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20/1/2016 Odontólogo Invitado ­ Carlos Bóveda Z. ­ Endodoncia ­ Caracas, Venezuela
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Invitado # 23 : (Mayo 2002)
"Efecto Citotóxico de los Cementos Selladores
Utilizados en Endodoncia Sobre el Tejido
Periapical"
por Mónica Topalian K.
Odontólogo, Universidad Central de Venezuela, 1996
Especialista en Endodoncia, U.C.V., Venezuela, 2000­2001
e­mail: cclmtopalian@hotmail.com
 
Introducción
Los objetivos principales de un tratamiento endodóntico exitoso son la limpieza y
conformación adecuadas del conducto radicular y la obturación total del espacio
preparado con un material inerte, dimensionalmente estable y biológicamente
compatible.
Una gran variedad de materiales para rellenar el sistema de conductos han sido
utilizados a través de los años. Actualmente, los métodos empleados con mayor
frecuencia en la obturación de los conductos radiculares se basan en el uso de conos
semisólidos de gutapercha como material base. Sin embargo, este material no sella el
conducto por sí solo; por ello, un cemento sellador es necesario para cubrir la
dentina y para rellenar las irregularidades y discrepancias entre el material de
obturación y las paredes del conducto logrando así el sellado.
El cemento sellador debe poseer ciertas características que son determinantes para
asegurar el éxito del tratamiento endodóntico. Debido a que el sellador estará en
contacto directo con los tejidos periapicales por un tiempo prolongado, su
biocompatibilidad es de gran importancia. La toxicidad de un sellador puede retardar
la cicatrización de los tejidos periapicales o causar una reacción tisular inflamatoria.
Actualmente, existen varios tipos de selladores endodónticos con diferentes
composiciones disponibles en el mercado. Estudios realizados tanto in vitro como in
vivo han aportado evidencias de que la mayoría de los materiales de uso común,
destinados a sellar los conductos radiculares, causan efectos citotóxicos sobre el
tejido periapical
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El potencial tóxico es particularmente mayor antes del fraguado del material,
mientras que una liberación lenta de componentes del sellador puede ocurrir durante
largos períodos dependiendo de la solubilidad del material en los fluidos tisulares y
el grado de exposición al organismo.
El objetivo de este trabajo es realizar una revisión bibliográfica sobre la
citotoxicidad de los cementos selladores utilizados en Endodoncia disponibles
actualmente.
 
Cementos Selladores
Funciones de los cementos selladores: El empleo de un sellador para obturar los
conductos radiculares es esencial para el éxito del tratamiento de conductos. No sólo
contribuye al logro del sellado apical, sino que también sirve para rellenar las
irregularidades del conducto y las discrepancias entre la pared del conducto radicular
y el material de relleno sólido 53.
Los selladores suelen proyectarse a través de los conductos accesorios o laterales y
pueden ayudar al control microbiano al expulsar los microorganismos ubicados en
las paredes del conducto radicular o en los túbulos dentinarios 53.
Los selladores se utilizan como lubricantes y ayudan al preciso asentamiento del
material de relleno sólido durante la compactación. En los conductos donde se
elimina la capa de desecho dentinario, muchos selladores demuestran un aumento de
sus propiedades adhesivas sobre la dentina, además de fluir a través de los túbulos
dentinarios limpios 40.
Requisitos de los cementos selladores: Grossman 18, en 1958, enumeró los
requisitos y características que debe poseer un cemento sellador de conductos
radiculares ideal; estos siguen vigentes hoy en día.
El cemento sellador ideal:
ccccccc 1.
Debe proporcionar adhesión entre el material y la pared del conducto al
fraguar.
2. Debe producir un sellado hermético.
3. Debe ser radiopaco para poder observarse radiográficamente.
4.
Debe poseer partículas finas de polvo que se mezclen fácilmente con el
líquido.
5. No debe encogerse al fraguar.
6. No debe pigmentar la estructura dentaria.
7.
Debe ser bacteriostático, o por lo menos no favorecer la reproducción
de bacterias.
8. Debe fraguar con lentitud para permitir un tiempo de trabajo adecuado
para la colocación del material de obturación.
9. Debe ser insoluble en fluidos bucales.
10. Debe ser bien tolerado por los tejidos periapicales.
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11. Debe ser soluble en un solvente común para retirarlo del conducto
radicular si fuese necesario.
Además se puede agregar que los cementos selladores no deben ser mutagénicos ni
carcinogénicos 32, no deben provocar una reacción inmunitaria en los tejidos, no se
debe modificar en presencia de humedad ni debe corroerse 41.
Para Pertot y col 43. un cemento sellador debe reunir varios requerimientos en cuanto
a sus características físicas; pero considera la compatibilidad del sellador con los
tejidos vivos una de sus características más importantes ya que, durante la
obturación, los cementos selladores pueden salir inadvertidamente hacia los tejidos
periapicales, causar inflamación y retardar o impedir el proceso de cicatrización.
Un sellador biocompatible no debe prevenir ni obstaculizar la reparación tisular, por
el contrario, debe ayudar o estimular la reorganización de las estructuras lesionadas
para que la reparación pueda producir el sellado biológico del ápice radicular y aislar
cuerpos extraños 58.
La combinación adecuada de eficacia selladora y biocompatibilidad de un cemento
sellador es determinante para un pronóstico favorable de la terapia endodóntica. Por
lo tanto es importante evaluar, al seleccionar el sellador endodóntico, el potencial de
producir irritación química tisular como un factor importante a tomar en cuenta
cuando se consideran las propiedades del sellador al seleccionarlo 8.
Sin embargo debe quedar claro que si un conducto radicular no ha sido limpiado y
conformado adecuadamente, las propiedades selladoras de un cemento endodóntico
no pueden mejorar los resultados del tratamiento. Además otra causa de fracaso del
tratamiento puede provenir de selladores que contienen componentes tóxicos
incluidos en su composición con el objeto de neutralizar los efectos de una
preparación biomecánica pobre 8.
 
Tipos de cementos selladores
Cementos selladores a base de óxido de zinc­eugenol.
Rickert en 1925 señaló la necesidad de utilizar un sellador unido a conos de
gutapercha como alternativa a los selladores de Cloropercha y Eucapercha de aquella
época. Este sellador se trata del cemento original de óxido de zinc modificado por
Rickert. Esta fórmula fue llamada comercialmente Cemento de Kerr® (Kerr
Manufacturing Company, Romulus, Mich. EEUU) y cumplía cabalmente con los
requisitos establecidos por Grossman, a no ser por que pigmentaba el tejido dentario
por la plata agregada para obtener radiopacidad 3.
Posteriormente Grossman recomendó el uso de un cemento a base de óxido de zinc
eugenol que no producía manchas en la estructura dentaria, como sustituto de la
fórmula de Rickert. Se conoce comercialmente como Sellador No Manchador
ProcoSol® (Proco­Sol Chemical Company, Inc., Philadelphia, Pa. EEUU), Roth
801® (Roth Drug Co., Chicago, IL. EEUU), Fill Canal® (Dermo, Rio de Janeiro,
RJ, Brazil) o Endoseal®18 (Centric, Inc. EEUU). La popularidad de este cemento
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resulta de su excelente plasticidad, consistencia, eficacia selladora y alteraciones
volumétricas pequeñas luego de fraguar 29.
El vehículo de la mezcla para estos materiales es el eugenol. El polvo contiene óxido
de zinc en finas partículas para incrementar la fluidez del cemento, es radiopaco y el
tiempo de manipulación se ajusta para permitir un adecuado tiempo de trabajo. Estos
cementos admiten a la adición de sustancias químicas, por ejemplo el
paraformaldehído por su efecto antimicrobiano, los germicidas por su acción
antiséptica y los corticosteroides contra las reacciones inflamatorias 53. Sin embargo,
los selladores que poseen un efecto antiséptico producen irritación moderada a
severa en los tejidos periapicales por lo que su uso debe ser considerado
cuidadosamente 7.
El fraguado de los cementos de óxido de zinc eugenol comprende un proceso
químico, combinado con una incrustación física del óxido de zinc en una matriz de
eugenolato de zinc. La formación del eugenolato constituye el endurecimiento del
cemento. El eugenolato de zinc tiene la desventaja de disolverse en los tejidos,
liberando eugenol y óxido de zinc; el eugenol libre siempre permanece en el sellador
y actúa como un irritante 1.
Sellador de Kerr­Pulp Canal Sealer®
Polvo
Oxido de Zinc
%
34­41,2
Plata (molecular/precipitada) 28­30
Oleorresinas 16­30
Yoduro de Timol 11­12,5
Líquido
Aceite de Clavos 78­80
Bálsamo de Canadá 20­22
ProcoSol®
Polvo
Oxido de Zinc
%
42
Resina Staybelite 27
Subcarbonato de Bismuto 18
Sulfato de Bario 18
Borato de Sodio 1
Líquido Eugenol 100
Pasta de Wach®
 
La Pasta de Wach® (Gibco Laboratories, Grand Island, NY. EEUU) es una variante
más compleja de la fórmula de óxido de zinc eugenol que surgió en 1925 y no
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obtuvo buena aceptación hasta su reintroducción en 19553. Al mezclarse se obtiene
un cemento de consistencia uniforme sin ser excesivamente espeso 22.
Polvo
Oxido de Zinc
%
61,3
Fosfato de Calcio 12,3
Subnitrato de Bismuto 21,5
Subyoduro de Bismuto 1,8
Óxido de Magnesio 3,8­5
Líquido
Bálsamo de Canadá 74­76,9
Aceite de Clavos 22­23
Creosota de Haya 2
Eucaliptol 2
TubliSeal®
Dado que el sellador para conductos radiculares de Kerr, la fórmula de Rickert,
perdió aceptación por las manchas que producía; la compañía ideó un sellador que
no mancha, el TubliSeal® (Sybron­Kerr Co., Romulus, MI. EEUU). Se comercializa
como un sistema de dos pastas, fácil de mezclar, pero tiene la desventaja de fraguar
rápidamente sobretodo en presencia de humedad 3.
