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DEL GEN A LA PROTEÍNA. EXPRESIÓN GÉNICA. ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
EXPERIMENTO DE   FREDERICK GRIFFITH. EXPERIMENTO DE TRANSFORMACIÓN (1928 ) La bacteria  Streptococcus pneumoniae  provoca neumonía humana y suele ser letal para los ratones. Griffith utilizó dos cepas: un  tipo virulento  normal  (S)  y otro mutante  no virulento ( R ).
EXPERIMENTO DE OSWALD AVERY, COLIN MACLEOD, Y MACLYN MCCARTY (1944 ). Estos tres investigadores retomaron el experimento de Griffith. Separaron los distintos tipos demoléculas que se encuentran en las células S muertas y estudiaron su capacidad de transformación por separado. Llegaron a la conclusión de que el factor transformante de las células R era el ADN. ,[object Object],[object Object],[object Object]
EXPERIMENTO DE  ALFRED D. HERSHEY Y MARTHA CHASE (1952) (I) .   ,[object Object],[object Object],[object Object]
EXPERIMENTO DE  ALFRED D. HERSHEY Y MARTHA CHASE (1952) (II) .
EXPERIMENTO DE  ALFRED D. HERSHEY Y MARTHA CHASE (1952) (III) .   Con fagos P32, casi toda la radiactividad terminaba en las bacterias: el ADN viral entraba en las células. Con fagos S35 la radiactividad aparecía en las cápsulas: la cápsula no entraba en la célula.
Definitivamente, el ADN era la molécula hereditaria.
 
 
LA TRANSCRIPCIÓN. DEL ADN AL ARNm
 
La ARN-polimerasa se une a una secuencia llamada  promotor  que normalmente está delante de la secuencia que especifica el RNA. El primer nucleótido que está e el RNA (incluido en el promotor) es el +1 y todas las bases se toman desde ese punto de referencia, delante - y detrás +. El resto del promotor no se transcribe.  CARACTERÍSTICAS IMPORTANTES DE LOS GENES PARA LA TRANSCRIPCIÓN.
TRANSCRIPCIÓN EN PROCARIOTAS ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],ARN POLIMERASA PROCARIOTA Sólo hay una forma   2  ‘   formada por cadenas polipeptídicas (holoenzima). Se separa cuando el enzima trabaja.    se une a elementos reguladores,    tiene el centro activo,   ‘  permite unirse al molde, en esa unión participa    que es importante para reconocer al promotor.
RNA-POLIMERASAS EUCARIOTAS ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Está formada por varias subunidades, por lo que hay varias clases de RNA polimerasa. Seleccionan los nucleótidos según el molde y forma enlace fosfodiéster. Primero localiza el promotor y luego se suelta para dejar el RNA libre. Las ARN polimerasas  no tienen necesidad de un cebador  para iniciar la transcripción y  son incapaces de identificar y de eliminar un nucleótido mal aparejado  dentro de una cadena en síntesis.
LOS DIRERENTES TIPOS DE ARNs ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
EL COMPLEJO ARN-POLIMERASA EUCARIOTA ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
TRANSCRIPCIÓN EN EUCARIOTAS ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
ESTRUCTURA DE UN GEN EUCARIOTA CODIFICANTE DE PROTEÍNA ,[object Object],[object Object],[object Object]
 
 
 
