informativo

1. TRANSFERENCIA DE
EMBRIONES EN BOVINOS
Dennis J Espinoza
BIOTECNOLOGÍAS REPRODUCTIVAS
Dr. Manuel Quezada
UNL 2020

2. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
La técnica del transplante
de embriones es un
sistema que involucra
varios métodos y buenos
conocimientos de
reproducción, con el objeto
de pasar embriones de un
animal a otro, buscando el
aprovechamiento genético
de un animal de
características superiores
llamado donador.

3. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
Si se logra alterar el ciclo
estral con hormonoterapia;
se lograra ovarios que
produzcan y liberen varios
óvulos en el mismo lapso
de tiempo (superovulación),
posteriormente se sacan y
se pasan a otros animales
que se encargará del
sustento del óvulo durante
toda la gestación.

4. VENTAJAS
● Obtención de una descendencia genéticamente
superior.
● Disminución del riesgo de contagio de
enfermedades infecciosas.
● Mejoramiento genético de un grupo de animales a
corto plazo.
● Multiplicación de las características de una hembra
genéticamente superior.
● Rescate genético de animales incapaces de realizar
la cópula natural.
● Movimiento nacional e internacional de animales de
alto valor genético (importación y exportación)

5. DESVENTAJAS
● Requiere de técnicas avanzadas y
complejas, la experiencia es
clave
● Mayor costo comparado a la
inseminación y de baja eficiencia
● Las donadoras y receptoras deben
ser animales reproductivamente
sanos
● Las donadoras deben ser de
calidad superior (la TE por sí
misma no mejora la calidad
genética)

6. Parámetros para un programa de T.E
1. Vacas donadoras
(selección, inseminación,
cuidado).
2. Vacas receptoras
(selección, tratamiento y
cuidados)
3. Embriones
(recolección,manejo,
evaluación, congelación,
implante y microcirugía
opcional)

7. HEMBRAS DONANTES (selección)
No se deben anotar en el programa embriones de vacas regulares, sino de buena
genetica y productivamente, además de tener en cuenta otros aspectos como:
● Buen manifiesto reproductivo al
ciclar
● Mostrar celo regularmente cada
18-21 días
● No haber presentado
enfermedades, anomalías o
deformaciones serias, en su
tracto reproductivo
principalmente
● Dar negativo a los exámenes de
brucelosis-leptospirosis y demás
enfermedades reproductivas

8. SELECCIÓN DE RECEPTORAS (selección)
La receptora debe ser un animal
con buen comportamiento
reproductivo, pues debe tener
ciclos regulares cada 18-21 días,
debe estar negativa a las
enfermedades reproductivas como
brucelosis-trichomoniasis, etc.
Preferiblemente debe tener un
buen tamaño y amplitud pélvica y
un útero con más de 60 días de
descanso después del parto y
obviamente un buen estado
nutricional y sanitario.

9. SUPEROVULACIÓN (donadoras)
El fin es mantener altos niveles de
FSH, para la estimulación de
varios folículos en los 2 ovarios.
Se utiliza FSH-P de origen
porcino se utiliza de 35-50 mg. En
dosis de 5mg, 2 veces al día
durante 5 días.
La pg2& de la aplica el día 13 del
ciclo de donadora, para producir
celo a las 48 horas, la FSH-P se
aplicará desde el día 10 del ciclo
hasta el 14.

10. SINCRONIZACIÓN DE RECEPTORAS
● Si se utiliza el implante de oreja,
este debe retirarse 48 horas antes
de que la donadora entre en calor.
● La usar PG2&, la dosis de la
receptora debe aplicarse más o
menos 24 horas antes que la dosis
de la donadora.
● La iny de PG2& debe ser puesta a
las receptoras, el dia 12 del ciclo de
la donadora entre las 10am-12pm
para así aproximar lo máximo
posible los celos entre donadora y
receptora

11. TÉCNICA DE RECOLECCIÓN DE EMBRIONES
Realizado el chequeo de todo el equipo. El veterinario se coloca
el guante desechable, le aplica lubricante, e introduce su mano
en el recto. Debe despejar todo el material fecal del tracto
rectal.
Coloca la anestesia epidural. Luego introduce su mano y coge
el cérvix para dirigir el dilatador con la mano derecha el cual va
a despejar el camino para la sonda. Se hace pasar la sonda por
el cuello uterino y se ubica su extremo en la bifurcación de los 2
cuernos, a partir de este punto decidimos en la entrada de qué
cuerno ubicamos la baloneta desde donde se podrá lavar.

