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Bit cora proyecto ruda
- 1. En este documentose encuentra todo el proceso investigativo, metodológico y de análisis en el trabajo del proyecto de investigación escolar, para la formación de un Shampoo Natural antipulgas para perros a base de RUDA. Bitácora de investigación Shampoo Natural para perros a base de Ruda Yizel Herrera Zapata Lorena Giraldo Gallego Sorlady Atehortua Osorio
- 2. 18 de abril3 a 4:30 Ruda recolectada a las 6:30 am, sin raíz; trasladada al laboratorio a temperatura ambiente Pesaje del material: 0,45 Kg Determinación del porcentaje de humedad en balanza humidimétrica: se tomaron 3 gramos de muestra con flores, tallos y hojas %Hd= 63,65% Observación: A altas temperaturas se volatilizan algunos compuestos de la ruda por lo que pierde su aroma El material se llevó al horno para deshidratación a 40ºC x 48 horas Peso del material deshidratado: 109 gramos %Hd=4,85% Rendimiento= 109g /450 g = 24,22% 2 de mayo 3 -5:30 Información de compuestos insecticidas y componentes del champú Preparación de exposición feria de la ciencia 9 de mayo 3 – 6:15 Extractos a trabajar: Material fresco: Extracción acuosa Extracción alcohólica Material seco: Extracción alcohólica Extracción acuosa: Se tomaron 131 gr de ruda fresca con tallo, hojas y flores; se realizó disminución de tamaño de partícula con bisturí y tijeras. Se llevó a licuadora industrial con los siguientes materiales: -500 ml de agua destilada -2,5 ml de tween 20 (grado proteómico); que equivale al 0,5% Se licuó el material y se evidenció un aumento de la temperatura el cual no se midió Posteriormente se pasó a un beaker, se observaron diferentes fases y se adicionó ácido cítrico. -0,2125 g de ácido cítrico (Tomado de tesis donde adicionan 0,425 g para 1 litro de champú) Se cubrió el recipiente con papel de aluminio y se llevó a refrigeración
- 3. Extracción alcohólica: Se tomaron175 gramos de material fresco con tallos, hojas y flores. Se disminuyó el tamaño de partícula con tijera y se maceró en un mortero.Se llevó a beaker para adicionar los demás componentes: -500 ml de etanol absoluto -2,5 ml de tween 20 (grado proteómica) Se cubrió el recipiente con papel de aluminio y se llevó a refrigeración Nota: No era necesario adicionar tween, pero se hizo para mantener las condiciones del ensayo iguales Extracción alcohólica con material seco: Se tomaron 101 g de material deshidratado, se disminuyó tamaño de partícula con tijera y procesador de alimentos y quedó heterogéneo (polvo y tallos). En beaker se adicionó: -500 ml de etanol absoluto -2,5 ml de tween 20 (grado proteómica) Se cubrió el recipiente con papel de aluminio y se llevó a refrigeración Nota: la cantidad de etanol utilizada cubría el material vegetal 16 de mayo 3 – 6:20 Se hizo filtración de los extractos en cedazo y posteriormente en embudo bushner con un velo o tul y se decidió cambiar a papel filtro (grade 3 hw, 5 g/m2, diámetro 90 mm, marca Boeco Germany). Se determinó el volumen de cada extracto y el pH Tipo de extracto Volumen de extractos inicial (ml) - cedazo Volumen extractos posterior a filtrado (ml) pH EFA 513 452 4,738 EFE 336 332 5,954 ESE 342 352 6,626 El material vegetal se sumergió nuevamente en etanol absoluto y se llevó a refrigeración ya que se observaba que la planta aún se conservaba muy verde. Se determinó el peso seco de cada muestra por triplicado. Para ello se pesaron cajas de Petri vacias y con una micropipeta se adicionó a cada una 1 ml de extracto. Se llevaron a una estufa a 45ºC por 48 horas y posteriormente se pesaron. Se presentan los resultados a continuación:
