MATERIAL TERCER EXAMEN<br />FECHA DE REALIZACIÓN<br />28 DE MAYO DEL 2010<br />
BarbaraMcClintock<br />1902-1992<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
ELEMENTOS GENÉTICOS TRANSPONIBLE<br />Los elementos genéticos transponibles son segmentos de DNA que tienen la capacidad d...
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />WALKING CROMOSE<br />
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Propiedades de los Elementos Genéticos Transponibles<br />Movimiento al azar- Los elementos genéticos transponibles pueden...
Incapaz de auto-replicarse – Los elementos genéticos transponibles no existen de manera autónoma (a excepción – algunos ge...
Transposición mediada por recombinación sitio-específica – La transposición requiere poca o ninguna homología entre la loc...
La recombinación que no requiere de homología entre las moléculas recombinantes se denomina de sitio-específico, ilegítima...
Transposición acompañada por duplicación – En muchas instancias la transposición del elemento genético transponible result...
Secuencias de Inserción (IS)<br />Las secuencias de inserción son elementos genéticos transponibles que llevan genes desco...
En medio de las secuencias terminales repetidas hay genes involucrados en la transposición y secuencias que pueden control...
Importancia<br />Mutación – La introducción de una secuencia de inserción en medio de un gene bacteriano resultará en la i...
Inserción de plásmidos en los cromosomas – Los sitios en los cuales los plásmidos se insertan en el cromosoma bacteriano s...
Microbiología cliníca<br />veterinaria<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Variación de Fase – Los antígenos flagelares son de los principales  antígenos ante los cuales se dirige la respuesta inmu...
APLICACIONES <br />EN <br />MEDICINA VETERINARIA<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Elementos IS de procariotas<br />El elemento más simple (descubierto inicialmente en el operón gal de E. coli) 800-1350 pb...
Integración del elemento IS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Integración del elemento IS<br /><ul><li>Transposición replicativa
Transposicion conservativa (cortar y pegar) </li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Transposones de procariotas<br />Transposón compuesto<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Transposones de procariotas<br />Genes resistencia en plásmidos<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010...
Transposones de procariotas<br />Transposón simple<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Elementos transponibles en  eucariotas<br />Tipos<br /><ul><li>Clase I: replicación vía RNA intermediario por la retrotran...
LTR
Sin LTR
Clase II: replicación vía enzima transposasa por un proceso de corte y empalme</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonza...
Elementos transponibles en  eucariotas: Clase II<br />Clase II<br />Clase II: replicación por enzima transposasa, proceso ...
Elementos transponibles en  eucariotas: Clase I<br />Genoma retrovirus<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOM...
gagpol (retrotranscriptasa)<br />LTR<br />LTR<br />Elementos transponibles en  eucariotas: Clase I<br />Retrotrasposón<br ...
Elementos transponibles en  eucariotas: Clase I<br />Retrotrasposición <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIO...
Elementos transponibles en  eucariotas<br />Retrotrasposón<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
El genoma dinámico: <br />los elementos transponibles son el principal componente de los genomas grandes de eucariotas<br ...
Elementos Efectos fenotípicos y genotípicos de la  transposición<br />Disgénesis híbrida en Drosophila<br />23/05/2010<br ...
Genes de resistencia a Antibióticos en plásmidos<br />Secuencias de inserción<br />Islas de patogenicidad<br />Genes de re...
Elementos móviles<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
E.coli O157:H7 Ejemplo de una nueva “casi especie”<br />Contiene 20 potenciales genes en elementos móviles adquiridos medi...
Islas de patogenicidad (PAI)<br /><ul><li>Elementosgenéticosmóviles (>10Kb) que se integran en el genoma o se mantienen en...
Presentansecuenciasrepetitivasflanqueantes o diferente uso de G+C y de codones
Contienengenescodificantes para diferentes funciones: resistencia a antibióticos, adhesinas, toxinas y otros factores de v...
Codifican por factores relacionados con la movilidadgenética: transposasas, integrasas, genesbacteriófagos y orígenes de r...
Contribuyen a introducircambiosrápidos en el potencial de virulencia</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BI...
Formación de las PAI<br />Adquisición del gen o genes de virulenciamediantealgúnmecanismo de HGT<br />Integración, probabl...
Isla Cag de Helicobacter pylori<br /><ul><li>Helicobacterpilory: patógenogástricocausante de gastritis, úlcera y cáncer
Cag:
Transferida mediante HGT
Diferentecontenido en G+C
27 ORF
CagA única proteína efectora</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Isla Cag de Helicobacter pylori<br /><ul><li>CagPAI: Forma un sistema de secreción de  tipo IV que:
Induce la expresión de citocinasproinflamatorias como IL-8, que contribuye a la inflamacióndel estómago
Cag F:  “chaperonlikeprotein”
17 genes son totalmentenecesarios para la translocación de CagA
14 genesestimulan la síntesis de IL-8 por parte de la célulahuesped</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIO...
La Transcripción<br />El ADN no sale del núcleo<br />Cuando hay que fabricar un polipéptido se crea una copia en forma de ...
TIPS, COSAS QUE DEBEN SABER X CULTURA EN BIOMOL (TRANSCRIPCIÓN  DEL  ADN)<br /><ul><li> Con la excepción de los genomas de...
La transcripción  es la coversión  de la información genetica de un segmento de ADN en una cadena de RNA con una secuencia...
Existen tres tipos de RNA
RNA mensajero (mRNA)= es el portador de las secuencias que codifican la secuencia de aminoácidos de uno o más polipéptidos...
RNA de transferencia (tRNA)=  es un adaptador que lee la información codificada en el mRNA y transfiere los aminoácidos ad...
RNA ribosamal (rRNA)=  Se asocia con  proteínas formando la intricada maquinaria para la sintesis de proteínas, el ribosom...
<ul><li> la replicacion y la transcripcion difieren en un aspecto importante.
 replicación:  en la replicación se copia el cromosoma entero dando ADN hijo que es identico al ADN parental o patron.</li...
 Las secuencias reguladoras específicas indican el principio y el fin  de los segmentos de ADN que se han de transcribir, ...
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Señal de poliadenilación<br /> (AAUAAA)<br />Codón de terminación de la traducción<br /> (AUG, UUA, UAG )<br />Cola no <br...
Modelo del Operón Lactosa<br />I               P       0         Z          Y           A <br />polimerasa de ARN         ...
SINTESIS DE PROTEINAS:<br />TRANSCRIPCIÓN<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
A<br />U<br />G<br />C<br />U<br />U<br />G<br />G<br />C<br />A<br />A<br />C<br />G<br />U<br />G<br />Transcripción:<br...
A<br />U<br />G<br />C<br />U<br />U<br />G<br />G<br />C<br />A<br />A<br />C<br />G<br />U<br />G<br />m-GTP<br />Transc...
A<br />U<br />G<br />C<br />U<br />C<br />G<br />U<br />G<br />U<br />A<br />G<br />A<br />A<br />A<br />A<br />A<br />m-G...
ARNm<br />ARNm<br />precursor<br />maduro<br />4.  Maduración (cont.): El ARNm precursor contiene tanto exones como intron...
Maduración del ARNm  (Visión de conjunto).<br />Región codificadora del gen<br />ADN<br />   Promotor                   E1...
SINTESIS DE PROTEINAS:<br />TRADUCCIÓN<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Pasos de la traducción <br />1.     “Activación” de los ARNt<br />Formación de los aminoacyl-ARNt <br />Iniciación del pro...
