El documento describe los esfuerzos para conservar especies animales en peligro a través de la criopreservación de semen. Se analizaron los parámetros seminales y se desarrollaron técnicas de congelación de semen para cinco especies de ungulados salvajes. Los resultados muestran que es posible criopreservar el semen de estas especies y que el semen descongelado mantiene cierta capacidad fecundante, lo que puede ayudar a los programas de reproducción en cautiverio dirigidos a la conservación de espec

1. 1.- CONSERVACIÓN ANIMAL:
Definiciones, estado y localización de los animales en peligro.
2.- Especies Salvajes:
3.- Especies Domésticas en España:
4.- BCRZ:
4.1.- Descripción del Programa GERMOBANK©
4.2.- Estructura: Pantallas y Dynalist (análisis de datos)
- Liks mas informativos.
Programas de gestión de gametos en mamíferos domésticos y salvajes

2. IUCN: Unión Internacional para la Conservación de la Naturaleza
LISTA ROJA DE LA IUCN:
- Es el inventario reconocido mundialmente sobre el estado de amenaza de las especies.
- Preparada por la Comisión de Supervivencia de Especies de la UICN, una red de más de
8.000 especialistas de todo el mundo que trabaja por la conservación de especies a nivel
mundial.
World Conservation Biology
CITES (Convención sobre el Comercio Internacional de Especies Amenazadas de
Fauna y Flora Silvestres):
- Es un acuerdo internacional entre los gobiernos.
- Su objetivo es asegurar que el comercio internacional de especímenes animales
y plantas silvestres no amenace su supervivencia.
http://www.iucn.org/es/sobre/union/secretaria/oficinas/sudamerica/sur_trabajo/sur
_especies/sur_listaroja/
http://www.iucn.org

3. Map of 595 sites of imminent species extinction (reprinted from Ricketts et al. 2005).
Yellow sites are either fully protected or partially contained within declared protected areas (n = 203 and
87, respectively)
Red sites are completely unprotected or have unknown protection status (n = 257 and 48, respectively)

4. Very Low Impact (<2.4) Medium Impact (5.7–9.0) High Impact (12–15.5)
Low Impact (2.4–5.7) Med-High Impact (9-12) Very High Impact (>15)
Global map of the cumulative human impact on marine ecosystems,
based on 20 ecosystem types and 17 different human activities.

5. CATEGORÍAS DE LA LISTA ROJA IUCN
EXTINTO (EX):
Un taxón es Extinto cuando no hay ninguna duda que el último individuo murió.
EXTINTO EN LIBERTAD (EL):
Un taxón está Extinto en el hábitat natural cuando sólo sobrevive en cultivo,
en cautiverio o como una población naturalizada.
EN PELIGRO (EP):
Un taxón está en Peligro cuando se considera en muy alto riesgo de extinción
en el hábitat natural.
VULNERABLE (VU):
Un taxón es Vulnerable cuando se considera que afronta un alto riesgo de
extinción en el hábitat natural.
MENOR PROCUPACIÓN (LC):
Un taxón es de Menor Preocupación (Interés) cuando ha sido evaluado frente a
todos los criterios y no está en peligro Crítico.

6. Reducción
Poblacional
Localización Individuos
Vulnerable ≥ 50% < 10 < 10,000
En peligro ≥ 70% 5 2,500
En peligro
Crítico
≥ 90% 1 < 250
CRITERIOS PARA ADJUDICACIÓN DE LAS
CATEGORÍAS EN LA LISTA ROJA IUCN

7. IUCN Red List assessment for all 5,487 mammal species.

8. EX EW CR EN VU NT DD LC TOTAL
CARNIVORA 5 0 8 24 39 27 19 163 285
CETARTIODACTYLA 7 2 14 46 49 26 62 123 329
PRIMATES 2 0 37 86 78 23 56 133 415
Extinct (EX). Extinct in the Wild (EW). Critically Endangered (CR). Endangered (EN).
Vulnerable (VU). Near Threatened (NT). Data Deficient (DD). Least Concern (LC).

