Practica 5 cloroformo toxicologia

La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición.
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LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Alumno: Elington Antonio Vélez Párraga.
Curso: Quinto bioq.farm Paralelo: B
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc
Grupo N°4
Fecha de Elaboración de la Práctica: martes 24 de junio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: martes 01 de julio del 2014
PRÁCTICA N° 5
TÍTULO DE LA PRÁCTICA
INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO
Animal de Experimentación: Cobayo.
Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Determinar la presencia del toxico, en este caso el cloroformo en el animal de
experimentación, con exámenes químicos colorimétricos.
2. Monitorear al animal de experimentación para estudiar los principales efectos que este
sufre luego de la intoxicación.

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MATERIALES
1. Jeringuilla de 10cc
2. Campana
3. Cronómetro
4. Equipo de disección
5. Bisturí
6. Vasos de precipitación
7. Erlenmeyer
8. Lámpara de alcohol
9. Equipo de destilación.
10. Tubos de ensayo
11. Guantes, gorros, mascarilla
12. Pipetas volumétricas
13. Bata de laboratorio
14. Pinzas para tubo.
SUSTANCIAS
1. cloroformo
2. Alcohol 95° con nitato de plata.
3. B-naftol
4. Potasa alcohólica
5. Percloruro de hierro
6. Sosa
7. Cristal de yodo
8. R. de benedict
9. Piridina
10. Cloruro de piperazina
11. Agua destilada
12. Ácido tartárico
PROCEDIMIENTO
1. Preparar el mesón de trabajo y con ello materiales y sustancias, además de
implementos de bioseguridad.
2. Administrar 10 ml de cloroformo por vía intraperitoneal
3. Monitorear síntomas que se presentan y en qué tiempo hasta la muerte del cobayo.
4. Atamos el cobayo a una tabla de disección.
5. Procedemos rasurarle toda la parte abdominal donde se hará el corte.
6. Con la ayuda del bisturí procedemos la disección del cobayo, y observamos los
cambios (coloración, dureza, etc.) que presentan sus órganos.
7. Procedemos a colocar los fluidos y las vísceras afectadas por el toxico (picadas lo
más finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso de precipitación).
8. A las vísceras ya picadas le añadimos 25ml de solución de ácido tartárico.
9. Esto lo llevamos a un balón.
10. Procedemos a destilar.
11. El residuo de la destilación (muestra) que obtuvimos por arrastre de vapor lo
recibimos en solución de Hidróxido de Sodio 0.1N.
12. Una vez realizado el paso anterior, se practican las diferentes reacciones
colorimétricas cualitativas.

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Reacciones:
1. A la llama.- En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo
con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la
mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico
formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de
plata.
2. Reacción de Dumas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos
mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio.
CHCl3 + 4 KOH  KCl + HCO2K + H 2 O
Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro
de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en caliente.
A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de
cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.
3.- Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y
solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas
gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.
Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo más o menos oscuro; con resorcinol
la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.
4.- Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2 con una
capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos
por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia
coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos
pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya
absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.
5.-Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y
se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está
presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el
alcaloide.
6.-Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de
Benedict, y de acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse una gama de colores
que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.

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GRAFICOS
1. Preparamos los
10ml que vamos
a inyectar
2. Inyectamos al
cobayo vía
intraperitoneal
4. se separa las vísceras afectadas y
fluidos
8. Se monta el equipo de destilación
y se destila.
3. se realiza la
disección al
cobayo
5. se añaden 25ml de
solución de ácido
tartarico
6. se transvasa a un
balón para posterior
destilación.
7. Se añaden las 50
perlas de vidrio

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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN EL DESTILADO
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO.
9. Realizando las
reacciones de
reconocimiento en el
destilado.
Patrón: destilado incoloro

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Reconocimiento en Medios Biológicos
REACCION DE DUMAS
REACCION DE LUSTGARTES
- (FeCl3)
Resultado:
Reacción positiva
característica.
Coloración roja
REACCIÓN CON AgNO3
Resultado: Positivo no
característico
Formación de precipitado,
pero no de llama con borde
verde
- (AgNO3)
Resultado: Reacción
positiva característica.
Precipitado se
disuelve
se forma precipitado
de cloruro de plata, al
agregar AgNO3
con amoniaco se
disuelve el precipitado.
- B-naftol
Resultado:
Reacción positiva
no característica.
Coloración roja
- resorcinol
Resultado:
Reacción positiva
característica.
Coloración roja
violaceo
- timol
Resultado:
Reacción positiva
característica.
Coloración
amarilla

