Este documento describe un experimento en el que se administró acetona a una rata por vía intraperitoneal y se observó su sintomatología hasta la muerte. Luego, se realizaron procedimientos de disección, destilación y reacciones químicas para identificar la presencia de acetona en la sangre de la rata. El experimento concluyó que la dosis administrada de acetona causó la muerte de la rata y que las pruebas confirmaron la presencia de este compuesto tóxico.
1. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA.
Profesor: Dr.- Carlos García MSc.
Alumno: Oswaldo Luis Silva Oyola.
Curso: 5to Bioq. Farm. Paralelo: “B“
Grupo: # 7
Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes 30 de Junio del 2015.
Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 7 de Julio del 2015.
PRÁCTICA N° 5
Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR CETONA .
Animal de Experimentación: Rata wistar de color: blanco.
Vía de Administración: Vía Parenteral. (INTRAPERITONIAL.)
Volumen Administrado: 6 ml
TIEMPOS:
Inicio de la práctica: 8:05 am
Dosis adminstrada: 6 ml
Animal de experimentacion: Rata wistar de color: blanco.
Hora de administración del toxico a la rata wistar : 8:10 am
Deceso del animal: 8:24 am
Hora de diseccion: 8:30 am
Inicio de la destilación: 8:55 am
Finalización de la destilación: 9:20 am
Final de la práctica: 10:30 am
SÍNTOMATOLOGIA DE LA RATA WISTAR.
Convulciones.
Nauseas.
Vomito.
Cefalias.
Muerte.
10
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OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:
Observar la reacción que presenta el animal de experimentacion ante
una intoxicación.
Distinguir la sintomatología de la intoxicación por cetona con relación a
otras sustancias toxicas.
Identificar la presencia de acetona en la sangre del animal mediante
pruebas de reconocimiento.
MATERIALES. SUSTANCIAS.
Bata de laboratorio
Equipo de destilación
Mechero
Guantes de látex
Gorro
Campana
Zapatones
Espátula
Mascarilla
Pipetas
Erlenmeyer
Tubos de ensayo
Vasos de precipitación
Jeringuilla de 10cc
Instrumentos de disección
PROCEDIMIENTO:
1.- Primeramente Bioseguridad: Es decir colocarse la mascarilla, bata de
laboratorio, gorro, zapatones y los guantes de látex
2.- A continuación se deben tener todos los materiales listos en la mesa de
trabajo
3.- Con la jeringuilla tomamos 10 ml de etanol e inyectamos al cobayo (vía
parenteral)
5.- Observar la sintomatología del toxico en el animal de experimentación.
6.- Esperamos el tiempo de defunción.
7.- Una vez muerto el cobayo se procede a amarrarlo en la tabla de
disección.
Hidróxido de sodio
Ácido clorhídrico
Reactivo yodo-mercúrico
Hidróxido de potasio
Acido tartárico
Acetona
Solución yodo-yodurada
Nitroprusiato de Sodio
Carbonato de sodio
EQUIPO.
Cocineta
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8.- Tomamos el bisturí # 11 y lo colocamos en el soporte de bisturí y
procedemos a rasurar al animal de experimentacion.
9.- Con mucho cuidado cortar la piel, ejerciendo presión sobre las costillas y
con una jeringa aspirar la sangre.
10- Retirar los órganos sin excepción de uno y los colocamos en un vaso de
precipitación.
11.- Luego procedemos a trocear muy fino los órganos con unas tijeras.
12.- Transvasamos a un balón y colocamos las perlas de vidrio, agregar
además una pequeña cantidad de ácido tartárico y unos 3ml de agua
destilada.
13.- Preparar 20 ml de NaOH al 20%, colocarlo en un erlenmeyer.
14.- Armar el equipo de destilación y poner las vísceras a destilar durante
30 minutos y con la ayuda de lámparas de alcohol calentar con movimientos
circulares.
15. Finalmente una vez obtenido el destilado se realizan las reacciones de
identificación:
1. Reacción de Nessler.
2. Reacción de Yodoformo.
3. Con nitroprusiato de Sodio.
4. Reacción de Fritsh.
5. Reacción de Frommer.
6. Reaccion con 2:4 Dinitrofenilhidracina.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO:
Después de destilar el material de investigación, en el destilado se
realizan las reacciones de reconocimiento.
1. REACCIÓN DE NESSLER.- La acetona reacciona con el reactivo
yodo-mercúrico en medio alcalino un precipitado blanco, formado por
un producto de adición.
2. REACCIÓN DE YODOFORMO.- Al calentar una pequeña cantidad de
la muestra con una solución yodo-yodurada en medio alcalino con
KOH se produce yodoformo reconocible por su olor particular y su
color amarillo.
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I2 + 2KOH INA + IOK + H2O
CH3 CI3
CO + 3IOK CO + 3KOH
CH3 CH3
CI3
CO + KOH CHI3 + CH3-COOK
CH3
3. CON NITROPRUSIATO DE SODIO.- Con este reactivo, al que se le
añade solución de carbonato de sodio o NaOH, orina una coloración
amarilla-rojiza que al agregarle ácido acético, dará un color violeta.
