1. Osteoprotegerin and osteoclastDiffetentiation factor in tooth ERUPTION AUTORES: G.E. Wise; S.J:Lumpkin. Department of Veterinary Anatomy and Cell Biology, School of Veterinary Medicine, Lousiana State University. Journal Dentistry 79(12):1937-1942,2000 DRA. SONIA YESMITH PEREZ LOPEZ DRA. YINNA LIZZETH RIVERA

2. OBJETIVO Determinar la regulación molecular de los osteoclastos durante su activación y formación atreves de la expresión del OPG y ODF durante la formación de la vía de erupción dental.

3. MATERIALES Y METODOS Se hicieron dos tipos de estudios en ratas y ratonesquehacian parte de lascolonias de reproduccion de la Universidad de Luisana. Se aprobaron los estudios por el comiteInstitucionalpara el cuidado animal bajo un protocolo especial paraanimales. ESTUDIO IN VIVO ESTUDIO IN VITRO CULTIVO CELULAR MODELOS ANIMALES

6. Experimento in vitro Se usaronlascèlulas del quintopasaje (muestra)deratasyratones Se trataton con mezcla de proteinarelacionada con la parathormonay CSF Se hicieron estudios con dosis y tiempo de exposiciòn. CSF 1 PTHrP LAS CELULAS SE INCUBARON EN 10ng/mL POR 5Min, 30Min, 1 hora y 3 horas LAS CELULAS SE INCUBARON EN 10ng/Ml de CSF1 por 5,15,30minutos, 1,3,12,24,48

8. En los dias 1,3,5,7,10

12. 3´fue 1242-1223Se amplificò el cDNA por PCR , susproductos fueron expuestos a electroforesis en un gel agar al 1% Se visualizò con tinciòn de bromuro de etileno, parapoderverlasbandas. La amplificaciònfueidenticapararatasyratones a traves del sebadorActina B

14. Fueron fijadas en un buffer de formalina 10% neutral por 48Horas a 4ºC

15. Se enjuagaron con10mM PBS a un pH 7,4

16. Se descalcificaron al 5% con acìdoformico por 7 dias

18. RESULTADOS IN VIVO EL GEN OPG SE EXPRESO EN EL FOLICULO DENTAL DE LA RATA Y EL RATON. HAY CAIDA DE LA EXPRESION EN EL DIA 3 EN RATA Y EN EL DIA 5 EN RATONES.

19. RESULTADOS IN VITRO La expresion del OPG de la celula del foliculo dental en la rata se inhibio al incubarse en PTHRP la maxima inhibiciones en 25ng/ml.

20. RATON lascelulas del foliculo dental tuvieronconcentración de PTHrP 1 ng/mLbajo, inhibe la expresión OPG IN VITRO

21. RESULTADOS TIEMPO INICIO DE INHIBICION DEL OPG FUE A LOS 30` DE INCUBACION EN PTHrP Y SE MANTUVO HASTA 1 HORA

22. RESULTADOS EN RATAS LA INCUBACION DE LAS CELULAS EN CSF1 INHIBE LA EXPRESION OPG.

23. RESULTADOS EN RATONES LAS CELULAS FOLICULOS TUVIERON MAXIMA REDUCCION DEL OPG EN CONCENTRACION DE 50ng/mL DE CSF1