Aspectos generales sobre la replicacion del ADN.
El modelo aceptado en la actualidad es el semiconservativo.
Se necesita de una cadena original y una cadena hija.
Las Polimerasas son las responsables del trabajo, la helicasa es la que rompe los puentes de hidrógeno.
La ORC es la directora de todas las enzimas.
1. Univ. Fiorella Aline.
Replicación [Libro base: Robertis]
- Posee el modelosemiconservativo
Cadenamolde:laoriginal
Cadenahija:lacopia [se vanagregandolosnucleótidoslibresenel núcleosegúnlanecesidadde la
copia].Puede ser:
- Continua
- Discontinua
Grosor del ADN:2 nm
Cadena continua
Es la que se acerca a la horquilla
1 lugar:se rompenlospuentesde hidrogeno,esteprocesoesmediadoporlaenzimahelicasa,
despuésel DNA se desenrollaentre las2cadenas.
Las proteínasenlazantesacadenasSSB evitanque las cadenasse vuelvanaunir,estocrea múltiples
burbujasde replicaciónalolargo del DNA.Al extremode laburbujase ladenominahorquillade
replicación.
Una vez que lascadenasesténseparadas,laDNA polimerasapuedecomenzaraincluirunanueva
cadena.
DNA Polimerasa:nopone el primernucleótido,nopuede iniciarunanuevacadenasolamente puede
colocar nucleótidosenunacadenapreexistente,laDNA-primasacolocalosprimerosnucleótidosen
la nuevacadena,proporcionaunextremo3’libre ycuandose tiene ese extremolibre actualaDNA
polimerasa.El cebadoresARN.La DNA polimerasaconstruye endirección5’-3’
Un tipodiferente de DNA polimerasareemplazaal cebador[DNA- primasa] porDNA.
Se necesitaunsolocebador
ADN polimerasaIIIδañade los nucleótidos.
Cadena discontinua
Es la que se alejade la horquilla,yaque se sintetizade formaopuesta
1 lugar: RNA Primasa,adhiere al cebadorenel extremo3’,entonceslaDNA polimerasacomienzaa
sintetizarlanuevacadena[estose vuelvearepetir]
Tramos discontinuos=Fragmentosde Okazaki
Una DNA polimerasadiferente cambiael cebadorde RNA porDNA
En cada Fragmentode okazaki se necesitaunnuevocebador[100 fragmentosde okazaki =100
cebadores]
2. Univ. Fiorella Aline.
El fragmentode okazaki se formapor ADN pol III α [1500 bpen procariotasy 200 en eucariotas]
Ligación:ADN ligasa,enlace fosfodiester
TERMINACION=cuandolas burbujascolisionanunasconotras.
Proceso General
1 . ABRIR
Se desenrollael ADN cuandovienelaORC
ORC: buscael origende replicaciónARS yluegose le une,reclutaa otras proteínas:helicasa,SSB.
2. ARMAR EL CEBADOR
3. ELONGAR LA CADENA
DNA polimerasasintetizaendirección5’-->3’,solamenteenese sentidoyusalacadena 3’-->5’ para
aparear.
Ejemplo:
3’ TATAAT 5’
DNA polimerasa
5’ ATATTAT 3’
DNA polimerasa
Una burbujatiene 2 horquillas,2continuasy2 discontinuas.
Replisoma
Formadapor:
Dimerode ADN pol III
Primosoma[helicasa,primasa]
Topoisomerasas
- TipoI: ADN yARN [rompe unacadena]
- TipoII o girasa:solamente hayenel ADN [rompe las2 cadenas].Sufuncióneslarelajación
del superenrollamientodelante de lahorquilla.
El repliconestodalaburbuja
SSB y abrazaderaestándetrásde la horquila
HelicasaytopoisomerasaIestándelante de lahorquilla
Para que ocurra la replicaciónlaciclinaG1+Cdk2 =SPF,estooriginala replicación
Replicaciondel ADN mitocondrial esunidireccional.
SecuenciaSar: hace que se sujete al eje de H1 cuandose formanlosbuclesolazos
3. Univ. Fiorella Aline.
Funcionesdel ORC:
Es necesarioparala activaciónde la replicación
Evitaque el ADN se redupliqueenfase G2
Es la “directora”de las proteínasporque lasreclutaal iniciode la fase S para unirse después
a la ARS que estaenlosorígenesde replicación.
Función de la abrazadera:
Impide el desprendimientode laenzimaperonosu deslizamiento
Construcciónde nucleosomas:
H3 Y H4: se liganentre si mediante laproteínaN1 y entregadasal ADN por el completoproteico
CAF-1
H2A Y H2B: se liganpor la nucleoplasmina,luegose juntanconlasdemásycompletanel octamero
Helicasa: gasta 2 ATP con cada par de basesque va rompiendo
Polimerasas del DNA
Son enzimasque catalizanlareacciónde replicación. Nose mueven.
PolimerasaI:
Catalizael crecimientode lacadenaendirección5’ --> 3’ [rellenaespaciosdejadosenlacadena
retrazaday sustituye al cebador.
ADN polimerasaβenambas cadenas.
PolimerasaII:
Posiblemente interviene enlareparacióndel ADN dañado.
PolimerasaIII:
Cadenacontinua:poli δ
Cadenadiscontinua:poli α
Replicacióndel ADN,síntesisde las2 cadenas,lamayor parte.