Este documento describe un procedimiento casero para extraer ADN de hígado de pollo sin usar instrumentos ópticos. Se licúa el hígado con agua y sal, luego se añade detergente para romper las membranas celulares. Se añaden enzimas como jugo de piña para degradar proteínas. Al añadir alcohol, el ADN precipita y puede observarse como filamentos blancos que flotan en la mezcla.
1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
DIRECCIÓN DE NIVELACIÓN Y ADMISION
SISTEMA NACIONAL DE NIVELACION Y ADMISION
PRACTICA DE LABORATORIO
Tema:EXTRACCIÓN CASERA DEL ADN.
Objetivo:Observar sin ayuda de ningún instrumento óptico, el ADN, utilizando
materiales caseros cuyo costo no es alto.
Materiales:
Sustancias:
Licuadora.
Enzimas (Jugo de piña).
Recipiente de vidrio.
Etanol CH3 OH
Vaso de precipitación.
Cloruro de Sodio NaCl.(sal
Cuchillo.
común)
Tubo de ensayo.
Detergente líquido.
Tabla de picar.
Hígado de pollo.
H2O
.
GRÁFICOS:
Materiales
Procedimientos:
1
2. 1. Debemos cortar en pequeños trozos el hígado de pollo, luego lo colocamos en
la licuadora y vertemos una taza de agua con una pizca de sal y licuamos
durante 15 segundos. Finalmente, la mezcla resultante se filtra para eliminar
cualquier partícula de gran tamaño.
2. Luego vertemos el licuado en el vaso de precipitación y le agregamos dos
cucharitas de detergente líquido y revolvemos suavemente con la ayuda de
una cuchara sin formar espuma. Dejamos reposar durante 5 a 10 minutos.
Sería conveniente que probaras con distintos detergentes ya que algunos no
funcionaran tan bien como otros. Finalmente colocamos la mezcla en tres
tubos de ensayo.
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3. 3. Añadimos una pizca, o cucharada de enzimas a cada envase y revolvemos
con cuidado y lentamente por unos 5 minutos. Si mezclamos con demasiada
rapidez o con mucha fuerza se corre el peligro de romper el ADN, con lo que
no podríamos observarlo.
4. Inclinamos el envase de la mezcla y vertimos muy lentamente el alcohol en
una proporción igual a la que hay de mezcla, de modo que se forme una capa
sobre la misma.
5. Luego de unos minutos e podrá observar unos filamentos blancos dentro del
alcohol, detergente y enzimas. Puedes retirarlo con la ayuda de un palillo. En
este caso las proteínas y la grasa se quedan en la parte acuosa de la mezcla y
el ADN asciende hasta llegar al alcohol.
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4. Observaciones:
Observamos unos filamentos blancos dentro del alcohol y que se elevan de la
mezcla del hígado, detergente y enzimas. En este caso los filamentos blancos
representan el ADN.
Pudimos observar como al mezclar el detergente líquido con el hígado
licuado este iba formándose de una manera gelatinosa.
Conclusiones:
El agua con una pizca de sal es una mezcla isotónica. Es para lo que se va a
sacar del hígado de pollo sufra lo menos posible. Es la licuadora se separan las
células unas de otras, en esto ayuda también el detergente. Las enzimas, jugo de
piña, suavizados de carne, cortan las proteínas y destruyen a las células, ya que
se trata de romper lo que hay dentro de las mismas, dejando intacto el ADN y al
añadir el alcohol se consigue separar el ADN, que tiene más afinidad con el
alcohol que con el agua, lo que hace posible ver el ADN.
Recomendaciones:
Usar mandil y guantes
Filtrar la mezcla, para eliminar partículas de gran tamaño
Revolver suavemente la mezcla
Mezclar lentamente para evitar que se rompa el ADN
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5. Utilizar distintos detergentes ya que algunos no funcionaran tan bien
como otros.
Cuestionario:
Investiga porque el jugo de piña actúa como una enzima.
Los zumos de piña y papaya contienen un enzima, la papaína, que contribuye a
eliminar las proteínas que puedan contaminar el ADN.
¿Porqué utilizamos alcohol para separar el ADN de las células?
El ADN es una molécula muy larga y tiende agruparse. De ahí la facilidad para
retirarla. Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es
soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol precipita en la interface
entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el
ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución
acuosa.
La sal en disolución actúa disminuyendo la solubilidad de las proteínas, lo que
hace que precipiten y se separen más fácilmente del ADN.
El detergente (O gel o champú) utilizado en el experimento tiene como función
destruir las membranas celulares del tejido vivo que estamos utilizando; el
detergente disuelve las grasas, que es el componente principal de la membrana
plasmática y nuclear de las células (es el mismo principio por el que el gel limpia
la grasa de nuestra piel). Al romperse las membranas celulares se permite la
salida del ADN al exterior. La licuadora ayuda en la rotura de estas células.
Web - grafía:
http://www.jugoverde.net/beneficios-de-la-pina.html
http://www.medicinajoven.com/2010/05/como-extraer-adn-de-forma-casera.html
Autoría:
Bioq. Carlos García Ms. C.
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