 0.220, 0.260 y 0.300 mg. La curva estándar fue:
Abs = 1.52 ± 0.42 (1/mg EQ)*X (mg EQ) + 0.0010 ± 0.019,
R2
= 0.973 ± 0.022. Los resultados se expresaron como mg
equivalentes de quercetina (EQ) en 1 g de hojas secas o en 1
g de microcápsulas.
Capacidad antioxidante
Se utilizó el método del DPPH (1,1-Difenil-2-picrilhidrazil)
desarrollado por Brand-Williams et al. (1995) con algunas
modificaciones (Molyneux, 2004; Esmaeili et al., 2015). Se
realizó una dilución 1:10 del extracto con agua destilada,
posteriormente se tomaron 300 µL de la dilución y se
mezcló en un tubo de ensayo (cubierto con papel aluminio)
con 1.7 ml de etanol (99.5 %) y 2 ml de solución de DPPH
(3.9 mg en 100 ml de etanol al 99.5 %). Se agitó durante 30
segundos en un Vortex (Thermolyne M37615, Iowa, EE.
UU.) y se dejó reposar 30 min a temperatura ambiente
(29 ± 2 °C) en la oscuridad. La absorbancia se midió a 517
nm en un espectrofotómetro UV-visible Jenway 7315 (Bibby
Scientific Ltd, Stone, Staffs, Reino Unido). La capacidad
antioxidante fue calculada como porcentaje de inhibición
de acuerdo a la siguiente ecuación: I ( %) = [1–(Absorbancia
de la muestra/Absorbancia del control)]*100. En cada
determinación se realizaron curvas estándar por duplicado
a diferentes concentraciones de Trolox (6-hidroxi-2, 5, 7,
8 tetrametilcromo-2 ácido carboxílico al 97 %, Aldrich): 0,
0.007,0.011,0.014,0.018,0.022,0.025 y 0.029 mg.La curva
estándar fue: I ( %) = 3334.62 ± 63.96 (1/mg ET)*X (mg ET) +
12.46 ± 5.21, R2 = 0.895 ± 0.05. Los resultados se expresaron
como mg equivalentes de Trolox (ET) en 1 g de hojas secas.
Obtención de microcápsulas
con extracto de muicle
Se utilizó un diseño factorial 2x2, dos concentraciones de
alginato de sodio (2 y 3 %) y dos concentraciones de CaCl2
(2 y 3 %). La relación alginato:extracto se mantuvo cons-
tante y fue de 3:1 (v/v). La elaboración de microcápsulas se
realizó mediante gelificación iónica externa y utilizando la
técnica de extrusión por goteo. La solución de alginato de
sodio (2 y 3 % p/p) (Wong et al., 2011; Yan et al., 2014; Lim y
Ahmad, 2017; Tan et al., 2018; Aguirre-Calvo y Santagapita,
2019), una vez preparada, se mantuvo en agitación por 4 h
y se dejó reposar hasta el día siguiente. La extrusión de la
mezcla alginato-extracto se realizó utilizando una jeringa
de 10 ml con aguja de 27 g (0.4 mm de diámetro interno y
40 mm de longitud) y una velocidad promedio de 92 micro-
cápsulas/min. La distancia entre la solución gelificante
(CaCl2 al 2 y 3 %, p/p) y la punta de la aguja se mantuvo a
5 cm (Boon-Beng et al., 2013). Para evitar la deformación
de las microcápsulas, se adicionó Tween 80 a la solución
de CaCl2 a una concentración de 0.5 % (Boon-Beng et al.,
2013). El tiempo de gelificación de las microcápsulas fue
de 30 min. Se recomienda un tiempo mínimo de 15 min y
máximo de 60 min, ya que tiempos de gelificación mayores
forman microcápsulas más rígidas y reducen su diámetro
(Boon-Beng et al., 2013).
Análisis de las propiedades
antioxidantes en microcápsulas
Las microcápsulas obtenidas se dejaron en 10 ml de solu-
ción de citrato de sodio al 3 % durante 16 h en refrigera-
ción (5 °C). Posteriormente, la mezcla se agitó (700 a 800
rpm) por 30 min, se adicionaron 10 ml de etanol absoluto
(99.5 %) y se agitó (600 a 700 rpm) por 15 min. La mezcla se
dejó reposar en refrigeración por 30 min con el objetivo de
separar el alginato de sodio. A continuación, la mezcla se
hizo pasar por una malla de 0.5 mm, se realizó un lavado
con 5 ml de etanol absoluto (99.5 %) y, por último, se filtró
mediante papel filtro Whatman No. 41. El filtrado obte-
nido se ajustó a un volumen de 20 ml con etanol absoluto
(99.5 %). Las muestras se colocaron en viales de 12 ml
211
Ingenierías y Desarrollo Tecnológico
forrados con aluminio y se almacenaron a temperatura de
5 °C hasta el día siguiente. Posteriormente las muestras se
decantaron, con el objetivo de eliminar el precipitado que
se forma y se colocaron en una centrífuga (Hermle modelo
Z 323, Alemania) durante 15 min a 5500 rpm. Finalmente,
se determinó el contenido de fenoles y flavonoides totales.
Análisis estadístico
Se realizó un análisis de varianza (ANOVA) de una sola
vía para determinar el efecto de la concentración de algi-
nato de sodio (2 y 3 %) y cloruro de calcio (CaCl2) (2 y 3 %),
en la elaboración de microcápsulas. Para establecer dife-
rencias entre los tratamientos, se realizó una comparación
múltiple de Tukey, utilizando el software MINITAB® versión
17.1.0 (Minitab Inc., 2013). Todos los ensayos se realizaron
por triplicado. Las diferencias se consideraron significa-
tivas a valores de p ≤ 0.05.
