1. ESCUELA DE CIENCIAS AGRÍCOLAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE
Gestión Tecnológica Agropecuaria
Unidad 2. Técnicas moleculares básicas para el
estudio de la Biotecnología
Octubre de 2016
Luzdary Salamanca Zúñiga – CC. 34.567.668
Grupo 4
2. 1. Hibridación de ácidos nucleicos (Secuenciación,
Southern, Western y Northern-blot).
Imagen tomada de: https://www.google.com.co/search?q=hibridaci%C3%B3n&biw=1024&bih=530&tbm=isch&tbo=u&source=univ&sa=
X&sqi=2&ved=0ahUKEwja97HBnobQAhUE6iYKHVOXBA0QsAQIVA&dpr=1.25
3. • Es la construcción artificial de
ácidos nucleicos bicatenarios a
partir de dos monocatenarios
usando la complementariedad de
bases.
• Se trata, por tanto, de un proceso
de unión de dos cadenas
complementarias de ADN, ARN o
de ADN y ARN para formar una
molécula de ácido nucleico de
doble cadena.
• Es un método muy versátil que
permite estudiar el grado de
relación genética entre dos ácidos
nucleicos.Imagen tomada de: https://www.google.com.co/search?q=
hibridaci%C3%B3n&biw=1024&bih=530&tbm=isch&tbo=u&source=univ&sa=
X&sqi=2&ved=0ahUKEwja97HBnobQAhUE6iYKHVOXBA0QsAQIVA&dpr=1.25
4. Es útil para saber el contenido de las
bases de un ADN o conocer a partir de
una secuencia como será la cadena
complementaria.
Imagen tomada de
https://www.google.com.co/search?q=Complementariedad+(secuenc
ia+de+bases):&biw=1024&bih=530&tbm=isch&tbo=u&source=univ&sa=
X&ved=0ahUKEwjXio_MmYbQAhUE7WMKHSSbDCcQsAQIIA#imgrc=shJD
8g8sQIm_RM%3A
5. La temperatura elevada rompe los puentes
de hidrógeno y separa las hebras del ADN
(desnaturalización). Esto ocurre alrededor de
los 90º (temperatura de fusión). Cuando una
solución de DNA que ha sido calentada se
enfría lentamente se produce la
rehibridación dando lugar a la estructura
inicial. Tal reasociación ocurre sólo si las
secuencias de bases son complementarias. Por
lo tanto, la hibridación permite la
formación de complejos bicatenarios no
naturales de DNA:DNA y ADN:ARN.
Imagen tomada de
https://www.google.com.co/search?q=Complementariedad+(secuenc
ia+de+bases):&biw=1024&bih=530&tbm=isch&tbo=u&source=univ&sa=
X&ved=0ahUKEwjXio_MmYbQAhUE7WMKHSSbDCcQsAQIIA#imgrc=shJD
8g8sQIm_RM%3A
6. El pH alto (pH>11) rompe los puentes
de hidrógeno, por lo que se produce
desnaturalización. Esto también
pueden producirlo agentes químicos
como la urea y la formamida e incluso el
agua destilada, que impide la
neutralización de los grupos fosfato de
la molécula por sales de sodio y
magnesio; al ser los grupos fosfato de
marcado carácter negativo, su repulsión
causa la separación física de las hebras y,
por tanto, su desnaturalización.
Imagen tomada de
https://www.google.com.co/search?q=Complementariedad+(secuenc
ia+de+bases):&biw=1024&bih=530&tbm=isch&tbo=u&source=univ&sa=
X&ved=0ahUKEwjXio_MmYbQAhUE7WMKHSSbDCcQsAQIIA#imgrc=shJD
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8. 1.1.
Es un método de
biología molecular
que permite detectar
la presencia de una
secuencia de ADN en
una mezcla compleja
de este ácido
nucleico.
Imagen tomada de:
https://www.google.com.co/search?q=southern+blot&biw=1024&bih=530&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0ahUKEwjXpqKTpobQAhWBUyYKHe9WAec
Q_AUICCgB#imgrc=y8z0aPRo1ZYfWM%3A
9. 1.2.
Es una técnica de separación de
ARN. Gracias a ella podemos a
partir de una muestra
biológica, de cualquier
organismo, podemos aislar un
ARN en particular si conocemos
al menos parte de su
secuencia. Además permite
separar los ARN dependiendo
de su tamaño.
Imagen tomada de:
https://www.google.com.co/search?q=Northern+blot&biw=1024&bih=530&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0ahUKEwil1fuXp4bQAhWHVyYKHbDlB3wQ
_AUIBigB#imgrc=qXQk_spJuwv9yM%3A
10. CGH Es una técnica útil en la
aproximación diagnóstica de
los niños con retraso global del
desarrollo y del fenotipo
dismórfico y permite una mayor
detección de alteraciones
comparada con el cariotipo.
Imagen tomada de: http://www.taper.es/hibridacion-genomica-comparada-cgh/
11. Son una técnica que se emplea
para compar la expresión
génica diferencial bajo dos
condiciones distintas, como
puede ser comparar la
expresión génica en células
normales con células
cancerígenas. Se basa en la
capacidad de hibridación entre
moléculas de ADN
complementarias entre sí.
Imagen tomada de:
https://www.google.com.co/search?q=Microarrays+de+ADN&biw=1024&bih=530&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0ahUKEwjykev1robQAhWF8CYKHQy
kDogQ_AUIBigB&dpr=1.25#imgrc=jNgwd6uukKuGqM%3A
12. Es una técnica de hibridación que se
realiza directamente sobre tejido,
células o cromosomas localizados
sobre un soporte sólido,
habitualmente un portaobjetos.
Está basada en la capacidad que poseen
los ácidos nucleicos para hibridarse
entre sí, es decir, la existencia de
determinada secuencia de ADN o ARN,
que resulta complementaria con otra
secuencia.
Imagen tomada de:
https://www.google.com.co/search?q=Hibridaci%C3%B3n+in+situ&biw=1024&bih=530&tbm=isch&tbo=u&source=univ&sa=X&ved=0ahUKEwjskNvor4bQAh
WG5CYKHYTKAEAQsAQIUQ#imgrc=MV3Gh4GiEkZlPM%3A
13. BIBLIOGRAFÍA
https://www.google.com.co/search?q=Complementariedad+(secuencia+de+bases):&
biw=1024&bih=530&tbm=isch&tbo=u&source=univ&sa=X&ved=0ahUKEwjXio_MmYbQA
hUE7WMKHSSbDCcQsAQIIA#imgrc=shJD8g8sQIm_RM%3A
Contreras, Ramon. (2014). Técnicas en Biología. Recuperado de:
http://biologia.laguia2000.com/tecnicas-en-biologia/northern-blot
,
Clavijo Hurtado, Sergio Alejandro. (2013). Universidad del Rosario. Uso de la
hibridación genómica comparativa-array (hgc-a) en pacientes con retraso global del
desarrollo y fenotipo. Recuperado de de:
http://repository.urosario.edu.co/bitstream/handle/10336/4219/80873230-
2013.pdf;jsessionid=0E476337358F83DE00B2CBC1EAEA7E22?sequence=1
Pedro L. Fernández Ruiz. Universidad de Barcelona . Hibridación de ácidos
nucleicos (consultado el 21 de mayo de 2015). Recuperado de
http://www.seap.es/c/document_library/get_file?uuid=dd48aeb8-9e38-4541-bcfb-
d75fd6b2ee9f
http://noticiasbiociencias.blogspot.com.co/2011/12/nociones-de-biologia-que-son-
los.html