Iniciación: La subunidad pequeña del ribosoma se une a la región líder del ARNm y el ARNm se desplaza hasta llegar al codó...
G U U<br />Gln<br />Elongación I: A continuación se une la subunidad mayor a la menor completándose el ribosoma. El comple...
Elongación II: Se forma el enlace peptídico entre el grupo carboxilo de la  metionina (Met) y el grupo amino del segundo a...
Elongación III: El ARNt del primer aminoácido, la metionina (Met) se libera.<br />  P             A<br />ARNm<br />3’<br /...
Elongación IV: El ARNm se traslada, de tal manera que el complejo ARNt-Gln-Met queda en la región peptidil del ribosoma, q...
A C G<br />Cys<br />Elongación V: Entrada en la posición correspondiente a la región aminoacil (A) del complejo ARNt-Cys, ...
Elongación VI: Unión del péptido Met-Gln (Metionina-Glutamina)  a la cisteína (Cys).<br />  P             A<br />ARNm<br /...
G U U<br />Elongación VII: Se libera el ARNt correspondiente al segundo aminoácido, la glutamina (Glu).<br />  P          ...
Elongación VIII: El ARNm corre hacia la otra posición, quedando el complejo ARNt3-Cys-Glu-Met en la región peptidil del ri...
Elongación IX: Entrada del complejo ARNt-Leu correspondiente al 4º aminoácido, la leucina.<br />  P             A<br />ARN...
Elongación X: Este se sitúa en la región aminoacil (A).<br />  P             A<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<...
A C G<br />Elongación XI: Unión del péptido Met-Gln-Cys con el 4º aminoácido, la leucina (Leu). Liberación del ARNt de la ...
Elongación XII: Entrada del ARNt de la leucina, el 5º aminoácido, la arginina (ARNt-Arg).<br />  P             A<br />ARNm...
A A U<br />Elongación XIII:Unión del péptido Met-Gln-Cys-Leu con el 5º aminoácido, la arginina (Arg). Liberación del ARNt ...
G C U<br />A A U<br />Finalización I: Liberación del péptido o proteína. Las subunidades del ribosoma se disocian y se sep...
A<br />A<br />A<br />A<br />A<br />A<br />U<br />G<br /> C<br />U<br />G<br /> C<br />U<br />U<br /> C<br />G<br />U<br />...
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />HABLADORES <br />EN CLASE<br />DEAL!!!<br />
ANTIBIÓTICOS QUE      INTERFIEREN EN LA BIOSÍNTESIS DE PROTEINAS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/201...
1.      inhibición del reconocimiento de un aminoacil-ARNt (aa-ARNt) hacia el sitio A del ribosoma;<br />2.      introducc...
INHIBIDORES DE LA FASE INICIAL DE LA ELONGACIÓN: TETRACICLINAS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<...
Mecanismo de acción: provocan que la unión del aa-ARNt al sitio A del ribosoma sea inestable y esté distorsionada, con lo ...
INDUCTORES DE ERRORES EN LA LECTURA DEL ARNm<br />AMINOGLUCÓSIDOS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/20...
Mecanismo de acción: se unen a los polirribosomas que están traduciendo el ARNm, provocando errores en la lectura del ARNm...
INHIBIDORES DE LA TRANSLOCACIÓN: MACRÓLIDOS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Mecanismo de acción: se une a la proteína L15, que forma parte del centro peptidil-transferasa de la subunidad grande del ...
INHIBIDORES DE LA TRANSCRIPCIÓN DE LAS EUBACTERIAS: RIFAMICINAS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010...
mecanismo de acción estriba en la inhibición del inicio de la transcripción, uniéndose de modo no covalente a la subunidad...
HIPOTESIS DEL BALANCEO F. CRICK<br />JUSTIFICACIÓN<br />Los tRNA reconocen codones mediante apareamiento de bases del codó...
Los dos RNA se aparean antiparalelamente. La primera base del codón se encuentra en el extremo 5' pues el mRNA va en direc...
Crick observó que la tercera base de casi todos los codones se aparea de manera bastante suelta con su correspondiente, es...
La tercera base es la del balanceo y permite la rápida disociación del tRNA de su codón durante la síntesis.<br />23/05/20...
Wobble hypothesis<br /><ul><li>Wobble hypothesis – el tercernucleótidode un</li></ul>anticodon de ARNtpuedeformarpuentes d...
Un amino ácido es unido al ARNt antes de<br />      ser incorporado en un polipéptido <br />Crick !<br /><ul><li> Crick pr...
Pensamiento de Crick<br /><ul><li>Los “adaptadores” de Crick resultaron ser moléculas de</li></ul>  ARNt<br /><ul><li> Cad...
 El complejo resultante llamado aminoacyl-ARNt se une a la secuencia</li></ul>  que codifica para alinear los amino ácidos...
39 end<br />Amino acid<br />accepting end<br />Loop 3<br />59<br />39<br />59 end<br />Amino<br />acid<br />Hydrogen bonds...
39 end<br />Amino acid<br />accepting end<br />Loop 3<br />59<br />39<br />59 end<br />Amino<br />acid<br />Hydrogen bonds...
ARNt (tRNA)<br />b. Son reconocidas por una “aminoacyl-ARNt synthetases”<br />que añade el amino ácido correcto a la molec...
39 end<br />Buena distancia<br />para mantener el <br />anticodon separado<br />del amino ácido <br />Amino acid<br />acce...
CONTROL DE LA EXPRESIÓN<br />GÉNICA<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
MODELO OPERÓN<br />Jacob, Monod y colaboradores analizaron el sistema de la lactosa enE. coli, de manera que los resultado...
Se denomina episoma a un plásmido incorporado al cromosoma bacteriano. Los plásmidos se replican en manera similar al crom...
El modelo operón de la regulación de los genes procariotas fue propuesto en 1961 por Francois Jacob y Jacques Monod<br />2...
MODELO <br /> OPERON<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Un Operón es grupo de genes estructurales cuya expresión está regulada por  elementos de control o genes (promotor y opera...
El promotores la parte del ADN en donde se pega la ARN polimerasa antes de abrir el segmento de ADN a ser transcripto<br /...
Un operón consiste en:   <br />un operador: controla el acceso de la ARN polimerasa al promotor<br />un promotor: donde la...
El genregulador codifica para una proteína que se pega al operador, obstruyendo al promotor (y por lo tanto a la transcrip...
Los operones son<br /><ul><li>inducibles o
reprimibles,</li></ul> de acuerdo al mecanismo de control<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
OPERONES INDUCIBLES<br />El Operón lactosa, que abreviadamente se denomina Operón lac, es un sistema inducible.<br />La pr...
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Cuando hay lactosa en el medio (intestinos de un mamífero durante la lactancia), ésta  funciona como inductor, se une al r...
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Cuando no hay lactosa en el medio, la proteína represora se encuentra unida al operador impidiendo la transcripción de los...
Operón lactosa en ausencia de lactosa<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
En ausencia del inductor (la lactosa), la proteína represora producto del gen i se encuentra unida a la región operadora e...
Operones reprimibles<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Cuando un producto del metabolismo, el triptofano por ejemplo, está en cantidades suficientes la bacteria puede dejar de f...
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Operón triptófano: en presencia de triptófano<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Operón triptófano: en ausencia de triptófano<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Tanto la represión como la inducción son ejemplos de control negativo, dado que la proteína represora detiene (" turn off ...
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
REGULACIÓN EXPRESIÓN GÉNICA<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Existen algunos procesos metabólicos que son necesarios para el funcionamiento normal de casi todas las células, de manera...