12. Practica de la vía 1, o via del aire
Ubicado el extremo de la sonda, en el cual
se encuentra la baloneta, el ayudante
toma la jeringa de aire y va aplicando
dosis de 5 cc de, el Vet debe controlar que
la boloneta se infle en el interior del
cuerno. El ayudante cierra el clamper o
seguro de aire. Una vez dispuesta la
boloneta, queda listo el cuerno para recibir
el medio preparado: se acerca una mesa
en donde colocamos el baño maría con los
dos botellones, uno contiene 1000 cc de
medio preparado y el otro vacío, recibirá el
medio que ha lavado el cuerno.

13. Práctica de la vía 2, o vía de embriones
La segunda vía consiste en una sonda
delgada, plástica, transparente, que se
desplaza por el interior de la zona metálica
comunicando el extremo o fondo de cada
cuerno uterino con el botellón que se
encuentra en este momento vacío. Luego
se debe desenroscar la sonda y dejar libre
el conducto plástico para empujarlo hacia el
interior del cuerno. El extremo de la sonda
consiste en en una cabeza telescopica
metalica, con pequeños orificios que
absorben el medio con los embriones y los
conduce al botellón de recuperación.

14. Practica de vía 3, o de alimentacion del medio de
lavado
1. Abrir el clamper que una la jeringa con el botellon
2. Cerrar el otro clamper que esta al otro lado de la jeringa, en
el tramo entre esta y la sonda metalica.
3. Llenar la jeringa con liquido de lavado
4. Cerrar el primer clamper para evitar que el liquido se
decuelva al botellón.
5. Esperar la orden del veterinario para abrir el segundo
clamper. si todo esta listo se abre el clamper entre la jeringa y
la sonda.
6. Se explusa en medio de lavado contenido en la jeringa, en
forma lenta y en dosis de 40.60 ml, siguiendo la graduación
de la jeringa.
7. Cierra el clamper 2 entre jeringa y la sonda. Asi evitamos que
el medio se vuelva

15. MANIPULACIÓN DE LOS EMBRIONES
El botellon con el contenido se deja reposar por 30
minutos, para que los embriones se sedimenten en
el fondo. Se coloca en frasco de contenido sobre
otro vacio a 10-20 cm con el fin de hacer sifon. Se
conecta una pequeña manguera entre ellos
permitiendo que se trasvase hasta dejar unos 50 ml.
Se toman las petri cuadriculadas y se desocupa el
frasco con los embriones. Se llevas a la lupa
esteroscopica y se colocan las cajas petri en la
platina con calefacción a 32 °C para inciar la
busqueda de embriones cuadro por cuadro. A
medida que siendo hallados los embriones, se
toman con micropipetas y se pasan a las cajas de
cultivo con tapa, estas cajas deben contener medio
de cultivo enrriquecido con suero fetal bovino en
una cantidad 10 o 20%

16. EVALUACIÓN Y SELECCIÓN DE EMBRIONES
La calidad embrionaria basada en la integridad morfológica de los embriones es de tipo numérico. Los códigos de
calidad embrionaria varían de 1 a 4.
1. Excelente.- Excelente, el desarrollo corresponde al día de la recolección. No existen defectos visibles. Los
blastómeros son claramente visibles, de color y estructura uniformes, simétricos, de forma esferoide y la zona
pelúcida está intacta
2. Bueno.- irregularidades moderadas en cuanto al aspecto, forma, tamaño, color y densidad de las células. Al
menos el 50% del material celular deberá encontrarse intacto y corresponde a una masa embrionaria viable.
3. Regular.- irregularidades mayores en la forma y tamaño de la masa embrionaria, así como en el tamaño, color y
densidad de células individuales. Al menos el 25% del material celular deberá encontrarse intacto y corresponde
a una masa embrionaria viable.
4. Malo (muerto o degenerado).- embrión, ovocito y embriones de 1 célula degenerados, no viables (PELÁEZ,
2011).