FORMACIÓN DEL ENLACE FOSFODIÉSTER La ARN-polimerasa cataliza la síntesis de ARN en la cadena molde de ADN. El nucleótido trifosfato precursor se aparea con el correspondiente en la cadena molde.  Se forma un enlace fosfodiéster entre la cadena de ARN en crecimiento y el precursor.
INICIO DE LA TRANSCRIPCIÓN EN LOS PROMOTORES. ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
FIN DE LA TRANSCRIPCIÓN EN LA SECUENCIA TERMINADORA.
LOS TIPOS DE ARNm: PROCARIOTA Y EUCARIOTA PROCARIOTAS La secuencia de la región codificante es colinear con la secuencia proteica. El ARNm se traduce directamente a péptido. EUCARIOTAS La secuencia de la región codificante no es colinear con el péptido a sintetizar. El ARNm debe ser procesado para eliminar fragmentos no codificantes denominados  intrones  y dejar sólo los fragmentos codificantes o  exones .
PROCESAMIENTO DEL PRE-ARNm: “SPLICING” ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],*** Volveremos más adelante sobre las modificaciones postranscripcionales.
MODIFICACIONES POSTRANSCRIPCIONALES DEL ARNm Procariotas:  no sufren procesamiento, funcionales tal y como son sintetizados. Participan en la síntesis de proteínas incluso antes de acabarse de sintetizar. ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
EL OPERÓN LAC: UN EJEMPLO DE REGULACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN EN PROCARIOTAS (I). ¿Cómo regula una célula todos sus genes? El control de la expresión génica es fundamental para un organismo: cada grupo celular reprime unos genes y expresa otros. El sistema que vamos a analizar es el del metabolismo de la lactosa en   E. coli . La figura adjunta presenta un modelo físico de control de las enzimas que actúan en el metabolismo de la lactosa. ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],EL SEGMENTO  POZYA  DE LA FIGURA CONSTITUYE UN  OPERÓN  O UNIDAD GENÉTICA DE EXPRESIÓN COORDINADA. lacZ lacY lacA lacI
EL OPERÓN LAC: UN EJEMPLO DE REGULACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN EN PROCARIOTAS (II). ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
TABLA DE COMPARACIÓN ENTRE PROCARIONTES Y EUCARIONTES EN LA TRANSCRIPCIÓN DE ADN.   Atrás CARACTERÍSTICA  PROCARIONTE EUCARIONTE Cistrón Policistrones Monocistrones RNA polimerasa una sola, con 5 subunidades distintas 3 ARN polimerasas Estabilización El ARN recien transcrito, no tiene. Contiene, al comienzo de la cadena, 7-metil-guanosina o CAP, y al final de la cadena, una secuencia poli A Comienzo ARN pol, se autoacopla al promotor ARN pol, necesita la presencia de proteínas de iniciación, que se unan antes que ella al ADN. Intrones No tiene Tiene y se eliminan con splicings Lugar de acción Inmediatamente, al ser creado En el citoplasma.
TEST DE CONCEPTOS ,[object Object],[object Object]
LA TRADUCCIÓN: DEL ARNm AL PÉPTIDO
EL CÓDIGO GENÉTICO El lenguaje genético consta de las cuatro bases nitrogenadas, que se agrupan en tripletes. Por tanto, son posible 4 3  = 64 tripletes diferentes. Cada triplete viene a codificar un aminoácido, y es por esto que se dice que este  código genético  está  degenerado , pues existen más tripletes de los necesario: 64 tripletes para 20 aminoácidos.
 
TRADUCCIÓN EN CÉLULAS EUCARIOTAS. VISIÓN GENERAL.
COMPONENTES MOLECULARES DE LA TRADUCCIÓN. 1. ARNm . Su lectura comienza en el extremo 5’, con un triplete iniciador AUG próximo a la caperuza 5’.  Este triplete va precedido de la secuencia AGGAGG ( secuencia de Shine-Dalgarno  ) que es la zona de unión con el ribosoma. 2. Ribosomas.  En eucariotas, la subunidad pesada es 60S y contiene ARNr 28S, 5.8S, y 5S, además de cerca de 50 proteínas ribosomales.. La subunidad pequeña es 40S y contiene ARNr 18S y cerca de 30 proteínas.  3. ARN transferente (ARNt),  con un extremo 3’- CCA de unión al aminoácido, y con una zona de unión complementaria al  codón  de ARNm denominada  anticodón . En ambos casos se trata de tripletes de bases nitrogenadas. Una enzima denominada ARNt-aminoacil-sintetasa une el aminoácido correspondiente a su ARNt en función de su anticodón.
ETAPAS EN LA TRADUCCIÓN ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
1.  INICIACIÓN . ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
2.  ELONGACIÓN . ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
3.  TERMINACIÓN . Tres codones especiales:  UAG, UAA y UGA . Una vez que el último resto carboxílico se ha unido a la cadena polipeptídica, esta cadena todavía se encuentra unida al ARNt en el centro A. La liberación del polipéptido es mediada por tres  factores de liberación  ( R1, R2 y R3 ). Se unen al ribosoma para provocar un desplazamiento del peptidil-ARNt desde el centro A al P. El enlace éster entre el ARNt y el péptido se hidroliza. Una vez liberado el polipéptido, el último ARNt y el ARNm abandonan el ribosoma. El ribosoma 70S libre se disocia en sus dos subunidades, proceso que requiere de uno de los factores de iniciación, pudiendo iniciarse un nuevo proceso de síntesis.
LOS POLISOMAS
 