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OBSERVACIONES
Según mi punto de vista de la práctica, el cloroformo resulto ser uno de los tóxicos que
demoran más en causar la muerte del animal de experimentación, pero debemos señalar que
inmediatamente luego de administrar dicho toxico al cobayo este reacciono sedándose, es
decir se paralizo totalmente, sabiendo que el cloroformo es una sustancia que se usaba mucho
como sedante, pero que ahora por el conocimiento de su toxicidad, se restringe su uso.
CONCLUSIONES
Se concluye manifestando que se logró cumplir los objetivos de esta práctica, es decir, se
determinó que el cloroformo que estaba presente en las vísceras del animal, y que había
causado su muerte, además de diferentes efector letales como la cianosis de sus órganos,
hipoxia, micción abundante lagrimeo, etc. Todo esto mediante ensayos químicos
colorimétricos y monitoreo de respuestas del animal de estudio ante la intoxicación con el
alcohol en cuestión.
REACCIÓN ROSEBOOM.
resultado: Positivo no
característico
Coloración rojiza
REACCIÓN DE BENEDICT
Resultado: negativa
Coloración roja nula.

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RECOMENDACIONES
- El cloroformo es uno de los tóxicos de tipo volátil por lo que para esta práctica se
debe usar implementación que cubra las vías aéreas, y si es posibles los ojos, además
de siempre mantener la piel aislada de este toxico ya que se puede absorber vía tópica.
- Tener cuidado con las sustancias de uso restringido o peligroso, para evitar
accidentes.
- Desechar el material usado, y los restos del cobayo en un lugar seguro que no valla a
ocasionar problemas a la comunidad.
CUESTIONARIO
1) CUALES SON LAS PROPIEDADES QUIMICAS DEL CLOROFORMO?
PROPIEDADES QUIMICAS:
Los productos de descomposición del cloroformo son: fosgeno, cloruro de hidrógeno, cloro
y óxidos de carbono y cloro. Todos ellos corrosivos y muy tóxicos.
El cloroformo reacciona violentamente con:
-Acetona en medios muy básicos.
-Fluor, tetróxido de dinitrógeno, metales como aluminio, magnesio, sodio, litio y potasio,
sodio en metanol, metóxido de sodio, nitrometano, isopropilfosfina y derivados alquilados
de aluminio.
Es oxidado por reactivos como ácido crómico, formando fosgeno y cloro. Se descompone a
temperatura ambiente por acción de la luz del sol en ausencia de aire y en la oscuridad en
presencia de este último, siendo uno de los productos de esta descomposición el fosgeno, el
cual es muy tóxico.

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2) DETALLE LOS USOS DEL CLOROFORMO
Fue utilizado como un anestésico temprano en cirugía y odontología y por esta razón las
personas que trabajan con el material deben evitar la inhalación de sus vapores.
Hoy en día el cloroformo tiene un importante número de usos tales como:
- En química se utiliza en la separación orgánica.
- En la fabricación de plásticos que se utiliza en el proceso de unión.
- Se utiliza en síntesis orgánica.
- Se utiliza como un precursor en la fabricación de teflón (antiadherente).
- En la Primera Guerra Mundial el cloroformo fue usado como arma química.
- El cloroformo es clasificado como nocivo en caso de ingestión y como un irritante
para la piel. La exposición por inhalación puede causar graves daños a la salud.
3) QUE ACCIONES DE EMERGENCIA TOMARIA CON EL CLOROFORMO?
Primeros auxilios:
Una exposición aguda al cloroformo requiere descontaminación y soporte de vida básico para
la víctima. El personal de emergencia debe usar ropa de protección adecuada, dependiendo
del grado de contaminación. Toda la ropa y equipo contaminado debe almacenarse en
recipientes especiales, para darles el tratamiento de descontaminación adecuado, más tarde.
De manera general, la víctima debe moverse a una zona ventilada. Evaluar signos vitales
como: pulso y velocidad de respiración. Si no hay pulso, proporcionar rehabilitación
cardiopulmonar. Si no respira, proporcionar respiración artificial. Si la respiración es
dificultosa, proporcionar oxígeno. No existe un antídoto específico y se sabe que no debe
darse adrenalina a las personas que sufren envenenamiento por cloroformo.
Ojos y Piel: Quitar la ropa contaminada, y lavar según sea el caso, ojos y/o piel con agua
corriente en gran cantidad. Los ojos pueden lavarse también con disolución salina neutra
asegurándose de abrir bien los párpados.
Ingestión: Mantener a la víctima en reposo y caliente. No inducir el vómito. Puede
suministrarse carbón activado, si la víctima está consciente. Usar de 15 a 30 g, para niños, o

