Caracterización y Evaluación de Propiedades Biológicas de la hoja de (Erythroxylum coca) rvch

REVISTA CIENTÍFICA Nº1 BIOFAR- CIENTÍFICA UMSS FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS Y BIOQUÍMICAS
INSTITUTO DE INVESTIGACIÓN
Ricardo Vargas Choque richivargas69@gmail.com
CARACTERIZACIÓN Y
EVALUACIÓN DE
PROPIEDADES BIOLÓGICAS
DE LA HOJA DE
(Erythroxylum coca)
Ricardo Vargas Choque, E. Silvia
Zabalaga Vía, Jenny K. Pinto Davalos,
Zulema L. Bustamante Garcia
RESUMEN
La hoja de coca, ha sido considerado
tradicionalmente por nuestros pueblos indígenas
como una planta sagrada de gran valor alimenticio
y curativo, forma parte de un legado ancestral
milenario. Como respuesta a las nuevas políticas
nacionales de tecnología e innovación, es necesario
contribuir al desarrollo socioeconómico
agroindustrial de la región del Estado Plurinacional
de Bolivia, generando tecnologías que permitan
lograr un valor agregado a los productos y formas
farmacéuticas de la hoja de coca a través de la
validación de las propiedades biológicas y
caracterizaciones químicas para una utilización
adecuada de la materia prima. Se identificaron los
metabolitos secundarios presentes en la hoja de
Erythroxylum coca procedente de la región del
chapare por medios de una marcha fitoquímica.
Entre las biomoléculas identificadas se encuentran
los alcaloides, flavonoides y saponinas en una alta
concentración, taninos antraquinonas,
antocianidinas en menor concentración.
Los valores obtenidos, muestran resultados
negativos para la actividad genotóxica del extracto
etanólico Erythroxylum coca a las concentraciones
de 8.7, 17.5 y 35mg/ml evaluadas en las alas de
Drosofila melanogaster.
Se evaluó la actividad antioxidante, a través de:
ensayo de decoloramiento del radical 2,2-difenil-1-
picril-hidrazilo (DPPH). Los resultados
demostraron la capacidad antioxidante a las
concentraciones de 25 ug/ml, 50 ug/ml, 100ug/ml
y 200ug/ml con 99.69% de decoloración. Se
concluye que los extractos de Erythroxylum coca
procedente del chapare podrían ser usados
potencialmente en la formulación de productos con
actividad antioxidante.
Palabras claves: Antioxidante, Genotoxica,
Erythroxylum coca,
Metabolitos, chapare.
ABSTRACT
The coca leaf, traditionally considered by our
indigenous peoples as a sacred plant of great
nutritional and curative value, is part of a thousand-
year-old ancestral legacy. In response to the new
national policies on technology and innovation, it
is necessary to contribute to the agro-industrial
socio-economic development of the region of the
Plurinational State of Bolivia, generating
technologies that allow to achieve an added value
to the products and pharmaceutical forms of the
coca leaf through The validation of the biological
properties and chemical characterizations for an
adequate use of the raw material. The secondary
metabolites present in the Erythroxylum coca leaf
from the chapare region were identified by means
of a phytochemical gait. Among the biomolecules
identified are alkaloids, flavonoids and saponins in
a high concentration, anthraquinone tannins,
anthocyanidins in a lower concentration to a lesser
extent.
The values obtained show negative results for the
genotoxic activity of the ethanol extract
Erythroxylum coca at concentrations of 8.7, 17.5
and 35mg / ml evaluated in the wings of Drosophila
melanogaster.
The antioxidant activity was evaluated through:
discoloration test of the 2,2-diphenyl-1-picryl-
hydrazyl radical (DPPH). The results demonstrated
antioxidant capacity at concentrations of 25æg / ml,
50æg / ml, 100æg / ml and 200æg / ml with 99.69%
discoloration. It is concluded that extracts of
Erythroxylum coca from the chapare could
potentially be used in the formulation of products
with antioxidant activity.
Key Words: Antioxidant, Genotoxic,
Erythroxylum coca, Metabolites, Chapare.