 
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Transcripcion traduccion

  • 1.
  • 2. EXPERIMENTO DE FREDERICK GRIFFITH. EXPERIMENTO DE TRANSFORMACIÓN (1928 ) La bacteria Streptococcus pneumoniae provoca neumonía humana y suele ser letal para los ratones. Griffith utilizó dos cepas: un tipo virulento normal (S) y otro mutante no virulento ( R ).
  • 3.
  • 4.
  • 5. EXPERIMENTO DE ALFRED D. HERSHEY Y MARTHA CHASE (1952) (II) .
  • 6. EXPERIMENTO DE ALFRED D. HERSHEY Y MARTHA CHASE (1952) (III) . Con fagos P32, casi toda la radiactividad terminaba en las bacterias: el ADN viral entraba en las células. Con fagos S35 la radiactividad aparecía en las cápsulas: la cápsula no entraba en la célula.
  • 7. Definitivamente, el ADN era la molécula hereditaria.
  • 8.  
  • 9.  
  • 10. LA TRANSCRIPCIÓN. DEL ADN AL ARNm
  • 11.  
  • 12. La ARN-polimerasa se une a una secuencia llamada promotor que normalmente está delante de la secuencia que especifica el RNA. El primer nucleótido que está e el RNA (incluido en el promotor) es el +1 y todas las bases se toman desde ese punto de referencia, delante - y detrás +. El resto del promotor no se transcribe. CARACTERÍSTICAS IMPORTANTES DE LOS GENES PARA LA TRANSCRIPCIÓN.
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  • 22. FORMACIÓN DEL ENLACE FOSFODIÉSTER La ARN-polimerasa cataliza la síntesis de ARN en la cadena molde de ADN. El nucleótido trifosfato precursor se aparea con el correspondiente en la cadena molde. Se forma un enlace fosfodiéster entre la cadena de ARN en crecimiento y el precursor.
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  • 24. FIN DE LA TRANSCRIPCIÓN EN LA SECUENCIA TERMINADORA.
  • 25. LOS TIPOS DE ARNm: PROCARIOTA Y EUCARIOTA PROCARIOTAS La secuencia de la región codificante es colinear con la secuencia proteica. El ARNm se traduce directamente a péptido. EUCARIOTAS La secuencia de la región codificante no es colinear con el péptido a sintetizar. El ARNm debe ser procesado para eliminar fragmentos no codificantes denominados intrones y dejar sólo los fragmentos codificantes o exones .
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  • 30. TABLA DE COMPARACIÓN ENTRE PROCARIONTES Y EUCARIONTES EN LA TRANSCRIPCIÓN DE ADN.   Atrás CARACTERÍSTICA PROCARIONTE EUCARIONTE Cistrón Policistrones Monocistrones RNA polimerasa una sola, con 5 subunidades distintas 3 ARN polimerasas Estabilización El ARN recien transcrito, no tiene. Contiene, al comienzo de la cadena, 7-metil-guanosina o CAP, y al final de la cadena, una secuencia poli A Comienzo ARN pol, se autoacopla al promotor ARN pol, necesita la presencia de proteínas de iniciación, que se unan antes que ella al ADN. Intrones No tiene Tiene y se eliminan con splicings Lugar de acción Inmediatamente, al ser creado En el citoplasma.
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  • 32. LA TRADUCCIÓN: DEL ARNm AL PÉPTIDO
  • 33. EL CÓDIGO GENÉTICO El lenguaje genético consta de las cuatro bases nitrogenadas, que se agrupan en tripletes. Por tanto, son posible 4 3 = 64 tripletes diferentes. Cada triplete viene a codificar un aminoácido, y es por esto que se dice que este código genético está degenerado , pues existen más tripletes de los necesario: 64 tripletes para 20 aminoácidos.
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  • 35. TRADUCCIÓN EN CÉLULAS EUCARIOTAS. VISIÓN GENERAL.
  • 36. COMPONENTES MOLECULARES DE LA TRADUCCIÓN. 1. ARNm . Su lectura comienza en el extremo 5’, con un triplete iniciador AUG próximo a la caperuza 5’. Este triplete va precedido de la secuencia AGGAGG ( secuencia de Shine-Dalgarno ) que es la zona de unión con el ribosoma. 2. Ribosomas. En eucariotas, la subunidad pesada es 60S y contiene ARNr 28S, 5.8S, y 5S, además de cerca de 50 proteínas ribosomales.. La subunidad pequeña es 40S y contiene ARNr 18S y cerca de 30 proteínas. 3. ARN transferente (ARNt), con un extremo 3’- CCA de unión al aminoácido, y con una zona de unión complementaria al codón de ARNm denominada anticodón . En ambos casos se trata de tripletes de bases nitrogenadas. Una enzima denominada ARNt-aminoacil-sintetasa une el aminoácido correspondiente a su ARNt en función de su anticodón.
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  • 40. 3. TERMINACIÓN . Tres codones especiales: UAG, UAA y UGA . Una vez que el último resto carboxílico se ha unido a la cadena polipeptídica, esta cadena todavía se encuentra unida al ARNt en el centro A. La liberación del polipéptido es mediada por tres factores de liberación ( R1, R2 y R3 ). Se unen al ribosoma para provocar un desplazamiento del peptidil-ARNt desde el centro A al P. El enlace éster entre el ARNt y el péptido se hidroliza. Una vez liberado el polipéptido, el último ARNt y el ARNm abandonan el ribosoma. El ribosoma 70S libre se disocia en sus dos subunidades, proceso que requiere de uno de los factores de iniciación, pudiendo iniciarse un nuevo proceso de síntesis.
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