Examen de citologia vaginal y cambios del ciclo estral en perras

2. Objetivos:
 General:
 Determinar el momento del estro mediante el
examen de citología vaginal usando 2
sujetos experimentales.
 Específicos:
 Investigar las diferentes etapas del ciclo
estral en la perra.
 Identificar los diferente cambios fisicos y
citologicos q ocurren en las diferentes
etapas del ciclo

3. Justificación
 Es importante el desarrollo de este trabajo ya que con el
conoceremos más a cerca del ciclo estral de la perra, pero
sobre todo los cambios hormonales y citológicos que se
producen en ella durante el proestro, estro, diestro y
anestro; teniendo siempre como base el aspecto fisiológico.
 Asi mismo en el trabajo hablaremos a cerca del manejo
reproductivo adecuado de la hembra, algunas técnicas de
laboratorio como son: toma, tinción y fijación de una muestra
que nos permitirá entender de mejor manera el desarrollo de
nuestra práctica siempre con un correcto análisis de los
resultados de laboratorio

4. Introduccion
 El examen seriado de las células exfoliadas del epitelio
vaginal, como método de diagnostico clínico de eficacia
probada y amplia difusión en el manejo reproductivo de
la especie canina, nos permite conocer de manera
exacta la fase del ciclo estral, gracias a la reacción y
sensibilidad del epitelio vaginal, en esta especie, frente
a las hormonas ováricas propias del ciclo sexual. En
este sentido, el epitelio vaginal responde al incremento
de los esteroides sexuales en sangre periférica,
particularmente estrógenos, transformándose en un
epitelio cornificado, cambios celulares que podemos
evaluar combinando las técnicas de tinción existentes y
el microscopio de campo claro.

5. Por lo general las hembras caninas pasan por diferentes fases de actividad
y descensos hormonales a esto denominamos ciclo estral, el mismo que
consta de 4 fases:
CICLO ESTRAL DE PERRAS
tiene de 4 fases:
Proestro Estro Diestro Anestro
*Duración media *Secreción de
*Incremento de progesterona.
5-10 días. *La FSH tiende a
actividad folicular. aumentar y la
*Duración
*Aceptación del progesterona
variable de60-80dias.
*Dura de6 a 11 disminuye a niveles
coito por la
días. *Formación de cuerpo basales.
hembra.
lúteo.
*Aumenta tamaño *Periodo de
*Estrógenos involución
de los ovarios. *Prolactina presente
Feed back + LH lo ,caída de uterina.(En una perra
FSH y LH preñada).
que induce a la progesterona.
ovulación.

6. Gonadotropinas pituitarias
 Laadenohipófisis produce 2 hormonas
de importancia en la reproducción de la
hembra:
•Pertenece a la familia Glucoproteínas de alto
peso molecular.
•se sintetiza y almacena en células basófilas
Hormona Folículo •Vida media larga de 170 minutos
estimulante (FSH) • Tiene una sustancia conocida como Ácido
Siálico que evita que se metabolice
rápidamente
•Estimula Indirectamente la Gametogénesis
•Desencadena ovulación actuando
sinérgicamente con la FSH

7. •Glocoproteiana de peso
molecular alto
•Se sintetiza y almacena en
células basófilas
•Vida media de 30 minutos.
Hormona Luteinizante •Participa Proceso ovulatorio y
(LH) para la luteinización de la
granulosa
•Formación del cuerpo lúteo
•Dar acabado a las células
terminales y desencadena la
ovulación.

8. Mecanismo de regulación

9. Progesterona:
• La progesterona es un intermediario importante
en la biosíntesis de los esteroides; el colesterol
es convertido en pregnenolana y esta es
convertida en progesterona por dos encimas: la
3β-hidroxiesteroide deshidrogenasa y la 5.3
citoesteroide isomerasa.