Polvo
Oxido de Zinc
%
57,4­59
Oleorresinas 18,5­21,25
Trióxido de Bismuto 7,5
Yoduro de Timol 3,75­5
Aceites y ceras 10­10,1
Catalizador
Eugenol *
Resina polimerizada *
Anidalina *
* Proporciones de los componentes no indicadas por el
fabricante
Canals®
Polvo
Oxido de Zinc
%
40
Resina 30
Sulfato de Bario 15
Subcarbonato de Bismuto 15
Líquido Aceite de Clavo 92
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Aceite de Maní 8
En 1959 Sargenti y Richter introducen el N2® (AGSA, Locarno, Suiza) y en base a
esta fórmula, se han comercializado varios cementos selladores similares con un
ingrediente común: el paraformaldehido 3. Entre estos se pueden mencionar: el RC­
2B® que es el equivalente Americano del N2®, la Endomethasone® (Septodont,
Paris, Francia) y Spad®, fabricados en Europa 53.
Algunas de las combinaciones del óxido de zinc eugenol se hicieron con
formaldehído para aumentar su acción antimicrobiana. Sin embargo, se han
suscitado grandes controversias sobre el empleo de este componente ya que añade su
efecto tóxico al del eugenol sobre los tejidos periapicales 53.
 
N2® y RC­2B®
Polvo
Oxido de Zinc
%
69
Prednisolona 0,21
Hidrocortisona 1,20
Borato de Fenilmercurio 0,09
Sulfato de Bario 2
Dióxido de Titanio 2
Subnitrato de Bismuto 2
Paraformaldehído 6,50
Subcarbonato de Bismuto 5
Tetróxido de Plomo 12
Líquido
Eugenol 92
Gerandiol 8
Endomethasone®
Polvo
Oxido de Zinc
mg
417,9
Dexametasona 0,1
Acetato de Hidrocortisona 10
Diyodotimol 250
Paraformaldehído 22
Óxido de Plomo 50
Subnitrato de Bismuto *
* Proporción del componente no indicada por el fabricante
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Líquido Eugenol 100
Cloropercha®
La Cloropercha® (Moyco, Union Broach, EEUU) es otro tipo de sellador utilizado
durante muchos años. Es el resultado de mezclar gutapercha blanca con cloroformo,
lo cual permite que la gutapercha se ajuste mejor al conducto radicular, sin embargo,
la cloropecha no posee propiedades adhesivas 53.
Otra forma comercial de la gutapercha es la Kloropercha N­O® (NO Therapeutics,
Oslo, Noruega), contiene resinas y bálsamo de Canadá, por lo que posee mejores
propiedades adhesivas. Las diversas formas de Cloropercha tienen una radiopacidad
muy inferior a la de la gutapercha 53.
El problema con la mayoría de los productos de la cloropecha suele ser su
contracción durante la evaporación del cloroformo. Algunas marcas como la
Kloropercha N­O® contienen partículas de relleno, por ejemplo óxido de zinc, para
reducir la contracción y aumentar la radiopacidad 53.
Composición­Kloropercha N­O®
Polvo
Bálsamo de Canadá
%
19,6
Resina 11,8
Gutapercha 19,6
Óxido de Zinc 4
Líquido Cloroformo 100
Nogenol®/Canals­N®
El Nogenol® (Coe Mfg. Co. EEUU) y Canals­N® (Showa Yakuhin Kako Co., Ltd.,
Tokio, Japón) son cementos a base de óxido de zinc sin eugenol, que fueron ideados
para superar las características irritantes de los cementos a base de óxido de zinc
eugenol convencionales. Parece que estos selladores poseen propiedades físicas y
biológicas que los hacen favorables para su uso en Endodoncia. A pesar de ello son
pocas las investigaciones realizadas sobre estos cementos, por lo tanto, su uso está
limitado en la práctica endodóntica 11.
Nogenol®­Composición
Polvo
Oxido de Zinc
%
*
Sulfato de Bario *
Resina natural *
Ácido Salicílico *
Líquido Aceite vegetal y ácidos grasos 100
* Proporciones de los componentes no indicados por el fabricante
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Canals N® Composición
Polvo
Oxido de Zinc
%
40
Resina 30
Subcarbonato de Bismuto 15
Sulfato de Bario 15
Líquido
Ácidos grasos 50
Glicol 50
Cementos selladores a base de hidróxido de calcio
Las pastas de hidróxido de calcio se han utilizado como medicamento intraconducto
en el manejo de exudados, para tratar resorciones radiculares internas y externas,
como agente bactericida y en perforaciones de la raíz entre otras indicaciones 9.
Manhart, citado por Briseño y col 9, en 1974 propone el uso de un agente para
pulpotomías a base de hidróxido de calcio como un sellador de conductos radiculares
permanente.
Desde entonces se han comercializado varios selladores basados en hidróxido de
calcio. Ejemplos de ellos son Sealapex® (Kerr/Sybron, Romulus, MI EEUU),
Calciobiotic o CRCS® (Hygienic, Akron, OH. EEUU), Apexit® (Vivadent/Ivoclaar,
Schaan, Liechtenstein) y Sealer 26® (Dentsply Industria e Comércio Ltda.,
Petrópolis, RJ, Brazil). Estos selladores se promocionan por ejercer un efecto
terapéutico debido a su contenido de hidróxido de calcio. Sin embargo para que el
hidróxido de calcio sea eficaz, debe disociarse en ion calcio e ion hidróxido; esto
genera la preocupación de que se disuelva el contenido sólido del sellador y deje
espacios en la obturación, debilitando por tanto, el sellado del conducto radicular 54.
CRCS® ­ Calciobiotic Root Canal Sealer®
El CRCS® es un sellador de óxido de zinc eugenol al cual se le ha añadido
hidróxido de calcio por su efecto terapéutico. El CRCS® tarda tres días en fraguar
por completo en un medio seco o húmedo y presenta poca absorción de agua. Esto
significa que es muy estable, lo cual mejora su eficacia de sellado pero hace dudar de
su capacidad para estimular la formación de cemento, hueso o ambos. Si no se libera
hidróxido de calcio del cemento, no puede ejercer un efecto osteogénico 22.
Polvo
Hidróxido de Calcio
%
*
Oxido de Zinc *
Dióxido de Bismuto *
Sulfato de Bario *
Líquido
Eugenol *
Eucaliptol *
20/1/2016 Odontólogo Invitado ­ Carlos Bóveda Z. ­ Endodoncia ­ Caracas, Venezuela
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* Proporciones de los componentes no indicados por el
fabricante
Sealapex®
Es un sellador a base de hidróxido de calcio que se presenta en dos pastas, una base
y un catalizador. Una vez mezclado tarda tres semanas en alcanzar su fraguado final
en humedad al 100%. En un ambiente seco, nunca fragua. Al igual que con el
CRCS®, persiste la duda de la solubilidad de Sealapex® en los fluidos tisulares y la
liberación del ion calcio e hidróxido con su efecto terapéutico; y si es así, si esta
disolución da lugar a un sellado inadecuado 22.
Base Hidróxido de Calcio
%
25
Oxido de Zinc 6,5
Catalizador
Sulfato de Bario 18,6
Dióxido de Titanio 5,1
Estearato de Zinc 1,0
Apexit®­composición
Base
Hidróxido de Calcio
%
31,9
Oxido de Zinc 5,5
Oxido de Calcio 5,6
Dióxido de Silicona 8,1
Estearato de Zinc 2,3
Colofonia hidrogenada 31,5
Fosfato Tricálcico 4,1
Polidimetilsiloxano 2,5
Activador
Trimetilo hexandioldisalicilato 25
Carbonato de Bismuto básico 18,2
Óxido de Bismuto 18,2
Dióxido de silicona 15
1,3­butandioldisalicilato 11,4
Colofonia hidrogenada 5,4
Fosfato Tricálcico 5
Estearato de Zinc 1,4
Cementos Selladores a Base de Resina
Los cementos selladores a base de resina han sido introducidos en la práctica
endodóntica por sus características favorables, como la adhesión a la estructura
20/1/2016 Odontólogo Invitado ­ Carlos Bóveda Z. ­ Endodoncia ­ Caracas, Venezuela
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dentaria, largo tiempo de trabajo, facilidad de manipulación y buen sellado 2.
Los cementos selladores a base de resina disponibles en el mercado actualmente son:
Diaket® (ESPE/Premier, Alemania/EEUU), Lee Endofill® (Lee Pharmaceuticals, El
Monte, CA. EEUU), AH26® (DeTrey/Dentsply, Ballaigues, Suiza), Topseal®
(Dentsply/Maillefer, Ballaigues, Suiza) y AH­Plus® (DeTrey/Dentsply, Ballaigues,
Suiza) 53.
Diaket®
Es un cemento sellador a base de resina polivinílica introducido por Schmidt en
1951. Al mezclar los polímeros de vinilo con óxido de zinc y fosfato de bismuto,
forma un sellador adhesivo. El tiempo de fraguado de Diaket® puede variar desde
un par de minutos a varias horas ya que es sensible a las condiciones ambientales 8.
Polvo
Oxido de Zinc
%
98
Fosfato de Bismuto 2
2,2­Dihidroxi­5,5 diclorodifenilmetano *
Líquido
Propionilacetofenona *
Trietanolamina *
Acido Capróico *
Copolímeros de acetato de vinilo *
Cloruro de vinilo y éter isobutílico de vinilo *
*Proporciones de los componentes no indicados por el
fabricante
AH26®
AH26® es una resina epóxica introducida por Schroder en 1954, desarrollada
inicialmente para usarla como material de relleno único. Se han reportado sus buenas
propiedades fisicomecánicas como estabilidad dimensional, radiopacidad,
adhesividad, baja contracción y solubilidad, eficacia selladora y fluidez 3.
Consiste de un polvo y líquido que permite al clínico escoger la viscosidad del
material. A medida que AH26® fragua en un lapso de 24 a 36 horas, se liberan
temporalmente residuos de formaldehído, que es muy inferior a la liberación a largo
plazo de los selladores convencionales que contienen este componente en su
composición. Sin embargo, produce un efecto tóxico inicial, tanto in vitro como in
vivo 22.
Polvo
Polvo de Plata
%
10
Oxido de Bismuto 60
Hexametilenotetramina 25
Oxido de Titanio 5
Éter bisfenoldiglicidílico
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Líquido Éter bisfenoldiglicidílico 100
AH­Plus®/Topseal®
Recientemente un sustituto de AH26® comercialmente llamado AH­Plus®, fue
introducido por Dentsply/DeTrey. Según el fabricante, el nuevo producto posee las
ventajosas propiedades físicas de AH26®, pero preserva la química de las aminas
epóxicas para que el material no libere la sustancia tóxica formaldehído, mejorando
así sus propiedades biológicas 8.
