transferencia de embriones

1. Estudiante: Cobeñas Gisbert
DOCENTE: Dr. Manuel Quezada
CICLO: IX “A”

2. HISTORIA
 El primer embrión bovino fue extraído por Hartman, Lewis, Miller y Swett en 1930
en el Carnegie Laboratory of Embryology de Baltimore.
 1970 el avance fue lento, con muchas ideas que terminaron en el fracaso.
 Con el surgimiento de métodos no quirúrgicos mediante los esfuerzos de Elsden,
 Hasler, Seidel y otros, el uso comercial de la transferencia de embriones tuvo auge.
En el año 2002, se registraron más de 25.000 terneros nacidos tras transferencias
de embriones en los Estados Unidos (Filipiak, 2011).

3. TRANSPLANTE DE EMBRIONES
Técnica para el mejoramiento genético que consiste en recoger los embriones de una
hembra donante y transferirlos al útero de unas hembras receptoras

4. DONADORAS
 Son vacas élite, son las donaras de genetica.

5. PROCESO DE SELECCIÓN
 Edad
 Estado fisiológico
 Sanidad
 Condición corporal
 Fenotipo
 Evaluación genética

6. SUPEROVULACIÓN
 Superovulación = mayor cantidad de óvulos, que puede así llegar a los 10 ó 12
 La vaca es una especie monótoca, por lo que si el óvulo que produce en cada ciclo
estral queda fecundado pasaría a producir un ternero al año.
 (MOET): varios embriones por ciclo

8. Dia Hora Tratamiento Foll-tropin
0 dispositivo P4 + 50mg P4+ 2.5 mg EB
4 6:00 hs 4ml
18:00 hs 4ml
5 6:00 hs 3ml
18:00 hs 3ml
6 6:00 hs PGF (2cc. ciclase) 2ml
18:00 hs PGF (2cc. ciclase) 2ml
7 6:00 hs 200 UI eCg 1ml
18:00 hs retirar implante 200 UI eCg 1ml
8 6:00 hs 5ml fertagyl(GnRH )
18:00 hs 1ra. inseminación
9 6:00 hs 2da. inseminación
15 10:00 hs colecta de embriones

9. Dia Hora Tratamiento Foll-tropin
0 Implante liberador de progestinas (CIDRB o Crestar), 5 mg de estradiol-17β (E-17β), y 100 mg de
progesterona (P4)
4 6:00 hs 4ml
18:00 hs 4ml
5 6:00 hs 3ml
18:00 hs 3ml
6 6:00 hs PGF (2cc. ciclase) 2ml
18:00 hs PGF (2cc. ciclase)
Retirar Implante 2ml
7 6:00 hs 1ml
18:00 hs 1ml
8 6:00 hs
18:00 hs 1ra. Inseminación
9 6:00 hs 2da. inseminación
15 10:00 hs colecta de embriones

10. INSEMINACION
 Inseminar de dos a tres veces con un intervalo de 12 horas.
 7 a 8 días más tarde estos oocitos o embriones son recuperados desde el útero de
la donante.

12. COLECTA
 Después del proceso de superovulación al día 15 o 16 se realiza la colecta para lo
cual primero se debe realizar un chequeo ginecológico para de esta manera
determinar cuántos cuerpos lúteos hay en cada ovario.

13. MATERIALES lidocaína
 Catéter de 52cm de silicona.
 Fiador de 60cm.
 Una llave de tres o dos vías, con un extremo adaptado al catéter de recolección y
los otros dos conectados a canales de entrada y salida del líquido de recolección.
 Dos jeringas de 15 ml, dos de 20 ml, dos de 25 ml y dos de 30 ml.
 Filtro de recogida de embriones.
 Dilatador cervical.
 Líquido PBS para la colecta.

14. PROCEDIMIENTO
 Inmovilizar al animal
 anestesia epidural 6ml para bajar las contracciones rectales,
 Lavar y desinfecta la región perivulvar.
 determina por vía rectal el tamaño de los ovarios ·#CL.
 Introducir un dilatador cervical hasta el cuerpo del útero

15.  Se realiza la recolección simultánea nivel del llenado del globo de 5 ml (úteros
pequeños y para grandes 30 ml)
 El globo se va inflando poco a poco con solución salina -fisiológica hasta que
quede ajustado para que el medio no se escape entre la pared del útero y el globo;
una vez terminada la recolección en un cuerno se repite la operación en el otro
con sonda nueva.

16.  Para la recolección se colocan en una botella estéril de 600 a 1,000 ml la solución
de Dulbecco o de Hartmann, conectada a una manguera de drenaje, esta
manguera se conecta a la sonda de Foley con un conector en forma deY, a este se
le coloca otra manguera que va a un filtro concentrador de embriones, cuya malla
tiene poros con diámetro de 75 micras y ahí se detienen los embriones y partículas
mayores a ese diámetro; después se abre el seguro de la manguera de salida para
que el medio con los embriones salga hacia el filtro.
 Procurar mantener en el filtro concentrador un nivel de 50 a 100 ml para evitar
deshidratación de embriones

18. EVALUACIÓN DE EMBRIONES
Fase de desarrollo según el tiempo pasado desde la ovulación, y el estado general
de estos.
La “Sociedad Internacional de Transferencia de Embriones”(IETS) ha establecido
ciertos grados atendiendo a:
 forma y tamaño de los embriones y los blastómeros;
 Color,
 textura del citoplasma
 presencia de vesículas en este; existencia o ausencia de células anómalas y
regularidad de la zona pelúcida

19. CLASIFICACIÓN SEGÚN EL ESTADO DE
DESARROLLO
 Sin fecundar.
 2-12 células.
 Mórula joven.
 Mórula compacta.
 Blastocisto joven.
 Blastocisto.
 Blastocisto expandido.
 Blastocisto eclosionado.
 Blastocisto expandido eclosionado. Los estadíos del 1 al 6 mantienen un diámetro que ronda
los 150- 190μm con una zona pelúcida de 12-15μm. Los
estadíos del 7 al 9 son 1,5-1,9 veces más grandes que los
anteriores por el aumento del volumen del blastocele.