INTRODUCCIÓN.
La utilización de plantas medicinales se puede
afirmar que constituye el elemento más
significativo en la práctica de la medicina
tradicional. No se conoce exactamente donde se
utilizaron las plantas medicinales por primera vez,
pero seguramente la búsqueda de algún remedio
CARACTERIZACIÓN Y EVALUACIÓN DE PROPIEDADES
BIOLÓGICAS DE LA HOJA DE (Erythroxylum coca)
Ricardo Vargas Choque, E. Silvia Zabalaga Vía, Jenny K. Pinto Davalos, Zulema
L. Bustamante Garcia
Instituto de investigación de la Facultada de Cs. Farmacéuticas y. Bioquímicas.
Programa de Fármacos, Alimentos y Cosméticos
Universidad Mayor de San Simón.
Cochabamba, Bolivia
CORRESPONDENCIA: richivarghas69@gmail.com

fue algo que se dio en todas las culturas a la vez,
fruto del deseo del hombre de sanar, por cuestión
mágica religiosa o de algún preparado que le
proporcionase una mayor facilidad temporal. La
mayoría de las veces los descubrimientos fueron
simplemente resultado de la búsqueda de nuevos
alimentos1
.
Bolivia presenta una gran biodiversidad de plantas
medicinales, por ello nos permite contar con un
gran desafío y oportunidades para la realización de
trabajos de investigación. Sobre la flora boliviana
para poder contribuir y dar a conocer la
potencialidad de las distintas plantas medicinales
que en su gran mayoría son desconocidas en la
actualidad y las cuales pueden proporcionar un
amplio desarrollo a nivel cultural, farmacéutico y
económico al país. Por tanto es importante dar
énfasis en el estudio de algunas plantas medicinales
de la biodiversidad boliviana2
.
Las plantas medicinales contribuyen al
fortalecimiento del buen vivir en la salud y en la
economía del país; lo que nos proporciona una serie
de desafíos y oportunidades para la realización de
trabajos de investigación de la flora boliviana lo
que nos permitirá dar a conocer el potencial de
plantas medicinales; proporcionando así al país un
desarrollo económico, cultural y farmacéutico.
Analizando la situación se puede aprovechar los
principios activos de los recursos naturales, con el
mayor rendimiento, minimizando cualquier riesgo,
que posteriormente podrán ser utilizados en la
elaboración de fitomedicamentos, cosméticos y
alimentos de bajo costo, accesible para la economía
del Estado Plurinacional de Bolivia.
Un antioxidante es una molécula capaz de retardar
o prevenir la oxidación de otras moléculas. El
sistema de defensa antioxidante está constituido
por compuestos de naturaleza enzimática como:
superóxido dismutasa, catalasa, glutation
peroxidasa, y compuestos de naturaleza no
enzimática como: vitamina E, beta-caroteno,
vitamina C, glutation reducido, albúmina,
flavonoides y metales de transición como Se, Cu,
Zn, Fe, entre otros3
.
El incremento de enfermedades degenerativas nos
lleva a buscar nuevas alternativas por lo que es
importante determinar el grado de actividad
antioxidante en extractos de la hoja de
Erythroxylum coca para la complementariedad
nutricional. Se conoce que la coca cultivada en el
trópico en
Cochabamba contiene antocianidinas, flavonoides
además de alcaloides.
Es importante realizar estudios que permitan
caracterizar y evaluar la actividad biológica y
química de las hojas de Erythroxylum coca
provenientes del trópico de Cochabamba
orientadas a la producción de información
científica que sustente la formulación de productos
derivados a corto y mediano plazo, rescatar y
validar la información sobre el uso, modo de
empleo y especialmente sobre su composición
química de nuestra flora medicinal boliviana.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se trabajó con las hojas de la planta de
Erythroxylum coca, que fueron recolectadas in situ
en la zona tropical del Chapare-Ivirgarzama del
departamento de Cochabamba, con la colaboración
de los comunarios de lugar.
El tipo de estudio que se realizo fue descriptivo,
experimental, prospectivo y transversal.