AH­Plus® consiste de dos pastas, es fácil de manipular, se adapta bien a las paredes
del conducto radicular y se afirma que presenta estabilidad dimensional a largo plazo
8.
Topseal® posee la misma composición que AH­Plus®, pero es fabricado por
Dentsply/Maillefer.
Pasta Epóxica
Resina epóxica
%
*
Tungstato de Calcio *
Oxido de Zirconio *
Aerosil *
Oxido de Hierro *
Pasta Amina
Amina Adamantina *
N,N­Dibenzyl­5­oxanonano­diamina­1,9­TCD­
diamina
*
Tungstato de Calcio *
Aerosil *
Aceite de silicona *
*Proporciones de los componentes no indicados por el
fabricante
Lee Endo­Fill®
Lee Endo­Fill® es un cemento sellador a base de silicona densamente radiopaco,
presentado como una pasta y un líquido que luego de mezclarse proporciona un
tiempo de operación flexible, fácil de manipular y retirar 22.
Base
Subnitrato de bismuto
%
*
Dimetilpolisiloxano *
Ácido Undecilénico *
Alcohol Bencílico *
Sílice amorfo hidrófobo *
Tetraetilortosilicato *
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Catalizador Polidimetilsiloxano *
*Proporciones de los componentes no indicados por el
fabricante
Cementos Selladores de Ionómero de Vidrio
El cemento de ionómero de vidrio fue introducido por Wilson y Kent en 1970 como
material de restauración por su capacidad de unirse químicamente a la dentina. Pitt
Ford propuso el uso del ionómero de vidrio como sellador endodóntico en 1979,
pero fue en 1991, que el ionómero de vidrio fue introducido por primera vez como
un cemento sellador endodóntico por la compañía ESPE llamado Ketac­Endo®
(ESPE/Seefeld, Alemania). Se sugirió inicialmente que el cemento se utilice con un
cono único sin la condensación lateral convencional con la idea de disminuir la
posibilidad de crear fracturas radiculares 29.
Entre las ventajas de este material se mencionan la adhesión a la dentina, por lo que
se adapta a las paredes del conducto, radiopacidad similar al del cemento de
Grossman, contracción mínima, excelente estabilidad dimensional, buen sellado y
escasa irritación tisular 28. Sin embargo su principal desventaja es la dificultad de ser
retirado del conducto radicular en caso de ser necesario un retratamiento, ya que
hasta ahora no se conoce solvente alguno para los ionómeros de vidrio 22.
Polvo
Lantato de calcio­aluminio­fluoruro­silicato­
vítreo
%
*
Wolframito de Calcio *
Pigmentos *
Líquido
Copolímero de ácido maléico y ácido cítrico *
Ácido tartárico *
*Proporciones de los componentes no indicados por el
fabricante
 
Citotóxicidad In Vitro de los Cementos Selladores Endodónticos
La toxicidad de un cemento sellador se determina en general, utilizando un sistema
de tres pasos. Primero se evalúa el material utilizando una serie de ensayos de
citotoxicidad in vitro. Luego si se encuentra que el material no es citotóxico in vitro,
se procede al segundo paso que es la implantación subcutánea o intraósea del
material para observar la reacción tisular local. El tercer paso consiste en evaluar la
reacción in vivo del tejido contra el material estudiado sobre sujetos humanos o
animales 41,63.
La evaluación citotóxica es uno de los estudios in vitro usados más comúnmente
para determinar la biocompatibilidad de un material. Es un estudio simple, rápido y
económico que proporciona una valiosa información de los materiales que deben ser
descartados o aquellos que deben ser sometidos a más estudios 41.
20/1/2016 Odontólogo Invitado ­ Carlos Bóveda Z. ­ Endodoncia ­ Caracas, Venezuela
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Se han empleado muchos métodos para determinar la citotoxicidad de los materiales
dentales. Estos métodos consisten en observar la inhibición del crecimiento celular o
registrar el daño o muerte celular. Las pruebas de citotoxicidad usadas más
comúnmente incluyen: La técnica de extendido en agar, el método de filtro
miliporoso y la prueba de liberación de cromo radiactivo 59.
Para Toledo y col 58. la toxicidad de un sellador o sus ingredientes puede evaluarse
observando alteraciones morfológicas en cultivos celulares y analizando estos
cultivos bajo el microscopio electrónico o el microscopio electrónico de barrido. Las
alteraciones morfológicas evidencian toxicidad intra o extracelular debido a la
exposición de las células al material.
Las líneas celulares establecidas más comúnmente utilizadas son: fibroblastos
gingivales humanos, fibroblastos L929 de ratón, células epiteliales de carcinoma
cervical humano HeLa, fibroblastos de riñón de hámster BHK 21, Células de riñón
de mono VERO y células epiteliales cutáneas humanas NCTC254 45.
Estas células son escogidas para realizar los estudios in vitro sobre la citotoxicidad
de cementos selladores debido a que son fáciles de conseguir, se cultivan con
facilidad y son consistentes en cuanto a su calidad 5.
El Instituto Americano Nacional de Estandarización, La Asociación Dental
Americana, La Organización Internacional de Estandarización y La Federación
Dental Internacional han publicado lineamientos para la evaluación de materiales
que fomentan el uso de métodos in vitro. Estos lineamientos pueden ser utilizados
como pruebas filtro, minimizando así la necesidad de pruebas in vivo 41.
Los resultados de las pruebas de citotoxicidad in vitro pueden no correlacionarse con
datos in vivo. Sin embargo, si un material de estudio consistentemente induce
reacciones citotóxicas fuertes en pruebas de cultivos celulares, es muy probable que
también ejerza efectos citotóxicos sobre tejidos vivos. La reducción en el número de
pruebas sobre animales y su costo consiste en un beneficio adicional de esta manera
de abordar las pruebas de citotoxicidad 41.
Para Vajrabhaya y col 63. la evaluación citotóxica tiene la ventaja de ser una manera
rápida y económica de filtrar un gran número de materiales antes de su evaluación in
vivo. Estas pruebas proporcionan una prueba inicial de los componentes del material
estudiado que pueden causar efectos adversos en las pruebas clínicas.
Subsecuentemente, una prueba in vivo, otorga información que conlleva a un mayor
entendimiento de la respuesta general del hospedero. De cada tipo de prueba se
obtiene entonces información valiosa sobre la biocompatibilidad de los materiales
sobre las células y tejidos. Por lo tanto las pruebas in vitro deben realizarse antes que
cualquier prueba in vivo 63.
1. Técnica de extendido en agar
En esta prueba las células son cultivadas en un monoestrato confluente de células
por 24 horas. Luego de ser removidas del medio de cultivo, las células se cubren con
Medio Esencial Mínimo de Eagle (MEM) suplementado con 1% de suero de ternera,
1% de agar y coloreado con 0,01% de Solución Rojo Neutro. El material a estudiar
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es colocado en la superficie de agar y es incubado por 24 horas. Los monoestratos de
células son examinados bajo un microscopio invertido y las placas son analizadas
visualmente para determinar la presencia de lisis celular. Las células muertas pierden
la coloración de Rojo Neutro y se observa una zona clara adyacente al material
estudiado. La toxicidad del material puede ser entonces registrada de acuerdo a un
índice de lisis celular de cero a cinco 59.
Los resultados con el método de extendido en agar, dependen de la difusión de las
sustancias presentes en estos materiales, su peso molecular y su solubilidad en agua,
lo que puede influir en el grado de citotoxicidad de estos materiales 59.
Pueden existir materiales con alta toxicidad, pero baja difusibilidad que causan
menores zonas de lisis que los menos tóxicos pero con una rápida difusibilidad 59.
Mohammad y col 35. afirman que el método de extendido de agar está
particularmente indicado para evaluar cementos selladores porque, a diferencia de
los métodos que involucran el contacto material célula, el procedimiento depende de
la difusión del material a las células a través de una capa de agar, por lo que los
valores medidos por este método están en función no sólo de la citotoxicidad en sí
sino de la difusibilidad de las sustancias tóxicas provenientes del material.
Luego de 72 horas la proporción de muerte celular aumenta debido al agotamiento
del medio de cultivo, por lo que una vez transcurrido este período, las pruebas
citotóxicas no son viables. Tomando esto en cuenta, las alteraciones morfológicas en
cultivos celulares son usualmente evaluadas a las doce, veinticuatro, cuarenta y ocho
y finalmente setenta y dos horas. Estas alteraciones sugieren que los selladores
actúan a niveles enzimáticos y morfológicos en la mitocondria y retículo
endoplasmático de las células, causando modificaciones en la cadena respiratoria y
en la síntesis proteínica, que son fundamentales en el mantenimiento de la estructura
celular 58.
2. Método del filtro miliporoso
Wennberg y col 64. introducen este método en el que discos de filtro miliporoso son
colocados en discos de cultivo de tejidos y cubiertos con suspensiones de células que
contienen células epiteliales humanas, células HeLa o fibroblastos de ratas L929.
Luego de que se establece un monoestrato de células en los filtros y se remueve el
medio de cultivo, los filtros son cubiertos con Medio Esencial Mínimo de Eagle y
1,5% de agar. Se permite que el agar solidifique y se coloca el filtro de agar en un
disco de Petri que se invierte. El material de estudio es colocado sobre los filtros y se
deja actuar por dos a veinticuatro horas. La intensidad de la tinción del monoestrato
de células que evidencia la actividad succinato deshidrogenasa es usado como
indicador de vitalidad celular alrededor de los materiales estudiados 64.
El grado relativo de toxicidad del material se registra en una escala de cero a tres
indicando la extensión de la zona con actividad enzimática reducida o inhibida 59.
3. Liberación de cromo radiactivo
El método de liberación de cromo radiactivo fue introducido por Spangberg como
una herramienta para evaluar biomateriales sólidos o plásticos cuando es esencial
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que las células entren en contacto íntimo con el material a ser evaluado. Es el tercer
método más utilizado para evaluar la citotoxicidad de los materiales dentales y se ha
comprobado que es rápido y proporciona resultados confiables 42.
Para llevar a cabo el método de liberación de cromo radiactivo, se utiliza una
cantidad mínima de material radioactivo que no altera la estructura celular. La
liberación del cromo radiactivo es proporcional a la toxicidad del material estudiado
42.
En este método el material de estudio es colocado en el fondo de las láminas de
cultivo de tejidos. Luego se cubre y se inocula con células cultivadas y premarcadas
con Na51CrO4 por una a veinticuatro horas dependiendo del diseño experimental.
