El documento describe los conceptos fundamentales del crecimiento de poblaciones microbianas. Explica que el crecimiento se refiere al aumento en el número de células o la masa celular en un tiempo determinado, y que el tiempo de duplicación o generación es el tiempo requerido para que una célula se divida en dos. Además, describe las cuatro fases típicas del crecimiento microbiano en un medio de cultivo líquido (fase de latencia, fase logarítmica, fase estacionaria y fase de muerte) y los fact
2. Crecimiento:
Incremento ordenado de todos los componentes de un
microorganismo
aumento de la masa celular (tamaño)
multiplicación celular (cantidad)
En microorganismos que se dividen por fisión o por
gemación aumento del nº de individuos (población)
En microorganismos cenocíticos (no división celular)
aumento del tamaño de la colonia cenocítica
3. Es el aumento en el numero de células de una
población.
Velocidad de crecimiento es el cambio en el
número de células o en la masa celular,
experimentado por unidad de tiempo.
Durante el ciclo de división celular, todos los
componentes se duplican.
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6. Cambio en el número de células o en la masa
celular en un determinado tiempo.
Tiempo de duplicación o generación
◦ Tiempo necesario para que una población se
duplique
◦ Varía entre cada microorganismo.
◦ Ej. 1 a 3 horas, 10 min, o varios dias.
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9. Crecimiento Microbiano:
Cambio en el número de células
por una unidad de tiempo
determinada.
Tiempo de generación
(duplicación):
Tiempo requerido para que una
célula se divida en dos.
El tiempo puede ser minutos,
hora o días.
12. El crecimiento de la población no inicia
inmediatamente, sino después de cierto
periodo de tiempo, el cual puede ser breve o
largo, dependiendo de varios factores.
Fase de adaptación a las condiciones
ambientales.
Duración variable.
Se sintetizan proteínas y ARN.
Duplicación insignificativa.
Ocurre cuando se transfiere un inóculo desde
un medio rico a un medio más pobre.
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14. Es la consecuencia del hecho de que cada célula se divide
en dos.
Las bacterias se encuentran en un estado óptimo.
Su velocidad esta influenciada por temperatura y
nutrientes.
Duplicación celular.
Actividad metabólica.
Estado fisiológico más sano.
Velocidad de crecimiento variable
◦ Condiciones medio ambientales
◦ Genética
Se alarga hasta que se agotan los nutrientes
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17. El medio de cultivo no se renueva, comienzan a
acumularse metabolitos tóxicos,
se modifica el pH,
los nutrientes se agotan,
la velocidad de multiplicación se retrasa y hay
un equilibrio entre bacterias vivas y muertas.
El número de células viables es igual número de
células muertas.
Los nutrientes son limitantes.
Formación de desechos.
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19. Cuando continua el crecimiento en el medio
de cultivo “viejo” se produce una inversión
numérica con respecto a la fase exponencial.
En este período son más las bacterias muertas
que las vivas, hasta que se termina con la
muerte de todas.
Si son bacterias con capacidad de esporular,
se produce la esporulación.
20.
21.
22. CUANDO INTRODUCIMOS UNA POBLACION DE
MICROORGANISMOS DENTRO DE UN MEDIO DE CULTIVO
LIQUIDO, CADA ORGANISMO PRESENTA CUATRO FASES
DE CRECIMIENTO TIPICAS:
FASE LAG(latencia)
FASE LOGARITMICA (LOG)
FASE ESTACIONARIA
FASE DE MUERTE.
ESTAS CUATRO FASES FORMAN LA CURVA ESTANDAR DEL
CRECIMIENTO BACTERIANO
CRECIEMIENTO EXPONENCIAL
N° CELULAS : 1 2 3 4 8
EXPONENTE 20 21 22 23 24
23. Cultivo balanceado mantenido por tiempo indefinido
por un sistema abierto de flujo compuesto por:
◦ Una cámara de cultivo de volumen constante a la que llega
un suministro de nutrientes desde una cámara reservorio.
◦ Desde la cámara de cultivo se elimina parte del cultivo y
de sustancias tóxicas por un dispositivo de rebosadero.
◦ Permite mantener poblaciones de células en crecimiento
exponencial por largos periodos de tiempo.
24. El más habitual en laboratorio
Cultivo en frascos, tubos, placas, etc.
No hay aporte nuevo de nutrientes ni es posible
eliminar los productos de desecho del cultivo
Se desarrolla a través de una curva característica de
crecimiento
La fase exponencial dura lagunas generaciones.
Luego se agotan los nutrientes y acumulan los
desechos.
25. Medición del número celular.
◦ Recuento directo
◦ Cámara de Petroff-Hauser
26. Métodos directos:
◦ Cámara de Petroff-Hauser (para bacterias).
◦ Cámara de Thoma- neubauer (para levaduras y células mayores
que las bacterianas).
◦ Contadores electrónicos de partículas (contador Coulter).
27. Recuento del Nº de colonias en cultivo:
◦ Ej. Un ml de una dilución de 1x10-6 produce 150
colonias, la muestra original contiene 1.5x108
ufc/ml.