Resultados/
Discusión de resultados
Propiedades fisicoquímicas
La Tabla 1 muestra los resultados obtenidos de las propie-
dades fisicoquímicas en muicle en polvo y el extracto de
muicle.
Tabla 1. Propiedades fisicoquímicas
en muicle en polvo y extracto
Variable Muicle en polvo Extracto de muicle
Humedad ( %) 7.31 ± 0.13 -
pH 7.64 ± 0.01 6.60 ± 0.01
aW 0.40 ± 0.01 -
SST (°Bx) - 5.24 ± 0.04
SST = Sólidos Solubles Totales.
Propiedades antioxidantes
Las propiedades antioxidantes en muicle y extracto se
muestran en la Tabla 2.Los compuestos fenólicos son meta-
bolitos secundarios que poseen una amplia gama de efectos
benéficos a la salud, tales como actividad antirradicalar,
antiviral,antitumoral,antidiabética y contra enfermedades
cardiovasculares. Los flavonoides poseen propiedades
biológicas tales como, actividad antimicrobiana, antiul-
cerosa, antiinflamatoria, antiespasmódica, entre otras
(Girón-Cruz, 2015). De acuerdo a resultados obtenidos
por Girón-Cruz (2015), el contenido de fenoles y flavo-
noides totales en extracto de muicle fue de 220.72 ± 8.98
mg EAG/100 mL y 391.25 ± 6.79 mg EQ/100 mL, respecti-
vamente. Estos resultados son similares a los obtenidos en
este trabajo. Las curvas estándar realizadas para la deter-
minación de fenoles totales,flavonoides totales y capacidad
antioxidante en extracto de muicle y microcápsulas se
muestran en la Figura 1.
Tabla 2. Propiedades antioxidantes en muicle
(J. spicigera) y extracto de muicle
Variable
Muicle en polvo
(mg/g)
Extracto de muicle
(mg/100 ml)
Fenoles totales (EAG) 146.42 ± 13.05 271.45 ± 24.19
Flavonoides totales (EQ) 181.44 ± 15.96 336.37 ± 29.58
Capacidad antioxidante
(ET)
29.72 ± 0.36 55.10 ± 0.67
Inhibición de DPPH 68.79 ± 0.68 %
Los valores representan la media ± desviación estándar.
EAG = Equivalentes de ácido gálico. EQ = Equivalentes de
quercetina. ET = Equivalentes de trolox.
Figura 1. Curvas para los diferentes estándares. (A) Ácido gálico. (B) Quercetina. (C) Trolox
Ingenierías y Desarrollo Tecnológico
212
Evaluación del proceso de
microencapsulación
El contenido de fenoles y flavonoides totales en las micro-
cápsulas se muestra en la Tabla 3.Con respecto al contenido
de fenoles, la mayor cantidad se obtuvo en el tratamiento 1
y 4. Para el contenido de flavonoides no hubo diferencias
significativas (p < 0.05) entre los tratamientos.
Lo anterior se puede observar en la Figura 2. Con
respecto a la eficiencia (retención de fenoles y flavonoides
totales en microcápsulas con extracto de muicle) de los
tratamientos, se puede observar (Figura 3) que el trata-
miento 3 mostró la mayor eficiencia, tanto para fenoles
como para flavonoides. Sin embargo, la cantidad de estos
compuestos en las microcápsulas fue menor a los demás
tratamientos. En lo referente a las propiedades físicas
de las microcápsulas (peso y diámetro) (Tabla 3), el trata-
miento con 3 % de alginato y 2 % CaCl2 (T3) proporcionó
microcápsulas con mayor diámetro y peso. Considerando
el contenido de fenoles y flavonoides totales en las micro-
cápsulas, el tratamiento 1 (T1) fue el mejor (1.56 ± 0.16 mg
EAG/g y 1.45 ± 0.01 mg EQ/g), teniendo una eficiencia de
59 y 44 % para el contenido de fenoles y flavonoides totales,
respectivamente.
Figura 2. Contenido de fenoles y flavonoides totales en
microcápsulas con extracto de muicle. Las barras con
diferente letra presentan diferencias significativas (p < 0.05)
Figura 3. Eficiencia del proceso de microencapsulación
de los diferentes tratamientos. Las barras con diferente
letra presentan diferencias significativas (p < 0.05)
Tabla 3. Propiedades físicas y antioxidantes en microcápsulas
Tratamiento Peso (g) Diámetro (mm)
Cantidad de
fenoles totales
(mg EAG/g)
Cantidad de
flavonoides
totales
(mg EQ/g)
Eficiencia en
fenoles totales
( %)1
Eficiencia en
flavonoides
totales ( %)1
1 0.343 ± 0.014 0.231 ± 0.001 1.56 ± 0.16 1.45 ± 0.01 58.85 ± 3.49 44.35 ± 1.47
2 0.364 ± 0.006 0.207 ± 0.001 1.25 ± 0.09 1.23 ± 0.03 50.32 ± 2.62 39.86 ± 0.01
3 0.626 ± 0.015 0.254 ± 0.001 1.00 ± 0.02 1.10 ± 0.03 69.25 ± 0.44 61.64 ± 3.42
4
0.370 ± 0.005
0.229 ± 0.001
1.46 ± 0.04 1.27 ± 0.20 59.78 ± 0.73 41.97 ± 7.28
1
Corresponde a la cantidad retenida en la microcápsula con respecto a la cantidad utilizada en la mezcla. EAG = Equivalentes de ácido gálico.