Los genes constitutivos codifican para sistemas enzimáticos constitutivos, que se necesitan siempre para la actividad norm...
Frente a los genes constitutivos, nos encontramos con los genes que se expresan solamente en determinadas situaciones y qu...
<ul><li>El promotor (P): se trata de un elemento de control que es una región del ADN con una secuencia que es reconocida ...
El operador (O): se trata de otro elemento de control que es una región del ADN con una secuencia que es reconocida por la...
El gen regulador (i):secuencia de ADN que codifica para la proteína reguladora que reconoce la secuencia de la región del ...
                                                                                              <br />23/05/2010<br />Dr. Gi...
Operón lactosa: ARNm multigénico o policistrónico<br />Operón lactosa: ARNm multigénico o policistrónico<br />23/05/2010<b...
EL OPERÓN TRIPTÓFANO<br />El operón triptófano (operón trp) es un sistema de tipo represible, ya que el aminoácido triptóf...
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
En ausencia de triptófano, o cuando hay muy poco, la proteína reguladora producto del gen trpR no es capaz de unirse al op...
Operón triptófano: en ausencia de triptófano<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
En presencia de triptófano, el triptófano se une a la proteína reguladora o represora cambiando su conformación, de manera...
Operón triptófano: en presencia de triptófano<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Categoría de células en función de su capacidad proliferativa<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<b...
<ul><li>Células con especialización estructural extrema, como las células nerviosas o eritrocitos que han perdido la capac...
Células que normalmente no se dividen, pero que pueden iniciar la síntesis de ADN cuando se enfrentan a un estímulo apropi...
Células que normalmente poseen un nivel relativamente alto de actividad mitótica, las células madres (o stem cell)</li></u...
CELULAS MADRE (Stem cell)<br />Propiedades: <br /><ul><li>No está totalmente diferenciada
Se puede dividir sin límites
Cuando se divide, cada célula hija puede permanecer como célula madre o puede iniciar una vía que conduce irreversiblement...
EMBRIONES</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
The control of gene expression<br />Each cell in the human contains all the genetic material for the growth and developmen...
Operons<br />An operon is a group of genes that are transcribed at the same time. <br />They usually control an important ...
The lac Operon<br /><ul><li>The lac operon consists of three genes each involved in processing the sugar lactose
One of them is the gene for the enzyme β-galactosidase
This enzyme hydrolyses lactose into glucose and galactose</li></ul>© 2007 Paul Billiet ODWS<br />23/05/2010<br />Dr. Giova...
Adapting to the environment<br />E. coli can use either glucose, which is a monosaccharide, or lactose, which is a disacch...
23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
LA IGNORANCIA HUMANA NO PERMANECE DETRAS DE LA CIENCIA, CRECE TAN RAPIDAMENTE COMO ELLA<br />Stanislaw Jeizy Lec<br />    ...
TECNOLOGIA DE DNA RECOMBINANTE<br />Giovanni Gonzalez DMV<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
Que es ?<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
La manipulación genética de organismos con un propósito predeterminado.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIO...
Que busca la Ingenería Genética?<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
La ingeniería genética busca el conocimiento de cada uno de los genes que conforman el mapa. La disciplina utiliza diferen...
Cuales son las herramientas que posee el hombre para lograr esto?<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/20...
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Material tercer examen

  1. 1. MATERIAL TERCER EXAMEN<br />FECHA DE REALIZACIÓN<br />28 DE MAYO DEL 2010<br />
  2. 2. BarbaraMcClintock<br />1902-1992<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  3. 3. ELEMENTOS GENÉTICOS TRANSPONIBLE<br />Los elementos genéticos transponibles son segmentos de DNA que tienen la capacidad de moverse desde una localización hasta otra (ej. genes saltarines).<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  4. 4. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />WALKING CROMOSE<br />
  5. 5. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  6. 6. Propiedades de los Elementos Genéticos Transponibles<br />Movimiento al azar- Los elementos genéticos transponibles pueden moverse desde cualquier molécula de DNA a cualquier otra molécula de DNA o aún a otro lugar dentro de la misma molécula. El movimiento no es  totalmente al azar; existen sitios preferentes en una molécula de DNA en la cual se insertará el elemento genético transponible.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  7. 7. Incapaz de auto-replicarse – Los elementos genéticos transponibles no existen de manera autónoma (a excepción – algunos genes transponibles en los fagos) y por tanto, para ser replicados deben ser parte de algún otro replicón<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  8. 8. Transposición mediada por recombinación sitio-específica – La transposición requiere poca o ninguna homología entre la localización actual y el nuevo sitio. El evento de transposición está mediado por una transposasa codificada por el elemento genético transponible. <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  9. 9. La recombinación que no requiere de homología entre las moléculas recombinantes se denomina de sitio-específico, ilegítima o bien recombinación no-homóloga<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  10. 10. Transposición acompañada por duplicación – En muchas instancias la transposición del elemento genético transponible resulta en la remoción del elemento de su sitio original y su inserción en un nuevo sitio. Sin embargo, en algunos casos el evento de transposición se acompaña de una duplicación del elemento genético transponible. Una copia permanece en el sitio original y la otra se transpone en el nuevo sitio.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  11. 11. Secuencias de Inserción (IS)<br />Las secuencias de inserción son elementos genéticos transponibles que llevan genes desconocidos, con excepción de aquellos que se requieren para la transposición.<br />Nomenclatura – A las secuencias de inserción (insertionsequences) se les da la designación IS seguida por un número (ej: IS1)<br />Las secuencias de inserción son pequeños tramos de DNA que a sus extremos tienen secuencias repetidas que están involucradas en la transposición. <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  12. 12. En medio de las secuencias terminales repetidas hay genes involucrados en la transposición y secuencias que pueden controlar la expresión de los genes, pero no presentan otros genes que no sean esenciales.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  13. 13. Importancia<br />Mutación – La introducción de una secuencia de inserción en medio de un gene bacteriano resultará en la inactivación de tal gene.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  14. 14. Inserción de plásmidos en los cromosomas – Los sitios en los cuales los plásmidos se insertan en el cromosoma bacteriano se localizan ya sea en las propias secuencias de inserción o cerca de ellas<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  15. 15. Microbiología cliníca<br />veterinaria<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  16. 