Crecimiento en filtro.
Medición de la masa celular
◦ Mide la capacidad de dispersar la luz, que es
proporcional al número celular.
◦ Un aumento del número, aumenta la turbidez y
disminuye la luz transmitida.
28. Recuento de células totales.
- Microscopía –
Recuento de células viables.
- Recuento de colonias -
29. Métodos directos:
◦ Determinación del peso húmedo
◦ Determinación del peso seco
◦ Determinación del N total
◦ Determinación de algún componente característico:
Peptidoglucano
ADN, ARN
Proteínas
ATP
Clorofilas (en fotosintéticos), etc.
30. Métodos indirectos:
◦ Consumo de nutrientes o producción de metabolitos en el tiempo:
consumo de oxígeno
consumo de dióxido de carbono
Producción de ciertos metabolitos
Producción de ácidos orgánicos
◦ Métodos turbidimétricos (ópticos): Determinación de la densidad óptica.
Espectrofotómetro (mide luz transmitida)
Nefelómetro (mide luz dispersada)
Turbidez. Es un método muy rápido y útil de medir el crecimiento
bacteriano.
31. Cuantificar la concentración de un
determinado soluto
Absorbancia (D.O)
32. Métodos indirectos:
◦ Recuento de viables por siembra de muestras de
diluciones en placas de Petri
◦ Recuento de viables a partir de grandes volúmenes de
suspensiones diluidas: se hacen pasar por filtros de
nitrocelulosa o equivalentes (ej.: sistema Millipore®), y
se incuban sobre medio sólido
39. pH
FACTORES AMBIENTALES Y CRECIMIENTO
MICROBIANO
Nutrientes
Tiempo
Oxígeno
Disponibilidad
de agua
Temperatura
aw
40. Pueden crecer en un rango determinado
◦ Acidófilos: pH 3.0- 6.0 (Lactobacillus)
◦ Neutrófilos: pH 6.0- 8.0 (Bacillus sp.)
◦ Alcalófilos: pH 8.0-10.5 ( Vibrio )
◦ Bacterias pH 5-6
◦ Levaduras 4-4,5
◦ Hongos < 4.
La acidez o alcalinidad de un medio tiene una gran
importancia sobre el crecimiento microbiano. La
mayoría de MO. Crecen a un pH entre 6 y 8.
El pH intracelular debe permanecer próximo a la
neutralidad.
42. Agua “libre” disponible para el crecimiento de
microorganismos
Disminuyendo la aw= aumento en la duración de la
fase lag y la disminución del crecimiento
microbiano
aw mínima para el crecimiento microbiano
Bacterias 0.90
Levaduras 0.87
Hongos 0.70
43. Cada especie microbiana tiene una temperatura
óptima, mínima y máxima
La temperatura es un factor ambiental importante
en el control de crecimiento microbiano.
Los M.O pueden agruparse según los márgenes de
temperatura que requieren.
Se distinguen 4 grupos:
1. Psicrofilos 2. Mesófilos
3. Termofilos 4. Hipertermofilos.
44. Tipo Rango de
Temperatura
Temperatura
Optima
M.O
Psicrófilo 0 - 20 15 Algas.
Bacterias
oceánicas
Mesófilo 15 - 45 20 - 45 Mayoría de las
bacterias
patógenas
Termófilo 40 - 70 55 - 65 Bacillus
stearothermophillus
Hipertermófilos 55 - 115 80 - 113 Thermus acuaticus
45. No afecta a microorganismos de la superficie
terrestre.
Presión de 1 atmósfera.
En el océano puede alcanzar 600 – 110 atm,
y Tº es de 2 – 3º C.
Barotolerantes un aumento de la
presión les afecta negativamente.
Barófilos crecen a presiones
elevadas.
46. El objetivo de controlar el crecimiento microbiano es:
Reducir la carga microbiana o el número de microorganismos
viables presentes en un material, alimento o en una solución.
El control del crecimiento microbiano puede hacerse por:
Inhibición del crecimiento, impidiendo la multiplicación
de los microorganismos.
Esterilización, matando, destruyendo o eliminando todos
los microorganismos viables de un medio.
Bactericidas: Los agentes que destruyen o matan las bacterias.
Bacteriostáticos: Los agentes que impiden el crecimiento de
bacterias.
Las medidas de control de los microorganismos son la
descontaminación, la desinfección y la esterilización.
47. Los métodos físicos se usan para lograr:
descontaminación microbiana,
desinfección y
esterilización.
Los agentes físicos más empleados para destruir o eliminar
microorganismos no deseables son:
calor,
radiación y
filtración
1.- Esterilización por calor
2.- Esterilización mediante radiaciones
2.- Esterilización por filtración
Control de los microorganismos por medios
físicos
48. Control de los microorganismos por medios
químicos
Control químico del crecimiento
Antisépticos, desinfectantes y esterilizantes
Un agente antimicrobiano es un compuesto químico, natural o sintético
que mata o inhibe el crecimiento de los microorganismos.