La estructura del procedimiento fue el siguiente:
Todo el material vegetal fue secado a la sombra en
atmósfera ambiental durante 20 días.
Posteriormente se separaron las hojas, se
pulverizaron en un molino de cuchilla y se
conservaron en frascos de color ámbar hasta la
realización del tamizaje fitoquímico.
Preparación de extractos.
La preparación de extractos etanólico al 70% y 2%
ácido clorhídrico por maceración a partir del
material pulverizado, utilizando como solvente de
extracción etanol: agua (7:3) en una relación de 1:

10 materia prima – solvente, de la siguiente
manera: Se tomó 50g de cada materia vegetal
pulverizada con 500 ml de solvente. Fueron
colocados en frascos ambarados de cristal
herméticamente cerrados y se maceraron por 48
horas, en constante agitación. Después del
macerado, se procedió al filtrado (papel filtro). El
filtrado obtenido se rota evaporó hasta ¼ del
volumen total a una temperatura de 55o
C en un
rotaevaporador.
Determinación de sólidos totales
Para la determinación de sólidos totales se utilizó
la estufa y se toma tres cápsulas lavadas con
alcohol, secadas con algodón, dejando en la estufa
por una hora, las tres capsulas fueron llevadas a un
desecador por 15 minutos luego pesadas en la
balanza analítica para obtener el peso inicial,
inmediatamente se colocó un ml de extracto
etanólico de la hoja de coca; se pesó en la balanza
analítica, luego fueron llevados a la estufa por 4
horas a una temperatura de 105º centígrados.
Pasado ese tiempo se volvieron a pesar previo
enfriamiento en el desecador entre 15 y 20 minutos
para eliminar el H2O, nuevamente se lleva a la
estufa FAETA por 2 horas. Esta operación se repite
hasta conseguir un peso constante. Con los
resultados obtenidos se realizaron los cálculos
correspondientes, la fórmula empleada fue:
Screening fitoquímico
El screening fitoquímico fue realizado con el fin de
detectar los diferentes metabolitos secundarios en
las plantas para ver a qué grupo de compuestos
corresponden los principios activos. En el trabajo
se realizó una marcha fitoquímica preliminar y otra
marcha por fraccionamiento con los solventes
adecuados.
El procedimiento que se siguió es el de Olga de
Lock (1996) que nos permitió separar fracciones
por solubilidad e identificar a los diferentes
metabolitos
Ensayo SMART en alas de Drosophila
melanogaster.
La evaluación se realizó in vivo con los extractos
de la hoja de coca producida en el trópico de
Cochabamba para determinar su genotoxicidad
mediante la prueba de Mutación y Recombinación
Somática (SMART). Se realizó dos tipos de
cruzamientos: 1) Estándar (ST), en el que hembras
vírgenes de la cepa flr3 se cruzan con machos del
linaje mwh; 2) De Alta bioactivación (HB) donde
hembras ORR se cruzan con machos mwh.
Posteriormente se analizó la mutación inducida
por los diferentes tratamientos en las células
somáticas que dan origen a la formación de las alas.
Medio de ovoposición
Se utiliza un cuarto paquete de levadura fresca
trozada en un vaso de precipitado, se añadió dos
cucharadas de azúcar y 20ml de agua sobre la
levadura y se dejó reposar por unos minutos. Se
repitió este procedimiento el 2do y 3er día. Las
moscas de cada cruce se vacciaron a los medios de
ovoposición y se dejó por 8 hrs. Luego de las 8
horas se devolvió a su medio original (medio de
cultivo) se repitió este procedimiento por tres días.
Cosecha de larvas
La cosecha de las larvas del primer día es al tercer
día. El procedimiento se realiza lavando los frascos
de ovoposición con agua a 20ºc. Una vez lavadas
las larvas de 3er instar fueron colocadas en un
tamiz para posteriormente hacer el conteo de 100
larvas por vial de experimento.