10. Acciones
•Estimular el crecimiento de las glándulas
endometriales.
•Estimular el crecimiento lóbulo-alveolar de la
glándula mamaria.
•Estimular la actividad secretora del oviducto y de las
glándulas endometriales.
•Estimular la conducta de estro en algunas especies
(oveja y perra) en coordinación con los estrógenos.
•Prevenir la contractibilidad del útero durante la
gestación.
•Regular la secreción de gonadotropinas

11. Estrogenos
Los estrógenos son hormonas
sexuales esteroideas (derivadas
del ciclopentanoperhidrofenantreno
) principalmente, producidos por
los ovarios y, en menores
cantidades, por las glándulas
adrenales.
Los estrógenos disminuyen la secreción de FSH al igual
que LH

12. Acciones de los Estrógenos:
Estimular el crecimiento de las glándulas endometriales
(mantenimiento del cigoto antes de la implantación).
Estimular el crecimiento de los conductos de la glándula
mamaria.
Causar actividad secretoria en el oviducto
(supervivencia del óvulo y del espermatozoide)
Regular la secreción de gonadotropinas.
Detener el crecimiento de los huesos largos al iniciar el
cierre de la placa epifisaria de crecimiento.
Favorecer el metabolismo proteico.

14. MANEJO REPRODUCTIVO DE LA HEMBRA
Se lo puede realizar mediante evaluaciones clínicas :
1.-Ablandamiento vulvar
Detectamos cambios del epitelio de la vagina por
2.-Citologia Exfoliativa los estrógenos. queratizacion de células sirve
(epitelio vaginal) para monitorear la proestral y estral del ciclo.
Se realiza mediante técnicas de RIA y ELISA
3.-Determinacion de niveles
séricos de progesterona.

15. 4.-Determinacion seriada
de niveles séricos de LH.
5.-Endoscopia Vaginal
7.-Ecografia Ovárica
6.-Examen de la secreción
cérvico-vaginal.

16. CITOLOGÍA
VAGINAL
Procedimientos diagnósticos para evaluación ginecológica de la perra,
especialmente en el aspecto reproductivo .
De mucha utilidad en los aspectos patológicos como ciclos estrales
anormales, afecciones genitales y hormonales.
Esta técnica se basa en que
las células epiteliales vaginales responden a los cambios
hormonales.

17. La citología vaginal es uno de los métodos indirectos más difundido, por ser
simple y rápido.
El método debe cumplir algunos principios básicos:
a) Debe ser simple de realizar y económico.
b) No debe ser doloroso.
c) Debe poderse realizar en presencia o ausencia de descarga
vaginal.
d) Debe ser realizable por los dueños después de un breve
aprendizaje.
e) Debe ser realizable, a pesar del tamaño o temperamento de la
perra

18. TOMA DE LA MUESTRA

20. TINCIÓN DE LA MUESTRA
La coloración de Papanicolaou es la técnica por
excelencia de la citología general
Para lograr una buena preparación
citológica es necesario que la toma o
recolección del material sea
adecuada, una correcta y rápida
fijación, y un buen proceso de
coloración

21. 96 grados
Eosina
Azul de metileno

22. Interpretacion citologica
Células epiteliales intermedias Células epiteliales superficiales
Células epiteliales parabasales:
Células epiteliales
Otros elementos celulares escamosas

23.  Cambios citológicos en el
ciclo estral de la perra

24. PROESTRO ESTRO
 Neutrófilos : hay algunos al
 Neutrófilos : deben estar
comienzo, pero desaparecen al final
ausentes.
de esta fase.
 Eritrocitos : en pequeña
 Eritrocitos : son muy numerosos al cantidad o ausentes en
comienzo y disminuyen, conforme condiciones normales, aunque
nos vamos acercando al estro. su presencia no tiene
 Células epiteliales : son grandes y significación clínica por sí sola.
se van queratinizando a lo largo de  Células epiteliales : están
esta fase, esto es, van perdiendo su queratinizadas entre un 60 y un
forma redondeada. Tienen grandes 90 %, formando grupos al final
núcleos que se van haciendo más del estro. Sus núcleos se van
pequeños al final del proestro. haciendo cada vez más
pequeños hasta desaparecer.
Estos son los días idóneos para
la monta si solo hacemos
citología o frotis vaginal.

