2. ¿QUE ES ?
La transferencia de embriones es una
técnica mediante la cual, los embriones
(óvulos fertilizados) son colectados del
cuerno uterino de una hembra donadora
antes de la nidación y transferidos al
cuerno uterino de unas hembras
receptoras en las que se completara la
gestación.
3. 1949 Primera transferencia de un embrión en
borregos y cabras.
Historia
1973 Primera transferencia de embriones en bovinos.
4. VENTAJAS Y DESVENTAJAS
Es necesario recalcar que de 100 vacas transferidas en fresco el %
de preñez oscila entre el 50 y 60 % y cuando son embriones
congelados se habla de 40-50 %
VENTAJAS DESVENTAJAS
• Intensidad de selección de
hembras.
• Aumento de progreso genético.
• Acortamiento de intervalo
generacional.
• Estimación del efecto materno.
• Importación y exportación del
material genético.
• Congelación del material
genético.
• Es relativamente costosa y de
baja eficiencia ( Requiere de
tiempo)
• Las donadoras y receptoras
deben ser animales
reproductivamente sanos
• Las donadoras deben ser de
calidad superior (la TE por sí
misma no mejora la calidad
genética)
• Puede crear una saturación del
mercado (y por lo tanto disminuir
los precios del ganado
genéticamente superior).
5. SELECCIÓN DE DONANTES
Criterios para selección de
donante
1. Haber presentado ciclos regulares desde temprana
edad.
2. No requerir más de dos servicios por concepción.
3. No presentar defectos de conformación o
genéticos detectables.
4. Tener de 3- 10 años de edad.
5. Debe tener un promedio de día entre calores entre
17 y 24 días.
6. No deben existir alteraciones en su aparato
reproductor. (quistes, adherencias, infecciones,
etc.)
7. Las vacas deben ser de alto valor genético.
8. Deben ser animales libres de parásitos internos y
externos.
9. Buena condición corporal de 3 – 3,5 en escala del 1
al 5.
IMPORTANTE
Un animal donante para la transferencia de
embriones se determina por su valor genético y
su capacidad para lograr un alto nivel de
resultado.
6. TRATAMIENTO DE SUPEROVULACIÓN
IMPORTANTE
Entre las gonadotrofinas utilizadas
para promover la superovulación se
destacan la gonadotrofina cariónica
equina (eCG o pmsg) y la FSH.
La eCG
Permite conseguir una respuesta superovulatoria
con apenas una dosis, entre los días 8 y 12 del ciclo
estral, pero, por tener una mayor vida media en la
sangre (más de diez días), resulta en prolongada
estimulada del crecimiento folicular
FSH
Debido a la media vida corta de la fsh
(aproximadamente 5 a 12 horas), es
preciso realizar múltiples aplicaciones
intramusculares para conseguir el efecto
de superovulación en las hembras bovinas.
Los protocolos más comunes requieren seis a ocho aplicaciones de
fsh con intervalos de doce horas, a fin de que varios folículos se
desarrollen y pueda ocurrir una ovulación múltiple.
7. Protocolo hormonal para Receptoras
BE (benzoato de estradiol), P4 (progesterona), PGF2α (prostaglandina F2α; cloprostenol sódico), eCG (gonadotropina
coriónica equina), GnRH (hormona liberadora de gonadotropinas; acetato de buserelina) y TETF (transferencia de
embriones a tiempo fijo).
8. SELECCIÓN DE VACAS RECEPTORAS
Criterios para selección de una
Receptora
1. Son ideales los animales jóvenes, bien
conformados, hembras multíparas o
lactantes energéticamente equilibradas.
2. Por lo menos debe observarse un ciclo estral
normal con anterioridad para que una
hembra sea seleccionada como receptora.
3. El estado de salud es importante para el
éxito de la transferencia de embriones.
4. una buena receptora es la hembra capaz de
recibir un embrión y llevarlo a término.
5. Deben ser de un tamaño apropiado para
parir con seguridad al (feto).
6. Novillas con buen desarrollo corporal (340-
350 kg).
9. SINCRONIZACIÓN DE CELO DE RECEPTORAS
IMPORTANTE
Se debe tomar principalmente en
cuenta la sincronización de las vacas
donadoras si va a ser Transferencia de
Embriones en fresco y también cuando
los embriones van a ser congelados.