Luego de un período de incubación apropiado, una cantidad estandarizada (1,0 mL)
del medio de cultivo se retira de cada lámina y la cantidad de 51Cr liberado en el
medio se mide en un contador de partículas gamma 42.
La comparación entre la cantidad original de cromo radiactivo incorporado en las
células con el liberado de las mismas después de la incubación con el material de
estudio, así como los controles positivos y negativos, se utilizan como indicadores de
la toxicidad de un material dental 59.
Para Vajrabhaya y col 62. aunque el método de liberación de cromo radiactivo es un
sistema preciso para evaluar la citotoxicidad de selladores endodónticos, la
manipulación, almacenamiento y desecho de isótopos radiactivos representa un
problema de seguridad tanto para el personal que lo maneja como para el ambiente. 
Osorio y col 41. realizan un estudio con cultivos celulares para medir la citotoxicidad
de cementos selladores utilizados actualmente: Endomet®, CRCS® y AH26® y
materiales de obturación a retro: amalgama, Gallium GF2®, Ketac Silver® y
MTA®.
Los efectos citotóxicos se determinan utilizando cultivos de fibroblastos L­929 de
ratones y fibroblastos gingivales humanos analizados mediante dos métodos:
ccccc
1. MTT: para la actividad enzimática mitocondrial. Se basa en la capacidad
de las enzimas deshidrogenasas mitocondriales de células vivas
para convertir la sal tetrazolium amarilla e hidrosoluble (3,4[4,5­
dimetilthiasol­2 y 1]­2,5­difeniltetrazolium bromuro (MTT;
Sigma) en cristales azul oscuro.
2. CV: para la medición del número de células en cultivos de monoestrato
utilizando cristales violeta. Se basa en la observación de las
células fijadas, donde los cristales violeta se unen a las proteínas
nucleares y la cantidad de uniones químicas se correlacionan en
una forma lineal con el número de células en el cultivo.
Los resultados del estudio indican que el CRCS® es el menos tóxico seguido por
Endomet®. AH26® presentó una fuerte citotoxicidad.
En cuanto a los materiales de obturación a retro, el MTA® demostró que no es
citotóxico, el Gallium GF2® originó escasa citotoxicidad mientras que el Ketac
Silver®, el SuperEBA® y la amalgama provocan la mayor toxicidad 41.
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Toledo y col 58. realizan un estudio para evaluar la citotoxicidad de cinco selladores
endodónticos en cultivos celulares. Utilizan cuatro selladores a base de hidróxido de
calcio: Sealapex®, CRCS®, Apexit® y Sealer 26® y uno a base de óxido de zinc
eugenol: Fill Canal®. La citotoxicidad de los cementos fue evaluada
microscópicamente en busca de cambios morfológicos en macrófagos peritoneales
de ratas a las 12, 24, 48 y 72 horas. Se analizan estadísticamente variables como
densidad e irregularidad citoplasmática, ruptura de la membrana celular y
fragmentación nuclear.
Resultados:
ccccc
1. Sealapex®: produjo la mayor alteración citotóxica en los cultivos de
macrófagos en todos los períodos de evaluación. Se encontró
marcada ruptura celular y fragmentación. Se evidenció en
este grupo el halo más amplio de lisis de macrófagos en
contacto con el sellador. Aquellos macrófagos a distancia del
sellador mostraron cambios en la apariencia del citoplasma.
Esta toxicidad se adjudica a la pronunciada alcalinidad del
material.
2. Apexit®,
CRCS® y
Sealer
26®:
produjeron un halo de lisis celular de menor intensidad.
Demostraron ser ligeramente agresivos pero no hubo
diferencias estadísticamente significativas entre ellos.
3. Fill
Canal®:
originó el menor halo de lisis celular con ligera alteración
celular a distancia.
Koulaouzidou y col 26. realizan una investigación con el objeto de estudiar la
citotoxicidad de tres selladores a base de hidróxido de calcio: Sealapex®, Apexit® y
CRCS® utilizando cultivos de células L929 y BHK21. Luego de permitir el
fraguado de los selladores durante 24 horas, estos se cubrieron con la suspensión
celular. La citotoxicidad se determina por medio de la técnica cuantitativa y
observación microscópica a las 24, 48 y 72 horas. Todos los selladores resultaron
tóxicos en los tres períodos de observación produciendo inhibición del crecimiento
celular.
Sealapex® produjo una disminución considerable de densidad celular comparado
con los otros selladores estudiados. Para los autores, esta toxicidad está relacionada
con la fuerte alcalinidad del material.
El sellador CRCS® causó baja inhibición de crecimiento celular a las 24 horas que
se incrementó a las 48 y 72 horas. Además de un pequeño componente de hidróxido
de calcio, CRCS® contiene óxido de zinc, eugenol y eucaliptol, por lo que su
comportamiento es más parecido a un sellador de óxido de zinc eugenol que a un
sellador a base de hidróxido de calcio. La toxicidad de CRCS® puede deberse
entonces a la presencia de eugenol.
El sellador Apexit® produjo la menor disminución de densidad celular comparado a
los otros selladores en los 3 períodos de observación.
En un estudio realizado por Briseño y col 9. se evaluó la citotoxicidad de cuatro
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selladores a base de hidróxido de calcio: Sealapex®, Apexit®, CRCS® y Endoflas
FS®. Luego de que se permitió que los selladores fraguaran por 24 horas, el primer
grupo y 48 horas el segundo grupo, se cubrieron con suspensión de fibroblastos
gingivales humanos. Se evaluó la citotoxicidad determinando el potencial de síntesis
de proteínas de las células en presencia de los materiales por 21 días.
Endoflas FS®, cuya composición contiene eugenolato de zinc, yodoformo,
paramonoclorofenol y eugenol, indujo una reducción dramática en el grupo de 24
horas. En el grupo de 48 horas se obtuvo una respuesta ligeramente menos tóxica.
Sin embargo este sellador resultó ser significativamente más tóxico que los demás
materiales estudiados en ambos grupos.
Estos resultados sugieren que la adición de un agente bactericida como el yodoformo
y el paramonoclorofenol en la fórmula de un cemento sellador puede aumentar su
citotoxicidad. Los fabricantes alegan que el cemento está concebido para actuar
como un medio aséptico para lograr la desinfección del conducto radicular. Sin
embargo ha sido comprobado clínica y radiográficamente que después de una
limpieza, conformación y obturación adecuadas, la reparación ocurre en la mayoría
de los casos con el uso de cementos selladores que contienen menos agentes
irritantes en su composición 9.
Después de tres días Sealapex® mostró una toxicidad relativamente baja en ambos
grupos. Apexit® mostró una toxicidad relativamente alta en la primera fase, pero
disminuyó luego de 3 días de cultivo. CRCS® también produjo cierta toxicidad en la
fase inicial pero el nivel de toxicidad declinó a los tres días.
Según el fabricante la porción líquida de CRCS® contiene suficiente eugenol para
reaccionar con el óxido de zinc pero se diluye con eucaliptol para prevenir un exceso
de eugenol luego de que ocurra la reacción. La reacción tóxica inicial de CRCS® en
los dos grupos puede ser debido, sin embargo, a un exceso de eugenol. El autor
opina que la dilución del eugenol no ocurrió durante el mezclado sino durante el
fraguado del material. Esto puede explicar la recuperación de los fibroblastos entre el
primer y tercer día de cultivo 9.
Miletic y col 34. realizaron un estudio para evaluar el efecto citotóxico de AH26®,
AH Plus®, Diaket® y Apexit®. Se usaron dos líneas celulares, células HeLa
(carcinoma cervical humano y L929 (fibroblastos cutáneos de ratón). Se prepararon
los selladores bajo condiciones asépticas y se cubrieron con suspensión celular. La
toxicidad se estimó determinando el número viable de células con un microscopio de
luz, así como el número total de células presentes a las 24, 48 y 120 horas luego de
la exposición de las células a los materiales.
Los resultados obtenidos en este estudio evidenciaron que AH Plus® presenta un
marcado potencial citotóxico seguido por AH26®. Diaket® fue ligeramente menos
tóxico que AH26®. Apexit® fue el sellador menos tóxico. La reducción del número
de células viables fue menor comparado con los demás selladores en todos los
períodos de prueba.
Los autores adjudican la elevada toxicidad del AH26® a la presencia de
formaldehído, que es liberado del AH26® recién mezclado. Además AH26® y AH
Plus® contienen un componente de resina epóxica que pueden ser otra causa de la
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citotoxicidad de ambos materiales. Por último las aminas presentes en la
composición de los materiales que aceleran la polimerzación puede estar relacionado
con la toxicidad de estos selladores 34.
Briseño y col 8. realizan un estudio para evaluar la citotoxicidad de 2 cementos
selladores a base de resina: AH26® y Diaket® y uno a base de silicona: Lee Endo
fill®. Se utilizaron cultivos celulares de fibroblastos gingivales y se observó su
capacidad de producir proteínas luego de entrar en contacto con los materiales. Se
permitió que los selladores fraguaran por 24 horas el primer grupo y 48 horas el
segundo grupo, antes de colocarlos en contacto con los fibroblastos. Los períodos de
observación fueron de 1, 3, 5, 10, 12, 14 y 21 días para cada grupo.
AH26® mostró una reacción de citotoxicidad severa a las 24 horas que se mantuvo
durante todos los períodos de observación. Diaket® presentó un potencial citotóxico
relativamente severo con recuperación celular luego de 3 días. Lee Endo­Fill®
mostró un potencial citotóxico significativamente más bajo durante los primeros 11
días, sin embargo la citotoxicidad aumentó después de ese período.
La citotoxicidad de los selladores en este estudio no disminuyó proporcionalmente al
tiempo de fraguado como sucede con la mayoría de los selladores a base de oxido de
zinc eugenol. Por lo tanto debe considerarse la posibilidad de que los selladores
evaluados pueden irritar los tejidos periapicales por un mayor período de tiempo 8.
En cultivos celulares la cantidad de los componentes mezclados en un cemento
sellador tiene efecto sobre su grado de citotoxicidad. Los resultados de experimentos
in vitro dependen no solo en la estandarización de las proporciones sino de muchas
otras variables 8.
Sin embargo en la práctica diaria es casi imposible estandarizar exactamente la
cantidad de componentes del sellador para mezclar. Por lo tanto, la incorporación de
componentes no irritantes en los cementos selladores es de gran importancia 8.