16. Variación de Fase – Los antígenos flagelares son de los principales  antígenos ante los cuales se dirige la respuesta inmune, en nuestro intento de luchar contra la infección bacteriana. <br />En Salmonella existen genes que codifican para dos genes flagelares antigenicamente diferentes. La  expresión de estos genes está regulada por secuencias de inserción. En una orientación, uno de los genes está activo mientras que en la otra orientación el otro gene flagelar estará inactivo. Como resultado Salmonella puede cambiar sus flagelos en respuesta al ataque del sistema inmune. La variación de fase en los antígenos flagelares de Salmonella no es única. También se ha visto que ocurre con otros antígenos de superficie. Además el mecanismo de la variación de fase puede ser diferente en diversas especies de bacterias (ej. transformación en Neisseria).<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  17. 17. APLICACIONES <br />EN <br />MEDICINA VETERINARIA<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  18. 18. Elementos IS de procariotas<br />El elemento más simple (descubierto inicialmente en el operón gal de E. coli) 800-1350 pb <br />Inverted terminal repeats (IRs) 9–41 pb<br />Peter J. Russell, iGenetics: Copyright © Pearson Education, Inc., publishing as Benjamin Cummings.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  19. 19. Integración del elemento IS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  20. 20. Integración del elemento IS<br /><ul><li>Transposición replicativa
  21. 21. Transposicion conservativa (cortar y pegar) </li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  22. 22. Transposones de procariotas<br />Transposón compuesto<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  23. 23. Transposones de procariotas<br />Genes resistencia en plásmidos<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  24. 24. Transposones de procariotas<br />Transposón simple<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  25. 25. Elementos transponibles en eucariotas<br />Tipos<br /><ul><li>Clase I: replicación vía RNA intermediario por la retrotranscriptasa, también conocidos como retrotransposones (relacionados con retrovirus)
  26. 26. LTR
  27. 27. Sin LTR
  28. 28. Clase II: replicación vía enzima transposasa por un proceso de corte y empalme</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  29. 29. Elementos transponibles en eucariotas: Clase II<br />Clase II<br />Clase II: replicación por enzima transposasa, proceso corte y empalme<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  30. 30. Elementos transponibles en eucariotas: Clase I<br />Genoma retrovirus<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  31. 31. gagpol (retrotranscriptasa)<br />LTR<br />LTR<br />Elementos transponibles en eucariotas: Clase I<br />Retrotrasposón<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  32. 32. Elementos transponibles en eucariotas: Clase I<br />Retrotrasposición <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  33. 33. Elementos transponibles en eucariotas<br />Retrotrasposón<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  34. 34. El genoma dinámico: <br />los elementos transponibles son el principal componente de los genomas grandes de eucariotas<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  35. 35. Elementos Efectos fenotípicos y genotípicos de la transposición<br />Disgénesis híbrida en Drosophila<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  36. 36. Genes de resistencia a Antibióticos en plásmidos<br />Secuencias de inserción<br />Islas de patogenicidad<br />Genes de resistencia a toxinas en plásmidos<br />Plásmido Ti de Agrobacterium<br />Virus y Viroides<br />HGT: Evoluciónprocariótica OTROS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  37. 37. Elementos móviles<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  38. 38. E.coli O157:H7 Ejemplo de una nueva “casi especie”<br />Contiene 20 potenciales genes en elementos móviles adquiridos mediante HGT<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  39. 39. Islas de patogenicidad (PAI)<br /><ul><li>Elementosgenéticosmóviles (>10Kb) que se integran en el genoma o se mantienen en plásmidosasociados a secuencias de tRNA.
  40. 40. Presentansecuenciasrepetitivasflanqueantes o diferente uso de G+C y de codones
  41. 41. Contienengenescodificantes para diferentes funciones: resistencia a antibióticos, adhesinas, toxinas y otros factores de virulencia.
  42. 42. Codifican por factores relacionados con la movilidadgenética: transposasas, integrasas, genesbacteriófagos y orígenes de replicación
  43. 43. Contribuyen a introducircambiosrápidos en el potencial de virulencia</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  44. 44. Formación de las PAI<br />Adquisición del gen o genes de virulenciamediantealgúnmecanismo de HGT<br />Integración, probablement mediada por una integrasa o recombinasa<br />Inmovilizaciónmediante la inactivación o deleción de los ori<br />Expresión de los genes (normalmente la expresiónejerce una selección positiva)<br />Escisión completa de la isla y transferencia a otroorganismo<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  45. 45. Isla Cag de Helicobacter pylori<br /><ul><li>Helicobacterpilory: patógenogástricocausante de gastritis, úlcera y cáncer
  46. 46. Cag:
  47. 47. Transferida mediante HGT
  48. 48. Diferentecontenido en G+C
  49. 49. 27 ORF
  50. 50. CagA única proteína efectora</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  51. 51. Isla Cag de Helicobacter pylori<br /><ul><li>CagPAI: Forma un sistema de secreción de tipo IV que:
  52. 52. Induce la expresión de citocinasproinflamatorias como IL-8, que contribuye a la inflamacióndel estómago
  53. 53. Cag F: “chaperonlikeprotein”
  54. 54. 17 genes son totalmentenecesarios para la translocación de CagA
  55. 55. 14 genesestimulan la síntesis de IL-8 por parte de la célulahuesped</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  56. 56. La Transcripción<br />El ADN no sale del núcleo<br />Cuando hay que fabricar un polipéptido se crea una copia en forma de ARN, este proceso se llama transcripción <br />El ARN contribuye a sintetizar las proteínas en los ribosomas <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  57. 57. TIPS, COSAS QUE DEBEN SABER X CULTURA EN BIOMOL (TRANSCRIPCIÓN DEL ADN)<br /><ul><li> Con la excepción de los genomas de RNA de ciertos virus, todas las moléculas de RNA se forman a partir de la información contenida permanentemente en el ADN.
  58. 58. La transcripción es la coversión de la información genetica de un segmento de ADN en una cadena de RNA con una secuencia de bases complementaria a una de las cadenas de ADN.
  59. 59. Existen tres tipos de RNA
  60. 60. RNA mensajero (mRNA)= es el portador de las secuencias que codifican la secuencia de aminoácidos de uno o más polipéptidos especificados por un gen o grupo de genes en los cromosomas
  61. 61. RNA de transferencia (tRNA)= es un adaptador que lee la información codificada en el mRNA y transfiere los aminoácidos adecuados a la cadena polipéptidica en crecimiento durante la sintesis proteica
  62. 62. RNA ribosamal (rRNA)= Se asocia con proteínas formando la intricada maquinaria para la sintesis de proteínas, el ribosoma.</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  63. 63. <ul><li> la replicacion y la transcripcion difieren en un aspecto importante.
  64. 64. replicación: en la replicación se copia el cromosoma entero dando ADN hijo que es identico al ADN parental o patron.</li></ul> mientras.<br /><ul><li> Transcripción: la transcripción es selectiva, en un momento determinado se transcribe sólo un gen determinado o un grupo de genes. Se puede regular la transcripción de modo que sólo se transcriba la información genética necesitada por la célula en un momento cualquiera.