EQ = Equivalentes de quercetina.
213
Ingenierías y Desarrollo Tecnológico
Obtención de microcápsulas
De acuerdo a las pruebas realizadas, el proceso estandari-
zado para la obtención de microcápsulas se muestra en la
Figura 4.Durante el proceso para la obtención de microcáp-
sulas, se observó que durante la fase de mezclado entre el
alginato de sodio y el extracto de muicle el pH es un pará-
metro que influye en una buena incorporación de ambas
mezclas. El pH indica la concentración de iones hidronio
en una solución acuosa,su determinación es importante en
la estabilidad del alginato de sodio, debido a que a valores
de pH ácidos se registra una despolimerización del alginato
y por consecuencia una estructura protectora débil. En
soluciones con valores de pH de 4 e inferiores, se presentan
problemas en la gelificación debido a la conversión del algi-
nato en ácido algínico (Lara-Fiallos et al., 2019).
Conclusiones
De acuerdo a los resultados obtenidos en el análisis de las
propiedades antioxidantes, el muicle (J. spicigera) es una
planta que posee cantidades significativas de compuestos
fenólicos y flavonoides, los cuales tienen un papel impor-
tante en la salud, ya que disminuyen el riesgo de enferme-
dades crónicas, tales como enfermedades cardiovasculares
y cáncer. Además, estos compuestos proporcionan diversas
propiedades antioxidantes, anticancerígenas y antidiabé-
ticas, lo cual explica el uso de esta planta en la medicina
tradicional mexicana para el tratamiento de enfermedades
infecciosas. El mejor tratamiento de microencapsulación
fue el T1. La combinación de alginato de sodio al 2 % y
CaCl2 al 2 % proporcionó los mejores resultados respecto al
contenido de fenoles y flavonoides totales (1.56 ± 0.16 mg
Figura 4. Metodología para la obtención de microcápsulas de alginato de sodio con extracto de muicle
Ingenierías y Desarrollo Tecnológico
214
EAG/g y 1.45 ± 0.01 mg EQ/g, respectivamente), con una
eficiencia promedio del 52 %. Por lo tanto, las microcáp-
sulas con extracto de muicle son una alternativa para el
desarrollo de alimentos funcionales.
Líneas de trabajo o trabajos a futuro
Realizar más pruebas del proceso de microencapsulación
con el objetivo de aumentar la eficiencia (retención del
contenido de fenoles y flavonoides totales) en las micro-
cápsulas, así como su aplicación y evaluación en alimentos
(yogur, bebidas, mermeladas, entre otros).
Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado por la Universidad
Tecnológica de Izúcar de Matamoros, Puebla, proporcio-
nando los laboratorios, materiales y reactivos necesarios
para los experimentos, así como la obtención del título de
TSU de la alumna Sarai Gil Gutiérrez.
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Obtención de microcápsulas con extracto de muicle.pdf

  • 1.
  • 2. Sergio Salomón Céspedes Peregrina Gobernador Constitucional del Estado de Puebla Javier Aquino Limón Secretario de Gobernación del Estado de Puebla Gabriela Bonilla Parada Presidenta del Sistema Estatal para el Desarrollo Integral de la Familia María Isabel Merlo Talavera Secretaria de Educación del Estado de Puebla Eduardo Castillo López Presidente de la Junta de Gobierno y Coordinación Política del H. Congreso del Estado Libre y Soberano de Puebla María Belinda Aguilar Díaz Presidenta del Tribunal Superior de Justicia del Estado de Puebla Victoriano Gabriel Covarrubias Salvatori Director General del Consejo de Ciencia y Tecnología del Estado de Puebla Luis Gerardo Aguirre Rodríguez Responsable del Área de Publicaciones Andrea Nazareth Tlaxcalteca Cruz Iliana Judith Gómez Pérez Corrección de estilo Luis Gerardo Aguirre Rodríguez Diseño editorial y de portada Primera edición, México, 2023 Publicado por el Consejo de Ciencia y Tecnología de Puebla (CONCYTEP) B Poniente de La 16 de Sept. 4511, Col. Huexotitla, 72534. Puebla, Pue. ISBN: 978-607-8901-94-4 CÓDIGO IDENTIFICADOR CONCYTEP: C-L-2023-10-88 La información contenida en este documento puede ser reproducida total o parcialmente por cualquier medio, indicando los créditos y las fuentes de origen respectivas. Iliana Judith Gómez Pérez Coordinadora