Es también deseable desarrollar un método investigativo que pueda imitar los
parámetros in vivo de una manera más objetiva que los cultivos celulares o métodos
de implantación. La naturaleza dinámica de tejidos periapicales humanos no puede
simularse con facilidad in vitro. Desde otro punto de vista, los resultados obtenidos
de este tipo de estudios pueden otorgarle al profesional la oportunidad de formarse
opiniones en relación con el potencial tóxico de los diferentes cementos selladores 8.
Willershausen y col 65. realizan un estudio para investigar la compatibilidad
biológica de cinco selladores endodónticos, Sealapex®, Endion®, Super­EBA®,
Ketac­Endo® y AH Plus®. Se utilizan tres líneas celulares para realizar
comparaciones entre ellas y para sacar conclusiones concernientes al efecto tóxico en
un sistema in vitro particular. Las células utilizadas son: fibroblastos nasales,
fibroblastos gingivales y células tumorales epiteliales. El crecimiento y la
morfología celular, el contenido proteico de las células y la liberación de
prostaglandina E2 celular son los parámetros utilizados para determinar la
citotoxicidad de los selladores estudiados.
Las células se dejaron en contacto con los materiales por 6 días, los medios de
cultivo se cambiaron cada 2 días. Al analizar las muestras, se encontraron diferencias
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significativas en los valores proteicos entre los diferentes materiales y se determinó
que la compatibilidad biológica de los materiales varía con cada línea celular.
Los fibroblastos gingivales demostraron una reducción significativa de los valores
proteicos con todos los materiales. Sealapex® y SuperEBA® demostraron la menor
reducción proteica mientras que Ketac Endo® y AH Plus® mostraron la mayor
inhibición de síntesis de proteínas. Un patrón similar se encontró con los fibroblastos
nasales. Se encontró un alto contenido proteico para el SuperEBA® y Sealapex®.
AH Plus® y Endion® redujeron significativamente los valores de contenido
proteico.
En un estudio realizado por Cohen y col 10. se evaluó la citotoxicidad del AH26® y
el AH Plus® mediante la prueba de difusión en agar. Se utilizó un monoestrato de
fibroblastos L929 y se observó la respuesta de ellas a los agentes estudiados luego de
48 horas. El grado de degeneración y malformación celular fue expresada en una
escala de 0 (no reactivo) a 4 (severamente reactivo). 
Se concluye en este estudio que luego del período de observación, los cultivos
celulares expuestos a los cementos exhibieron una severa reactividad (grado 4) tanto
con el AH26® como con AH Plus®.
Se detectó liberación de formaldehído en ambos selladores aunque el fabricante de
AH Plus® afirma que está libre de este compuesto. La presencia de formaldehído en
AH Plus® se debe probablemente a la reacción de la resina epóxica con las aminas
para iniciar el fraguado, sin embargo, la cantidad encontrada de formaldehído es
mínima. El AH26® contiene hexametilenotetramina que en un ambiente ácido se
descompone para liberar amonio y formaldehído.
En otro estudio realizado por Koulaouzidou y col 26. se evaluó la citotoxicidad de
tres cementos selladores a base de resina: AH26®, AH Plus® y TopSeal®. Se
utilizaron células L929 y células de pulpa de ratas, RPC­C2A. La citotoxicidad se
determinó por medio de la técnica cuantitativa a las 24 y 48 horas. AH26® presentó
un efecto citotóxico severo, mientras que TopSeal® y AH Plus® demostraron una
influencia tóxica marcadamente menor. No se estableció una diferencia significativa
en los grados de citotoxicidad entre el TopSeal® y AH Plus®.
Los selladores endodónticos son colocados en los conductos radiculares recién
mezclados, por lo que durante un período después de la aplicación clínica, el
material provoca respuestas locales debido a los componentes reactivos. Luego del
período de fraguado, es posible aún que constituyentes potencialmente tóxicos sean
liberados por los materiales, ya sea por filtración hacia los fluidos tisulares, por
corrosión o por desgaste físico 26.
Según este estudio, el potencial citotóxico del AH26® es alto, en especial
inmediatamente después de mezclarse. El fabricante afirma que AH Plus® contiene
nuevos tipos de aminas que disminuyen la cantidad de formaldehído liberado y una
reacción de polimerización basada en reacciones de adición térmica epóxico amina.
Estos cambios en la composición de AH Plus® pueden producir un efecto citotóxico
de menor intensidad comparado al AH26®. Para el autor el AH Plus® y TopSeal®
representan progresos en el desarrollo de materiales endodónticos más compatibles
26.
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Un estudio realizado por Leonardo y col 31. comparó la liberación de formaldehído
de AH26®, Endomethasone®, AH Plus® y TopSeal® luego de endurecer. Los
resultados indicaron que todos los selladores evaluados liberan formaldehído, pero la
cantidad liberada por AH Plus® y TopSeal® es mínima comparada con la
concentración liberada por AH26® y Endomethasone®.
Azar y col 2. llevan a cabo una investigación para evaluar los efectos citotóxicos de
AH Plus®, AH26® y óxido de zinc­eugenol sobre cultivos de fibroblastos gingivales
humanos. La citotoxicidad se determinó a través de la incubación directa de
extractos de los selladores con los fibroblastos a intervalos de 1, 4, 8, 24, 48 horas, 5
días, 1, 2, 4 y 5 semanas.
Según los resultados de este estudio, el óxido de zinc eugenol presenta un efecto
tóxico moderado inmediatamente después de mezclarse, luego, el efecto citotóxico
aumentó dramáticamente y permaneció en niveles altos durante todo el tiempo que
duró el estudio (cinco semanas). El autor afirma que la solubilidad continuada y la
liberación de eugenol y otros ingredientes son responsables de la severa
citotoxicidad del óxido de zinc eugenol a largo plazo.
AH26® demostró alta toxicidad inmediatamente después de mezclarse hasta el final
de la primera semana de experimentación, seguido por una disminución sustancial de
citotoxicidad. Los efectos citotóxicos más severos se observaron a las 24 y 48 horas
de mezclarse.
La cantidad de formaldehído liberado por AH26® aumenta casi 200 veces cuando
está recién mezclado hasta las siguientes 48 horas. Luego de este tiempo, se
evidencia una reducción relativa del contenido de formaldehído hasta el final de la
primera semana. Luego de la primera semana, la cantidad de formaldehído liberado
no es significativa 2.
AH Plus® exhibió una severa citotoxicidad inmediatamente después de mezclarse,
hasta las primeras 4 horas. Después de este tiempo, se observó una considerable
reducción de la citotoxicidad. En los demás períodos de tiempo, no se aprecian
diferencias significativas entre el AH Plus® y el grupo control negativo. La
citotoxicidad a corto plazo de AH Plus® se debe probablemente a su contenido bajo
de componentes tóxicos solubles en agua, como formaldehído y a su corto tiempo de
fraguado. (8 horas a 37°C)
Para los autores la toxicidad de corta duración producida por AH Plus® puede
inducir respuestas inflamatorias in vivo más leves en el área periapical, lo que puede
causar menos síntomas postobturación, como inflamación y dolor. Además el
proceso de reparación probablemente se produciría más temprano comparado a
condiciones en que el sellador produzca efectos citotóxicos por un período de tiempo
mayor 2.
La toxicidad de los cementos selladores ha sido estudiada en estado fresco o luego
de endurecer, usualmente luego de 24 a 48 horas de mezclarse. En la clínica, sin
embargo, el fraguado del sellador toma lugar dentro del conducto radicular en
contacto con tejido vivo, por lo tanto, las características biológicas de un sellador
mientras fragua deben estudiarse 64.
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Kettering Y Torabinejad 23, comparan la citotoxicidad de los cementos selladores
recién mezclados y ya fraguados en cultivos de células HeLa y fibroblastos
humanos. Los selladores estudiados son: TubliSeal®, Diaket®, AH26®, Sellador de
Grossman® y Sellador de Wach®.
Los selladores ya sea recién mezclados o fraguados por un espacio de 48 horas, se
diluyen en etanol al 95% a una concentración de 1:25. Esta concentración inicial es
diluida sistemáticamente obteniéndose concentraciones de: 1:50, 1:100, 1:200,
1:300, 1:400, 1:500, 1:1000 y 1:2000 de cada sellador.
Los resultados indican que, en general, todos los cementos son tóxicos en mayor o
menor medida, tanto en estado fresco como ya endurecidos.
En este estudio, el TubliSeal® resultó ser el menos tóxico tanto en estado fresco
como endurecido en ambos tipos celulares, seguidos en orden de menos tóxico a más
tóxico por el Sellador de Wach®, Sellador de Grossman® y AH26®. Diaket® fue el
más tóxico de los selladores estudiados.
Wennberg 64 realiza en 1980 un estudio para determinar la irritación tisular a
AH26®, Kloropercha®, Pasta de Riebler® y Sellador U/P® (cemento de
Grossman), en estado fresco y luego de fraguar para comparar el grado de
citotoxicidad inicial y tardía utilizando la técnica del filtro miliporoso.
La Pasta de Riebler presentó un grado de citotoxicidad severo durante el fraguado,
que disminuyó a través del tiempo pero sin desaparecer definitivamente durante el
estudio. El Sellador U/P®, presentó una citotoxicidad moderada que se mantuvo a
través del experimento sin aumentar ni disminuir.
La Koropercha N­O® presentó citotoxicidad inicial moderada que disminuyó hasta
desaparecer por completo. Los selladores de Cloropercha tienen una alta toxicidad
mientras el cloroformo permanece en el material. Cuando éste se evapora el
componente tóxico principal desaparece. No se conoce el ritmo de evaporación del
cloroformo, pero es razonable pensar que es lento ya que debe ser eliminado a través
de fluidos tisulares. Sin embargo, este experimento muestra que el producto final de
la Cloropercha es menos tóxico que otros selladores endodónticos.
AH26® mostró un grado de toxicidad leve recién mezclado, luego de polimerizar
por una hora, aumentó hasta producir un efecto tóxico severo y por último, después
de las 6 horas, el efecto irritante sobre las células era imperceptible.
Estos hallazgos coinciden con los de Spangberg y Langeland 51, que reportaron la
variación en el grado de toxicidad entre materiales de diferentes composiciones
químicas y la disminución de la toxicidad de los materiales durante su fraguado.
Safavi y col 46. realizan un estudio para evaluar la toxicidad de TubliSeal®, Pulp
Canal Sealer® y AH26® sobre células L929 utilizando el método de liberación de
cromo radiactivo. Los selladores se evaluaron en estado fresco y a las 24, 48, 72, 144
y 522 horas después de mezclarse.