  65. 65. Las secuencias reguladoras específicas indican el principio y el fin de los segmentos de ADN que se han de transcribir, asi como que cadena se han de utilizar como molde.</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  66. 66. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  67. 67. Señal de poliadenilación<br /> (AAUAAA)<br />Codón de terminación de la traducción<br /> (AUG, UUA, UAG )<br />Cola no <br />traducida<br />Secuencias clave para la transcripción y traducción de un gen eucariótico <br />Terminación de la transcripción<br />Codón de inicio de la traducción (AUG)<br />Sitio de inicio de<br /> la transcripción<br />GU A AG<br />GU A AG<br />3´<br />5´<br />Exón 2<br />Exón 3<br />Intrón 2<br />Exón 1<br />Promotor<br />Secuencia lider <br />no traducida<br />Adición de caperuza<br />Transcrito de mRNA primario<br />Corte 3´<br />Adición de la cola poli(A)<br />Poli(A)<br />Escisión de intrones<br />mRNA funcional<br />Procesamiento del transcrito a mRNA <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  68. 68. Modelo del Operón Lactosa<br />I P 0 Z Y A <br />polimerasa de ARN genes estructurales <br />ADN<br />mRNA<br />mRNA<br />mRNA<br />proteína<br />represora<br />lactosa<br />Medio<br />-galactosidasa permeasa transacetilasa<br />(Griffiths y col. 2002)<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  69. 69. SINTESIS DE PROTEINAS:<br />TRANSCRIPCIÓN<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  70. 70. A<br />U<br />G<br />C<br />U<br />U<br />G<br />G<br />C<br />A<br />A<br />C<br />G<br />U<br />G<br />Transcripción:<br />1- Iniciación: Una ARN‑polimerasa comienza la síntesis del precursor del ARN a partir de unas señales de iniciación "secuencias de consenso " que se encuentran en el ADN.<br />ARNpolimerasa<br /> T A C G A A C C G T T G C A C A T C <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  71. 71. A<br />U<br />G<br />C<br />U<br />U<br />G<br />G<br />C<br />A<br />A<br />C<br />G<br />U<br />G<br />m-GTP<br />Transcripción: <br />2. Alargamiento: La síntesis de la cadena continúa en dirección 5'3'. Después de 30 nucleótidos se le añade al ARN una cabeza (caperuza o líder) de metil‑GTP en el extremo 5‘ con función protectora.<br />ARNpolimerasa<br /> T A C G A A C C G T T G C A C A T C <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  72. 72. A<br />U<br />G<br />C<br />U<br />C<br />G<br />U<br />G<br />U<br />A<br />G<br />A<br />A<br />A<br />A<br />A<br />m-GTP<br />Transcripción: <br />3- Finalización: Una vez que la enzima (ARN polimerasa) llega a la región terminadora del gen finaliza la síntesis del ARN. Entonces, una poliA‑polimerasa añade una serie de nucleótidos con adenina, la cola poliA, y el ARN, llamado ahora ARNm precursor, se libera.<br />poliA-polimerasa<br />ARNm precursor<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  73. 73. ARNm<br />ARNm<br />precursor<br />maduro<br />4. Maduración (cont.): El ARNm precursor contiene tanto exones como intrones. Se trata, por lo tanto, de un ARNm no apto para que la información que contiene sea traducida y se sintetice la correspondiente molécula proteica. En el proceso de maduración un sistema enzimático reconoce, corta y retira los intrones y las ARN‑ligasas unen los exones, formándose el ARNm maduro.<br />cola<br />Cabeza<br />AAAAAA<br />AUG<br />UAG<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  74. 74. Maduración del ARNm (Visión de conjunto).<br />Región codificadora del gen<br />ADN<br /> Promotor E1 I1 E2 I2 E3 Terminador <br />TAC<br />ATC<br />cola<br />Cabeza E1 I1 E2 I2 E3<br />ARNm<br />AAAAAA<br />precursor<br />AUG<br />UAG<br />Cabeza<br />cola<br />ARNm<br />maduro<br />AAAAAA<br />AUG<br />UAG<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  75. 75. SINTESIS DE PROTEINAS:<br />TRADUCCIÓN<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  76. 76. Pasos de la traducción <br />1. “Activación” de los ARNt<br />Formación de los aminoacyl-ARNt <br />Iniciación del proceso de traducción <br />Comienza el proceso de síntesis de proteínas <br />3. Alargamiento (“elongation”)<br />La adición continua de amino ácidos a la cadena <br /> naciente de polipéptidos <br />4. Terminación<br />El fin de la traducción, se libera la proteína <br /> Esencialmente lo mismo en bacterias y células<br /> eucarióticas <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  77. 77. Iniciación: La subunidad pequeña del ribosoma se une a la región líder del ARNm y el ARNm se desplaza hasta llegar al codón AUG, que codifica el principio de la proteína. Se les une entonces el complejo formado por el ARNt-metionina (Met). La unión se produce entre el codón del ARNm y el anticodón del ARNt que transporta la metionina (Met). <br />Subunidad menor del ribosoma<br /> P A<br />3’<br />5’<br />AAAAAAAAAAA<br />A U GC A A<br />U G C<br />C G A<br />U A G<br />U U A<br />U A C<br />Codón<br />Anticodón<br />ARNt<br />ARNm<br />Met<br />(i)<br />1er aminoácido<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  78. 78. G U U<br />Gln<br />Elongación I: A continuación se une la subunidad mayor a la menor completándose el ribosoma. El complejo ARNt-aminoácido2 , la glutamima (Gln) [ARNt-Gln] se sitúa enfrente del codón correspondiente (CAA). La región del ribosoma a la que se une el complejo ARNt-Glnse le llama región aminoacil (A).<br />Subunidad menor del ribosoma<br /> P A<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />A U GC A A<br />U A G<br />U G C<br />C G A<br />U U A<br />U A C<br />Met<br />(i)<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  79. 79. Elongación II: Se forma el enlace peptídico entre el grupo carboxilo de la metionina (Met) y el grupo amino del segundo aminoácido, la glutamina (Gln). <br /> P A<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />A U GC A A<br />U A G<br />C G A<br />U U A<br />U G C<br />U A C<br />G U U<br />Gln-Met<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  80. 80. Elongación III: El ARNt del primer aminoácido, la metionina (Met) se libera.<br /> P A<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />A U GC A A<br />U G C<br />U A G<br />C G A<br />U U A<br />G U U<br />U A C<br />Gln-Met<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  81. 81. Elongación IV: El ARNm se traslada, de tal manera que el complejo ARNt-Gln-Met queda en la región peptidil del ribosoma, quedando ahora la región aminoacil (A) libre para la entrada del complejo ARNt-aa3 <br /> P A<br />ARNm<br />AAAAAAAAAAA<br />3’<br />5’<br />A U GC A A<br />U A G<br />U G C<br />C G A<br />U U A<br />U G C<br />G U U<br />Gln-Met<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  82. 82. A C G<br />Cys<br />Elongación V: Entrada en la posición correspondiente a la región aminoacil (A) del complejo ARNt-Cys, correspondiente al tercer aminoácido, la cisteína (Cys).<br /> P A<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />A U GC A A<br />U A G<br />U G C<br />C G A<br />U U A<br />U G C<br />G U U<br />Gln-Met<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  83. 83. Elongación VI: Unión del péptido Met-Gln (Metionina-Glutamina) a la cisteína (Cys).<br /> P A<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />A U GC A A<br />U A G<br />U G C<br />C G A<br />U U A<br />U G C<br />A C G<br />G U U<br />Cys-Gln-Met<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  84. 84. G U U<br />Elongación VII: Se libera el ARNt correspondiente al segundo aminoácido, la glutamina (Glu).<br /> P A<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />A U GC A A<br />U A G<br />U G C<br />C G A<br />U U A<br />U G C<br />A C G<br />Cys-Gln-Met<br />(i)<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  85. 85. Elongación VIII: El ARNm corre hacia la otra posición, quedando el complejo ARNt3-Cys-Glu-Met en la región peptidil del ribosoma.<br /> P A<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />A U GC A A<br />U A G<br />U G C<br />C G A<br />U U A<br />U G C<br />A C G<br />Cys-Gln-Met<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  86. 86. Elongación IX: Entrada del complejo ARNt-Leu correspondiente al 4º aminoácido, la leucina.<br /> P A<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />A U GC A A<br />U A G<br />U G C<br />C G A<br />U U A<br />U G C<br />A C G<br />A A U<br />Cys-Gln-Met<br />Leu<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  87. 87. Elongación X: Este se sitúa en la región aminoacil (A).<br /> P A<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />A U GC A A<br />U A G<br />U G C<br />C G A<br />U U A<br />U G C<br />A C G<br />A A U<br />Leu<br />Cys-Gln-Met<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  88. 