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Unbiased STEREOLOGY
for biological research
16 | 01 | 2013
UNBIASED STEREOLOGY
Estereología "imparcial"
« La estereología es un set de métodos diseñados
para asegurar un análisis cuantitativo riguroso del
tamaño, forma y número de objetos de interés »
➲ Volumen (3
dimensiones)
➲ Superficie (2
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La estereología apunta a recrear o estimar las
propiedades de objetos geométricos en el espacio
UNBIASED STEREOLOGY
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UNBIASED STEREOLOGY
Diferentes métodos
Model - Based Stereology
Usa modelos basados en las propiedades geométricas de los objetos
Desing - Based Stereology
Las sondas y esquemas de muestreo son diseñados, por lo que
los métodos son independientes del tamaño, forma,
orientación y distribución espacial del objeto.
☒
☑
Usa métodos de aproximación que solo funcionan si los modelos
realmente representan al objeto.
Todo objeto tiene la misma probabilidad de ser
muestreado
No se asume sobre el tamaño, forma, orientación o
distribución del objeto muestreado
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CRITERIOS
Punto único de conteo
Muestreo
Unbiased Counting Frame
❶
❷
❸
CRITERIOS
Muestreo
CRITERIOS
Muestreo
La retina del ojo es un buen ejemplo, ya que las células de ganglio retinal
no se distribuyen de forma uniforme sobre la retina.
Random
independent samples
Uniform random
systematic samples
CRITERIOS
Medición: Punto único de conteo
CRITERIOS
Medición: The Unbiased Counting Frame
Una partícula es contada si y sólo si:
Está completamente dentro del cuadro
de conteo
Cruza una linea verde pero no una roja
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Línea de inclusión
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Un ejemplo…
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The Unbiased Counting Frame: ¿Cómo funciona?
CRITERIOS
The Unbiased Counting Frame: ¿Cómo funciona?
La célula de Purkinje mostrada en este ejemplo es contada en el UCF n°3
y solo en este UCF, ya que toca al menos una de las líneas de exclusión de
los UCF n° 1, 2 y 4.
CRITERIOS
Medición: The Optical Disector
Di-sector = dos secciones
CRITERIOS
The Guard Zones
VENTAJAS
Lo que ofrece el método
Datos 3D “reales”
Los valores obtenidos se relacionan con un punto en el espacio
Exacto
Y por lo tanto imparcial
☑
☑
Preciso
Lo que aumenta la eficiencia del proceso
Simple
Fácil de aplicar en la práctica
☑
☑
APLICACIONES
La estereología puede usarse para estimar
Una población de células
Tamaño celular
Volumen de una región específica de un órgano
Fracción de área
Superficie
Largo de fibra
Etc…
STEREO INVESTIGATOR
Permite hacer estimaciones:
Área dentro de un contorno trazado
Volumen, luego de medir el grosor de una muestra histológica
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!
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El programa facilita el muestreo sistemático
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Unbiased stereology

  • 1. Unbiased STEREOLOGY for biological research 16 | 01 | 2013
  • 2. UNBIASED STEREOLOGY Estereología "imparcial" « La estereología es un set de métodos diseñados para asegurar un análisis cuantitativo riguroso del tamaño, forma y número de objetos de interés » ➲ Volumen (3 dimensiones) ➲ Superficie (2 dimensiones) ➲ Largo (1 dimensiones) La estereología apunta a recrear o estimar las propiedades de objetos geométricos en el espacio
  • 4. UNBIASED STEREOLOGY Diferentes métodos Model - Based Stereology Usa modelos basados en las propiedades geométricas de los objetos Desing - Based Stereology Las sondas y esquemas de muestreo son diseñados, por lo que los métodos son independientes del tamaño, forma, orientación y distribución espacial del objeto. ☒ ☑ Usa métodos de aproximación que solo funcionan si los modelos realmente representan al objeto. Todo objeto tiene la misma probabilidad de ser muestreado No se asume sobre el tamaño, forma, orientación o distribución del objeto muestreado ➲ ➲
  • 5. CRITERIOS Punto único de conteo Muestreo Unbiased Counting Frame ❶ ❷ ❸
  • 7. CRITERIOS Muestreo La retina del ojo es un buen ejemplo, ya que las células de ganglio retinal no se distribuyen de forma uniforme sobre la retina. Random independent samples Uniform random systematic samples
  • 9. CRITERIOS Medición: The Unbiased Counting Frame Una partícula es contada si y sólo si: Está completamente dentro del cuadro de conteo Cruza una linea verde pero no una roja ☑ ☑ Línea de inclusión Línea de exclusión
  • 11. CRITERIOS The Unbiased Counting Frame: ¿Cómo funciona?
  • 12. CRITERIOS The Unbiased Counting Frame: ¿Cómo funciona? La célula de Purkinje mostrada en este ejemplo es contada en el UCF n°3 y solo en este UCF, ya que toca al menos una de las líneas de exclusión de los UCF n° 1, 2 y 4.
  • 13. CRITERIOS Medición: The Optical Disector Di-sector = dos secciones
  • 15. VENTAJAS Lo que ofrece el método Datos 3D “reales” Los valores obtenidos se relacionan con un punto en el espacio Exacto Y por lo tanto imparcial ☑ ☑ Preciso Lo que aumenta la eficiencia del proceso Simple Fácil de aplicar en la práctica ☑ ☑
  • 16. APLICACIONES La estereología puede usarse para estimar Una población de células Tamaño celular Volumen de una región específica de un órgano Fracción de área Superficie Largo de fibra Etc…
  • 17. STEREO INVESTIGATOR Permite hacer estimaciones: Área dentro de un contorno trazado Volumen, luego de medir el grosor de una muestra histológica Conteo de poblaciones ! ! El programa facilita el muestreo sistemático Permite el uso de cuadros de conteo y calcula las zonas de protección Posee diversas sondas para análisis locales y globales Además: