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Extraccion de adn desde muestras vegetales
1. Extraccion de ADN desde muestras vegetales
Nombre: Cristian Zamorano
Curso: 4°A
Asignatura: Biología Común
Colegio: ICHNAC
Fecha: 6/10/2016
2. Objetivo:
Extraer el ADN de un ser vivo vegetal, en este caso el sujeto de prueba fue una cebolla.
Materiales:
Para este experimento se utilizó:
- ADN vegetal (cebolla).
- Sal.
- Palillos de coctel.
- Detergente líquido.
- Solución para lentes de contacto.
- Alcohol etílico 96%.
- Juguera.
- Cronometro.
- Tubo de ensayo.
- Colador.
- Cucharita.
- Pipeta.
- Taza.
- Cuchillo.
- Agua.
- Papel de cocina.
- Guantes de látex.
- Delantal.
3. Procedimiento experimental:
1. Se mescla ½ taza del vegetal seleccionado, una pizca de sal y una taza de agua (200 mL) en la
juguera durante 15 segundos. La mezcla resultante se debe filtrar con el colador para descartar las
partículas de gran tamaño.
2. A la mezcla filtrada se le debe añadir dos cucharaditas de detergente líquido. Revolver sin formar
espuma. Luego la dejan reposar por 10 minutos.
3. Se le agrega a un tubo de ensayo una pequeña cantidad de solución para lentes de contacto, se
revuelve por lentamente.
4. Se inclina el tubo de ensayo con la mezcla y se añade cuidadosamente el alcohol etílico 96%, de
modo que se forme una capa sobre la mezcla anterior. Se debe añadir tanto alcohol como la
cantidad de la mezcla que tengan en el tubo de ensayo (1:1).
5. El ADN comenzara a ¨coagular¨ como una maza blancuzca y subirá hasta la parte donde está el
alcohol. En este momento se puede retirar el ADN con un palillo. En este caso, las proteínas y la
grasa se quedan en la parte acuosa de la mezcla y el ADN asciende hasta llegar al alcohol.
La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas:
En primer lugar tienen que romperse la membrana plasmática de la célula eucariota para poder acceder al
núcleo de la célula. En el caso de los vegetales también habrá que romper la pared celular.
A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN.
Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que
precipite en alcohol.
4. Observaciones del experimento:
Se observa cómo queda una mezcla heterogénea en la juguera, esa muestra se cuela con el colador y se
obtiene de este procedimiento una mezcla homogénea entre el agua y la cebolla, al agregar detergente
observando que este detergente la cebolla y el agua mantienen una solución homogénea al dejar reposar
la muestra en el tubo de ensayo junto a la solución para lentes de contacto observando a consiguiente
luego de agregarle la capa superficial de alcohol como el ADN queda suspendido con un color blanquecino
y pegajoso.
Análisis del experimento:
1 Uso de la sal y el agua:
EL agua hidrata las células pero la sal hace que ocurra una plasmólisis, lo que hace que el agua de la célula
mayormente sea expulsada al exterior.
2 Uso del detergente:
Cataliza las grasas de la cebolla, rompe la membrana plasmática, nuclear y pared celular.
3 Uso de la solución para lentes de contacto, jugo de piña, ablandador de carne:
Remueve las proteínas de la solución que degradan el ADN, ya que todos contienen proteasas, proteínas
especializadas en la degradación de otras proteínas.
4 Uso del alcohol etílico:
Hace que el ADN se precipite, posibilitando que este suba por la mayor afinidad que posee el alcohol con el
ADN, permitiendo la separación de este de los restos de la célula que quedan difuminado en la muestra del
tubo de ensayo.
El ADN descondensado queda coagulado y suspendido en la muestra del tubo de ensayo listo para su
extracción.
Conclusión:
El ADN es el material genético a través del cual se transmite la información contenida en los genes de
generación en generación.
El ADN está presente en los indicios biológicos como sangre, semen, saliva, tejido, hueso, pelo, etc.
Es muy importante conocer las condiciones para la remisión adecuada de las muestras.
Este procedimiento de extracción de ADN es simple y permite hacerlo con materiales fáciles de conseguir
para todo aquel que desee estudiar el ADN.