TubliSeal® prácticamente no produjo toxicidad durante los períodos experimentales.
Los autores atribuyen la baja toxicidad a su corto tiempo de fraguado. Pulp Canal
Sealer® se mostró inicialmente más tóxico que AH26® a las 0, 24 y 48 horas. Desde
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las 72 horas en adelante, la toxicidad de AH26® y Pulp Canal Sealer® disminuyó
hasta compararse con el bajo efecto irritante de TubliSeal®.
Spangberg 52 realizó una evaluación in vitro empleando tres técnicas de cultivo por
un período de 5 meses, encontrando también que el tiempo de endurecimiento
influye en el grado de toxicidad del material. A medida que endurece el material va
disminuyendo su toxicidad. Al evaluar cinco cementos selladores observó que
AH26® fue el menos tóxico, seguido por la Cloropercha®, el N2®, el Diaket® y la
Pasta Riebler®. Posiblemente la baja respuesta tóxica que presentó la Cloropercha®
se deba a la rápida evaporación del cloroformo, disminuyendo así su efecto irritante.
Geurtsen y col 17. llevan a cabo una investigación para determinar la
citocompatibilidad de AH26®, Apexit®, Sealapex®, N2® y gutapercha. Se
utilizaron extractos de los materiales que se colocaron en contacto con fibroblastos
primarios del ligamento periodontal obtenidos de premolares sanos y de células
permanentes 3T3 de ratones. Los resultados se evaluaron a las 24 horas, 5 días, 5
días adicionales y 24 horas adicionales.
Apexit® y la gutapercha no segregaron ingredientes que alteraran a las células.
AH26® y Sealapex® liberaron sustancias irritantes durante las primeras 24 horas.
Adicionalmente cantidades considerables de componentes citotóxicos se liberaron
durante los dos extractos de 5 días, mientras que el N2® liberó constantemente
ingredientes citotóxicos al medio.
En este estudio se utilizaron dos líneas celulares. Se observaron reacciones similares
en los dos cultivos celulares en cuanto al N2® que fue altamente tóxico en ambos, el
Apexit® y Gutapercha que se mostraron compatibles frente a los dos tipos de
células. Sin embargo se observaron diferencias en cuanto al AH26® y Sealapex®. El
efecto citotóxico de Sealapex® fue mayor en las células 3T3 que el AH26®,
mientras que en los fibroblastos primarios el AH26® resultó ser más tóxico que el
Sealapex®. Esto se puede explicar por los diferentes mecanismos de daño celular de
cada sellador.
El sellador N2® fue el más tóxico. Esto se debe a que el N2® libera 300 veces más
formaldehído que el AH26® en los siguientes dos días luego de fraguado. El
formaldehído retarda significativamente la reparación del ligamento periodontal en
el periápice. Además el N2® libera eugenol, que es altamente citotóxico.
Beltes y col 5. realizaron un estudio para evaluar la citotoxicidad de dos cementos
selladores de vidrio ionómero: Ketac­Endo® y Endion®, a través de cultivos de
células BHK 21, fibroblastos de riñón de hámster. Los cultivos se incubaron a 37°C
por 24, 48, y 72 horas y la citotoxicidad se evaluó tiñendo las células y contándolas
bajo un microscopio de luz.
El sellador Ketac­Endo® exhibió muy baja toxicidad en cada período experimental,
mientras que Endion® produjo una toxicidad severa durante cada intervalo de
tiempo. La marcada toxicidad de Endion® se puede deber a la posibilidad de que
contenga aditivos especiales como agentes bactericidas que esgrimen un efecto
tóxico sobre las células.
Ersev y col 13. realizan en 1999 un estudio para comparar el efecto citotóxico de
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Ketac­Endo® con AH26® y TubliSeal® sobre células L­929. Los resultados indican
que Ketac­Endo® ejerce un efecto tóxico leve sobre las células cultivadas mientras
que TubliSeal® y AH26® presentaron un efecto citotóxico de moderado a severo.
La biocompatibilidad de un sellador endodóntico contribuye al éxito clínico de la
terapia endodóntica. Un material tóxico puede retrasar la reparación de los tejidos
periapicales o causar una reacción tisular inflamatoria 1.
Cuando se colocan materiales a base de óxido de zinc eugenol en contacto con
tejidos vivos, esto causan una respuesta inflamatoria de leve a severa. La toxicidad
de los selladores a base de óxido de zinc eugenol se ha estudiado in vitro, la mayoría
de los estudios que utilizan técnicas de cultivos celulares han demostrado que el
oxido de zinc eugenol es citotóxico 1.
Uno de estos estudios fue llevado a cabo por Briseño y Willershausen 7 sobre
fibroblastos gingivales humanos donde se evaluó la toxicidad de seis selladores a
base de óxido de zinc­eugenol: Tubli­Seal®, Pulp Canal Sealer®, Proco­Sol®,
Endoseal®, Cemento de Wach® y Hermetic®.
Pulp Canal Sealer® presentó citotoxicidad inicial moderada pero, luego de trece
días, se observó una recuperación de fibroblastos marcada. Tubli­Seal®, Endoseal®,
Hermetic®, Proco­Sol® y la Fórmula de Wach® presentaron recuperación leve al
final de la prueba.
Cuando el óxido de zinc se mezcla con eugenol se forma eugenolato de zinc. El
cemento de óxido de zinc eugenol fraguado consiste de granos de polvo de óxido de
zinc unidos por una matriz de eugenolato de zinc. En condiciones húmedas se
hidroliza el eugenolato de zinc formando hidróxido de zinc y eugenol libre 1,16,43,51.
La toxicidad de este eugenol liberado puede deberse a la inhibición de la respiración
celular o a la lisis de la membrana citoplasmática 1.
Para evitar reacciones inflamatorias innecesarias, sólo una cantidad mínima de
sellador a base de óxido de zinc eugenol debe contactar los tejidos periapicales 7.
Para lograr esta exposición mínima, la preparación del conducto radicular se debe
realizar con un ensanchamiento apical tan conservador como sea posible 1.
Sin embargo un estudio realizado en 1999 por Hashieh y col 19. determinó que la
concentración de eugenol liberado de un cemento a base de óxido de zinc eugenol a
través del ápice es muy baja y disminuye a través del tiempo hasta volverse
indetectable luego de un mes. Los autores afirman que esta cantidad baja de eugenol
liberado puede producir un efecto analgésico y antiinflamatorio contrario al efecto
citotóxico que se le adjudica.
Vajrabhaya y col 64. realizan un estudio en cultivos celulares de fibroblastos de ratas
para evaluar la citotoxicidad de seis cementos selladores: MU Sealer® que es un
cemento de Grossman modificado, ROCANAL 3®, ROCANAL 2®, a base de oxido
de zinc­eugenol con Dowicide® (un antimicrobiano) Apexit®, AH26® y
Endomethasone®.
Apexit® y AH26® resultaron menos tóxicos que el ROCANAL 3® y ROCANAL
2®, Endomethasone® y MU Sealer®; estos últimos, no mostraron diferencias
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significativas en el grado de toxicidad.
Gerosa y col 16. realizan una investigación para evaluar la citotoxicidad de seis
cementos selladores endodónticos: Pulp Canal Sealer®, ROCANAL 2®,
ROCANAL 3®, Endomethasone®, AH26® y Bioseal® sobre fibroblastos
gingivales humanos. Se observó citotoxicidad severa con AH26® en la primera y
segunda semana de experimentación mientras que Pulp Canal Sealer® y
Endomethasone® presentaron baja citotoxicidad en todos los períodos
experimentales. ROCANAL 2® presentó citotoxicidad severa mientras que
ROCANAL 3® presentó citotoxicidad moderada al igual que Bioseal®
Yesilsoy y col 66. evaluaron la citotoxicidad de siete materiales endodónticos: N2®,
Mynol®, Roth®, TubliSeal®, Diaket®, AH26® y un agente para pulpotomía a base
de hidróxido de calcio, Life®. Se utilizó la técnica del filtro miliporoso con dos tipos
de células: L929 y células pulpares de humanos.
El material menos citotóxico es el AH26® y Life®. El N2® y el Mynol® resultaron
ser los materiales más tóxicos, seguidos por Roth®, TubliSeal®, a base de óxido de
zinc eugenol y por último Diaket®.
En este estudio se utilizaron diferentes criterios para evaluar la citotoxicidad de los
cementos y se concluyó que además de la influencia que puedan ejercer las
propiedades fisicoquímicas de los materiales estudiados sobre su actividad
citotóxica, es necesario utilizar varios parámetros de toxicidad ya que uno solo no es
suficiente para establecer el grado de toxicidad de cada material 64.
Ya que la toxicidad de los cementos a base de óxido de zinc eugenol ha sido
atribuido a la liberación de eugenol desde el material hacia los tejidos, se han
desarrollado cementos a base de óxido de zinc sin eugenol como Nogenol® y
Canals­N®22.
Nakamura y col 37 realizan un estudio para evaluar la citotoxicidad de Canals® y
Nogenol® comparándolos con AH26®, TubliSeal® Neodyne®, que contiene
eugenol y FR®, un sellador a base de hidróxido de calcio.
Los resultados indicaron que Nogenol® presentó la menor toxicidad de todos los
selladores estudiados, seguido por Canals®, Neodyne®, TubliSeal®, FR® y por
último AH26® que presentó una severa toxicidad.
Araki y col 1. realizan un estudio en el que evalúan la citotoxicidad de dos cementos
selladores a base de oxido de zinc: Canals® que contiene eugenol, y Canals­N® sin
eugenol. Se utilizaron células L929 y fibroblastos de ligamento periodontal humano.
La citotoxicidad se evalúa a través del método de liberación de cromo radiactivo.
En este estudio Canals® presentó una citotoxicidad elevada cuando estaba recién
mezclado, pero una vez fraguado, no se detectó ningún grado de citotoxicidad. Se
especula que esta citotoxicidad inicial severa es causada por una gran cantidad de
eugenol libre, que disminuye a través del tiempo.
En este estudio Canals­N® no evidenció ser citotóxico. Este resultado demuestra que
algunos ingredientes del líquido luego de mezclarse con el polvo presentan una
citotoxicidad tan baja que no puede ser detectado por este sistema de evaluación.
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Matsumoto y col 33. por su parte compararon la citotoxicidad de AH26®, Diaket®,
Canals®, TubliSeal® y Sealapex® con 3 selladores nuevos desarrollados por los
autores a base de oxido de zinc sin eugenol en cultivos de pulpas dentales de ratas.