Tratamiento de larvas
Las larvas obtenidas son llevadas a un medio
instantáneo Drosophila (Carolina biological
supply). Reconstituido con diferentes
concentraciones de la muestra a evaluar y también
suplementando con los controles negativos. Los
disolventes usados fueron de la muestra; agua,
etanol y tween 80. Los frascos fueron dejados en la
incubadora a 25ºC hasta la emergencia de los
adultos. Una vez ocurrido el crecimiento de las
larvas se realizó el conteo de sobrevivientes.
Posteriormente se colocaron las moscas tratadas en
etanol al 70%. Para su respectivo análisis de las alas
y posterior análisis estadístico. Las alas fueron
fijadas en porta objetos con la solución de faurer.
Preparación de medios SMART
La preparación de medios se realiza en un vaso
precipitado, se coloca 750ml de agua a fuego lento,
en otro vaso precipitado de 1000ml se mezcla la
levadura con azúcar y nipazol, hasta que tenga una
consistencia pastosa, en otro recipiente se disuelve
harina amarilla con agua destilada de 138ml. Una
vez que el agua empieza a burbujear se introduce la
mezcla de levadura.
Se deja hervir unos minutos removiendo la
consistencia pastosa a fuego lento y se añade la
solución acida de 3.5ml. El medio se vierte a los
frascos hasta cubrir aproximadamente 2cm de la
base.
Medio de experimentación
La cuantificación se realizó con el medio carolina
biological supply a 1.5g la cantidad requerida del
medio se colocó en los frascos de experimentación,
se agregó el extracto etanólico a diferentes
concentraciones a cada frasco.
Solución Faure
P2
% Sólidos Totales = x 100
P1

Los componentes se mezclaron de la siguiente:
goma arábiga 30g, glicerol 20ml, hidrato de cloral
50g y agua destilada en un vaso precipitado en baño
María hasta que tome una coloración translucida y
consistencia viscosa.
Análisis de las alas
El análisis microscópico se realizó el conteo tanto
de la parte dorsal como la ventral de las alas de D.
melanogaster bajo un aumento de lente de 10x a
40x. En el análisis de las alas se toma en cuenta el
número de manchas por ala. Las mutaciones se
diferenciaron entre: manchas simples (tricomas flr3
o mwh); manchas pequeñas (1 a 2 células);
manchas grandes (2 o más células) y manchas
gemelas (tricomas flr3 y mwh adyacentes). Se
considera solo los sectores encontrados en las
siguientes regiones distales del ala: A, B, C, C´, D,
D´y E.
Análisis estadístico de Genotoxicidad
Esta prueba estadística determina si la frecuencia
de mutación que se encuentra en la serie tratada
difiere significativamente de lo hallado en el
control, que corresponde a la frecuencia espontanea
de mutación.
La formulación de dos hipótesis alternativas
permite emitir un diagnostico estadístico, de
manera que el resultado pueda clasificarse como
positivo, débil positivo, negativo o inconcluyente.
Estas hipótesis son4
:
 Hipótesis nula (H0) no hay diferencia en la
frecuencia de mutación entre el
tratamiento y el control.
 Hipótesis alternativa (HA) el tratamiento
supone un incremento de m veces la
frecuencia de mutación comparada con la
frecuencia esperada por mutación
espontanea.
 Si se rechaza H0 implica que el
tratamiento origina un incremento
significativo de la frecuencia de mutación.
 Si además se rechaza HA significa que el
tratamiento no produce el incremento
requerido para considerar el compuesto
como un claro mutágeno. En este caso se
clasifica como mutágeno débil.
 Por otro lado, si no se rechaza ninguna de
las dos hipótesis, los resultados se
consideran inconcluyentes y no pueden
ser aceptadas a la vez.
 Esto permite una comparación de la
actividad genotóxica de diferentes agentes
o sustancias.
 La frecuencia de inducción de sectores
mutantes se calcula aplicando la siguiente
formula:
Dónde:
F: frecuencia de inducción de sectores por célula
n: Nro de sectores mutantes totales.
N: Nro de alas analisadas.
C: Nro de células por ala.