- 4. Extracto Muestra Peso cajade petri vacía (g) Peso de caja + 1ml de extracto Peso final (g) Diferencia entre el peso final y el peso de la caja Peso seco (promedio) Desviación estándar EFA 1a 44,573 45,403 44,584 0,011 0,01166667 0,00115471b 48,42 49,367 48,431 0,011 1c 44,17 45,155 44,183 0,013 EFE 2a 45,827 46,666 45,838 0,011 0,01166667 0,002081672b 46,611 47,38 46,621 0,01 2c 46,378 47,21 46,392 0,014 ESE 3a 39,357 40,138 39,359 0,002 0,00166667 0,000577353b 45,338 46,063 45,339 0,001 3c 37,828 38,508 37,83 0,002 Adicionalmente se tomó una fracción de papel filtro, se impregnó con el EFA y se puso con 4 pulgas en una caja de Petri. Se observó que las pulgas no tuvieron ninguna reacción. 21 de mayo 3 – 6:00 pm Cálculo de peso seco 0 0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,014 extracto acuoso material fresco extracto etanólico material fresco extracto etanólico material seco gramosdeextractos/ml Tipo de extracto peso seco
- 5. Preparación de exposiciónpara feria municipal 1 de junio 3 – 5:40 pm Se dio inicio a rotoevaporación de extractos. Para ello se usó un equipo Heidolph y se trabajaron las siguientes condiciones: -Temperatura del baño: 40ºC -Rotación: 150 rpm -Presión: 95 mbar -Tiempo: para rotoevaporar 100 ml de extracto de ruda se requieren aproximadamente 30 minutos Se pesaron los balones para muestra y solvente completamente secos. Se procedió a rotoevaporar 300 ml de EFE con las condiciones anteriormente mencionadas; cuando se notó que ya no salía etanol, se retiró el balón y se pesó con el extracto. En este caso no hubo necesidad de adicionar agua. El extracto se almacenó en refrigeración en un frasco ámbar. EFE Peso balón para muestra (g): 269 Peso balón + extracto (g): 290 Peso balón para solvente (g): 261 Peso balón + solvente (g): 491 Peso 100 ml de extracto (g): 85 Volumen de etanol recuperado (ml) 277 Peso 100 ml de extracto (g): 85 Volumen del extracto (ml) 14 Peso 100 ml de extracto (g): 86 El balón con paredes impregnadas de extracto se llevó a refrigeración, protegido de la luz. Nuevamente se filtraron los extractos con cedazo y embudo bushner: Tipo de extracto Volumen de extractos inicial (ml) - cedazo - 2ª Volumen extractos posterior a filtrado (ml)-2ª EFA N/A N/A EFE 64 60 ESE 287 284
- 6. Los 277 mlde etanol recuperado, fueron usados nuevamente para sacar más extracto del material seco. 6 de junio Se rotoevaporó 55 ml de EFE; con las mismas condiciones. El extracto impregnado en las paredes se recuperó con agua destilada (19 ml) EFE Peso balón para muestra (g): N/A Peso balón + extracto (g): 270 Peso balón para solvente (g): 260 Peso balón + solvente (g): 301 Peso 55 ml de extracto (g): 45 Volumen de etanol recuperado (ml) 54 Volumen del extracto (ml) 19 19 ml de agua destilada adicionada 8 de junio 1- 6:00 pm Se llevó a cabo nuevamente la filtración del ESE en cedazo y bushner. No se observó cambio en el volumen. Ya la ruda presentaba decoloración. Tipo de extracto Volumen de extractos inicial (ml) - cedazo - 3ª Volumen extractos posterior a filtrado (ml)-3ª EFA N/A N/A EFE N/A N/A ESE 257 257 Se rotoevaporó extracto de material seco etanólico:
- 7. ESE Peso balón paramuestra (g): 269 Peso balón + extracto (g): 270 Peso balón para solvente (g): 261 Peso balón + solvente (g): 332 Peso 100 ml de extracto (g): 81 Volumen de etanol recuperado (ml) 189 Volumen del extracto (ml) 33 30 ml de agua destilada adicionada Nota: Al material vegetal seco se le adicionó alcohol recuperado + 100 ml de alcohol absoluto. Total 289 ml En cajas de Petri de 60 mm de diámetro se hicieron ensayos con pulgas para evaluar el comportamiento frente a los mismos. Se cortó papel filtro del tamaño de la mitad de las cajas, se impregnó con 0,5 ml de cada uno de los extractos (EFA, EFE, ESE) y se llevó a cada caja encontrando lo siguiente: Extracto utilizado Nro de pulgas muertas Bioensayo 1 Bioensayo 2 EFA 1/4. 3/5. EFE 4/4. 4/4. ESE 2/4. 0/4. Agua 0/1 0 En términos generales se observó que en todos los ensayos se repelieron las pulgas, brincando a la parte superior de la caja de Petri. Pasado un tiempo las pulgas regresaron a la superficie de la caja, una vez pisaban el papel filtro con los extractos, brincaban al otro lado. En el bioensayo 2 del ESE, pasada media hora no se observó que murieran las pulgas. El mejor resultado aparentemente se logró con el EFE.