La porción líquida de los nuevos cementos contenía ácidos grasos y glicol en dos de
ellos, y ácido oleico en el restante.
Comparado con los selladores convencionales, los nuevos selladores sin eugenol
mostraron menor citotoxicidad tanto en estado fresco como endurecido. En cuanto a
los selladores convencionales el orden de citotoxicidad fue: primero, Sealapex®,
seguidos por Canals®, TubliSeal®, AH26® y Diaket®. Este orden cambió al
evaluar los selladores endurecidos siendo Diaket® el menos tóxico después de los
selladores experimentales, seguidos por Canals®, AH26®, TubliSeal® y Sealapex®.
La elevada citotoxicidad de Sealapex® al fraguar se atribuyó a que el sellador se
disolvió en el medio, aumentando su alcalinidad.
Spangberg y Langeland 51 llevan a cabo un estudio in vitro para evaluar la
citotoxicidad de doce cementos endodónticos sobre células HeLa. Se utilizó el
método de liberación de cromo y se compararon los resultados in vitro con estudios
de implantación para correlacionar los métodos in vivo e in vitro.
Para estos autores las propiedades biológicas de los materiales evaluados no son
aceptables. Todos contienen propiedades irritantes para los tejidos. Mohammad y col
35. coinciden con esta opinión al realizar un estudio de citotoxicidad con 10
selladores endodónticos utilizando el método de extendido en agar. Todos los
selladores estudiados demostraron algún grado de toxicidad.
La reacción tisular a un material se da por una combinación del efecto tóxico del
material en sí y la respuesta a sus propiedades físicas. Se espera que cuando un
material es tóxico in vitro cause irritación tisular. Sin embargo una toxicidad leve in
vitro no se corresponde necesariamente a una leve irritación tisular. Esto depende de
su capacidad de resorción, variaciones de solubilidad en fluidos tisulares o
fragmentación que pueden causar reacciones inflamatorias y fagocitosis. Esto
factores no pueden ser evaluados in vitro. Por esto aquellos materiales que producen
resultados prometedores in vitro también deben ser evaluados en pruebas de
implantación en animales 51.
Al correlacionar diferentes estudios sobre la citotoxicidad de cementos selladores
endodónticos se evidencian discrepancias entre los resultados obtenidos. Estas
variaciones se deben en gran parte a los diferentes métodos utilizados para conducir
cada experimento. Muchos modelos de estudio se diseñan sin una estandarización
absoluta de los procedimientos, con el uso de equipos diferentes y la participación de
investigadores con diferentes niveles de experiencia 51.
Parece ser necesario el desarrollo de métodos nuevos y más confiables para evaluar
los selladores endodónticos. Entre estos se pueden incluir estudios basados en la
reparación de tejidos lesionados, como el efecto de los selladores sobre la velocidad
y capacidad de recuperación luego de producido un daño tisular que puede resultar
una guía más útil que los estudios de cultivos celulares existentes 23.
No se deben realizar evaluaciones clínicas en dientes humanos hasta que los
materiales no demuestren ciertas características en las pruebas in vitro y de
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implantación ya que los cementos selladores pueden producir efectos locales y
sistémicos nocivos 51.
 
Pruebas de Implantación
En vista de que las pruebas de citotoxicidad in vitro tienen sus limitaciones, se
recomiendan las técnicas de implantación subcutánea e intraósea que se consideran
estudios secundarios para evaluar la biocompatibilidad de los materiales dentales 60.
Las primeras pruebas de implantación consistían en la colocación de porciones del
material dental estudiado en diferentes tejidos blandos y hueso. El método de
implantación fue refinado por Friend y Browne que usaron tubos de Teflón como
vehículo para colocar porciones pequeñas estandarizadas del material fresco o
fraguado en contacto con determinados tejidos. Estas pruebas proveen información
valiosa sin un costo excesivo y el sacrifico innecesario de animales 60.
Para poner a prueba los efectos tóxicos de los cementos selladores se efectúan
implantes subcutáneos mediante inyección con aguja bajo la piel de animales, o
mediante incisión e inserción real del producto, sea solo o en tubos o copas de
Teflón. El material recién mezclado puede implantarse y se deja que endurezca in
situ, o bien, puede insertarse el material ya fraguado para juzgar sus efectos a largo
plazo 22.
El efecto irritante de los cementos selladores se evalúa por medio del examen
histopatológico de la respuesta tisular alrededor del material 25.
Los resultados de los diversos estudios de implantación no pueden compararse
debido a las posibles diferencias en las respuestas tisulares en diferentes especies
animales, la localización del implante, métodos diferentes de evaluación y periodos
de observación cortos 60.
En la implantación subcutánea el desplazamiento mecánico del material implantado
ha sido reconocido como una desventaja en esta técnica, ya que este inconveniente
puede dificultar el contacto entre el material estudiado y el tejido 59.
La implantación intraósea de selladores recién mezclados ofrece dos ventajas
importantes:
ccccc
1. En la práctica endodóntica de rutina, selladores recién mezclados entran
en contacto directo con el hueso y el periodonto. La implantación
intraósea permite el estudio de la respuesta del tejido óseo a los
selladores bajo condiciones similares a aquellos encontrados en el uso
clínico, la toxicidad inicial de un sellador fresco es entonces evaluado a
largo plazo 43.
2. El perfecto engranaje del implante en la cavidad ósea creada, evita las
reacciones inflamatorias inducidas por la movilidad del mismo 43.
Sin embargo, Olsson y col 38. afirman que a pesar de las ventajas de la técnica de
implantación intraósea, una cavidad ósea artificial y el material de estudio contenido
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dentro de un tubo de teflón implantado en el hueso, son diferentes a un diente unido
al ligamento periodontal.
Los resultados de los estudios de implantación muestran en general que los
materiales de obturación causan inicialmente inflamación y se vuelven más
biocompatibles con el tiempo, como resultado del trauma quirúrgico y a la liberación
de sustancias antigénicas de estos materiales. (Wolfson y Seltzer, Mcarre y Ellender,
Cleary y col. y Olsen y col. citados por Torabinejad y Pitt Ford 59.
Las técnicas de implantación proporcionan información importante sobre la
respuesta tisular a los materiales dentales. Sin embargo los investigadores establecen
que es difícil asumir que estas técnicas son comparables a las pruebas clínicas. Los
resultados de estos métodos, como aquellos obtenidos en las pruebas in vitro, no
deben utilizarse como valores absolutos y solo pueden ser utilizados como
indicadores de biocompatibilidad de los materiales en estudio 59.
Bezerra y col 6. realizan un estudio donde evalúan la respuesta inflamatoria de
algunos selladores a base de hidróxido de calcio: Sealapex®, CRCS®, Apexit® y
Sealer 26®, en el tejido subcutáneo y cavidad peritoneal de ratones. Los resultados
se analizaron luego de 2, 4, 8 y 16 días.
El examen histológico en el tejido subcutáneo reveló:
ccccc
1. En la fase inicial se observan grandes cantidades de leucocitos
polimorfonucleares en respuesta a todos los selladores, presentándose
más intensamente con el CRCS® y Apexit®.
2. En algunos casos el infiltrado inflamatorio estaba acompañado por
necrosis tisular especialmente ante Sealer 26® y Sealapex®.
3. Durante la fase intermedia se presentó una disminución significativa en
el número de polimorfonucleares, observándose más marcadamente con
Sealapex® seguido de CRCS® y Apexit®. Durante esta fase también se
presentó un aumento progresivo y diferenciación de células
mononucleares: monocitos, macrófagos y células epitelioides. La fase
final de la respuesta inflamatoria se caracteriza por una reacción
granulomatosa intensa con predominio de células epitelioides y células
gigantes multinucleadas, que contenían material fagocitado en su
citoplasma. Se observa la presencia de necrosis con Sealer 26®, CRCS®
y Apexit®.
El examen histológico de la cavidad peritoneal reveló:
ccccc
1. Todos lo selladores indujeron un aumento significativo en el número de
neutrófilos y células mononucleares en la evaluación de las 6 horas.
Apexit® presentó el mayor número de neutrófilos seguido por Sealer
26®. Sealapex® y CRCS® indujeron el menor número de neutrófilos.
2. A las 24 horas Sealer 26® demostró un mayor número de neutrófilos que
los demás selladores.
3. Cinco días después de la inyección se observó una disminución marcada
en el número de neutrófilos con Sealapex® y CRCS®, que para este
momento no presentaron diferencias significativas con el grupo control.
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4. 15 días después de la inyección todos los selladores presentaron número
de neutrófilos comparables al grupo control.
5. En cuanto a la cantidad de infiltrado mononuclear no se presentaron
diferencias significativas entre los selladores. Al comparar dicho
infiltrado mononuclear de los selladores con el grupo control, sólo se
presentaron diferencias significativas a las 6 y 24 horas luego de la
inyección.
En la fase intermedia del análisis histológico del tejido subcutáneo se observó un
aumento y diferenciación de células mononucleares. La diferenciación celular en la
zona inflamatoria produce la formación de una lesión granulomatosa cuya función es
circunscribir y prevenir la difusión del agente causante. Esto se correlaciona con
ciertas características fisicoquímicas del material como su concentración, tamaño de
la partícula y solubilidad 6.
La diferenciación celular más marcada de observó con Sealapex®, un hecho que
posiblemente se puede explicar por la baja solubilidad de este agente y su
concentración alta de calcio. La introducción de hidróxido de calcio en los cementos
selladores se basa en el hecho de que el ion de calcio actúa en el proceso de
diferenciación celular y activación de macrófagos 6.
También se observaron áreas de necrosis de extensión y duración variables como
respuesta a los cuatro selladores. En los animales inyectados con Sealapex®, esta
necrosis fue observada sólo durante la fase inicial de la respuesta y se redujo
progresivamente con el tiempo, mientras que en los animales inyectados con los
otros selladores estudiados, la necrosis persistió durante todo el experimento 6.
La necrosis causada por Apexit® es del tipo exudativo y actúa como un estimulante
de migración constante de leucocitos polimorfonucleares a la zona inflamatoria. Esto
retarda, prolonga o evita el proceso reparador que aunque ocurre durante los
primeros estadios de la respuesta inflamatoria, alcanza un pico cuando el estímulo
inflamatorio cesa 6.
En este estudio se obtuvieron resultados insatisfactorios con Sealer 26® y CRCS®.