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de 50 a 100 g, para adultos con 1/2 a 1 taza de agua. Provocar excreción con un cartártico
salino o sorbitol para víctimas concientes, los niños requieren de 15 a 30 g y los adultos de
50 a 100 g.
EN TODOS LOS CASOS DE EXPOSICION, EL PACIENTE DEBE SER
TRANSPORTADO AL HOSPITAL TAN PRONTO COMO SEA POSIBLE.
Control de fuego:
Use equipo de respiración autónoma y ropa de protección adecuada, dependiendo de la
magnitud del incendio. Recordar, que a pesar de que el compuesto es no inflamable, los
productos de descomposición por calentamiento (entre ellos fosgeno) son muy peligrosos.
Mover los recipientes fuera del área de fuego cuando sea posible. Atacar el fuego desde una
distancia segura. El agua utilizada para controlar el fuego no debe tirarse al drenaje por lo
que, si es necesario, debe construirse un dique para contenerla y tratarla posteriormente.
Para incendios pequeños, pueden utilizarse extinguidores de polvo químico seco, dióxido de
carbono, agua, neblina o espuma.
Fugas y derrames:
Utilizar bata, lentes de seguridad y guantes o el equipo de seguridad que sea necesario,
dependiendo de la magnitud del siniestro.
Mantenga el material alejado de fuentes de agua y drenajes. Construir diques para almacenar
el líquido, en caso necesario. Para ello puede utilizarse tierra, sacos de arena o espuma de
poliuretano. El líquido derramado puede absorberse con cemento y para inmovilizar el
derrame, se utilizan agentes gelantes universales. Para almacenar el agua de desecho, utilizar
recipientes especializados o excavar un foso y absorber con sacos de arena o succionadores.
Para el agua contaminada puede utilizarse carbón activado, en regiones de 10 ppm o más,
aplicarlo, en una proporción 10:1 carbón activado/derrame.
Desechos:
En pequeñas cantidades puede dejarse evaporar en una campana extractora. En caso de
grandes cantidades, debe mezclarse con combustible, como queroseno, e incinerarse en
equipo especializado para evitar la generación de fosgeno.
ALMACENAMIENTO
Los recipientes que contienen este producto deben ser almacenados en lugares alejados de la
luz directa del sol, ya que se descompone lentamente a productos como el fosgeno

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WEBGRAFÍA
- PROPIEDADES QUIMICAS DEL CLOROFORMO (en línea)
Disponible en: http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/7cloroformo.pdf
- USOS DEL CLOROFORMO (en línea)
Disponible en: http://cloroformo.org/usos/
- ACCIONES DE EMERGENCIA (en línea)
Disponible en: http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/7cloroformo.pdf

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ANEXO:
Fig.1. DATOS OBTENIDOS CON EL MONITOREO DEL COBAYO Y LOS ANALISIS
COLORIMETRICOS.
GLOSARIO:
- FOSGENO: (COCl2), es un importante componente químico industrial utilizado para
hacer plásticos y pesticidas. A temperatura ambiente (70 °F / 21 °C), el fosgeno es
un gas venenoso. Si es enfriado y presurizado, el gas de fosgeno puede ser convertido
en líquido, de forma que pueda ser transportado y almacenado. Cuando se libera
fosgeno líquido, éste se transforma rápidamente en gas que permanece cerca del suelo
y se propaga con rapidez (es más denso que el aire y por esa razón se expande hacia
áreas más bajas). Al fosgeno también se le conoce por su denominación militar “CG”
- ALQUILO: es un sustituyente, formado por la separación de un átomo de hidrógeno
de un hidrocarburo saturado o alcano, 1 para que así el alcano pueda enlazarse a otro
átomo o grupo de átomos.