  • 3. 207 Ingenierías y Desarrollo Tecnológico Obtención de microcápsulas con extracto de muicle (Justicia Spicigera) mediante la técnica de extrusión por goteo a Gil Gutiérrez Sarai* y a Cid Ortega Sandro a Universidad Tecnológica de Izúcar de Matamoros, Programa Educativo de Ingeniería en Procesos Alimentarios. Prolongación Reforma No. 168, Barrio de Santiago Mihuacán 74420, Izúcar de Matamoros, Puebla, México *saraigutierrez105@gmail.com Resumen El objetivo de este trabajo fue obtener microcápsulas de alginato de sodio con extracto de muicle, mediante gelifi- cación iónica externa y utilizando la técnica de extrusión por goteo, así como evaluar sus propiedades antioxi- dantes. Se utilizaron hojas de muicle (Justicia spicigera) de la región de Izúcar de Matamoros, Puebla. Se determinó el contenido de fenoles totales (FT), flavonoides totales (FLT) y capacidad antioxidante (CA) al extracto de muicle. Para la obtención de microcápsulas se utilizó un diseño factorial 2x2, dos concentraciones de alginato de sodio (2 y 3 %) y dos concentraciones de CaCl2 (2 y 3 %). La relación alginato:extracto se mantuvo constante (3:1 v/v). El conte- nido de FT, FLT y CA, en 100 ml de extracto de muicle, fue de 271.45 ± 24.19 mg EAG (Equivalentes de ácido gálico), 336.37 ± 29.58 mg EQ (Equivalentes de quercetina) y 55.10 ± 0.67 mg ET (Equivalentes de trolox), respecti- vamente, con una capacidad de inhibición del DPPH de 68.79 ± 0.68 %. La combinación de alginato de sodio al 2 % y CaCl2 al 2 % proporcionó los mejores resultados respecto al contenido de TP y TF (1.56 ± 0.16 mg EAG/g y 1.45 ± 0.01 mg EQ/g, respectivamente), con una eficiencia promedio de 52 %.Las microcápsulas con extracto de muicle son una alternativa para el desarrollo de alimentos funcionales. Palabras clave: Justicia spicigera, Microcápsulas, Extracto de muicle, Propiedades antioxidantes. Abstract This work aimed to obtain microcapsules of sodium alginate with muicle extract, using external ionic gelation and using the drip extrusion technique,as well as to evaluate its antiox- idant properties. Muicle leaves (Justicia spicigera) from Izúcar de Matamoros region,Puebla,were used.The content of total phenols (TP), total flavonoids (TF), and antioxidant capacity (AC) of the muicle extract, were assessed. To obtain micro- capsules, a 2x2 factorial design was used, with two concen- trations of sodium alginate (2 and 3 %) and two concen- trations of CaCl2 (2 and 3 %). The alginate:extract ratio was kept constant (3:1 v/v). The content of TP, TF, and AC, in 100 ml of muicle extract was 271.45 ± 24.19 mg GAE (Gallic acid equivalents), 336.37 ± 29.58 mg QE (Quercetin equivalents), and 55.10 ± 0.67 mg TE (Trolox equivalents),respectively,with a DPPH inhibition capacity of 68.79 ± 0.68 %. The combina- tion of 2 % sodium alginate and 2 % CaCl2 provides the best results on the TP and TF content (1.56 ± 0.16 mg EAG/g and 1.45 ± 0.01 mg EQ/g, respectively), with an average efficiency of 52 %. Therefore microcapsules with muicle extract are an alternative for developing functional foods. Keywords: Justicia spicigera, Microcapsules, Muicle extract, Antioxidant properties.
  • 4. Ingenierías y Desarrollo Tecnológico 208 Glosario de abreviaturas y símbolos - CA, capacidad antioxidante - DPPH, 2,2-Difenil-1-Picrilhidrazilo - EAG, equivalentes de ácido gálico - EQ, equivalentes de quercetina - ET, equivalentes de trolox - FT, fenoles totales - FLT, flavonoides totales - M, concentración molar - rpm, revoluciones por minuto - °Bx, grados brix Introducción En la actualidad, las personas están más preocupadas por llevar una vida saludable, buscando el consumo de compuestos bioactivos o alimentos funcionales que impacten directamente en la salud, como los antioxidantes que se encuentran en las frutas y verduras (Castro-Alatorre et al., 2021). El desarrollo de alimentos funcionales ha demostrado ser una buena estrategia para la industria, mejorando sus productos mediante la incorporación de compuestos bioactivos, como antioxidantes, vitaminas, microorganismos probióticos y fibra. México es un país donde la medicina tradicional sigue teniendo un papel importante en el cuidado y preservación de la salud, por lo que las plantas medicinales ofrecen posibilidades para descubrir moléculas con actividad antimicrobiana (Vega- Avila et al., 2012). Justicia spicigera (muicle como nombre común) es una planta endémica de Mesoamérica que crece en México, perteneciente a la familia Acanthaceae. Se trata de un arbusto verde con flores tubulares de color naranja. En los pueblos maya se le conoce como «ych-kaan», pero los nombres más comunes son «hierba azul» y «hierba tinta» debido al color oscuro de sus preparaciones acuosas, que van del rojo al azul oscuro. En México ha sido utilizada desde la época prehis- pánica en la medicina tradicional para el tratamiento de disentería, diabetes, leucemia y anemia. Esta planta también se usa por sus efectos antialgésicos contra el dolor de cabeza, hipertensión, epilepsia, dolor de estómago, diarrea, cáncer, enfermedades circulatorias, nervios, reumatismo e inflamación de estómago (Awad et al., 2018). Diversas investigaciones demuestran que los extractos de las hojas de J. spicigera poseen propiedades antioxidantes (Sepúlveda-Jiménez etal.,2009),anticancerígenas (Alonso- Castro et al., 2013), antidiabéticas (Girón-Cruz, 2015; Ortiz- Andrade et al., 2012) y antidepresivas (Cassani et al., 2014). Estas propiedades se deben a la presencia de compuestos fenólicos y flavonoides, principalmente glucósidos del kaempferol, siendo los más importantes kaempferitrina (Kaempferol-3,7-diramnósido; 574.20 ± 65.10 mg/100 g de muestra seca) y astragalina (kaempferol-3-β-D-glucopira- nósido; 113.10 ± 15.06 mg/100 g de muestra seca) (Nazira- Sarian et al., 2017; Cid-Ortega et al., 2021). Los principales flavonoles que se encuentran en la mayoría de los vegetales son la quercetina y el kaempferol; se ha sugerido un efecto