25. DIESTRO ANESTRO
 Neutrófilos : abundante cantidad al  Neutrófilos : en número
comienzo de esta fase para luego ir reducido o moderado.
disminuyendo. Si se mantuvieran
altos nos indicaría la presencia de  Eritrocitos : ausentes.
una infección.  Células epiteliales : son
 Eritrocitos: generalmente ausentes. células redondas parabasales
 Células epiteliales: numerosas e intermedias de núcleos
células parabasales al principio, y su
número va disminuyendo conforme
grandes.
nos acercamos al anestro.

26. Es recomendado realizar 2-3 frotis en el entorno de
4 a 7 días. Como rutina se recomienda comenzar a
realizar el frotis al cuarto día de que la perra es
identificada en celo (presencia de descarga vaginal),
y luego continuar cada 48 horas realizando 3 frotis
por perra para poder observar la evolución del
epitelio vaginal y determinar claramente el momento
de comienzo del estro. Para evaluar el cambio
citológico se realizaran mas frotis.

27. Procedimiento
Sujetos experimentales
Pelusa Sol
Edad 8 años Edad:5 años
Raza: French pudle Raza: bóxer
Celo inducido Celo natural

29. Segundo dia Sol (natural)
Pelusa (inducido)
Observaciones: Observaciones:
• Glóbulos rojos •Abundantes glóbulos rojos
• Células intermedias grandes y • Células intermedias grandes y
pequeñas pequeñas
• Escasas células parabasales •Células parabasales nulas

30. Cuarto dia
Pelusa (inducido) Sol (natural)
Es
Observaciones: Observaciones:
• Eritrocitos nulos • Escasos eritrocitos
•Celulas intermedias grandes y pequeñas •Celulas intermedias grandes y pequeñas

31. Sexto dia
Pelusa (inducido) Sol (natural)
Observaciones: Observaciones:
•Celulas intermedias grandes y •Celulas intermedias grandes y
pequeñas pequeñas
•Celulas superficiales

32. Octavo dia
Pelusa (inducido) Sol (natural)
Observaciones: Observaciones:
•Celulas intermedias grandes y •Células superficiales anucleadas
pequeñas •Celulas con núcleo picnótico
•Celulas superficiles escasaz •Celulas escamosas

33. Decimo dia
Pelusa (inducido)
Observaciones:
•células superficiales anucleadas
•Celulas con núcleo picnótico
•Celulas escamosas

34. Conclusiones
 Se determinaron los cambios citológicos en las diferentes
etapas hasta llegar al estro, tales como la presencia de
eritrocitos en el proestro temprano y su disminución con el
paso de los dias; la evolución de las células que van desde
parabasales hasta las superficiales anucleadas en el estro.
 Se concluye que en términos generales el período de máxima
fertilidad en la perra coincide con la presencia de > 80% de
células superficiales queratinizadas
 La realización rutinaria de la CV permite al veterinario clínico
adquirir la experiencia necesaria para obtener
de ella los mayores beneficios.
 Si bien tradicionalmente ha sido usada para el asesoramiento
con respecto al momento de servicio, en la actualidad ha sido
reemplazada o complementada con las determinaciones
hormonales (progesterona y/o hormona luteinizante),

35. Recomendaciones
 Se recomienda fijar con alcohol de 96 grados las
muestran no menos de 10 minutos para evitar que
las células se sequen.
 Llevar las muestras con cuidado al laboratorio para
evitar daño de las placas
 No dejar más de un minuto en cada paso de
tinturacion
 Aunque sean tranquilas las perras, colocarles bozal
para evitar accidentes y que la dueña este presente
para que se sientan más tranquilas.
 Ser muy cuidadosos al tomar la muestra para no
lastimarlas.

36. Gracias por su
atención