El documento describe un procedimiento para demostrar la curva de crecimiento bacteriano mediante el uso de un espectrofotómetro. Se agregan diferentes volúmenes de un cultivo bacteriano a tubos con medio de cultivo y se miden las absorbancias a intervalos regulares durante 3 horas para generar curvas que muestran las fases de crecimiento bacteriano.

1. ESPECTOFOTOMETRO
PROCEDIMIENTO PARA DEMOSTRAR
LA CURVA DE CRECIMIENTO
BACTERIANO

2. PROCEDIMIENTO PARA DEMOSTRAR LA CURVA DE
CRECIMIENTO BACTERIANO
1. Se determina el crecimiento bacteriano de células viables y no viables
2. Se usa el espectrofotómetro ó colorímetro
3. El espectrofotómetro debe encederse 15 minutos antes del uso y se ajusta la
longitud de onda a 600 nm.
4. Se mide una muestra blanco que es el medio de cultivo líquido en un tubo de ensayo
adaptado al equipo.
5. Cómo el cultivo crece al estar en el medio líquido como agua de peptona, va a
generar un incremento en la turbidez y por tanto, va a aumentar la absorbancia leída a
600 nm.
6. Antes de leer los datos de absorbancia, es necesario homogenizar para distribuir las
células en el medio del cultivo líquido.

3. 7. Emplee un tubo con agua de peptona
8. El segundo tubo de agua de peptona se adiciona 0,1 ml de un cultivo microbiano
incubado días antes.
9. El tercer tubo se adiciona con 0,2 ml de un cultivo microbiano incubado
previamente
10. El cuarto tubo se agrega 0,5 ml de un cultivo microbiano incubado días antes.
11. Se registran los valores correspondientes cada 20 minutos durante 3 horas. En los
tiempos de espera, se incuban los tubos a 37°C.
PROCEDIMIENTO PARA DEMOSTRAR LA CURVA DE
CRECIMIENTO BACTERIANO

4. Tiempo (min) Abs (nm)
Tubo 2
Abs (nm)
Tubo 3
Abs (nm)
Tubo 4
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
Graficar la absorbancia para cada tubo. Absorbancia (eje y) y tiempo (eje x)
PROCEDIMIENTO PARA DEMOSTRAR LA CURVA DE
CRECIMIENTO BACTERIANO

5. VIDEOS
http://www.youtube.com/watch?v=ILeKva55dWY
http://www.youtube.com/watch?v=uxRexW975nw