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- POLÍMEROS: son macromoléculas (generalmente orgánicas) formadas por la unión
de moléculas más pequeñas llamadas monómeros.
El almidón, la celulosa, la seda y el ADN son ejemplos de polímeros naturales, entre
los más comunes de estos y entre los polímeros sintéticos encontramos el nailon, el
polietileno y la baquelita.
- CATÁRTICA: es una sustancia que acelera la defecación. Esto es en contraste a
laxante: sustancia que facilita defecar, usualmente por ablandar las heces. Es posible
que una sustancia tenga ambos roles de laxante y de catártico. Hay agentes como
semillas de Plantago ovata que incrementan el volumen de las heces.
Catárticos como el sorbitol se usan en ocasiones como tratamiento a
envenenamiento.
- POLIURETANO :(PU) es un polímero que se obtiene mediante condensación de
bases hidroxílicas combinadas con isocianatos. Los poliuretanos se clasifican en dos
grupos, definidos por su estructura química, diferenciados por su comportamiento
frente a la temperatura. De esta manera pueden ser de dos tipos: Poliuretanos
termoestables o poliuretanos termoplásticos (según si degradan antes de fluir o si
fluyen antes de degradarse, respectivamente).1 Los poliuretanos termoestables más
habituales son espumas, muy utilizadas como aislantes térmicos y como espumas
resistentes.
INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO
Generalidades
El cloroformo es el triclorometano (CHCl3). Inicialmente se empleó como agente anestésico,
pero poco después se abandonó este uso por s gran toxicidad hepática y renal.es un líquido
incoloro y no inflamable, de olor y sabor dulzón, extremadamente volátil y muy liposoluble.
Fuentes de exposición
Está disponible como disolvente en laboratorios y en la industria química.se ha prohibido
su uso como sustancia aromática en pastas de dientes y otros productos como resultado de su
efecto carcinogénico en animales después de exposiciones crónicas. La intoxicación aguda y
crónica puede ocurrir por exposición a sus vapores.
Toxicocinetica y mecanismo de acción
El cloroformo es un anestésico potente y origina una profunda depresión del SNC. Entra en
el organismo por vía respiratoria, digestivo dérmico. En humanos puede producir la muerte
con la ingestión oral de tan solo 10 ml .exposiciones prolongadas o repetidas a los vapores
pueden producir hepatotoxicidad, severa que se característica por necrosis centrolobular.

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Asimismo se ha descrito degeneración grasa del hígado, el riñón el corazón. El mecanismo
de lesión parece ser la oxidación a nivel hepático del cloroformo a fosgeno a través del
sistema microsomal. También se forma fosgeno cuando los vapores de cloroformo se
exponen al calor de una llama. El fosgeno inhalado se convierte en ácido hidroclorhídrico y
dióxido de carbono cuando reacciona con el agua en el alvéolo; y el ácido produce edema
pulmonar.
Cuadro clínico
La severidad de los síntomas por exposición aguda, vía respiratoria, digestivo, dérmica, está
en relación directa con la dosis absorbida. El cloroformo, cuando se inhala, produce todos
los niveles de anestesia, teniendo un margen de seguridad muy estrecho, debido a que causa
fallo cardiaco y respiratorio de forma casi simultánea. No puede detectarse por el olfato hasta
que su concentración excede de 400 ppm. Una exposición durante 10 minutos a
concentraciones de 1000 ppm produce síntomas generales como náuseas, vómitos, vértigo
cefaleas .exposiciones a una concentración de 1000 a 4000 ppm origina desorientación y
concentraciones de 10000 a 20000 ppm dan lugar a pérdida de conciencia, pudiendo originar
la muerte.
Dependiendo de la dosis absorbida va a producir alteraciones más o menos importantes de la
función hepática, renal y cardiaca.
El cloroformo, por su acusado poder como disolvente de grasas, en contacto con la piel da
lugar a dermatitis local, y en los ojos produce irritación corneal.
Reacciones en medio biológico
El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio acido
tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificación.
1. En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras
tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se
observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico formado
reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata.
2. Reacción de Dumas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos
mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio.
CHCl3 + 4 KOH  KCl + HCO2K + H 2 O
Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro
de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en caliente.

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A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de
cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.
3.- Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y
solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas
gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.
Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo más o menos oscuro; con resorcinol
la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.
4.- Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2 con una
capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos
por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia
coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos
pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya
absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.
5.-Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y
se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está
presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el
alcaloide.
6.-Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de
Benedict, y de acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse una gama de colores
que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.

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