88. A C G<br />Elongación XI: Unión del péptido Met-Gln-Cys con el 4º aminoácido, la leucina (Leu). Liberación del ARNt de la leucina. El ARNm se desplaza a la 5ª posición<br /> P A<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />A U GC A A<br />U A G<br />U G C<br />C G A<br />U U A<br />U G C<br />A A U<br />Leu-Cys-Gln-Met<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  89. 89. Elongación XII: Entrada del ARNt de la leucina, el 5º aminoácido, la arginina (ARNt-Arg).<br /> P A<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />A U GC A A<br />U A G<br />U G C<br />C G A<br />U U A<br />U G C<br />A A U<br />G C U<br />Leu-Cys-Gln-Met<br />Arg<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  90. 90. A A U<br />Elongación XIII:Unión del péptido Met-Gln-Cys-Leu con el 5º aminoácido, la arginina (Arg). Liberación del ARNt de la leucina (Leu). El ARNm se desplaza a la 6ª posición, se trata del un codón de finalización o de stop.<br /> P A<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />A U GC A A<br />U G C<br />U A G<br />C G A<br />U U A<br />G C U<br />Arg-Leu-Cys-Gln-Met<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  91. 91. G C U<br />A A U<br />Finalización I: Liberación del péptido o proteína. Las subunidades del ribosoma se disocian y se separan del ARNm.<br /> P A<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />A U GC A A<br />U G C<br />U A G<br />C G A<br />U U A<br />Arg-Leu-Cys-Gln-Met<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  92. 92. A<br />A<br />A<br />A<br />A<br />A<br />U<br />G<br /> C<br />U<br />G<br /> C<br />U<br />U<br /> C<br />G<br />U<br />G<br />Finalización II: Después unos minutos los ARNm son digeridos por las enzimas del hialoplasma.<br />ARNm<br />3’<br />AAAAAAAAAAA<br />5’<br />(i)<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  93. 93. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />HABLADORES <br />EN CLASE<br />DEAL!!!<br />
  94. 94. ANTIBIÓTICOS QUE INTERFIEREN EN LA BIOSÍNTESIS DE PROTEINAS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  95. 95. 1.      inhibición del reconocimiento de un aminoacil-ARNt (aa-ARNt) hacia el sitio A del ribosoma;<br />2.      introducción de errores en la lectura de los ARNm<br />3.      inhibición de la reacción de formación del enlace peptídico;<br />4.      inhibición de la traslocación del peptidil-ARNt (pp-ARNt) desde el sitio A al sitio P.<br />5.      bloqueo de los factores de elongación.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  96. 96. INHIBIDORES DE LA FASE INICIAL DE LA ELONGACIÓN: TETRACICLINAS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  97. 97. Mecanismo de acción: provocan que la unión del aa-ARNt al sitio A del ribosoma sea inestable y esté distorsionada, con lo cual se evita la elongación de la cadena. <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  98. 98. INDUCTORES DE ERRORES EN LA LECTURA DEL ARNm<br />AMINOGLUCÓSIDOS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  99. 99. Mecanismo de acción: se unen a los polirribosomas que están traduciendo el ARNm, provocando errores en la lectura del ARNm, al distorsionar la estructura del ribosoma. Por lo tanto, la bacteria comienza a sintetizar proteínas defectuosas; con un efecto final que es bactericida.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  100. 100. INHIBIDORES DE LA TRANSLOCACIÓN: MACRÓLIDOS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  101. 101. Mecanismo de acción: se une a la proteína L15, que forma parte del centro peptidil-transferasa de la subunidad grande del ribosoma 70S. Bloquea el paso de translocación interfiriendo específicamente con la liberación del ARNtdesacilado, es decir, impide que el ARNt “descargado” (una vez que ha cumplido su misión al transferirse el péptido naciente al aa-ARNt del sitio A) salga del sitio P; por lo tanto, el pp-ARNt cargado y situado en el sitio A no puede translocarse al sitio P, y se produce la parada de la síntesis de proteinas.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  102. 102. INHIBIDORES DE LA TRANSCRIPCIÓN DE LAS EUBACTERIAS: RIFAMICINAS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  103. 103. mecanismo de acción estriba en la inhibición del inicio de la transcripción, uniéndose de modo no covalente a la subunidad ß de la ARN polimerasa eubacteriana.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  104. 104. HIPOTESIS DEL BALANCEO F. CRICK<br />JUSTIFICACIÓN<br />Los tRNA reconocen codones mediante apareamiento de bases del codón del mRNA y una secuencia de tres bases del tRNA denominada anticodón. <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  105. 105. Los dos RNA se aparean antiparalelamente. La primera base del codón se encuentra en el extremo 5' pues el mRNA va en dirección 5'-3' y la primera del tRNA se encuentra en el extremo 3' ya que va en dirección 3'-5'.<br />El número de tRNA para cada aminoácido no es el mismo que el número de sus codones Además, algunos de los tRNA tiene inosinato (I), que contiene la base poco frecuente hipoxantina que puede aparearse con U, C y A, aunque son más débiles que los habituales.<br />Las terceras bases de los codones forman puentes de hidrógeno bastante débiles con el resíduo I del anticodón.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  106. 106. Crick observó que la tercera base de casi todos los codones se aparea de manera bastante suelta con su correspondiente, es decir, la tercera base se balancea.<br />Las primeras bases de un codón en el mRNA siempre forman pares de bases de Watson y Crick con las bases del anticodón de tRNA confiriéndole así la parte más importante de la especificidad a las dos primeras.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  107. 107. La tercera base es la del balanceo y permite la rápida disociación del tRNA de su codón durante la síntesis.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  108. 108. Wobble hypothesis<br /><ul><li>Wobble hypothesis – el tercernucleótidode un</li></ul>anticodon de ARNtpuedeformarpuentes de<br />hidrógeno con mas de un tipo de tercernucleótido<br /> del codón<br />Algunasmoléculas de ARNtpuedenreconocerhastatres<br />codonesdiferentesquedifieren en el tercernucleotido<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  109. 109. Un amino ácido es unido al ARNt antes de<br /> ser incorporado en un polipéptido <br />Crick !<br /><ul><li> Crick propuso que debía haber una molécula que sirviera de</li></ul> adaptados en la síntesis de proteínas sirviendo como un <br /> puente entre el ARNm y las proteínas<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  110. 110. Pensamiento de Crick<br /><ul><li>Los “adaptadores” de Crick resultaron ser moléculas de</li></ul> ARNt<br /><ul><li> Cada tipo de molécula de ARNt se une a un solo tipo de </li></ul> amino ácido<br /><ul><li> Los amino ácidos están unidos covalentemente a sus moléculas</li></ul> de ARNt mediante enzimas específicas <br /> (aminoacyl - tRNA synthetases)<br /><ul><li> Estas enzimas utilizan ATP como fuente de energía
  111. 111. El complejo resultante llamado aminoacyl-ARNt se une a la secuencia</li></ul> que codifica para alinear los amino ácidos en el orden correcto para<br /> formar una cadena de polipéptidos <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  112. 112. 39 end<br />Amino acid<br />accepting end<br />Loop 3<br />59<br />39<br />59 end<br />Amino<br />acid<br />Hydrogen bonds<br />Loop 1<br />39<br />59<br />tRNA<br />Loop 1<br />Modified nucleotides<br />Loop 2<br />Loop 2<br />Anticodon<br />Anticodon<br />(a)<br />(b)<br />(c) Aminoacyl-tRNA<br />Anticodon<br /><ul><li> Las moléculas de ARNt son polinucleótidos de 70 o 80 nucleótidos</li></ul> cada uno con secuencias únicas mientras que otras son comunes<br /> para todos <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  113. 113. 39 end<br />Amino acid<br />accepting end<br />Loop 3<br />59<br />39<br />59 end<br />Amino<br />acid<br />Hydrogen bonds<br />Loop 1<br />39<br />59<br />tRNA<br />Loop 1<br />Modified nucleotides<br />Loop 2<br />Loop 2<br />Anticodon<br />Anticodon<br />(a)<br />(b)<br />(c) Aminoacyl-tRNA<br />Anticodon<br />Una molécula de ARNt consiste de:<br />Un anticodon – una secuencia de ARNt con una secuencia <br /> complementaria al codón del ARNm<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  114. 