  • 5. 209 Ingenierías y Desarrollo Tecnológico sinérgico de estos compuestos en la reducción de células cancerosas (Ackland et al., 2005). La ingesta regular de antioxidantes se ha convertido en una necesidad para lograr la prevención de algunas enfer- medades (Aguirre-Calvo y Santagapita,2017).Sin embargo, la incorporación de ingredientes funcionales en los alimentos suele verse limitada por su inestabilidad durante el procesamiento y el almacenamiento. Por lo tanto, encon- trar una manera de obtener una entrega natural y eficaz al cuerpo humano se ha convertido en uno de los principales objetivos de la industria alimentaria. La protección de compuestos antioxidantes mediante encapsulación se ha vuelto importante en la formulación de alimentos funcio- nales (Castro-Alatorre et al., 2021). Los procesos de encap- sulación fueron desarrollados entre los años 1930 y 1940 por la National Cash Register para la aplicación comercial de un tinte a partir de gelatina como agente encapsulante mediante un proceso de coacervación. Las técnicas de encapsulación se han estudiado por sus notables efectos en la protección y conservación de alimentos durante su almacenamiento por un período prolongado de tiempo (Aguirre-Calvo y Santagapita,2017).La microencapsulación es una técnica que consiste en transformar los alimentos de forma líquida a sólida.Se utiliza en la industria alimentaria para proteger los ingredientes alimentarios funcionales y compuestos bioactivos de la evaporación,oxidación,degra- dación, pérdida de volátiles y disminución de la estabilidad y vida útil (Castro-Alatorre et al., 2021). Por lo anterior, el objetivo de este trabajo fue obtener microcápsulas de algi- nato con extracto de muicle, mediante gelificación iónica externa y utilizando la técnica de extrusión por goteo, así como evaluar sus propiedades antioxidantes. Materiales y métodos Material vegetal Se utilizaron hojas de muicle (Justicia spicigera) de la región de Izúcar de Matamoros,Puebla.Las hojas fueron seleccio- nadas, lavadas y secadas a temperatura ambiente (31 ± 1° C; humedad relativa de 75 ± 7 %) hasta una humedad menor al 10 %.Las hojas secas se molieron en un molino pulverizador de acero inoxidable marca Veyco modelo MPV 100 (México) con malla de 0.5 mm. El polvo obtenido se hizo pasar por una malla Tyler No. 14 (1.4 mm de luz) y se almacenó en bolsas herméticas.Se determinó su contenido de humedad, actividad de agua y pH. Todos los análisis se realizaron por triplicado. Propiedades fisicoquímicas Humedad Se determinó de acuerdo al método de la norma oficial mexicana NOM-116-SSA1 (1994). La muestra se deshidrató a 100 °C durante 4 horas a presión atmosférica en un horno de secado digital (Novatech HS35-ED, Quimilab Inc. Tlaquepaque, Jalisco, México). Actividad de agua (aw) Se realizó utilizando un higrómetro AQUA-LAB modelo 4TE (Decagon Devices Inc. Pullman, WA, USA) con control de temperatura interna (15-50 ± 0.2° C).El equipo se calibró con soluciones estándar de NaCl 6.0 M (aw = 0.76 ± 0.003) y LiCl 8.57 M (aw = 0.50 ± 0.003) (Decagon Devices Inc. 2008). La temperatura de medición fue de 25 ± 0.01° C. pH Se realizó de acuerdo al método 10.035 de la AOAC (1980). Se utilizaron 5 g de muestra, a los cuales se les adicionaron 10 ml de agua destilada, se mezcló hasta obtener una pasta uniforme y se introdujo el electrodo directamente de manera que lo cubriera perfectamente. El potenciómetro (Conductronic pH 120, Conductronic S. A. Puebla, México) se calibró con soluciones reguladoras de pH 4, 7 y 10. Sólidos solubles totales (SST) Se determinaron de acuerdo al método 932.14C de la AOAC (1995), mediante un refractómetro manual Atago modelo Master-M (Atago Co. LTD, Tokio, Japón) con una escala de 0-32° Bx. Las lecturas se corrigieron a 20 °C, utili- zando los valores establecidos en las tablas de referencia del AOAC (1995). Propiedades antioxidantes Obtención de extractos Las extracciones se realizaron a reflujo en un equipo de extracción múltiple (modelo 5000, Lab-Line Instruments, Inc. IL, EE.UU.), utilizando 1 g de polvo seco en 50 ml de etanol (0.02 g/ml) (Baqueiro-Peña y Guerrero-Beltrán,2017) al 50 % p/p, a una temperatura de 60 ºC, durante 45 min. Las mezclas se filtraron a través de papel filtro Whatman No. 4 y se colocaron en matraces de 50 ml, forrados con papel aluminio. Posteriormente, el etanol fue removido utilizando un rota-evaporador RV 8 V (IKA, Suecia) a una temperatura de 55 ± 1° C y presión de vacío de 54 cmHg (Cid-Ortega y Guerrero-Beltrán, 2014). Los extractos se almacenaron en refrigeración (4 ºC) en frascos forrados con papel aluminio para su posterior análisis. Contenido de fenoles totales Se determinó mediante el método espectrofotométrico desarrollado por Folin y Ciocalteu (Singleton y Rossi, 1965). En un tubo de ensayo (cubierto con papel aluminio) se