Transferencia de
Embriones es en
fresco
Cuando el embrión
es congelado
Las receptoras al momento de sincronizar deben
estar en celo el mismo día que las donadoras,
para que al momento de transferir coincida la
misma secuencia de ovulación y favorecer la
preñez haya sido transferido el embrión.
Las vacas receptoras se sincronizan
solo para que entren en celo y
esperar 7 días para transferir el
embrión
10. Recolección o lavado de embriones:
• Se realiza al día 7 después de la primera I.A. de la vaca donadora, mediante un lavado
uterino transcervical.
• Se puede encontrar embriones en estadios de mórula y blastocisto, estadios más
estables, hace posible que sean transferidos directamente (transferencia en fresco) o que
resistan a actividades como la congelación y micromanipulación.
11. Materiales:
Circuito de lavado
Sonda Foley (Con estilete o
mandril)
Medio de lavado (PBS)
Dilatador de cérvix
Guantes de
palpación
ginecológica
Filtro de recolección
Jeringas
Lidocaína al 2%
13. Se limpia y desinfecta la región
perineal y vulvar
14. dilatación del cérvix para facilitar el paso de la
sonda, esto se realiza con el dilatador de cérvix.
Se introduce un brazo por vía rectal y con el
otro se introduce la sonda Foley (con el estilete
o mandril) vía vaginal, se pasa el cérvix
15. Se infla el balón o globo con 10 -15
ml de aire o de solución salina o PBS
Se procede a introducir el medio de
lavado
16. El líquido debe ser colectado y pasa a
través de un filtro en donde van a ser
colectados los embriones.
Finalizada la recolección de embriones,
desinflar el globo y extraer la sonda.
17. Circuito cerrado con flujo continuo
Con este método se emplean catéteres de 3 vías,
rígidos o flexibles.
1era vía, es destinada a la inyección del medio para el
lavado.
2da vía, se inyecta aire o medio para llenar el balón.
3era vía, se recolecta la solución de lavado con los
embriones
18. Circuito abierto con flujo discontinuo
Inyección y recolección con una jeringa
Tipos de lavado uterino:
El medio se inyecta y recolecta por la misma vía y con
la misma jeringa, se utilizan 2 jeringas de 15ml, 2
jeringas de 20ml, 2 jeringas de 25ml y 2 jeringas de
30ml, estas jeringas son especiales para lavar
embriones, en esta técnica se descarga un volumen de
medio (PBS) fijado por el operador.
19. Laboratorio:
Los filtros que fueron utilizados para
el lavado son llevados al laboratorio
para luego trasladar los embriones
atrapados a las placas de petri
La persona encargada de realizar la
selección o búsqueda de los
embriones utiliza un microscopio y
una placa de petri grande
cuadriculada
20. LLENADO DE LA PAJILLAS DE
EMBRIONES
Antes del llenado de las
pajillas, los embriones deben
estar en una solución
comercial llamada Vigro
Holding Plus
Primero se llena de solución
de Vigro Holding, luego un
espacio de aire; en el
siguiente espacio deberá ir el
embrión en la solución
(porción media de la pajilla),
seguido de un espacio de aire
y al final la solución.
Al finalizar el llenado, se debe
sellar la pajilla al extremo
donde no se encuentra el
algodón dentro de la pajilla
con la máquina selladora por
calor, teniendo el cuidado de
no dañarlo
21. PREPARACIÓN DEL EQUIPO DE
CONGELACIÓN
Se utiliza alcohol etílico al 70% para
el proceso de congelado ya que su
punto de congelamiento es a -50°C.
Debe tener un punto de partida donde se
empieza a congelar las pajillas y un punto final
Punto de partida -0.60°C Punto final -
34.0°C
CRISTALIZACIÓN
Para cristalizar el medio que está dentro de las
pajillas hay que colocarlas en el equipo de
congelamiento a -0.60°C de 2 a 3 minutos.
Tener lista una barra de cobre dentro del
tanque de nitrógeno líquido, la cual se usará
para frotar o pasarla por las pajillas que están
dentro del equipo y favorecer la cristalización.
El proceso del congelamiento tarda alrededor de una hora
22. DESCONGELACIÓN DE LOS EMBRIONES
Se debe hacer lo más rápido posible
en agua a 37°C.
Esto se logra lavando 4 o 6 veces sucesivas
en soluciones de concentración decreciente
del crioprotector.
Los que son aptos para la transferencia se
colocan en pajillas de 0.5 o 0.25 ml y se
transfieren directamente.