9. 0
20
40
60
80
100
120
140
160
Carnivora Cetartiodactyla Chiroptera Diprotodontia Eulipotyphla Primates Rodentia
EXTINT
CRITICALLY ENDANGERED
ENDANGERED
VULNERABLE

10. ESTUDIO DE PARÁMETROS
SEMINALES Y
CONSERVACIÓN DE
ESPERMA EN ANIMALES
SALVAJES
INIA
Lab. de Reproducción Asistida

11. OBJETIVO:
Programas de reproducción
en cautiverio de especies en
peligro de extinción
Instauración de políticas de
manejo animal que mantengan el
potencial de recrear una
población salvaje sostenible
(Eberhard, 1995).

12. HERRAMIENTAS para la
reproducción en cautiverio:
• Conservación de semen Bancos de
germoplasma
• Inseminación artificial
• Otras técnicas de reproducción asistida:
Fertilización in vitro
Transferencia de embriones

13. • Caracterización de los
parámetros seminales de 5
especies de ungulados salvajes
• Puesta a punto de técnicas de
congelación de semen

14. Uro (Bos Primigenius)
Bisonte europeo (Bison bonasus)
IUCN: vulnerable
Cabra hispánica (Capra pyrenaica hispanica)
IUCN: en peligro
Arrui (Ammotragus lervia)
IUCN: vulnerable
Sitatunga (Tragelaphus spekei gratus)

15. OBTENCIÓN DE SEMEN:
1.- Animales vivos:
- Selección de machos a participar
- Anestesia. Mediante cerbatana o rifle
• Uro y Bisonte: Xilacina (3,6 y 8,6 mg/100Kg PV
• Arrui: Tiletamina+Zolazepan (2,5 + 2,5mg/Kg PV)
• Sitatunga y Cabra: Zoletil (5 mg/Kg PV)
- Inmovilización del animal

16. - Obtención del
eyaculado:
• Lavado e higienización
de la zona prepucial
• Vaciado de las heces
de la ampolla rectal
• Sonda de 6 cm (Uro
y Bisonte) ó 2,5 cm y
3 electrodos longitudinales

17. 2.- Animales muertos:
- Disección de testículos
y epidídimos
- Lavado retrógrado de
la porción distal de la
cola del epidídimo
desde el conducto
deferente
- Cortes en la cola del
epidídimo y dilución
en el medio de
congelación

18. PARÁMETROS SEMINALES:
- Determinación de Volumen
- Concentración espermática: recuento en
cámara (hemocitometría) previa dilución
(1:100, v:v) en glutaraldehído al 2%.
- Movilidad masal: escala 0 a 5
- Movilidad individual: porcentaje de
células móviles (0-100%) y calidad de
movimiento

19. PARÁMETROS SEMINALES:
- Grado de morfoanomalías: contraste de fases.
Inclusión de la muestra en glutaraldehído al 2%
y tinciones con Giemsa

20. - Integridad acrosómica: contraste de fases
Espz. con borde apical normal NAR
Espz. con acrosoma dañado DAR
Esperm. sin borde apical MAR
PARÁMETROS SEMINALES:

21. PARÁMETROS SEMINALES
Fijación:
Glutaraldehído al 2%
Test de endósmosis celular:
100 μL de semen en
1 mL de solución
hipoosmótica
(100 msOsm/Kg), 30´

22. - Viabilidad espermática:
Tinción con Eosina/nigrosina
PARÁMETROS SEMINALES:
Bisonte Sitatunga

23. EVALUACIÓN DE DILUYENTES
PARA LA CONGELACIÓN:
Control: TRILADYL
Test:
- TES-TRIS-glucosa, 20% yema de huevo
- Leche descremada
- Vesículas lipídicas vegetales (Bisonte y Delfin)

24. METODOLOGÍA DE CONGELACIÓN:
Adición del diluyente (200 x 106 spz/mL)
Vitrina a 5ºC, 4 horas (-0,22ºC/min)
Envasado en pajuelas 0,25 mL
Vapores de Nitrógeno líquido (5 cm, 10 min)
Inmersión en Nitrógeno y trasvase al
tanque de almacenamiento (-196ºC)

25. CAPACIDAD FECUNDANTE:
Test fertilización heteróloga: vaca o hamster
- Test de Hámster:
Superovulación de hámster doradas: eCG y HCG
Ovocitos denudados con hialuronidasa y tripsina
Co-cultivo con espermatozoides en TC-199
con 10% de FCS durante 4-5 h a 37ºC en
atmósfera de 5% de CO2
Índice de penetración % de penetración