Determinación de la actividad antioxidante por
DPPH
El estudio de la actividad antioxidante se llevó a
cabo mediante el método desarrollado por Brand-
Williams que tienen el siguiente fundamento; el
radical DPPH, tiene un electrón desapareado, es de
color azul-violeta, va decolorándose hacia amarillo
pálido por la reacción con una sustancia
antioxidante, siendo medido
espectrofotométricamente a 517nm. La diferencia
de absorbancia, permite determinar el porcentaje de
captación de radicales libres. DPPH a una
concentración de 20 mg/L5, 6
.
Preparación de la curva de calibración:
 La absorbancia inicial del DPPH en el
medio de la reacción se determinó
mediante una curva de calibración.
 Se preparó una solución madre de DPPH
en una concentración 10mM en etanol
absoluto.
 A partir del cual se preparó la solución
inicial en una concentración de 0.1mM.
 Se preparó una solución de DPPH 0,2
mg/ml en etanol absoluto y a 1ml de cada
muestra se le adicionó 1ml de la solución
de DPPH preparada a una concentración
de 0.02; 0.04; 0.06; 0.08mM.
 La absorbancia fue leída en un
espectrofotómetro Thermo scientific,
GENESYSTM
10uv a una longitud de onda
de 517nm.
Determinación de la actividad antioxidante
Para la determinación cuantitativa se utilizó el
método del radical libre DPPH, el cual reduce el
radical 2,2-difenil-1-picrilhidracilo (DPPH) en la
2,2-difenil-1-pricril hidrazina por la acción
antioxidante de compuestos que contienen grupos -
OH que decoloran dicho reactivo6
.
 Se preparó una solución madre de DPPH en
una concentración 10mM en etanol
absoluto.
 Se utilizó como blanco etanol absoluto, la
muestra a analiza: Erythroxylum coca y
como control positivo el ácido ascórbico.
 Fueron colocados a 2ml de solución inicial
DPPH 0.1mM un volumen de 50ul de
(n *10-5
)
F =
N.C

muestra a diferentes concentraciones (25,
50, 100 y 200ug/ml; preparadas a partir de
la solución stock)
 La mezcla se dejó en reposo en ausencia de
la luz durante 30minutos.
 Fueron leídas la absorbancia a 517nm de
longitud de onda en un espectrofotómetro
Thermo scientific, GENESYSTM
10uv.
 Los resultados fueron expresados como
porcentaje de decoloración de DPPH
utilizando la siguiente formula:
Dónde:
Am : Es la absorbancia de la mezcla de reacción
(DPPH + extracto),
Abm : Absorbancia del blanco de muestra
(extracto + agua)
AbmDPPH : La absorbancia de la solución de DPPH.
Ver Anexo N° 19
Análisis estadístico de la actividad antioxidante
El análisis estadístico fue realizado con el
programa SPSS 11.5 y con el programa Minitab
Professional v16.2.0.0
Para la prueba realizada a diferentes
concentraciones y la actividad antioxidante fue el
análisis de varianza de un factor basado en la
desviación estándar agrupada.
Para comparar la actividad antioxidante de las
hojas de Erythroxylum coca en relación a la
vitamina C, se utilizó el análisis de ANOVA
unidireccional.
RESULTADOS
Los resultados del presente trabajo de tesis se
describen a continuación:
Resultados de la determinación de sólidos
totales
Tabla 1. Determinación de sólidos totales y
porcentaje de humedad
(% de sólidos totales
% humedad)
X- ST
X- %H
Extracto etanólico 5.5063% 94.4936%
Extracto en medio acido 8.4704% 91.5292%
Podemos ver que el porcentaje de solidos totales en
promedio de media aritmética del extracto
etanólico es 5.5063% y en el extracto en medio
ácido se observa, un promedio de media aritmética
de 8.4704%. En relación a la humedad podemos
ver que el porcentaje de agua en promedio en el
extracto etanólico es 94.4936% y en el extracto en
medio ácido es de 91.5292%.
