Este documento describe varias técnicas de extracción e identificación de principios activos de plantas medicinales, incluyendo extracción con solventes como éter, hexano y metanol, seguida de cromatografía y pruebas químicas. También cubre métodos para aislar aceites esenciales y compuestos solubles en agua, así como bioensayos para detectar actividad biológica. El objetivo final es elucidar las estructuras de compuestos puros y descubrir nuevos tratamientos a partir de plantas.

2. FITOQUÍMICA

3. “ TÉCNICAS DE EXTRACCIÓN E
IDENTIFICACIÓN DE
PRINCIPIOS ACTIVOS DE
PLANTAS MEDICINALES”

4. LA EXTRACCIÓN DEL MATERIAL
VEGETAL
 Se puede dividir en:
 Parte aérea
– (flores, fruto, semillas, hojas y tallo)
 Raíz
El estudio fitoquímico, puede ser de la
planta en general ó en sus respectivas partes
que la constituyen, para un mejor análisis.

5. EXTRACTO ETÉREO
 La planta seca y molida se extrae en un
Soxhlet, con éter de petróleo o hexano
durante 7 días a una temperatura de 20º-
30ºC.
Al término de éste tiempo observar
si hay un precipitado, en caso de
tenerlo, filtrar inmediatamente y
evaporar el filtrado.

6. El filtrado etéreo ya
evaporado:
1. Se refluja con metanol una hora (15ml
de metanol por cada gramo de extracto)
2. Se deja enfriar
3. Separar el insoluble
4. Pesar lo insoluble y soluble
5. Si es posible tomar el punto de fusión al
insoluble y sacar cromatografía.
6. Al soluble en metanol sacar
cromatografìa y pesarlo.

7. De 3 a 4 gramos de extracto
soluble en metanol (ya
evaporado) montarlo en una
columna empacada con sílica
gel (35-70 mesh Astm), se
requiere 20 gramos de sílica
por cada gramo de extracto.

8. Extracto etéreo o hexánico soluble en
metanol mezclado con sílica gel
Silica gel tipo 60 (35-70 mesh Astm)
Algodón

10. Empezar a eluir la columna
ELUENTE PROPORCIÓN
HEXANO
HEXANO-ACETONA 9.5 / .5
HEXANO-ACETONA 9.0 / 1.0
ACETONA
ACETONA-METANOL 9.5 / .5
ACETONA METANOL 9.0 / 1.0
METANOL
Recolectando fracciones de 125 ml

11. PRUEBAS PARA DETECTAR
TIPOS DE COMPUESTOS EN LOS
EXTRACTOS
Punto de fusión del precipitado.
Observar las cromatografìas al UV marcando
las manchas fluorescentes con un capilar.
Revelar con Yodo (revelador general)
Observar.
Revelar con cloruro de cobalto.
Revelar con: Dragendorff modificado (si la
mancha persiste más de 24 horas, es positiva
para alcaloides).
Erlich (revelador, para compuestos con anillo
furánico)

12. PRUEBAS QUÍMICAS
PRELIMINARES PARA TODO TIPO
DE EXTRACTO
 Saponinas
 Shinoda
 Taninos
 Antrona
 Nitrato de plata
 Liebermann-Burchard

13. EXTRACTO METANÓLICO
Después de haber extraído la planta con
éter o hexano se extrae ahora con metanol
durante 7 dìas, al término de este tiempo
observar si hay precipitado, en caso de
haberlo filtrar, pesar y al filtrado
evaporarlo y pesarlo.

14. Al filtrado metanólico (ya
evaporado), se extrae con
cloroformo y agua en una
proporción 3 / 1 en un embudo
de separación, agitar y dejar
reposar 20 minutos
En ocasiones se forman
tres capas, que son:

15. • Capa acuosa.-
Liofilizar, para sus pruebas químicas
preliminares.
• Capa intermedia.-
Filtrar a sequedad para sus pruebas
físicas y químicas
• Capa clorofórmica.-
Evaporar, para montarlo en la columna y
empezar a eluirla como lo descrito en el
extracto etéreo.

16. EXTRACTO ACUOSO
Después de haber extraído la planta en
Soxhlet con los solventes anteriores, toca el turno
ahora de hacer la extracción con agua (destilada),
durante 7 días.
La solución acuosa se le hace la extracción
con acetato de etilo en un embudo de separación,
para separar lo soluble e insoluble

17. A lo soluble en acetato de etilo
evaporarlo y pesar para montar
columna, empezando a eluir con
cloroformo, cloroformo-metanol 9.5 /
1.5 , 9 / 1 ......... hasta llegar a metanol.
Al insoluble (solución acuosa),
liofilizar

18. ARRASTRE POR VAPOR
Los aceites esenciales se obtienen por
éste método con planta fresca y los
componentes del aceite, se pueden
separar por medio de la columna
cromatográfica, eluyendo primero con:
 Éter de petróleo o hexano
y después se va aumentando la
polaridad.