26. RESULTADOS

27. URO (Bos primigenius)
Parámetros seminales (X ± SD)
Movilidad (%) 80.0 ± 8.9
Calidad de movimiento 3.9 ± 0.3
% Normales 90.4 ± 2.6
NAR (%) 79.5 ± 9.5
Endósmosis + (%) 87.9 ± 8.4
Viabilidad (%) 76.8 ± 6.5
- Nº animales: 1
- Ensayos: 13
- Volumen: 6.3 ± 3.0 mL
- Spz totales: 5.8 ±4.0 x 109
- Dosis: 890

28. BISONTE EUROPEO (Bison bonasus)
Parámetros seminales (X ± SD)
Movilidad (%) 83.0 ± 3.6
Calidad de movimiento 4.4 ± 0.1
% Normales 76.8 ± 2.6
NAR (%) 74.2 ± 8.6
Endósmosis + (%) 90.6 ± 8.2
Viabilidad (%) 71.4 ± 8.0
- Nº Animales : 1
- Ensayos: 5
- Volumen: 8.6 ± 1.3 mL
- Spz totales : 5.3 ±2.4 x 109
- Dosis: 481

29. BISONTE EUROPEO
(Bison bonasus)

30. Parámetros seminales (X ± SD)
Movilidad (%) 80.0 ± 7.14
Calidad de movimiento 4.1 ± 0.31
% Normales 74.1 ± 16.9
NAR (%) 86.0 ± 8.29
Endósmosis + (%) 84.1 ± 8.37
Viabilidad (%) 86.1 ± 4.41
- Nº Animales : 1
- Ensayos: 7
- Volumen: 0.33 ± 0.15 mL
- Spz Totales : 0.789 ±0.5 x 109
- Dosis: 72
CABRA HISPÁNICA (Cabra pyrenaica hispanica)

31. GUEPARDO
(Acinonyx jubatus)

32. GORILA (gorilla gorilla gorilla)

33. - Muerto el 30 de abril de
1.996 de prostatitis
- Obtención a las 4 horas de
la muerte del animal
- Hipoplasia testicular
unilateral de grado medio
- Tes-Tris glucosa 20% yema
y 6% glicerol
- 37 x 106 spz/mL
PANDA GIGANTE (Ailuropoda melanoleuca)

34. Fresco Refrigerado Descongelado
Movilidad (%) 75 60 35
Calidad movimiento 3.5 3.0 3.0
% normales 16 14 22
% GCP 18 8 14
% GCM 12 8 10
% GCD 54 70 54
NAR (%) 68 56 42
Endósmosis + (%) 86 82 72
PANDA GIGANTE (Ailuropoda melanoleuca)

35. Resultados de la triple tinción
Vivos Muertos
NAR MAR NAR MAR
33.0 0.0 25.5 41.5
PANDA GIGANTE (Ailuropoda melanoleuca)

36. % Índice
Penetración penetración
62 1.78
PANDA GIGANTE (Ailuropoda melanoleuca)
Resultados del test de hámster

37. CONGELACIÓN DE SEMEN DE EPIDÍDIMO
DE GACELA (Gazella dorcas neglecta)
- Obtención a las 4 h de
la muerte
- Tes-Tris-Glucosa, 20%
yema huevo y 6%
glicerol
- Volumen = 8 mL
- Dosis = 31

38. GACELA (Gazella dorcas neglecta)
Fresco Refrigerado Descong.
Movilidad (%) 85 70 65
Calidad movim. 3.5 3.5 3.0
% Normales 48 62 60
NAR (%) 62 62 43
Endósmosis + (%) 98 98 56
Viabilidad (%) (-) (-) 46

39. ORYX (Oryx gazella)
Fresco Refrig. Des
Movilidad (%) 60 45 20
Calidad Mov. 2.5 2.5 2.0
% Normales 15 21 30
NAR (%) 74 70 45
Endósmosis + (%) 88 66 46
Viabilidad (%) 65 37 26

40. JIRAFA (Giraffa camelopardalis Rothschildi)
Fresco Refrig. Descon
Movilidad (%) 10 5 2
Calidad Mov. 1.0 1.0 1.0
% Normales 11 22 22
NAR (%) 56 42 34
Endósmosis + (%) 79 70 61
Viabilidad (%) 67 64 61