Resultado de la determinación del Screening
fotoquímico
Tabla 2. Determinación de la marcha
preliminar presentes en Erythrxylum coca
Marcha Preliminar
Muestra Metabolitos Reactivos Concentración
Alcaloides
R.
Draguendorf +++
Erythroxylum
coca Flavonoides R. Shinoda +++
Saponinas R. Espuma +++
Taninos
R. Cloruro
Férrico ++
Los extractos de Erythroxylum coca, etanólicos y
en medio acido, de acuerdo a las pruebas
realizadas, contienen Saponinas, Flavonoides y
Alcaloides; también se observa a los Taninos con
mediana concentración.
Resultado de la determinación del ensayo
Genotóxico
Tabla 3. Cruce standard: Sectores mutantes
inducidos con el extracto Erythroxylum coca,
cálculo realizado por el paquete estadístico
Kastenbaum y Bowman
En la Tabla 3 se observa que en el cruce Estándar
la mayor frecuencia observada corresponde al
control negativo, observándose una disminución
proporcional en la frecuencia de manchas con
relación a la concentración para los grupos con
tratamiento, para MSP. Los valores obtenidos
mediante el paquete estadístico Kastenbaum y
Bowman, muestran resultados negativos para la
actividad genotóxica del extracto a la
concentración evaluada.
Resultado de la determinación de la actividad
Antioxidante por DPPH.
En este trabajo se preparó una curva de calibración
del reactivo DPPH (2,2difenil-1-picrilhidracilo), a
diferentes concentraciones (0.02; 0.04; 0.06;
Am - Abm
% Decoloración DPPH = 1 - x
100
AbmDPPH

0.08mM) encontrando un coeficiente de
correlación de 0.901como se observa en el gráfico.
Figura 1. Curva de calibración del reactivo DPPH
(2,2difenil-1-picrilhidracilo), a diferentes
concentraciones, encontrando un coeficiente de
correlación de 0.901.
Los resultados de la actividad antioxidante se
muestran en la tabla 4.
Tabla 4. Actividad antioxidante del extracto
etanólico Erythroxylum coca expresado en
porcentaje
Actividad Antioxidante de Erythroxylum coca
Concentración Extracto etanólico al 70%
200ug/ml 97.30%
100ug/ml 97.50%
50ug/ml 96.10%
25ug/ml 97.50%
X-
97.10%
En la tabla se observa la actividad antioxidante del
extracto de Erythroxylum coca con etanol al 70%
En relación a los resultados de la actividad
antioxidante del extracto Erythroxylum coca se
tomó en cuenta el extracto al 70% y la
concentración de 200ug/ml las cuales mostraron
resultados, en la media aritmética de 97.10%. Para
comparar la actividad antioxidante del extracto de
Erythroxylum coca con el control positivo que fue
la Vitamina C, se realizó un test de Anova
unidireccional (tabla 5 y tabla 6)
Tabla 5. Se muestra el porcentaje de la actividad
antioxidante a diferentes concentraciones de la
vitamina C
Actividad Antioxidante de la Vitamina C
Concentración Extracto Acuoso
200ug/ml 80.47%
100ug/ml 59.52%
50ug/ml 38.70%
25ug/ml 21.47%
Tabla 6. Análisis estadístico:
ANOVA unidireccional de la
Vitamina C.
ANOVA unidireccional: Vitamina C.
Fuente GL SC MC F P
Factor 4 62735 1568 1.62 0.224
Error 20 13557 978
Total 24 19830
S = 31.67 R-cuad. = 62.43% R-cuad.
(Ajustado) = 75.01%
El análisis estadístico muestra que Erythroxylum
coca en relación a la Vitamina C no presenta
diferencia significativa por tanto hay un
comportamiento similar; a pesar que en los
resultados Erythroxylum coca muestra una
actividad antioxidante mayor que la vitamina C.
Figura 2. Comparación entre control vitamina C
con el extracto etanólico de Erythroxylum coca a
diferentes concentraciones del % decoloración
DPPH.