Las formulaciones diferentes de selladores de hidróxido de calcio llevan a respuestas
tisulares diferentes dependiendo de las sustancias incorporadas en estos selladores 6.
CRCS® es esencialmente un sellador corriente de óxido de zinc eugenol. El
eucaliptol y eugenol presentes en su composición se consideran tóxicos. El eugenol
puede actuar directamente en la cadena respiratoria celular induciendo daño celular
irreversible y necrosis 6.
Se concluye en el estudio que los cuatro selladores estudiados, poseen propiedades
irritantes, y la respuesta inflamatoria producida por ellos depende de la composición
de cada material 6.
Feiglin 15 evaluó el CRCS®, ProcoSol®, TubliSeal® y Diaket®. Se estudió la
citotoxicidad relativa de esos materiales por medio del flujo de células
mononucleares o macrófagos y su transformación en células gigantes multinucleadas
en granulomas experimentales insertados subcutáneamente en ratas.
20/1/2016 Odontólogo Invitado ­ Carlos Bóveda Z. ­ Endodoncia ­ Caracas, Venezuela
http://www.carlosboveda.com/Odontologosfolder/odontoinvitadoold/odontoinvitado_23.htm 29/46
Todos los selladores evaluados aumentaron, en varios grados, el promedio de flujo
de células mononucleares y células gigantes multinucleadas. CRCS®, demostró lo
mejores resultados, seguido por el ProcoSol® y el TubliSeal®, mientras que el
Diaket® fue el más citotóxico de los materiales probados.
En un estudio realizado por Zmener y cols 68. se evidenció una respuesta tisular
severa ante Sealapex® al ser implantado en el tejido subcutáneo de ratas. En el
estudio histopatológico se observaron células gigantes de cuerpo extraño con
partículas oscuras en su citoplasma adyacentes al material que se encontraron aún en
el período de observación de tres meses. Estos resultados se pueden correlacionar
con aquellos observados por Tronstad y cols 61. en 1988 cuando estudiaron el
sellador Sealapex® colocándolo en dispositivos intraóseos en ratas. Se evidenció una
reacción severa con infiltrado inflamatorio y macrófagos.
Kolokouris y col 25. realizan en 1998 un estudio para comparar la biocompatibilidad
de Apexit® y Pulp Canal Sealer® implantándolos en el tejido conjuntivo de 44 ratas.
Cada sellador se colocó en tubos de teflón y se implantaron en tejidos dorsales. Los
implantes fueron removidos a los 5, 15, 60 y 120 días.
En la evaluación microscópica se observaron reacciones inflamatorias severas con
zonas de necrosis causadas por Apexit® a los 5 y 15 días. El tejido se encontraba
infiltrado con neutrófilos, linfocitos, células plasmáticas, macrófagos y algunas
células gigantes que poseían material ingerido en su citoplasma.
A los 60 y 120 días la reacción era muy leve y se caracterizaba por la presencia de
tejido conjuntivo con pocos macrófagos.
En los especímenes en contacto con Pulp Canal Sealer®, se observó al quinto día,
inflamación moderada con áreas confinadas de necrosis. La reacción inflamatoria se
caracterizaba por la presencia de neutrófilos y macrófagos, mientras que se
observaron pocos linfocitos y células plasmáticas. También se observó hiperemia
vascular. Para el día 15 la reacción había disminuido y se observan numerosos
macrófagos con partículas ingeridas del material en su citoplasma. A los 60 días se
observó la presencia de tejido conjuntivo con fibras colágenas y escasos fibroblastos,
además de los macrófagos y células gigantes con material fagocitado. A los 120 días
el tejido conjuntivo se encontraba infiltrado por algunos macrófagos.
Los resultados indicaron que ambos selladores son inicialmente irritantes al tejido
subcutáneo. La reacción inflamatoria, sin embargo, había desaparecido a los 60 y
120 días. La mayor diferencia entre los dos materiales es que Apexit® causó
mayores extensiones de necrosis que Pulp Canal Sealer® en los primeros períodos
de observación. Esto se debe probablemente al elevado pH inicial de este material a
base de hidróxido de calcio.
Pulp Canal Sealer® esgrimió el efecto irritante por más tiempo que el Apexit® en la
observación a largo plazo. La liberación de eugenol de los componentes del material
es inicialmente elevado pero disminuye a través del tiempo. Sin embargo el ritmo de
esta disminución es lento porque pequeñas cantidades continúan siendo liberados de
las mezclas de oxido de zinc eugenol por un año, como lo afirma Becker y col.
citado por Kolokouris 25.
20/1/2016 Odontólogo Invitado ­ Carlos Bóveda Z. ­ Endodoncia ­ Caracas, Venezuela
http://www.carlosboveda.com/Odontologosfolder/odontoinvitadoold/odontoinvitado_23.htm 30/46
El autor concluye que el efecto irritante a largo plazo de Pulp Canal Sealer® es
ligeramente mayor que el ejercido por Apexit®.
Pertot y col 43. evalúan en 1992 la biocompatibilidad in vivo de Pulp Canal Sealer®
y Sealite®, dos cementos a base de óxido de zinc­eugenol, luego de implantarlos en
el hueso de la mandíbula de 30 conejos. Los selladores se implantaron en estado
fresco, sin fraguar. Se establecieron períodos de observación de 4 y 12 semanas y los
resultados se dividieron en 6 grupos:
ccccc 1. 0 ausencia de reacción inflamatoria
2. 1 a 2 reacción muy leve
3. 3 a 4 reacción leve
4. 5 a 6 reacción moderada
5.
7 a
10
reacción severa
6.
10 a
13
reacción muy severa
En este estudio Pulp Canal Sealer® y Sealite® presentaron biocompatibilidad
similar. Las reacciones observadas a las 12 semanas eran menos severas que aquellas
observadas a las 4 semanas.
A las cuatro semanas se presentaron reacciones leves a moderadas, caracterizadas
por la presencia de una cápsula fibrosa gruesa, numerosos linfocitos, células
plasmáticas y macrófagos que contenían partículas de sellador.
A las doce semanas se observaron reacciones leves a muy leves. En la mayoría de
los casos, había formación de hueso en contacto directo con los selladores y en
algunos casos, se observó hueso dentro de los implantes. En algunas zonas se
observó una delgada capa de tejido conjuntivo entre el hueso formado y el sellador
implantado.
Como ya se ha mencionado la toxicidad in vitro de los selladores a base de oxido de
zinc eugenol se atribuye al eugenol y los iones de zinc liberados de la masa de
eugenolato de zinc 43.
La neoformación ósea y la ausencia de reacciones severas a las 4 semanas indica que
la compatibilidad de los selladores estudiados es aceptable. Las diferencias
observadas entre los selladores y el control negativo puede deberse a la toxicidad a
corto plazo a causa de la implantación de selladores recién mezclados.
La ausencia de inflamación severa o moderada a las doce semanas parece indicar que
la toxicidad in vitro reportada disminuye y desaparece con el tiempo. Esto puede ser
el resultado de una reducción de la cantidad de eugenol e iones de zinc liberados
mientras el sellador fragua. Además las reacciones de defensa evidentemente juegan
un papel importante en la respuesta de los tejidos al sellador.
Los resultados de este estudio sugieren que la extrusión de un sellador fuera del
foramen apical no induciría el fracaso de un tratamiento endodóntico ya que la
reparación de los tejidos alrededor del sellador no está impedida. Sin embargo
20/1/2016 Odontólogo Invitado ­ Carlos Bóveda Z. ­ Endodoncia ­ Caracas, Venezuela
http://www.carlosboveda.com/Odontologosfolder/odontoinvitadoold/odontoinvitado_23.htm 31/46
aunque los selladores estudiados parecen ser bien tolerados por el tejido óseo, se
debe tener cuidado para evitar la extrusión del sellador en los tejidos periapicales
durante la obturación. La ausencia de regeneración ósea completa en contacto
directo con la superficie del sellador en todos los casos y la interposición de tejido
conjuntivo fibroso pueden ser indicaciones de la respuesta continua del cuerpo a un
irritante de bajo grado 43.
Además se debe tener en mente que los implantes son colocados en orificios
realizados en tejido sano bajo condiciones estériles. La respuesta tisular puede ser
diferente en áreas con patosis periapical 43.
Orstavik y col 39. realizan implantes de 12 selladores endodónticos en el tejido
subcutáneo de ratas. Se analizó histológicamente el tejido a los 14 y 90 días. Los
materiales evaluados fueron: Endomethasone®, ProcoSol®, AH26®, Kloropercha
NO®, Biocalex®, Kerr Pulp Canal Sealer®, Forfenan®, N2 Normal®, Diaket®,
Hydron® y Formocresol.
Los resultados indicaron que:
ccccc
1. La respuesta tisular hacia los materiales disminuye con el tiempo de
implantación.
2. AH26® resultó ser considerablemente irritante a corto plazo, mientras
que a largo plazo, el efecto irritante disminuyó marcadamente
3. Los materiales a base de óxido de zinc eugenol y Kloropercha®
presentaron una irritación moderada, pero la respuesta inflamatoria
persistió por más tiempo.
Olsson y col 38. realizan un estudio para determinar la toxicidad de Kloroperka®,
Sellador de Kerr® y AH26®, implantándolos en el tejido subcutáneo de 42 ratas.
Los resultados indican que:
ccccc 1. Todos los materiales causaron respuestas tisulares iniciales severas.
2. La intensidad de la respuesta tisular disminuyó a través del tiempo.
3. Para establecer diferencias en cuanto a la compatibilidad de los materiales
es necesario que los materiales posean grados de toxicidad muy
diferentes.
Rappaport y col 45. llevan a cabo un estudio para comparar la citotoxicidad de diez
selladores endodónticos: Pasta de Rickert®, Cemento Mynol®, a base de óxido de
zinc­eugenol, AH26®, Diaket®, Kloropercha®, ProcoSol®, N2®, N2 Medical®
(una variación del anterior) y óxido de zinc eugenol. Se implantaron los selladores
en el tejido subcutáneo de ratas y se examinaron a 6, 12, 16, 22, 28 y 35 días.
Inicialmente todos los cementos selladores produjeron reacciones inflamatorias que
disminuyen en proporción al tiempo transcurrido con excepción de N2® y N2
Medical®.
AH26® presentó una reacción inicial marcada con tejido de granulación y tejido
necrótico. Sin embargo, a largo plazo, esta inflamación disminuyó hasta desaparecer.
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