4. REACCIÓN DE FRITSH.- Se mezcla la solución problema con un
volumen igual de ácido clorhídrico concentrado que contiene 5% de
ramnosa, se calienta en baño de vapor. Aparece un color rojo,
apreciable aún en concentración de 0.01 g de acetona por ml de
solución.
5. REACCIÓN DE FROMMER.- La muestra problema, al ser condensada
con aldehído salicílico en medio alcalino, produce un color rojo que
permite su determinación colorimétrica o fotométrica por su gran
sensibilidad y especificidad.
6. CON LA 2:4 DINITROFENILHIDRACINA: Disuelva una ó dos gotas
del compuesto que se va investigar en 2 ml de etanol y añada a 3 ml
del reactivo de 2,4-dinitrofenilhidracina. Agite vigorosamente y si no
se forma inmediatamente .Un precipitado de color amarillo, anaranjado
o rojo, deje reposar la solución durante 15 minutos.
REACTIVO. El reactivo se prepara disolviendo 3 g de 2,4-
dinitrofenilhidracina en 15 ml de ácido sulfúrico concentrado.
Entonces se añade esta solución, a 20 ml de agua destilada y 70 ml
de etanol al 95%. Se mezcla perfectamente la solución y se filtra.
COMENTARIOS: La mayoría de las cetonas producen
dinitrofelhidrazonas que son sólidos insolubles. Al principio, el
precipitado puede ser aceitoso y al reposar, volverse cristalino. Sin
embargo, algunas cetonas dan dinitrofenilhidrazonas que son aceites.
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GRÁFICOS DE LA PRACTICA:
Animal de
experimentación:
“ Rata wistar “.
Inyectar 20 ml el toxico
(metanol) en el animal
de experimentacion.
Observar los síntomas
de la rata luego de la
administración del toxico
hasta la muerte.
Colocar a la rata en
la tablay realizamos
la disección.
Colocación de las
vísceras (picadas lo más
finas posibles) en el
vaso.
Se arma el equipo de
destilación y comienza la
destilacion.
Se recoge el
destilado, para las
reacciones de
identificación.
Aqui esta la solucion
madre, para que los
grupos hagan las
reacciones de
reconocimiento.
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS.
REACCIÓN DE NESSLER :
Reacción Positivo No característico No hay
coloración en medio alcalino debia dar un precipitado blanco.
REACCION DE YODOFORMO:
Reacción Positivo ( + ) caracteristico Se
produce yodoformo reconocible por su olor particular y su color
transparente.
REACCION DE NITROPRUSIATO DE SODIO:
Reacción Positivo ( + ) caracteristico Hay
Coloración rojo, café o violeta.
Antes (color transparente)
Despues (Positivo
caracteristico )
Antes (color transparente)
Despues (Positivo
caracteristico )
Antes (color transparente) Despues (Positivo No
caracteristico )
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REACCIÓN DE FRITSH:
Reacción Positivo No caracteristico No hay
coloracion rojo.
REACCIÓN DE 2:4 DINITROFENILHIDRACINA:
7.1 Reacción con Etanol Positivo (+) caracteristico Hubo
coloracion amarillo.
7.2 Reacción Positivo (+) caracteristico Hubo color
anaranjado o rojo.
OBSERVACIONES.
En la realización de ésta práctica al haber administrado los 6 ml de
Cetona por vía peritoneal en el cobayo se pudo observar el deceso del
animal después de 18 minutos, durante su agonía presentó mareos,
Antes (color transparente) Despues (Positivo No
caracteristico )
Antes (color transparente) Despues (Positivo
caracteristico )
Despues (Positivo
caracteristico )
Antes (color transparente)
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perdida de la visión, convulsiones y seguidamente la muerte por la
intoxicación con cetona.
Es importante mencionar que a través de la aplicación de las reacciones
de identificación en medios biológicos, observamos la coloración de las
reacciones lo cual corroboro para determinar la presencia del (toxico) en
la rata wistar.
CONCLUSIONES.
En la realización de esta práctica de esta práctica se aprendió a
reconocer los efectos o síntomas provocados por la administración del
toxico (cetona) al organismo de un animal de experimentación, así como
también hemos identificado la presencia de este en la sangre del animal
mediante pruebas específicas para el reconocimiento de este compuesto
que puede originar a su vez coma o hasta incluso la muerte como se ha
demostrado en esta práctica.
RECOMENDACIONES.
Asegurarse que el equipo esté correctamente sellado, ya que de esta
forma logramos impedir el escape de los vapores en el proceso de la
destilación, evitando así una intoxicación.
Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, gorro,
zapatones, guantes, mascarilla.
Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.
Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida
Acatar las sugerencias y guías expuestas por el ayudante, para de esta
manera obtener muy buenos resultados en la realización de la práctica.
CUESTIONARIO.
1. ¿CUÁLES SON LAS PROPIEDADES FÍSICAS DE LAS CETONAS?