19. El agua que quedó del arrastre por vapor se le hace la
extracción con cloroformo en un aparato líquido-líquido ,
durante 5 días a una temperatura de 30°- 40° C
El extracto clorofórmico se
evapora y es lo que se montara
en columna, eluyendo con
solventes de polaridad creciente.
Fig. 32. Extractor líquido-líquido

20. EXTRACTO METANÓLICO DIRECTO
Material
Vegetal
Metanol (Soxhlet)
Sol Metanol Ins Metanol
REFLUJO 1 hr.
Hexano
Sol Hexano Ins Hexano
Cloroformo
Sol Cloroformo Ins Cloroformo
Acetato de Etilo
Sol Acetato de Ins Acetato de
Etilo Etilo

21. LIXIVIACIÓN DE MATERIAL
VEGETAL
Es dejar el material vegetal fresco en un
recipiente (del tamaño que se requiera según la
cantidad de material vegetal) a temperatura
ambiente, durante tres dìas, con acetona, sín
ser necesario cortar en trozos dicho material.
Después de este tiempo se decanta y se
evapora la acetona.

22. BIOENSAYOS Y PRUEBAS
QUIMICAS
PRELIMINARES PARA
DETECTAR
ACTIVIDAD BIOLÓGICA EN
VARIAS PLANTAS.

23. Utilizando pequeñas cantidades de material
vegetal se pueden hacer extracciones, para
determinar mediante pruebas químicas
preliminares que tipos de compuestos puedan
contener, las diferentes plantas a examinar
Así también se obtienen pequeñas
cantidades de extracto en forma más rápida, para
realizar los bioensayos y determinar la actividad
biológica de cada una de las plantas.

24. Los compuestos puros se
someten
a diversos métodos para
elucidar su estructura.

25. Métodos
Métodos Físicos Espectroscópicos
1.- Punto de fusión. 1.- Ultravioleta.
2.-Resonancia Magnética
Nuclear.
3.-Infrarrojo.
4.- Rotación Óptica.
5.- Espectro de Masas
6.- Espectro de Difracción
de Rayos X

26. Métodos Químicos
1.- Ignición
2.- Instauraciones.- Prueba de tetranitrometano (TNM).
3.- Prueba de bromo en tetracloruro de carbono
4.- Prueba de permanganato de potasio
5.- Grupo carbonilo.- Prueba de la 2, 4-dinitrofenilhidrazina
6.- Grupo carboxilo.- Prueba de bicarbonato de sodio.
7.- Oxhidrilos fenólicos, (Taninos).- Prueba de cloruro
férrico
8.- Esteroides y triterpenos. Prueba de Liebermann-
Burchard.
9.- Saponinas
10.- Flavonoides

27. 11.- Carbohidratos.- Prueba de la Antrona
12.- Coumarinas.-
13.- Alcaloides.- Prueba de Dragendorff.
14.- Ehrlich.-
15.- Prueba de aromaticidad.-
16.- Prueba para identificar nitritos (NO2)
17.- Prueba para cloruros.-
18.- Prueba de Belstein.- (halógenos),
19.- Prueba para identificar Cianuros.-
20.- Para identificar una sal de cloruro de amonio (NH4Cl),
agregar hidróxido de sodio y tapar con papel ph idriòn y
ver los cambios;
NH4Cl + NaOH NaCl + NH4OH

28. PREPARACIÒN DE ALGUNOS
REVELADORES PARA
CROMATOGRAFÌA EN CAPA
DELGADA
1. CLORURO DE COBALTO (Revelador
general)
2. DRAGENDROFF MODIFICADO
3. EHRLICH (Para compuestos con anillo
furánico)
4. REVELADOR PARA POLIHOLES
5. MARQUIZ (Revelador de alcaloides)

29. 6. REVELADOR PARA QUINONAS
7. REVELADOR PARA SESQUITERPENLACTONAS
8. REVELADOR PARA AZÚCARES.-
9. REVELADOR PARA ACEITES ESCENCIALES.-
10. REVELADOR PARA FLAVONOIDES (SALES DE
DIAZONIO).-
11. REVELADOR PARA COMPUESTOS QUE LLEVE
EL GRUPO CETONA.-
12. REACTIVO DE KELLER – KILLIANI (Para
glicósidos cardiotónicos),

30. La naturaleza nos ofrece una gama extensa
de compuestos con actividad biológica,
muchos de ellos aún a la espera de ser
descubiertos. El uso de las plantas
medicinales, no significa que se va a eliminar
la vegetación o ir en contra de la Ecología ya
que después de ser encontrado el
componente con actividad biológica, éste
puede ser posteriormente sintetizado en los
laboratorios.

31. En algunos casos, un compuesto vegetal se
puede “copiar” en el laboratorio, es decir,
sintetizarlo completamente en grandes
cantidades, como la L Efedrina, originalmente
aislado de Ephedra distachya, que se emplea
contra el asma y la fiebre del heno.

32. Y saber que en México contamos con una
gran cantidad de especies vegetales y por
que no, también contamos con curanderos
indígenas, con grandes conocimientos que
heredaron de sus ancestros y así podríamos
aprender, a contribuir a un mejor desarrollo
social, económico y de salud para el país,
con beneficio general para la humanidad,
descubriendo y desentrañando los misterios
de las plantas medicinales.