20. CLASIFICACIÓN POR CALIDAD
Código Estado Conservación
1 excelentes y buenos para congelar
2 regulares no se congela
3 malos no sirve
4 no fecundado/ degenerados no sirve

21. LAVADO DE EMBRIONES
 La zona pelúcida es esencial para el mantenimiento del embrión. Es muy
importante eliminar cualquier impureza que pueda quedar de la recolección

22. Con el objetivo de asegurar la salubridad de los embriones recolectados, el manual
de la IETS establece un protocolo de lavado. Este proceso consiste en:
 Cinco lavados de solución salina, PBS, antibióticos (suelen ser gentamicina y
kanamicina) y Albúmina Sérica Bovina (BSA-V).
 Se añaden dos gotas de una solución de tripsina al 25% (pH 7,6- 7,8) durante 60-90
seg.
 Se vuelve a lavar otras cinco veces, esta vez con una solución de PBS, antibióticos y
un 2% de suero.
 La sustitución de la BSA-V por el suero en este segundo lavado nos asegura la
inactivación total de la tripsina, por lo que no será perjudicial para el embrión.

23. CRIOPRESERVACIÓN DE
EMBRIONES
Básicamente, la criopreservación embrionaria contempla cuatro etapas:
a) suspensión de los embriones en soluciones a la que se les ha adicionado
crioprotectores,
b) enfriamiento en condiciones tales que eviten la formación de cristales
intracelulares cuando se sumergen en nitrógeno liquido (-196 ºC),
c) entibiamiento de los embriones a temperaturas fisiológicas para reasumir las
funciones y,
d) remoción de los crioprotectores (dependiendo del criopreservante del que se
trate

24. CRIOPROTECTORES
Existen muchos tipos de crioprotectores, que se
agrupan según la posibilidad de penetración o no
de las membranas celulares. Así los
crioprotectores permeables más utilizados:
Glicerol, Dimetil sulfoxido (DMSO),Etilenglicol,
1,2 Propanediol.
Los crioprotectores no permeables (que no
atraviesan la membrana) másutilizadosson:
Sacarosa, Dextranos, Polivinil pirrolidona (PVP).

25. DESCONGELACIÓN
 Baño Maria a 20-37ºC durante 20-30 segundos.
 Inmediatamente de realizada la descongelación, el crioprotector debe ser retirado
del embrión para evitar el shock osmótico.
 Un protocolo típico de descongelación incluye mantener las pajuelas durante 5 a
10 segundos en el aire (lo que evita que se rompa la zona pelúcida) y luego
sumergirlas en agua a 25-37ºC hasta que el hielo este completamente derretido en
aproximadamente 30 segundos.
 La descongelación completamente al aire resulta en una reducción de la viabilidad
embrionaria, mientras que la descongelación directamente en agua resulta en una
alta incidencia de fracturas de la zona pelúcida.

26. RECEPTORAS
 No aportan nada genéticamente dentro del proceso de la transferencia,
 Sirven como recipientes para llevar a término los embriones.
 Tienen que estar libres de enfermedades reproductivas, y ser candidatas a buenas
madres porque van a tener que amamantar y destetar después a los terneros.

27. PROCESO DE SELECCION
Las hembras receptoras deben cumplir:
 No presentar enfermedades hereditarias.
 Tener un excelente historial reproductivo y de salud.
 Alto valor en el mercado.
 Ciclos estrales regulares.
 No tener enfermedades que afecten la fertilidad.
 No ser demasiado viejas.

28. PROTOCOLO
Lo importante de todos los protocolos de sincronización es buscar que la vaca receptora y la donante
se encuentren en el mismo momento del ciclo estral, ya que la aceptación del embrión por parte de la
receptora tan solo tiene lugar si la sincronización de esta no supera +/- 1 día a la donante.

29. PROCESO DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES.
 Anestecia epidural en la hembra receptora si esta es muy nerviosa
 A la hora de realizar la transferencia a la hembra receptora es muy importante
ecografiar
 Con la zona perineal lavada, se introducirá la vaina de inseminar con la pajuela
que contiene el embrión deseado, y una vez pase el cérvix se llevará hasta el
cuerno elegido para depositar la dosis en la curvatura anatómica que este realiza,
asegurando que el orificio de salida no queda obstruido por la pared del cuerno.

31. VENTAJAS
 Incrementar la producción de hembras genéticamente superior
 Recuperación genética de animales accidentados o enfermos de los que pudieran
obtenerse embriones antes de que el animal muera
 Control y prevención de enfermedades infecciosas
 Importacion y exportacion
 Maximiza el uso del semen

32. DESVENTAJAS
 Costos operacionales
 Entrenamiento de los técnicos e instalaciones
 Falta de predicción de resultados: número de embriones transferibles por vaca y
número de gestaciones
 Tiene un porcentaje de supervivencia entre el 50 y 60 %

33. Terminada la transferencia
 Evitar que la receptora sufra el menor estrés posible
 A los 30 días se hace una primera ecografía para detectar las preñeces
 A los 90 días se vuelve a chequear preñeces para dar un diagnóstico final de
preñez.