DISCUSION
La media aritmética de los sólidos totales en los
extractos de Erythroxylum coca en medio ácido es
mayor a la correspondiente de los extractos
hidroalcoholicos. Al margen de que los solventes
en medio ácido son más eficientes para la
extracción de alcaloides, se puede pensar que esta
diferencia se debe a una extracción más eficiente
de sustancias orgánicas e inorgánicas de carácter
más polar.
En la marcha fitoquímica del extracto de
Erythrxylum coca, se identificaron como
metabolitos secundarios de mayor concentración,
los alcaloides, flavonoides y saponinas, y de menor
concentración los taninos. En la técnica de
fraccionamiento, debido a una mayor sensibilidad,
se identificaron alcaloides, flavonoides, saponinas,
taninos, sapogeninas, quinonas, esteroides,
cardenolidos, leucoantocianidinas y esteroides
triterpenos7
.
Los alcaloides tienen diferentes acciones
farmacológicas, así se conoce la acción de varios

como la atropina y otros que tiene una acción
antiespasmódica analgésica y estimulante y la
egnonina tiene una acción que contribuye a
metabolizar las grasas por la literatura podemos
indicar que tiene propiedades antimicrobianas,
antiinflamatorias, expectorantes, antitusivas.
Otros efectos reportados para la acción de los
flavonoides y alcaloides presentes en
Erythroxylum coca son efectos antivirales y
antioxidante (tales como anti-herpes simple, anti-
VIH), anti-infecciosos; anestésicos, analgésicos,
antiinflamatorios y acciones estimulantes para las
afecciones respiratorias8
.
Los taninos son astringentes a nivel gastrointestinal
por vía interna, ejercen un efecto antidiarreico y
antiséptico, por vía externa impermeabilizan las
capas más externas de la piel y mucosas a esto hay
que añadir un efecto vasoconstrictor, por
información bibliográfica son utilizados en el
tratamiento de quemaduras y para el catarro de
mucosas, además de ser usado como antídoto en
casos de envenenamiento7
.
Respecto a la genotoxicidad; en el presente estudio
el extracto etanólico de Erythroxylum coca, tanto
para los mutágenos directos como los indirectos en
las concentraciones evaluadas, dan una respuesta
negativa, razón por la cual se descarta al extracto
etanólico de Erythroxylum coca, como agente
recombinogénico, mediante la prueba de SMART,
debido a que el total de manchas no presenta un
incremento estadísticamente significativo dando
como expresión fenotípica la formación de MSP y
la presencia de MG nulas. En la mayoría de los
casos, estas últimas son producidas exclusivamente
por la recombinación mitótica, lo que indica que, el
extracto etanólico de Erythroxylum coca, inducen a
una recombinación mitótica en forma directa sobre
el DNA. En cuanto a las manchas simples pueden
ser producidas por varios mecanismos9
.
La observación de una baja frecuencia de
MSP/mosca en el cruce ST a las concentraciones
evaluadas, para el extracto etanólico de
Erythroxylum coca, indican que sus componentes
son de acción directa, pues cuando un compuesto
actúa de manera directa normalmente se producen
daños genéticos tardíos, debido a que los
compuestos necesitan activarse para poseer
actividad, dando como expresión fenotípica la
formación de mayor número de manchas simples
pequeñas, en relación a las manchas simples
grandes, las cuales se presentan cuando el
compuesto actúa en las etapas iniciales de división
mitótica10
.
Los análisis estadísticos de los datos obtenidos en
este estudio sugieren que el extracto etanólico de
Erythroxylum coca, no poseen la capacidad de
promover el desarrollo de procesos cancerígenos,
debido a que el proceso de recombinación mitótica
inhibe la acción de los genes supresores de tumores
siendo en muchos casos un factor desencadenante
de cáncer.
El extracto etanólico de Erythroxylum coca no
ejerce una actividad genotóxica directa y tampoco
una actividad genotóxica indirecta detectada por el
test de mutación y recombinación somática
SMART de D. melanogaster. El extracto etanólico
de Erythroxylum coca no demuestra actividad
genotóxica directa y tampoco actividad genotóxica
indirecta detectada por el test de mutación y
recombinación somática (SMART) de D.
melanogaster.