Los compuestos carbonílicos presentan puntos de ebullición más bajos que los
alcoholes de su mismo peso molecular. No hay grandes diferencias entre los
puntos de ebullición de aldehídos y cetonas de igual peso molecular. Los
compuestos carbonílicos de cadena corta son solubles en agua y a medida que
aumenta la longitud de la cadena disminuye la solubilidad.
2. ¿CÓMO ES LA OBTENCIÓN DE LA ACETONA?
Se obtiene como subproducto en la fermentación por medio de la cual se
obtiene alcohol butílico; por oxidación de isopropanol; por ruptura de
hidroperóxido de cumeno en la cual se obtiene, además, fenol; por destilación
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de acetato de calcio; por destilación destructiva de madera y a partir de
oxidación por cracking de propano.
3. ¿EN QUE SE UTILIZA LA CETONA?
Es utilizada como disolvente de grasas, aceites, ceras, hules, plásticos, lacas y
barnices. Se usa en la manufactura de algunos explosivos, rayón, películas
fotográficas, elaboración de removedores de pinturas y barnices, purificación
de parafinas, en la deshidratación y endurecimiento de tejidos, en la extracción
de algunos productos vegetales y animales y como materia prima en una gran
variedad de síntesis en química orgánica.
4. ¿CUÁLES SON LOS NIVELES DE TOXICIDAD DE LA CETONA?
LD50 (en ratas en forma oral): 5800 mg/Kg
LD50 (en piel de conejos): 20 mg/Kg
Niveles de irritación a ojos en humanos: 500 ppm
Niveles de irritación a piel en conejos: 395 mg, leve. 500 mg / 24 h, leve.
Niveles de irritación a ojos en conejos: 3.950 mg, severo. 100 mg/24h,
moderado.
5. ¿ APLICACIONES DE LA ACETONA?
La acetona se utiliza principalmente como disolvente y como compuesto
intermedio en la producción de sustancias químicas. Sus principales
aplicaciones son la producción de Metil Metacrilato, Acido Metacrílico y
Metacrilatos de mayor tamaño, Bisfenol A, Metil Isobutil Cetona, aplicaciones
médicas y farmacéuticas (compuesto intermedio y solvente para drogas,
vitaminas y cosméticos), como solvente para revestimientos,resinas, tintes,
barnices, lacas, adhesivos y en acetato de celulosa.
GLOSARIO.
CETONA . Es un compuesto orgánico caracterizado por poseer un
grupo funcional carbonilo unido a dos átomos de carbono, a diferencia
de un aldehído, en donde el grupo carbonilo se encuentra unido al
menos a un átomo de hidrógeno. Para nombrar a las cetonas por el
nombre común, se indican los nombres de los grupos alifáticos o
aromáticos unidos al carbono carbonilo, seguido de la palabra cetona.
TOXICOCINETICA . Como el conjunto de fenómenos que experimenta
el tóxico desde su entrada a un organismo hasta su eliminación.
TRANSAMINASAS. Las transaminasas son enzimas que cumplen una
función metabólica en el interior de las células. Estas enzimas se
encuentran presentes en el tejido de muchos órganos
(hígado, corazón, riñones, músculos.
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ERITEMATOSA. Es un término médico dermatológico para un
enrojecimiento de la piel condicionado por una inflamación debida a un
exceso de riego sanguíneo mediante vasodilatación.
NEUROTÓXICA. A toda sustancia capaz de alterar el funcionamiento
del sistema nervioso, lo cual aleja al individuo de su estado
homeostático y pone en riesgo su vida.
HIPOXIA. Es una familia de afecciones caracterizadas por una falta de
oxígeno en los tejidos del cuerpo. La hipoxia puede abarcar el cuerpo
general, o un área específica, tal como el cerebro.
BIBLIOGRAFÍA.
LORÍA J .BERMEO A. RAMÍREZ A. FERNÁNDEZ D. Archivos de
Medicina de Urgencia de México. Intoxicación por CETONA, reporte
de un caso. Mexico 2009 Vol. (Consultado el 19 deJunio del 2014).
Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/urgencia/aur-
2009/aur092f.pdf
Peterson, W.R. Formulación y Nomenclatura Química Orgánica (en
español) (6ta edición). Barcelona-España: Eunibar-editorial
universitaria de Barcelona. pp. 102–106.
Armendaris G, Gerardo (2007). Química orgánica 3 (en
español) (Tercera edición). Quito-Ecuador: Gruleer. pp. 140–141.
WEBGRAFÍA
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002680.htm
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002480.htm
http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/4acetona.pdf
AUTORIA.
Dr.- Carlos García MSc.
FIRMA DEL RESPONSABLE.
11. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 11
ANEXOS:
DATOS OBTENIDOS DE LA PRACTICA DE INTOXICACION POR
CETONAS , MEDIANTE LA SINTOMATOLOGIA DE LA RATA WISTAR Y
LAS REACCIONES DE RECONOCIMIENTO.
AQUÍ ESTA EL GRUPO # 7
TRABAANDO Y MOSTRANDO LA REACCION DE RECONOCIMEINTO
CON 2:4 DINITROFENILHIDRACINA: INTOXICACION POR CETONA.