  • 6. Ingenierías y Desarrollo Tecnológico 210 colocaron 5 µL de extracto de muicle (o 1000 µL del extracto de microcápsulas), 3 ml de agua destilada, 250 µL del reactivo de Folin-Ciocalteu, 750 µL de Na2CO3 al 20 % y se aforó con agua destilada (995 µL) a 5 ml.Se agitó durante 30 segundos en un Vortex (Thermolyne M37615,Iowa,EE.UU.) y se dejó reposar 1 hora a temperatura ambiente (29 ± 2° C) en la oscuridad. Posteriormente se midió la absorbancia a 765 nm en un espectrofotómetro UV-visible Jenway 7315 (Bibby Scientific Ltd, Stone, Staffs, Reino Unido). En cada determinación se realizaron curvas estándar por duplicado a diferentes concentraciones de ácido gálico (98.5 %, Sigma): 0, 0.0080, 0.0160, 0.0240, 0.0320, 0.0400, 0.0480, 0.0560 y 0.0640 mg. La curva estándar fue: Abs = 25.83 ± 2.95 (1/mg EAG)*X (mg EAG) + 0.03 ± 0.01, R2 = 0.997 ± 0.003. Los resultados se expresaron como mg equivalentes de ácido gálico (EAG) en 1 g de hojas secas o en 1 g de microcápsulas. Contenido de flavonoides totales Se realizó de acuerdo al método descrito por Nanasombat et al. (2015) con algunas modificaciones. El extracto de muicle (10 µL) o extracto de microcápsulas (3000 µL) se mezcló con 1.25 ml de agua destilada y 75 µL de NaNO2 (5 %, p/p). Después de 5 min, se agregaron 150 µL de AlCl3 (10 %, p/p), se mezclaron y se dejó reposar por 6 min. Posteriormente, se adicionaron 500 µL de NaOH (1 M) y se ajustó el volumen final a 4 ml con agua destilada. La mezcla se agitó durante 30 segundos en un Vortex (Thermolyne M37615, Iowa, EE. UU.) e inmediatamente se midió la absorbancia a 510 nm utilizando un blanco para ajustar el equipo a cero. Se utilizó un espectrofotómetro UV-visible Jenway 7315 (Bibby Scientific Ltd, Stone, Staffs, Reino Unido). En cada determinación se realizaron curvas estándar por duplicado a diferentes concentraciones de quercetina (95 %, Sigma): 0, 0.020, 0.060, 0.100, 0.140, 0.180, 0.220, 0.260 y 0.300 mg. La curva estándar fue: Abs = 1.52 ± 0.42 (1/mg EQ)*X (mg EQ) + 0.0010 ± 0.019, R2 = 0.973 ± 0.022. Los resultados se expresaron como mg equivalentes de quercetina (EQ) en 1 g de hojas secas o en 1 g de microcápsulas. Capacidad antioxidante Se utilizó el método del DPPH (1,1-Difenil-2-picrilhidrazil) desarrollado por Brand-Williams et al. (1995) con algunas modificaciones (Molyneux, 2004; Esmaeili et al., 2015). Se realizó una dilución 1:10 del extracto con agua destilada, posteriormente se tomaron 300 µL de la dilución y se mezcló en un tubo de ensayo (cubierto con papel aluminio) con 1.7 ml de etanol (99.5 %) y 2 ml de solución de DPPH (3.9 mg en 100 ml de etanol al 99.5 %). Se agitó durante 30 segundos en un Vortex (Thermolyne M37615, Iowa, EE. UU.) y se dejó reposar 30 min a temperatura ambiente (29 ± 2 °C) en la oscuridad. La absorbancia se midió a 517 nm en un espectrofotómetro UV-visible Jenway 7315 (Bibby Scientific Ltd, Stone, Staffs, Reino Unido). La capacidad antioxidante fue calculada como porcentaje de inhibición de acuerdo a la siguiente ecuación: I ( %) = [1–(Absorbancia de la muestra/Absorbancia del control)]*100. En cada determinación se realizaron curvas estándar por duplicado a diferentes concentraciones de Trolox (6-hidroxi-2, 5, 7, 8 tetrametilcromo-2 ácido carboxílico al 97 %, Aldrich): 0, 0.007,0.011,0.014,0.018,0.022,0.025 y 0.029 mg.La curva estándar fue: I ( %) = 3334.62 ± 63.96 (1/mg ET)*X (mg ET) + 12.46 ± 5.21, R2 = 0.895 ± 0.05. Los resultados se expresaron como mg equivalentes de Trolox (ET) en 1 g de hojas secas. Obtención de microcápsulas con extracto de muicle Se utilizó un diseño factorial 2x2, dos concentraciones de alginato de sodio (2 y 3 %) y dos concentraciones de CaCl2 (2 y 3 %). La relación alginato:extracto se mantuvo cons- tante y fue de 3:1 (v/v). La elaboración de microcápsulas se realizó mediante gelificación iónica externa y utilizando la técnica de extrusión por goteo. La solución de alginato de sodio (2 y 3 % p/p) (Wong et al., 2011; Yan et al., 2014; Lim y Ahmad, 2017; Tan et al., 2018; Aguirre-Calvo y Santagapita, 2019), una vez preparada, se mantuvo en agitación por 4 h y se dejó reposar hasta