114. ARNt (tRNA)<br />b. Son reconocidas por una “aminoacyl-ARNt synthetases”<br />que añade el amino ácido correcto a la molecula de ARNt<br />c. Tienen un sitio de acoplamiento (“attachment site”) para<br /> el amino ácido para el que codifica el anticodon<br />d. Es reconocido por los ribosomas <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  115. 115. 39 end<br />Buena distancia<br />para mantener el <br />anticodon separado<br />del amino ácido <br />Amino acid<br />accepting end<br />Loop 3<br />59<br />39<br />59 end<br />Amino<br />acid<br />Hydrogen bonds<br />Loop 1<br />39<br />59<br />tRNA<br />Loop 1<br />Modified nucleotides<br />Loop 2<br />Loop 2<br />Anticodon<br />Anticodon<br />(a)<br />(b)<br />(c) Aminoacyl-tRNA<br />Anticodon<br />El apareamiento de las bases complementarias <br />causa que la molécula se doble sobre si misma<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  116. 116. CONTROL DE LA EXPRESIÓN<br />GÉNICA<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  117. 117. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  118. 118. MODELO OPERÓN<br />Jacob, Monod y colaboradores analizaron el sistema de la lactosa enE. coli, de manera que los resultados de sus estudios permitieron establecer el modelo genético del Operón que permite comprender como tiene lugar la regulación de la expresión génica en bacterias. Jacob y Monod recibieron en 1965 el Premio Nobel pos estas investigaciones<br />Francois Jacob<br />Jacques Monod<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  119. 119. Se denomina episoma a un plásmido incorporado al cromosoma bacteriano. Los plásmidos se replican en manera similar al cromosoma bacteriano.<br />El ADN procariota se organiza en paquetes coherentes denominados OPERONES, en los cuales se encuentran los genes para funciones interrelacionadas. <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  120. 120. El modelo operón de la regulación de los genes procariotas fue propuesto en 1961 por Francois Jacob y Jacques Monod<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  121. 121. MODELO <br /> OPERON<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  122. 122. Un Operón es grupo de genes estructurales cuya expresión está regulada por elementos de control o genes (promotor y operador) y genes reguladores<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  123. 123. El promotores la parte del ADN en donde se pega la ARN polimerasa antes de abrir el segmento de ADN a ser transcripto<br />Un segmento del ADN que codifica para un polipéptido específico se conoce como un gen estructural. <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  124. 124. Un operón consiste en:  <br />un operador: controla el acceso de la ARN polimerasa al promotor<br />un promotor: donde la ARN polimerasa reconoce el sitio de inicio de la transcripción<br />un gen regulador: controla el tiempo y velocidad de transcripción de otros genes<br />un gen estructural: codifican las enzimas relacionadas o las proteínas estructurales<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  125. 125. El genregulador codifica para una proteína que se pega al operador, obstruyendo al promotor (y por lo tanto a la transcripción), del gen estructural. <br />Cuando se remueve la proteína represora, puede producirse la transcripción.<br />El operador y el  promotor son sitios de unión sobre el ADN y no se trasncriben.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  126. 126. Los operones son<br /><ul><li>inducibles o
  127. 127. reprimibles,</li></ul> de acuerdo al mecanismo de control<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  128. 128. OPERONES INDUCIBLES<br />El Operón lactosa, que abreviadamente se denomina Operón lac, es un sistema inducible.<br />La proteína reguladora, producto del gen regulador , es un represor que impide la expresión de los genes estructurales en ausencia del inductor.<br />El inductor en este caso es la lactosa<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  129. 129. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  130. 130. Cuando hay lactosa en el medio (intestinos de un mamífero durante la lactancia), ésta  funciona como inductor, se une al represor  cambiando su forma lo que evita que se pueda unir al operador, de este modo la polimerasa puede transcribir los genes correspondientes.<br />Este operón lac sólo se activa cuando hay lactosa en el medio. <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  131. 131. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  132. 132. Cuando no hay lactosa en el medio, la proteína represora se encuentra unida al operador impidiendo la transcripción de los genes para las enzimas que metabolizan la lactosa.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  133. 133. Operón lactosa en ausencia de lactosa<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  134. 134. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  135. 135. En ausencia del inductor (la lactosa), la proteína represora producto del gen i se encuentra unida a la región operadora e impide la unión de la ARN-polimerasa a la región promotora y, como consecuencia, no se transcriben los genes estructurales.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  136. 136. Operones reprimibles<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  137. 137. Cuando un producto del metabolismo, el triptofano por ejemplo, está en cantidades suficientes la bacteria puede dejar de fabricar las enzimas que los sintetizan.<br />En este sistema, el producto funciona como correpresor uniéndose al represor y de este modo detiene la síntesis proteica. <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  138. 138. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  139. 139. Operón triptófano: en presencia de triptófano<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  140. 140. Operón triptófano: en ausencia de triptófano<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  141. 141. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  142. 142. Tanto la represión como la inducción son ejemplos de control negativo, dado que la proteína represora detiene (" turn off ") la transcripción.  <br />La lactosa, el azúcar de la leche, es hidrolizada por la enzima beta-galactosidasa. Esta enzima es inducible: solo se produce en grandes cantidades cuando la lactosa, el sustrato sobre el cual opera, esta presente. <br />En cambio, las enzimas para la síntesis del aminoácido triptófano se producen continuamente a menos que el triptófano este presente en el medio de cultivo, se dice en este caso que las enzimas sintetizadoras de triptófano están reprimidas.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  143. 143. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  144. 144. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  145. 145. REGULACIÓN EXPRESIÓN GÉNICA<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  146. 146. Existen algunos procesos metabólicos que son necesarios para el funcionamiento normal de casi todas las células, de manera que existen una serie de necesidades básicas para el mantenimiento normal de una célula. <br />Los genes que codifican para las enzimas necesarias para el metabolismo básico celular se están expresando continuamente, es decir, se expresan de forma constitutiva o continua.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  147. 147. Los genes constitutivos codifican para sistemas enzimáticos constitutivos, que se necesitan siempre para la actividad normal de la célula.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  148. 148. Frente a los genes constitutivos, nos encontramos con los genes que se expresan solamente en determinadas situaciones y que, por consiguiente, codifican para enzimas que solamente se necesitan en momentos concretos.<br /> A este tipo de genes se les llama genes adaptativos y a las enzimas codificadas por ellos, sistemas enzimáticos adaptativos. Se denominan así pensando en que se expresan cuando la célula se adapta a una determinada situación ambiental.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  149. 149. <ul><li>El promotor (P): se trata de un elemento de control que es una región del ADN con una secuencia que es reconocida por la ARN polimerasa para comenzar la transcripción. Se encuentra inmediatamente antes de los genes estructurales. Abreviadamente se le designa por la letra P.
  150. 150. El operador (O): se trata de otro elemento de control que es una región del ADN con una secuencia que es reconocida por la proteína reguladora. El operador se sitúa entre la región promotora y los genes estructurales. Abreviadamente se le designa por la letra O.