18. CONSERVACIÓN DE EMBRIONES
Los embriones se montan en la pajilla a una temperatura de
20°C, se colocan en la rampa de congelación y se cierra la
tapa del congelador de embriones, se deja descender la
temperatura hasta -7°C a un ritmo de 5°C por minuto. Al
llegar a los -7°C la congelación se ha realizado por acción
de los vapores de nitrógeno se destapa del congelador y se
hace el seeding, que consiste en aplicar sobre las pijillas
una especie de T invertida que ha estado sumergida en el
nitrógeno líquido. Aplicado el seeding se cierra la tapa
suavemente y se dejan congelar los embriones a una
temperatura de -30°C, a un ritmo de 0.3°C por minuto.

19. DESCONGELACIÓN DE EMBRIONES
Una congelación lenta hasta -30° debe estar asociada a una velocidad de
descongelación muy rápida (2000 °C/mnt), con el fin de evitar la
recristalización.
El calentamiento se consigue introduciendo la pajuela congelada en agua a
37° durante algunos minutos. Seguidamente vamos a eliminar el
crioprotector antes de la transferencia, que consiste en utilizar las
propiedades de un medio de sucrosa, que no penetra en la célula, pero
aumenta la presión osmótica del medio y favorece la dilución pasiva del
glicerol del blastocisto. El embrión ya puede ser transferido en el útero de la
receptora mediante catéter de implantación especial para embriones
(Reguedera Verdejo, 1991).

20. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES RECEPTORAS
Colocación del embrión: para el implante del embrión se utiliza una pistola
miniaturizada, muy parecida a la de inseminación. Se aplicará anestesia epidural.
El embrión por lo general se coloca en el cuerno ipsilateral al cuerpo lúteo, en el
primer tercio, aunque también es viable colocarlo más profundo.
El mejor momento para realizar la transferencia es entre el séptimo y octavo día
después del estro.
Transcurridos 45 días se hace el diagnóstico de preñez y a los 90 días se verifica
la evolución de la gestación.

21. bibliografía
Brito, B. (2012). MANEJO DE RECEPTORAS EN PROGRAMAS DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES A TIEMPO FIJO.
Obtenido de https://dspace.ucuenca.edu.ec/bitstream/123456789/428/1/TESIS.pdf
Cabodevila, J. (n.d.). CONSERVACION DE LOS EMBRIONES. www.reprobiotec.com
Cabrera, P., & Fernández, A. (2006). Criopreservación de Embriones: una herramienta básica en la Reproducción Asistida.
García, D. (2015). TRANSFERENCIA DE EMBRIONES EN FRESCO, EN VACONAS LECHERAS, UTILIZANDO DOS
PROTOCOLOS HORMONALES DE INSEMINACIÓN ARTIFICIAL A TIEMPO FIJO, ADICIONANDO eCG Y SIN
ADICIONAR eCG. Obtenido de http://200.12.169.19/bitstream/25000/10224/1/T-UCE-0014-024.pdf
García, P., Quintela, L., Becerra, J., & Peña, A. (2017). La transferencia de embriones en bovinos. Obtenido de
https://www.historiaveterinaria.org/noticias/la-transferencia-de-embriones-en-bovinos_455.htm
Gonzales, E., & Mendoza, I. (2017). DOS PROTOCOLOS DE SUPEROVULACIÓN Y SU EFECTO EN DONANTES DE
EMBRIONES EN VACAS MESTIZAS DE LECHE EN EL TRÓPICO. Obtenido de
http://repositorio.espam.edu.ec/bitstream/42000/7