el día siguiente. La extrusión de la mezcla alginato-extracto se realizó utilizando una jeringa de 10 ml con aguja de 27 g (0.4 mm de diámetro interno y 40 mm de longitud) y una velocidad promedio de 92 micro- cápsulas/min. La distancia entre la solución gelificante (CaCl2 al 2 y 3 %, p/p) y la punta de la aguja se mantuvo a 5 cm (Boon-Beng et al., 2013). Para evitar la deformación de las microcápsulas, se adicionó Tween 80 a la solución de CaCl2 a una concentración de 0.5 % (Boon-Beng et al., 2013). El tiempo de gelificación de las microcápsulas fue de 30 min. Se recomienda un tiempo mínimo de 15 min y máximo de 60 min, ya que tiempos de gelificación mayores forman microcápsulas más rígidas y reducen su diámetro (Boon-Beng et al., 2013). Análisis de las propiedades antioxidantes en microcápsulas Las microcápsulas obtenidas se dejaron en 10 ml de solu- ción de citrato de sodio al 3 % durante 16 h en refrigera- ción (5 °C). Posteriormente, la mezcla se agitó (700 a 800 rpm) por 30 min, se adicionaron 10 ml de etanol absoluto (99.5 %) y se agitó (600 a 700 rpm) por 15 min. La mezcla se dejó reposar en refrigeración por 30 min con el objetivo de separar el alginato de sodio. A continuación, la mezcla se hizo pasar por una malla de 0.5 mm, se realizó un lavado con 5 ml de etanol absoluto (99.5 %) y, por último, se filtró mediante papel filtro Whatman No. 41. El filtrado obte- nido se ajustó a un volumen de 20 ml con etanol absoluto (99.5 %). Las muestras se colocaron en viales de 12 ml
  • 7. 211 Ingenierías y Desarrollo Tecnológico forrados con aluminio y se almacenaron a temperatura de 5 °C hasta el día siguiente. Posteriormente las muestras se decantaron, con el objetivo de eliminar el precipitado que se forma y se colocaron en una centrífuga (Hermle modelo Z 323, Alemania) durante 15 min a 5500 rpm. Finalmente, se determinó el contenido de fenoles y flavonoides totales. Análisis estadístico Se realizó un análisis de varianza (ANOVA) de una sola vía para determinar el efecto de la concentración de algi- nato de sodio (2 y 3 %) y cloruro de calcio (CaCl2) (2 y 3 %), en la elaboración de microcápsulas. Para establecer dife- rencias entre los tratamientos, se realizó una comparación múltiple de Tukey, utilizando el software MINITAB® versión 17.1.0 (Minitab Inc., 2013). Todos los ensayos se realizaron por triplicado. Las diferencias se consideraron significa- tivas a valores de p ≤ 0.05. Resultados/ Discusión de resultados Propiedades fisicoquímicas La Tabla 1 muestra los resultados obtenidos de las propie- dades fisicoquímicas en muicle en polvo y el extracto de muicle. Tabla 1. Propiedades fisicoquímicas en muicle en polvo y extracto Variable Muicle en polvo Extracto de muicle Humedad ( %) 7.31 ± 0.13 - pH 7.64 ± 0.01 6.60 ± 0.01 aW 0.40 ± 0.01 - SST (°Bx) - 5.24 ± 0.04 SST = Sólidos Solubles Totales. Propiedades antioxidantes Las propiedades antioxidantes en muicle y extracto se muestran en la Tabla 2.Los compuestos fenólicos son meta- bolitos secundarios que poseen una amplia gama de efectos benéficos a la salud, tales como actividad antirradicalar, antiviral,antitumoral,antidiabética y contra enfermedades cardiovasculares. Los flavonoides poseen propiedades biológicas tales como, actividad antimicrobiana, antiul- cerosa, antiinflamatoria, antiespasmódica, entre otras (Girón-Cruz, 2015). De acuerdo a resultados obtenidos por Girón-Cruz (2015), el contenido de fenoles y flavo- noides totales en extracto de muicle fue de 220.72 ± 8.98 mg EAG/100 mL y 391.25 ± 6.79 mg EQ/100 mL, respecti- vamente. Estos resultados son similares a los obtenidos en este trabajo. Las curvas estándar realizadas para la deter- minación de fenoles totales,flavonoides totales y capacidad antioxidante en extracto de muicle y microcápsulas se muestran en la Figura 1. Tabla 2. Propiedades antioxidantes en muicle (J. spicigera) y extracto de muicle Variable Muicle en polvo (mg/g) Extracto de muicle (mg/100 ml) Fenoles totales (EAG) 146.42 ± 13.05 271.45 ± 24.19 Flavonoides totales (EQ) 181.44 ± 15.96 336.37 ± 29.58 Capacidad antioxidante (ET) 29.72 ± 0.36 55.10 ± 0.67 Inhibición de DPPH 68.79 ± 0.68 % Los valores representan la media ± desviación estándar. EAG = Equivalentes de ácido gálico. EQ = Equivalentes de quercetina. ET = Equivalentes de trolox. Figura 1. Curvas para los diferentes estándares. (A) Ácido gálico. (B) Quercetina. (C) Trolox
