El plásmido Ti es un plásmido presente en la bacteria Agrobacterium tumefaciens que causa la enfermedad de la corona gall en plantas. Parte de este plásmido, conocido como ADN-T, se transfiere a las células de la planta infectada y se integra en su ADN, lo que provoca la formación de tumores en la planta. El plásmido Ti se ha modificado para transferir genes exógenos a plantas como Arabidopsis, permitiendo su uso en ingeniería genética vegetal.
Plásmido Ti: Transferencia de genes entre bacterias y plantas
1. PLÁSMIDO Ti
INTRODUCCIÓN
Los plásmidos son pequeñas moléculas
circulares de DNA. Algunos plásmidos están
presentes en un alto número de copias por
célula, mientras que otros solo están presentes
en una o dos. En general, los plásmidos
poseen genes que no son esenciales para las
funciones bacterianas, pero pueden
desempeñar un papel importante en el ciclo de
la vida y en el crecimiento dentro de sus
huéspedes. Algunos plásmidos estimulan el
apareamiento entre bacterias, otros contienen
genes que matan a otras bacterias. Es de gran
importancia destacar que los plásmidos son
muy utilizados en ingeniería genética y algunos
de ellos participan en la diseminación de la
resistencia bacteriana a los antibióticos. La mayoría de los plásmidos son circulares y constan
de varios miles de pares de bases de longitud, aunque se han encontrado plásmidos de cientos
de miles de pares de bases. Dado que poseen su propio origen de replicación, un plásmido se
replica en forma independiente del cromosoma bacteriano. La replicación parte del origen en
una o dos direcciones hasta que se copia el plásmido a su totalidad. Hay algunos plásmidos
que cuentan con múltiples orígenes de replicación.
PLÁSMIDO TI
La bacteria del suelo
Agrobacterium tumefaciens, que invade
las plantas a través de heridas e induce
la formación de tumores (crown galls), se
ha empleado para transferir genes a las
planta. Esta bacteria contiene un
plásmido Ti, parte del cual se transfiere a
la célula vegetal cuando A. tumefaciens
infecta una planta. En esta, parte del
plásmido Ti se integra en uno de los
cromosomas de la planta, donde se transcribe y traduce para producir varias enzimas que
ayudan a mantener la bacteria.
2. Por otra parte, pueden transferirse genes de otros organismos a Arabidopsis por medio
del plásmido Ti: una vez infectada y transferido el plásmido Ti a la células, este se inserta al
azar dentro del DNA de la planta que infecta, por lo que genera, por lo tanto, mutaciones en el
DNA de la planta en un proceso denominado mutagénesis por inserción. Los genetistas han
modificado el plásmido Ti para que sea portador del gen GUS, que carece de promotor propio.
ESTRUCTURA
El plásmido Ti es replicativo, de
doble cadena, circular y de gran tamaño;
que oscila mucho de unas cepas a otras,
pudiendo llegar a las 300Kb. Su tamaño
medio es cercano a las 200 kb. En él se
encuentran genes de virulencia, de
síntesis y catabolismo de opinas (como
octopina o nopalina) y de síntesis de
fitohormonas. La región del plásmido que
se transfiere a la a la célula huésped, se
denomina t-DNA. En ella, se encuentran
genes para la síntesis de una o varias
auxinas, de una o varias citoquininas y de
opinas. Las auxinas y citoquininas son las
responsables de la formación del tumor, por proliferación y crecimiento exacerbados de las
células vegetales. Las opinas son derivados de aminoácidos, que sirven de principal de
nutriente de Agrobacterium tumefaciens, sirviéndole a la bacteria de fuente de energía, por
oxidación aerobia. La región t-DNA, se encuentra flaqueada por dos secuencias constituidas
por repeticiones directas de 23 nucleótidos, en alguna ocasión 25), que delimitan que zona del
plásmido se va a movilizar. Estas secuencias se denominan borde derecho e izquierdo del t-
DNA. Todo lo ubicado entre ambas, pasará a la célula vegetal. Los genes de virulencia son los
encargados de transferir y proteger el t-DNA. Se encuentran como un operón. En la región que
no se transfiere quedan los genes para el catabolismo de opinas.
FUNCIONAMIENTO
Primero la agrobacteria entra en contacto con las raíces del vegetal, cuando capta las
moléculas fenólicas que desprende la raíz. En ese momento se estimula la síntesis de
proteínas de los genes de virulencia. El primer gen en inducirse es Vir-A, que mediante gasto
de ATP estimula la síntesis de Vir-G. Vir-G es el encargado de estimular la síntesis del resto de
genes de virulencia .Vir-D1 y Vir-D2 son los encargados de cortar el ADN-T por los bordes
izquierdo y derecho. Vir-B forma un poro en la pared bacteriana que comunica con el interior de
la célula vegetal, Vir-E, junto con Vir-D1 y Vir-D2 forma un complejo con otras proteínas (VIP)
que entrará en la célula vegetal. En el citoplasma de la célula Vir D2 es reconocida por los
3. mecanismos del vegetal como una proteína nuclear y viaja al núcleo arrastrando a todo el
complejo. Una vez el ADN-T es en el núcleo se integra en regiones homólogas a sus bordes.
BIBLIOGRAFIA
Pierce B. (2009). Genética Un Enfoque Conceptual. Madrid, España: Medica Panamericana.