  151. 151. El gen regulador (i):secuencia de ADN que codifica para la proteína reguladora que reconoce la secuencia de la región del operador. El gen regulador está cerca de los genes estructurales del operón pero no está inmediatamente al lado. Abreviadamente se le denomina gen i.</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  152. 152.                                                                                               <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  153. 153. Operón lactosa: ARNm multigénico o policistrónico<br />Operón lactosa: ARNm multigénico o policistrónico<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  154. 154. EL OPERÓN TRIPTÓFANO<br />El operón triptófano (operón trp) es un sistema de tipo represible, ya que el aminoácido triptófano (Correpresor) impide la expresión de los genes necesarios para su propia síntesis cuando hay niveles elevados de triptófano.<br />Sin embargo, en ausencia de triptófano o a niveles muy bajos se transcriben los genes del operón trp. <br />En el siguiente esquema se indican los elementos del Operón Triptófano<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  155. 155. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  156. 156. En ausencia de triptófano, o cuando hay muy poco, la proteína reguladora producto del gen trpR no es capaz de unirse al operador de forma que la ARN-polimerasa puede unirse a la región promtora y se transcriben los genes del operón triptófano<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  157. 157. Operón triptófano: en ausencia de triptófano<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  158. 158. En presencia de triptófano, el triptófano se une a la proteína reguladora o represora cambiando su conformación, de manera que ahora si puede unirse a la región operadora y como consecuencia la ARN-polimerasa no puede unirse a la región promotora y no se transcriben los genes estructurales del operón trp.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  159. 159. Operón triptófano: en presencia de triptófano<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  160. 160. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  161. 161. Categoría de células en función de su capacidad proliferativa<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  162. 162. <ul><li>Células con especialización estructural extrema, como las células nerviosas o eritrocitos que han perdido la capacidad de dividirse. Una vez diferenciadas, permanecen en este estado hasta su muerte.
  163. 163. Células que normalmente no se dividen, pero que pueden iniciar la síntesis de ADN cuando se enfrentan a un estímulo apropiado (hepatocitos y linfocitos)
  164. 164. Células que normalmente poseen un nivel relativamente alto de actividad mitótica, las células madres (o stem cell)</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  165. 165. CELULAS MADRE (Stem cell)<br />Propiedades: <br /><ul><li>No está totalmente diferenciada
  166. 166. Se puede dividir sin límites
  167. 167. Cuando se divide, cada célula hija puede permanecer como célula madre o puede iniciar una vía que conduce irreversiblemente hacia la diferenciación terminal.</li></ul>Obtención:<br /><ul><li>TEJIDOS ADULTOS
  168. 168. EMBRIONES</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  169. 169. The control of gene expression<br />Each cell in the human contains all the genetic material for the growth and development of a human<br />Some of these genes will be need to be expressed all the time<br />These are the genes that are involved in of vital biochemical processes such as respiration<br />Other genes are not expressed all the time<br />They are switched on an off at need<br />© 2007 Paul Billiet ODWS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  170. 170. Operons<br />An operon is a group of genes that are transcribed at the same time. <br />They usually control an important biochemical process. <br />They are only found in prokaryotes.<br />Jacob, Monod & Lwoff<br />© NobelPrize.org<br />© 2007 Paul Billiet ODWS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  171. 171. The lac Operon<br /><ul><li>The lac operon consists of three genes each involved in processing the sugar lactose
  172. 172. One of them is the gene for the enzyme β-galactosidase
  173. 173. This enzyme hydrolyses lactose into glucose and galactose</li></ul>© 2007 Paul Billiet ODWS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  174. 174. Adapting to the environment<br />E. coli can use either glucose, which is a monosaccharide, or lactose, which is a disaccharide<br />However, lactose needs to be hydrolysed (digested) first<br />So the bacterium prefers to use glucose when it can<br />© 2007 Paul Billiet ODWS<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  175. 175. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  176. 176. LA IGNORANCIA HUMANA NO PERMANECE DETRAS DE LA CIENCIA, CRECE TAN RAPIDAMENTE COMO ELLA<br />Stanislaw Jeizy Lec<br /> La ingnorancia Humana no permanece detrás de la ciencia, crece tan rápido como esa.<br /> Stanislaw Jerzy Lec<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  177. 177. TECNOLOGIA DE DNA RECOMBINANTE<br />Giovanni Gonzalez DMV<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  178. 178. Que es ?<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  179. 179. La manipulación genética de organismos con un propósito predeterminado.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  180. 180. Que busca la Ingenería Genética?<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  181. 181. La ingeniería genética busca el conocimiento de cada uno de los genes que conforman el mapa. La disciplina utiliza diferentes métodos para alterar el material genético.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  182. 182. Cuales son las herramientas que posee el hombre para lograr esto?<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  183. 183. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  184. 184. <ul><li>1970. Arber y Smith. Endonucleasas de restricción</li></ul>1987. Kary Mullis<br />POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  185. 185. <ul><li>Aislamiento de Genes
  186. 186. Generación de moléculas recombinantes de DNA</li></ul>Introducción a célula Huésped (Transformación)<br /><ul><li>Síntesis en célula huésped de un nuevo producto o modificación de la expresión de un producto previamente presente.</li></ul>23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  187. 187. Enzimas de Restricción<br /> <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  188. 188. <ul><li>son enzimas que cortan los enlaces fosfodiester del material genético a partir de una secuencia que reconocen.</li></ul>como reconocen?<br /> Las mismas permiten cortar DNA de hebra doble, donde reconocen secuencias palindrómicas <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  189. 189. sitio de restricción<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  190. 190. Exonucleasas<br />Endonucleasas<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  191. 191. Tipos de enzimas de restricción<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  192. 192. Sistemas tipo IUna sola enzima (multimérica que posee 3 subunidades) reconoce la secuencia específica de ADN, metila y restringe. Pero la restricción no ocurre en el sitio de reconocimiento, sino que es al azar y en sitios distantes al de reconocimiento.<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  193. 193. Sistemas tipo IIEnzimas diferentes realizan la restricción y modificación. La restricción ocurre en el sitio de reconocimiento ó adyacente. Estas enzimas tipo II son las utilizadas en genética molecular puesto que permiten romper el ADN en sitios específicos, y así, recuperar secuencias conocidas<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  194. 194. Sistemas tipo IIIEs similar al sistema tipo I, utilizan una enzima oligomérica que realiza todas las actividades enzimáticas, y rompen el DNA 25-27 bp, más allá del sitio de reconocimiento.<br /> <br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  195. 195. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  196. 196. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  197. 197. Ejemplos de enzimas de restricción tipo II<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  198. 198. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  199. 199. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  200. 200. Mapa de restricción<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  201. 201. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  202. 202. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  203. 203. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  204. 204. ADN ligasas<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  205. 205. catalizan la formación de un enlace fosfodiéster entre el 5' de un fosfato y el 3' de un nucleótido. Se usan para unir covalentemente cadenas de ADN.<br />Ligación intermolecular: entre dos cadenas distintas de ADN<br />Ligación intramolecular: entre los dos extremos de la misma cadena de ADN, dADNo lugar a un círculo<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  206. 206. como introduzco esta molécula?<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  207. 207. vectores de clonación<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  208. 208. plasmido<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  209. 209. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  210. 210. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  211. 211. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  212. 212. Bacteriófagos<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  213. 213. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  214. 214. Cósmidos<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  215. 215. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  216. 216. proceso<br />video<br />23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  217. 217. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />
  218. 218. 23/05/2010<br />Dr. Giovanni Gonzalez DMV/BIOMOL/2010<br />

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