  • 8. Ingenierías y Desarrollo Tecnológico 212 Evaluación del proceso de microencapsulación El contenido de fenoles y flavonoides totales en las micro- cápsulas se muestra en la Tabla 3.Con respecto al contenido de fenoles, la mayor cantidad se obtuvo en el tratamiento 1 y 4. Para el contenido de flavonoides no hubo diferencias significativas (p < 0.05) entre los tratamientos. Lo anterior se puede observar en la Figura 2. Con respecto a la eficiencia (retención de fenoles y flavonoides totales en microcápsulas con extracto de muicle) de los tratamientos, se puede observar (Figura 3) que el trata- miento 3 mostró la mayor eficiencia, tanto para fenoles como para flavonoides. Sin embargo, la cantidad de estos compuestos en las microcápsulas fue menor a los demás tratamientos. En lo referente a las propiedades físicas de las microcápsulas (peso y diámetro) (Tabla 3), el trata- miento con 3 % de alginato y 2 % CaCl2 (T3) proporcionó microcápsulas con mayor diámetro y peso. Considerando el contenido de fenoles y flavonoides totales en las micro- cápsulas, el tratamiento 1 (T1) fue el mejor (1.56 ± 0.16 mg EAG/g y 1.45 ± 0.01 mg EQ/g), teniendo una eficiencia de 59 y 44 % para el contenido de fenoles y flavonoides totales, respectivamente. Figura 2. Contenido de fenoles y flavonoides totales en microcápsulas con extracto de muicle. Las barras con diferente letra presentan diferencias significativas (p < 0.05) Figura 3. Eficiencia del proceso de microencapsulación de los diferentes tratamientos. Las barras con diferente letra presentan diferencias significativas (p < 0.05) Tabla 3. Propiedades físicas y antioxidantes en microcápsulas Tratamiento Peso (g) Diámetro (mm) Cantidad de fenoles totales (mg EAG/g) Cantidad de flavonoides totales (mg EQ/g) Eficiencia en fenoles totales ( %)1 Eficiencia en flavonoides totales ( %)1 1 0.343 ± 0.014 0.231 ± 0.001 1.56 ± 0.16 1.45 ± 0.01 58.85 ± 3.49 44.35 ± 1.47 2 0.364 ± 0.006 0.207 ± 0.001 1.25 ± 0.09 1.23 ± 0.03 50.32 ± 2.62 39.86 ± 0.01 3 0.626 ± 0.015 0.254 ± 0.001 1.00 ± 0.02 1.10 ± 0.03 69.25 ± 0.44 61.64 ± 3.42 4 0.370 ± 0.005 0.229 ± 0.001 1.46 ± 0.04 1.27 ± 0.20 59.78 ± 0.73 41.97 ± 7.28 1 Corresponde a la cantidad retenida en la microcápsula con respecto a la cantidad utilizada en la mezcla. EAG = Equivalentes de ácido gálico. EQ = Equivalentes de quercetina.
  • 9. 213 Ingenierías y Desarrollo Tecnológico Obtención de microcápsulas De acuerdo a las pruebas realizadas, el proceso estandari- zado para la obtención de microcápsulas se muestra en la Figura 4.Durante el proceso para la obtención de microcáp- sulas, se observó que durante la fase de mezclado entre el alginato de sodio y el extracto de muicle el pH es un pará- metro que influye en una buena incorporación de ambas mezclas. El pH indica la concentración de iones hidronio en una solución acuosa,su determinación es importante en la estabilidad del alginato de sodio, debido a que a valores de pH ácidos se registra una despolimerización del alginato y por consecuencia una estructura protectora débil. En soluciones con valores de pH de 4 e inferiores, se presentan problemas en la gelificación debido a la conversión del algi- nato en ácido algínico (Lara-Fiallos et al., 2019). Conclusiones De acuerdo a los resultados obtenidos en el análisis de las propiedades antioxidantes, el muicle (J. spicigera) es una planta que posee cantidades significativas de compuestos fenólicos y flavonoides, los cuales tienen un papel impor- tante en la salud, ya que disminuyen el riesgo de enferme- dades crónicas, tales como enfermedades cardiovasculares y cáncer. Además, estos compuestos proporcionan diversas propiedades antioxidantes, anticancerígenas y antidiabé- ticas, lo cual explica el uso de esta planta en la medicina tradicional mexicana para el tratamiento de enfermedades infecciosas. El mejor tratamiento de microencapsulación fue el T1. La combinación de alginato de sodio al 2 % y CaCl2 al 2 % proporcionó los mejores resultados respecto al contenido de fenoles y flavonoides totales (1.56 ± 0.16 mg Figura 4. Metodología para la obtención de microcápsulas de alginato de sodio con extracto de muicle
  • 10. Ingenierías y Desarrollo Tecnológico 214 EAG/g y 1.45 ± 0.01 mg EQ/g, respectivamente), con una eficiencia promedio del 52 %. Por lo tanto, las microcáp- sulas con extracto de muicle son una alternativa para el desarrollo de alimentos funcionales. Líneas de trabajo o trabajos a futuro Realizar más pruebas del proceso de microencapsulación con el objetivo de aumentar la eficiencia (retención del contenido de fenoles y flavonoides totales) en las micro- cápsulas, así como su aplicación y evaluación en alimentos (yogur, bebidas, mermeladas, entre otros). Agradecimientos Este trabajo fue apoyado por la Universidad Tecnológica de Izúcar de Matamoros, Puebla, proporcio- nando los laboratorios, materiales y reactivos necesarios para los experimentos, así como la obtención del título de TSU de la alumna Sarai Gil Gutiérrez. Referencias bibliográficas Ackland, M. L., Van de Waarsenburg, S. & Jones, R. (2005). 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