Los resultados que se presentan en el análisis
estadistico muestran que el extracto etanolico de
erythroxylum coca no es genotóxico ya que la
frecuencia de manchas encontradas es menor a la
frecuencia del control negativo. Incluso se tiene en
poca cantidad de manchas gemelas que se cuentan
como nulas para la determinación de la
genotoxicidad producida. Se confirma, entonces,
que el extracto a las concentraciones evaluadas no
es genotóxico.
En relación a la actividad antioxidante podemos
indicar; que si bien es cierto que existen diferentes
métodos para evaluar la actividad antioxidante, ya
sea in vitro o in vivo, los métodos in vitro nos
permiten tener una idea aproximada de lo que
ocurre en situaciones complejas, in vivo. Los
métodos más utilizados son ABTS y DPPH.
Ambos métodos, presentan una excelente
estabilidad en ciertas condiciones, aunque también
muestran diferencias. Los metabolitos secundarios
de Erythroxylum coca presentaron actividad
antioxidante con porcentaje decoloración de
99.69% de actividad antioxidante a una
concentración de 200ug/ml.
Esta actividad antioxidante podría deberse a la
presencia de flavonoides en la hoja de coca que son
potentes inhibidores de la oxidación del colesterol,
evitando así su transformación en oxiesteroles que
se forman durante la manufactura y procesamiento
de alimentos. Algunos de estos antioxidantes,
presentes en las diferentes plantas estudiadas,
contrarrestan los efectos de los oxiesteroles que son
citotóxicos, mutagénicos, aterogénicos,
carcinogénicos y que están presentes en los
alimentos preparados mediante fritura con aceites
vegetales y/o animales11
.
En años recientes, se ha incrementado el número de
publicaciones reportando la composición química
de ciertos flavonoides y de sus propiedades
farmacológicas: antibacterianas, antivirales,
antiinflamatorias, antialérgicas, antitrombótica,

vasodilatadora, antimutagénica y antineoplásica,
por su capacidad, en la dieta, para proteger o inhibir
el desarrollo del cáncer12
.
El extracto hidroalcoholico de Erythroxylum coca,
presenta una buena actividad antioxidante, siendo
el extracto etanólico al 70%, el que presentó una
mayor capacidad de captación de radicales libres, a
una concentración de 200ug/ml. Las diferencias
entre los resultados encontrados por diferentes
investigadores podrían explicarse en parte por las
variedades botánicas de los extractos de diferentes
lugares y las condiciones de cultivo,
almacenamiento y de procesamiento13
.
Los metabolitos presentes en el extracto
Erythroxylum coca, analizados y caracterizados
lleva a discutir la posibilidad de formular productos
derivados de Erythroxylum coca con actividad
antioxidante, analgésica, cosmética y energizante.
CONCLUSIONES
Los resultados del análisis fitoquímico muestran
que en las hojas de Erytrhroxylum coca existen
mayor cantidad de alcaloides, flavonoides y
saponinas.
Los datos obtenidos en el análisis estadístico del
potencial genotóxico mediante el cruce estándar,
refieren que el extracto etanólico Erythroxylum
coca a las concentraciones evaluadas no induce
daño genotóxico, debido a que las frecuencias de
manchas encontradas son inferiores respecto al
control negativo, lo cual indica que la
genotoxicidad para el cruce ST el genotipo trans-
heterocigoto, es negativo de acuerdo a los datos
obtenidos mediante el paquete estadístico
empleado.
El análisis comparativo del total de manchas entre
el cruce ST, el control positivo en relación al
control negativo, demuestran que el extracto
etanólico de Erythroxylum coca, no presenta efecto
genotóxico a las concentraciones evaluadas.
El extracto hidroalcoholico de Erythroxylum coca
estudiado, presento una buena actividad
antioxidante, siendo el extracto etanólico al 70%,
el que presentó una mayor capacidad de captación
de radicales libres, a una concentración de
200ug/ml por tanto podemos concluir que el
extracto etanolico Erythroxylum coca es un buen
antioxidante.
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