1. Haplotipos del gen de la β-globina en pacientes
con anemia falciforme y su incidencia en la
República Dominicana.
Carlos Fdo Vergara Castillo Esp,
MSc, PhD(c)

2. Este proyecto fue desarrollado en el
Instituto de Innovación en
Biotecnología e Industria (IIBI)
Hace parte de las investigaciones
financiadas por el Ministerio de
Educación Superior, Ciencia y
Tecnología, a través del FONDOCYT.

3. Herencia de la anemia falciforme
http://www.google.com.do/imgres?q=sickl
e+cell+anemia&hl

4. Estructura proteica de la hemoglobina
http://www.ornl.gov/sci/techresources/H
uman_Genome/posters/chromosome/hbb
.shtml

6. http://www.britannica.com/EBchecked/media/160694/The-distribution-of-malaria-and-the-distribution-of-sickle-
cell

7. Numero de pacientes muestreados por ciudad.
Cuidad Hospitales No. pacientes muestreados
Santo Domingo Luis E. Aybar 144
Robert Reid Cabral
Santiago José María Cabral y Báez 61
La Vega Murillo King 19
San Francisco de Macorís San Vicente de Paul 14
Higuey Nuestra Señora de la Altagracia 11
Total 249

9. Fase de laboratorio
▫ Toma de muestra y Extracción de
ADN
 Tarjetas Watman FTA
 Frotis bucal.
• Análisis SNP basado en PCR.

11. A
A
T
A
517pb
267pb
T
A
A
A

12. Gel de agarosa al 2%. Confirmación de diagnostico de pacientes falcémicos y
portadores. Se observa claramente la separación de los fragmentos de 517
pb y de 267 pb, lo que permite identificar individuos homocigotos y
heterocigotos para la mutación.

13. Restricción enzimática
Dirección Posición
Enzimas de restricción Secuencias de marcadores
HindII 5' a ε 5' TCTCTGTTTGATGACAAATTC f 18652–18672
5' AGTCATTGGTCAAGGCTGACC r 19391–19411
XmnI 5' a Gγ 5' AACTGTTGCTTTATAGGATTTT f 33862–33883
5' AGGAGCTTATTGATAACCTCAGAC r 34495–34518
HindIII dentro de IVS II Gγ 5' AGTGCTGCAAGAAGAACAACTACC f 35677–35700
5' CTCTGCATCATGGGCAGTGAGCTC r 35981–36004
HindIII dentro de IVS II Aγ 5' ATGCTGCTAATGCTTCATTAC f 40357–40377
5' TCATGTGTGATCTCTCAGCAG r 40971–40991
HindII 3' a ψβ 5' GTACTCATACTTTAAGTCCTAACT f 49559–49582
5' TAAGCAAGATTATTTCTGGTCTCT r 50448–50471
AvaII dentro de IVS II β 5' GTGGTCTACCCTTGGACCCAGAGG f 62416–62439
5' TTCGTCTGTTTCCCATTCTAAACT r 62720–62743

14. Mapa de restriccion de cluster del gen de
B-globina
Ubicación de las seis regiones de restricción para cuatro enzimas
del cluster del gen de la beta-globina.ddd

15. Gel de agarosa al 2% donde se muestra el corte enzimático para un grupo de
pacientes con HindII para ε.

16. Haplotipo Configuración de corte
Árabe-indio (+ + + - + +)
Benín (- - - - + +)
Camerún (+ + + - + +)
Senegal (- + + - + +)
Bantú-CAR (- - + - - +)
Bantú A1 (- - - - - +)
Bantú A2 (+ - - - - +)
Bantú A2a (+ - - - - -)
Bantú A4 (- + + - + -)
Bantú A6 (- - + + - +)

17. Sitios de restricción
Haplotipos ε γG γA ψβ 3´ψβ 5´β N %
Árabe-indio + + + - + + 8 7.55
Benín - - - - + + 31 29.2
Bantú-CAR - - + - - + 1 0.943
Bantú A1 - - - - - + 18 17.0
Bantú A2 + - - - - + 8 7.55
Bantú A4 - + + - + - 1 0.943
Bantú A6 - - + + - + 3 2.83
Camerún - - + + + + 7 6.6
Senegal - + + - + + 9 8.49
Atípico 13 - - + - + + 20 18.9
Definición de haplotipos y frecuencias haplotípicas significativas

18. 1 2 3 4 5
1 0.00000
2 0.10803 0.00000
3 -0.03019 0.01633 0.00000
4 0.00331 -0.01276 -0.05820 0.00000
5 0.02321 0.09831 -0.06108 0.04715 0.00000
Cálculo FST poblacional.

19. Distancia genética de Reynolds, Weir y Cockerham
1 2 3 4 5
1 -0.00000
2 0.11432 -0.00000
3 0 0.01646 -0.00000
4 0.00331 0 0 -0.00000
5 0.02348 0.10348 0 0.04829 -0.00000
Distancia genética de Slatkin.
1 2 3 4 5
1 0.00000
2 0.12111 0.00000
3 0 0.01660 0.00000
4 0.00332 0 0 0.00000
5 0.02376 0.10902 0 0.04948 0.00000

20. Representación haplotípica en el continente africano (Tomado de Rodriguez y
col, 1998)

21. Haplotipos
Población N Bantú-CAR Benín Senegal Camerún Otros
207 31* 31 9 7 0.0
Rep. Dominicana1
20 60.0 10.0 30.0 0.0 0.0
Afro-Brasileños2
42 54.8 45.2 0.0 0.0 0.0
Salvador3
160 48.2 45.6 0.6 0.0 5.6
Salvador 4
61 11.5 49.2 13.1 13.1 13.1
Canadá5
371 19.1 55.3 15.1 3.5 7.0
U.S.5
244 9.8 75.4 2.9 2.1 9.8
Jamaica6
77 29.9 53.2 2.6 2.6 11.7
Surinam5
252 11.5 77.0 8.7 2.8 0.0
Guadalupe7
198 41.0 51.0 8.0 0.0 0.0
Cuba8
37 78.8 18.2 0.0 0.0 3.0
México9
176 32.4 51.1 14.2 2.3 0.0
Venezuela10
90 43.4 51.1 3.3 0.0 2.2
Venezuela11
42 50.0 35.7 2.4 0.0 11.9
Venezuela12
92 55.5 34.8 4.3 5.4 0.0
Colombia13
Distribución de frecuencias haplotípicas en las Américas (Tomado de Cardoso y col,
2006).

22. A ustedes, por su amable
atención